实验性四氯化碳诱致的大鼠肝纤维化自发逆转研究

目的研究肝纤维化大鼠在去除诱导因素后肝脏的病理学改变,以及转化生长因子(TGF)-β1表达的动态变化及组织分布。方法30只雄性SD大鼠随机均分为5组,1组作为正常对照组(N组),另4组建立大鼠四氯化碳(CCl4)肝纤维化模型后随机处死6只大鼠,定为肝纤维化组(F组),以后分别于停止注射后第7、20、30天各随机处死6只大鼠,分别定为肝纤维化自发逆转组(T1、T2、T3组),观察肝纤维化分级,应用免疫组织化学及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TGF-β1。结果停止注射CCl4后30 d肝纤维化分级明显下降,停止注射CCl4后7 d TGF-β1表达水平已有下降。结论去除致病因子后纤维化肝脏发生自发逆转过程,TGF-β1水平的下降早于病理组织学改变,与肝纤维化自发逆转过程密切相关。     

四氯化碳复合法诱导家兔肝纤维化模型的建立

目的 建立一组家兔肝纤维化动物模型,并总结建模过程中所得到的经验.方法 选用30只普通级家兔,随机选取2-4只家兔作为实验组,5只为对照组.饲养适应1周后,四氯化碳色拉油溶液以5%的起始浓度经腹腔注射法注入实验组家兔体内,对照组给予相同剂量的生理盐水.于造模4W、7W、lOW、13W、16W末分别处死24只实验组及1只对照组家兔,以观察肝纤维化的发展程度.结果 造模期间实验组家兔死亡7只,对照组家兔无死亡.家兔肝脏纤维化程度随着造模时间延长而逐渐加重.结论 此方法成功地建立了一种兔肝纤维化动物模型.     

pcDAN3.1·PTH治疗甲状旁腺功能低下症血钙变化

目的　研究pcDAN3.1·PTH治疗甲状旁腺功能低下症时血钙的变化及血钙与 pcDAN3.1·PTH剂量的关系。方法　手术去掉家兔甲状旁腺 ,建立甲状旁腺功能低下症模型。将已构建的人甲状旁腺激素基因 pcDAN3.1·PTH以 10 0 ,30 0 ,5 0 0 μg/ml剂量注射模型家兔的骨骼肌内 ,测定注射后不同时间的血钙。 结果　注射pcDAN3.1·PTH后 2 4h时模型家兔的血钙升高 ,7d达高峰水平 ,并持续 2个月 ,以 30 0 μg/ml和 5 0 0μg/ml为佳。 结论　人甲状腺激素基因治疗甲状旁腺功能低下是有效的 ,且以 30 0 μg/ml和 5 0 0 μg/ml为最佳剂量。     

不同浓度四氯化碳复合法诱导家兔肝纤维化模型的建立

目的 寻找到适宜做影像学和血清学研究的动物家兔肝纤维化模型建市方法.方法 分别用体积比为5%四氯化碳(CCl4)油溶液和纯CCl4,按0.1 ml/kg剂量每周1次腹腔注射,并辅以5%浓度的乙醇作为饮水,诱导家兔肝纤维化形成,并于注射后6、8、10、12周分组处夕匕家兔取其肝脏进行病理学检查.结果 家兔的死亡多发生在4周之内,6周之后趋于稳定.5%CCl4浓度组家兔死亡率为60%,纯CCl4组死亡率为25%.结论 长期给予CCl4可导致家兔的肝纤维化形成,采用腹腔注射纯CCI4,同时辅以5%浓度的乙醇作为饮水的复合法造模,家兔死亡率低,成模率高.     

不同浓度四氯化碳诱导兔肝纤维化模型的对照研究

目的通过比较不同浓度四氯化碳（CCl4）诱导兔肝纤维化模型的差异,寻找高效的CCl4诱导兔肝纤维化模型的方法。方法 48只新西兰大白兔随机分组,分为实验组1（n=21）、实验组2（n=21）和对照组（n=6）。实验组1、实验组2分别以起始浓度5%和10%CCl4橄榄油溶液腹腔注射,0.1mL/kg CCl4,1次/6d,4次注射为1个周期,共4个周期,后续3个周期分别依次调整浓度（实验组1：10%、15%和20%,实验组2：20%、30%和40%）和剂量（0.2mL/kg、0.3mL/kg和0.4mL/kg）。对照组予1ml/kg生理盐水腹腔注射,首次注射后第6、9、12周分批处死7、7、2只实验兔,行肝脏病理学检查。结果实验组1实验兔死亡率28.5%,实验组2实验兔死亡率42.8%,两组实验兔死亡率差异无统计学意义（χ2=0.933,P〉0.05）。第9、12周兔肝脏病理评分显示实验组2与实验组1相比,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论长期持续给予CCl4可诱导实验兔肝纤维化形成。采用起始10%浓度和0.1mL/kg剂量腹腔注射,浓度、剂量逐渐等量递增的模型建立方法,造模进程较快,成模率较高。     

经小脑延髓池注射内毒素致家兔实验性脑水肿模型的研制

目的　经家兔小脑延髓池注射内毒素 ,制作类似临床所见的严重感染及毒血症导致的急性脑水肿模型 ,用于感染性脑水肿的实验研究。方法　选择 35只新西兰白兔 ,分为内毒素组 (30只 )和对照组 (5只 )。内毒素组于小脑延髓池内注射内毒素 10 0 μg/kg ,对照组注入等量灭菌纯水。分批于注射后 3h、6h、12h、2 4h、4 8h、72h处死家兔 ,留取脑组织 ,采用光镜和透射电镜观察脑组织的形态学改变 ,并测定脑组织的含水量。结果　注射内毒素后 3h ,脑组织含水量即升高 ,6～ 4 8h时明显高于对照组 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,2 4h时脑含水量达峰值。光镜和电镜可观察到注射内毒素 6～ 2 4h后脑组织病变最严重。其中 2只兔在注射过程中出现意外损伤。结论　经小脑延髓池注射内毒素建立家兔实验性脑水肿模型简单、可靠、安全、适用 ,是进行感染性脑水肿实验研究较理想的模型     

脂多糖构建大鼠肝内胆管炎症动物模型的浓度研究

目的 研究脂多糖(LPS)构建大鼠肝内胆管炎症动物模型的最佳浓度.方法 80只大鼠分为空白对照组、模型组A、B和C,每组各20只.空白对照组按5 mL/kg在肝内胆管一次性注射生理盐水,模型组A、B、C分别按5.00、2.50、1.25 mg/kg 3种不同浓度在肝内胆管一次性注射LPS构建大鼠肝内胆管炎症动物模型,观察大鼠存活时间共7d.分别于造模后2、4、6、8h和7d采取各组大鼠血液进行血常规、生化检测,观察大鼠血常规中白细胞计数(WBC)、中性粒细胞百分比(N％)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)炎性指标;同时采取各组大鼠肝脏组织,进行苏木素-伊红染色观察大鼠肝脏组织病理特征.根据造模结果分析LPS构建大鼠肝内胆管炎症动物模型的最佳浓度.结果 在造模后2、4、6、8 h及造模后7 d,模型组C的WBC、N％、ALT及AST水平较其他3组明显升高(P<0.05).模型组肝脏病理均有不同程度改变,其中模型组C肝脏病理组织炎性改变及肝损伤改变最为明显.结论 在肝内胆管注射1.25 mg/kg LPS是构建大鼠肝内胆管炎症动物模型的最佳浓度.     

四氯化碳、酒精与四氯化碳联合、胆管结扎致SD大鼠肝纤维化病理学比较

目的 研究四氯化碳、酒精与四氯化碳联合、胆管结扎致SD大鼠肝纤维化模型肝脏的病理学改变,初步探讨肝纤维化发病机制.方法 四氯化碳组SD大鼠以3 mg/kg的剂量(首次剂量加倍)皮下注射50％四氯化碳(四氯化碳∶橄榄油=1∶1),每周2次,连续注射6周;酒精与四氯化碳联合组SD大鼠每日按照10 mL/kg剂量灌服酒精混合物(酒精∶吡唑∶玉米油=10 mL∶25 mg∶2 mL),同时每周2次按0.3 mL/kg剂量给予腹腔注射四氯化碳:橄榄油(1∶3),连续造模60 d;胆管结扎组大鼠按10 mg/kg体重腹腔注射3％戊巴比妥钠麻醉,腹部皮肤消毒,无菌操作沿腹部正中线剪开腹腔,分离出胆管,在胆管近端和远端2处结扎胆管,28 d后结束实验.试验结束后麻醉动物,解剖取动物肝脏组织,用10％福尔马林固定,进行病理学检查.结果 四氯化碳致SD大鼠肝纤维化模型表现为弥漫性脂肪肝、肝炎、肝纤维化;酒精与四氯化碳联合致SD大鼠肝纤维化模型表现为酒精性脂肪肝、肝炎、肝纤维化;胆管结扎致SD大鼠肝纤维化模型表现为胆管增生、肝炎、肝纤维化.结论 这3种方法都可以引起大鼠肝脏发生纤维化,其中胆管结扎致SD大鼠肝纤维化造模方法适合于临床胆汁淤积所致肝纤维化的模型建立,其它两种方法适合于化学性、病毒性肝炎引起的肝纤维化模型的建立,可根据不同的实验目的选择不同的方法构建相应的动物模型.     

去交感神经状态对肝脏血流量的影响

目的探讨去交感神经状态对肝脏血流量的影响.方法健康家兔20只,分为2组:①正常组;②实验组为急性肝损伤组.两组分别行去交感神经处理.在注射6-OHDA前,和注射后30、60、120、180 min分别测定血流参数,包括平均血流速度(MBV)、平均血流量(MBF)、血管阻力指数(RI)和动脉搏动指数(PI).结果去交感神经状态可使正常家兔肝动脉MBV和MBF升高,RI和PI0降低;而门静脉血流参数无变化.在急性肝损伤的情况下,去交感神经状态可使肝动脉和门静脉MBV和MBF均升高,同时肝动脉RI和PI降低.结论去交感神经状态可降低肝动脉血管阻力,使血流量增加;在急性肝损伤的情况下对门静脉亦有同样的影响.     

参芎葡萄糖注射液质量标准中热原检查剂量的探讨

目的 对参芎葡萄糖注射液质量标准中热原检查项家兔注射剂量进行了实验探讨. 方法按<中国药典>2005年版二部附录热原检查法.结果 按家兔体重每1㎏注射6ml和10ml两种剂量,观察体温变化情况,结果无显著性差异. 结论建议修订热原检查项家兔注射剂量为"取本品,依法检查(中国药典2005年版二部附录XID),剂量按家兔体重每1kg注射6ml,应符合规定."     

HG颗粒对肝纤维化大鼠肝脏胶原纤维及羟脯氨酸含量的影响

目的:研究HG颗粒对二甲基亚硝胺(DMN)致肝纤维化大鼠肝脏胶原纤维及羟脯氨酸含量的影响.方法:80只SD大鼠,除正常对照组10只外,其余大鼠均腹腔注射DMN(2 mL/kg)3周,建立肝纤维化大鼠模型,存活动物按性别、体质量随机分为5组,分别给予蒸馏水或药物灌胃治疗.正常对照组:蒸馏水0.1 mL/kg;模型对照组:蒸馏水0.1 mL/kg;HG颗粒高、中、低3种剂量组:6 g、3 g、1.5 g生药/kg;复方鳖甲软肝片组:1 g/kg,1次/d,连续4周.后处死动物,取左叶肝脏检测大鼠肝脏胶原纤维及羟脯氨酸含量.结果:肝纤维化模型大鼠肝脏胶原纤维及羟脯氨酸含量均明显增高,HG颗粒治疗后有明显缓解.结论:HG颗粒对DMN肝纤维化模型大鼠具有显著的治疗作用.     

pcDNA3.1甲状旁腺激素基因治疗甲状旁腺功能低下症的实验观察

目的　研究pcDNA3 1·PTH治疗甲状旁腺功能低下的治疗效果及最佳剂量。方法　手术切除家兔甲状旁腺 ,建立甲状旁腺功能低下症模型。将已构建的人甲状旁腺激素基因pcDNA3 1·PTH以 50 μg/kg、1 50 μg/kg、2 50 μg/kg剂量注射模型家兔的骨骼肌内 ,测定注射后不同时间的血钙及血PTH。结果　注射pcDNA3 1·PTH后 2 4h模型家兔的血钙及PTH升高 ,肌注 1 50 μg/kg组的模型兔 ,血钙和PTH值在 7d时达正常水平 ,各为 :2 83± 0 0 2 (mmol/L)、1 1 30 3± 0 0 2 5(pg/ml)。肌注 2 50 μg/kg组的模型兔 ,血钙和PTH值在 7d时达正常水平 ,各为 :2 81± 0 0 7(mmol/L)、1 2 0 0 1± 0 0 0 8(pg/ml)。并均持续 2个月时间。结论　人甲状旁腺激素基因治疗甲状旁腺功能低下是有效的 ,且以 1 50 μg /kg和 2 50 μg/kg为最佳剂量     

肝纤维化形成与血清HA、LN、Ⅳ型胶原相关性的实验研究

目的 :研究肝纤维化形成过程中形态学与血清学的相关性。方法 :取雄性Wistar大鼠 ,随机分成 5组 ,即对照组和 4个中毒组 ,中毒组腹腔注射 DMN( 1 0 μl/kg) 1周连续注药 3d,持续 4周 ,制作大鼠的肝纤维化模型 ;对照组注射同样剂量的生理盐水。大鼠分别在 7、1 4、2 1、2 8d心脏取血 ,用 ELISA法测定在肝纤维化形成过程中血清 HA、LN、 型胶原动态变化。取其肝脏 ,动态观察在肝纤维化形成过程中的形态学变化 ,并对血清学与形态学进行相关分析。结果 :随造模时间的延长 ,DMN模型组大鼠 HA、LN和 型胶原的含量随时间的增加而增加 ,并且其含量间有显著性差异 ,形态学观察随造模时间的延长DMN模型组大鼠肝纤维化逐渐形成并加重。结论 :肝纤维化形成过程中血清 HA、LN、 型胶原动态变化与形态学的变化呈正相关     

高剂量异丙酚对家兔肝血流阻力及肝血流量的影响

目的观察高剂量异丙酚对家兔肝血流阻力及肝血流量的影响,为临床合理用药提供依据。方法20只成年雄性健康家兔随机分为异丙酚组11例,输注异丙酚1.2mg/(kg·min)和对照组9例,输注等容量5%葡萄糖液,开腹游离门静脉和肝动脉,行颈总动脉、门静脉、肝静脉插管。循环稳定后给药,生理记录仪连续监测给药后90min内平均动脉压、门静脉压、肝静脉压,电磁血流仪连续测定门静脉和肝动脉血流量,计算门静脉、肝静脉血管阻力。结果给药30min后各时点,异丙酚组平均动脉压较对照组明显下降(P<0.05),但肝血流量较对照组明显增加(P<0.05),以门静脉血流量增加为主,同期门静脉、肝静脉血管阻力明显低于对照组(P<0.05)。结论高剂量异丙酚虽降低肝灌注压,但同时也使肝血管阻力显著降低,明显提高肝脏血液灌注。     

双氧水直肠灌注肝脏声学造影的有效性和安全性研究

目的:探讨双氧水经直肠灌注肝声学造影的有效性和安全性.方法:48只家兔按不同双氧水浓度分四组,每组又按不同双氧水剂量分为四个小组,经直肠灌注双氧水观察兔肝脏声学造影效果及病理检查双氧水对器官组织的损伤.结果:当双氧水浓度为1%,剂量10ml时即可使肝脏显影,随着浓度增加肝脏回声增强,出现回声增强的时间缩短、持续时间延长;在同一浓度下,随着剂量的增加,出现回声增强的时间无明显差异,但持续时间延长.兔的平均生存期与双氧水浓度呈明显负相关(γ=-0.99),而损伤严重程度与其呈明显正相关(γ= 0.99).结论:双氧水直肠灌注可有效进行肝脏声学造影,但同时也可能对机体组织器官和微循环造成损伤,严格掌握双氧水的使用浓度和剂量,寻找良好的解决方法有着重要的临床意义.     

硫代乙酰胺致大鼠肝性脑病模型的量-效关系

目的 :探讨不同剂量硫代乙酰胺 (TAA)致大鼠肝性脑病 /轻微型肝性脑病 (HE/MHE)的量 -效关系。方法 :设立 3个TAA剂量组 ,分别以 2 0 0、2 5 0、35 0mg/(kg·d)剂量的TAA隔日行腹腔内注射 ,共 2次 ,建立不同剂量TAA致大鼠肝性脑病的动物模型 ,1d后进行检测脑干听觉诱发电位 (BAEP)和门静脉血浆内毒素 ,血氨 ,肝功能 ,肝脏病理等指标。结果 :不同剂量TAA组的大鼠在HE/MHE发生率 ,肝性脑病分级评分 ,内毒素 ,血氨 ,肝功能和肝脏病理变化等方面均差异显著 (P <0 .0 5 ) ,TAA剂量越大 ,内毒素和血氨水平越高 ,肝功能损害和肝脏病理变化越明显 ,HE/MHE发生率和肝性脑病分级评分越高 ,存在明显的量 -效关系。结论 :TAA致大鼠肝性脑病模型具有显著的量效关系 ,其中 2 0 0mg/(kg·d)剂量TAA为制备MHE模型的适宜剂量。     

四氯化碳皮下注射构建大鼠肝纤维化模型的研究

目的 构建大鼠肝纤维化模型，观察纤维化的病理进程。方法轮替给大鼠四肢内侧皮下注射四氯化碳植物油混合液．按0．3ml／100g体重的剂量，每周注射两次。分别于初次注射后1、4、8周解剖大鼠，观察肝脏外观．肝组织切片行Van-Gieson(V-G)染色观察纤维增生情况。结果 随注射时间的增加肝脏外观先后出现了出血、坏死、增生、纤维化的特征。V-G染色证实肝脏纤维增生逐渐增多，8周时肝纤维化已形成。结论 四氯化碳皮下注射构建肝纤维化模型具有以下优点：(1)造模易于成功，大鼠死亡率小；(2)肝纤维化程度比较理想；(3)肝纤维化的进展与注射的时间长度直接相关，易于控制纤维化的程度，有利于进一步的研究。     

兔肝区组织间插植内照射后肝纤维化过程的动态观察

目的：观察家兔肝脏高剂量率组织间插植内照射后肝纤维化的过程,方法：将家兔分成4组：A组10Gy,B组20Gy,C组30Gy,D组对照组,观察内照射后1周,2周,1月,3月,6月的组织形态变化。结果：30Gy内照射后半年逐渐出现肝纤维化病变,可分为急性放射性肝炎期（1－2周）;肝纤维化前期（1－3个月）,肝纤维化期（6个月后）,结论：照射后6个月10Gy组肝损伤基本恢复,30Gy组出现典型的放射性肝纤维化改变。     

LPS/D-GalN诱导小鼠急性肝损伤模型的建立

目的 建立LPS/D-GaIN诱导小鼠急性肝损伤模型。方法 40只雌性C57BL/6小鼠用于观察8种不同LPS与D-GalN剂量配比联合刺激后小鼠存活时间,以确定模型建立的最佳剂量。使用腹腔注射最佳剂量染毒32只雌性C57BL/6小鼠,分别在0h、1h、4h、8h处死,每组8只,0h注射相同剂量生理盐水作为对照。观察染毒后小鼠肝组织病理损伤,检测血清中ALT及炎症因子IL-6、MCP-1和TNF-α表达水平变化。结果 通过观察小鼠存活时间,确定腹腔注射最佳染毒剂量为LPS（2.5mg/kg）和D-GalN（0.3g/kg）;小鼠染毒后肝组织呈进程性病变,最终发展为肝脏弥漫性坏死,肝细胞核崩解。与对照组相比,血清ALT显著升高（P<0.001）,IL-6、MCP-1、TNF-α均在1h后达到最高水平（P<0.001）,然后持续下降。结论 成功建立LPS/D-GaIN诱导小鼠急性肝损伤模型,为探索急性肝损伤的致病机制以及药物干预治疗提供有效的动物模型。     

N-乙酰半胱氨酸对肝损伤大鼠体内NO水平及NOS活性的影响

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(N-Acetylcysteine,NAC)对肝损伤大鼠肝脏病理的影响及对肝脏损伤保护的作用机制.方法:选用36只SD大鼠随机分为3组,正常对照组:腹腔注射生理盐水10ml/kg 1次;肝损伤模型组:给予D-gal 1g/kg腹腔注射1次;NAC实验组:于腹腔注射D-gal 1g/kg后6、12、18 h分别腹腔注射NAC 0.1mmol/kg 1次.急性肝损伤模型建立后24h取血及肝组织标本,观察比较各组大鼠肝组织病理改变,测定其血清、肝组织NO水平及肝组织NOS活性.结果:NAC实验组大鼠的肝脏病理形态较肝损伤模型组有所改善,其血清NO水平较肝损伤模型组增高,而肝组织中NO水平较模型组降低,均具有统计学差异.NAC组大鼠肝组织中cNOS活性较模型组有明显提高,而iNOS活性较模型组明显降低(P均＜0 05).结论:NAC可以改善急性肝损伤大鼠的肝脏病理改变,该保护作用可能通过影响不同型别的NOS活性而改变体内不同部位的NO水平有关.