聚L-丝氨酸修饰电极的制备及测定针剂中的多巴胺

目的:建立用氨基酸修饰电极测定多巴胺的新方法。方法:用循环伏安法制备聚L-丝氨酸修饰玻碳电极,研究神经递质多巴胺在聚L-丝氨酸修饰玻碳电极上的电化学行为,建立循环伏安法测定痕量多巴胺的新方法。结果:在pH 7.0的磷酸盐缓冲溶液中,多巴胺在聚L-丝氨酸修饰玻碳电极上产生一对氧化还原峰,峰电位分别为Epa=0.278 V,Epc=0.066 V(相对Ag/AgC l电极)。用循环伏安法测定多巴胺的线性范围:5.0×10-6~1.0×10-3mol/L,检测限:1.0×10-6mol/L。对1.0×10-4mol/L多巴胺溶液平行测定15次,其相对标准偏差为4.8%。结论:方法简单,电极稳定性好,用于针剂中多巴胺的测定,结果满意。     

用聚L-缬氨酸修饰电极循环伏安法测定药剂中的多巴胺

目的:建立修饰电极测定多巴胺的新方法。方法:在pH9.0的磷酸盐缓冲溶液中,用循环伏安法制备聚L-缬氨酸修饰玻碳电极,研究多巴胺在聚L-缬氨酸修饰电极上的电化学行为,建立测定多巴胺的电化学分析新方法。结果:在pH6.0的磷酸盐缓冲溶液中,多巴胺在聚L-缬氨酸酸修饰玻碳电极上出现一对灵敏的氧化还原峰,峰电位分别为:Epa=0.296V,Epc=0.205V(对饱和甘汞电极)。用循环伏安法测定多巴胺的线性范围:1.0×10-9～5.0×10-7mol/L,5.0×10-7～5.0×10-4mol/L,检出限:8.0×10-10mol/L。结论:该方法简单、快速、灵敏,用于药剂中多巴胺的测定,结果满意。     

聚L-半胱氨酸修饰电极的制备及测定多巴胺

多巴胺(DA)是脑内独立存在的神经递质．其在纹状体内的含量占全脑的70％以上。脑内DA神经功能失调是精神分裂症和帕金森氏症的重要原因。此外，DA为拟肾上腺素药，具有兴奋心脏，增加肾血流量的功能。因此对其测定方法的研究在生理功能和临床应用方面都具有重要的实际意义。化学修饰电极自1975年问世以来，在神经递质物质测定中的研究越来越多。     

细胞色素c/丙三醇修饰电极的制备及其对H2O2的催化

目的:制备细胞色素c(Cyt c)/丙三醇(GLY)修饰电极并探讨其电化学行为。方法:采用循环伏安法探讨了细胞色素c(Cyt c)/丙三醇(GLY)修饰的金电极的电化学行为。结果:细胞色素c/丙三醇修饰金电极呈现一对峰型良好的准可逆氧化还原峰,峰电流与扫描速度呈线性关系,说明该电极过程是表面控制过程。最佳pH=7.0,离子强度对修饰电极的影响不大。该修饰电极对过氧化氢具有良好的催化性能。结论:该修饰电极重现性和稳定性较好。     

辛基酚羧基化碳纳米管修饰电极方法测定

目的 建立修饰电极测定辛基酚的新方法。方法 通过自组装的方法将羧基化碳纳米管(c-CNT)组装到壳聚糖修饰的玻碳电极表面,构建c-CNT-壳聚糖修饰玻碳电极,在pH 6.0的磷酸盐缓冲溶液中,用循环伏安法和示差脉冲伏安法探讨辛基酚在该修饰电极上的电化学行为及其测定。结果 在pH 6.0磷酸盐缓冲溶液中,测定辛基酚的线性范围为8.33×10^-8～2.0×10^-5mol/L,检测限为3.67×10^-8mol/L(S/N=3);采用同一支电极对3.0×10^-6mol/L的辛基酚平行测定10次,相对标准偏差为3.6%;对标准样品进行加标回收率实验,回收率为(92.5±0.1)%～(106.5±0.1)%;将修饰电极放置2 d后再次测定,峰电流为最初峰电流的95%;大部分离子如K⁺、Na⁺、NH₄⁺、Ca²⁺、Mg²⁺、Cl^-、NO₃^-、Ag⁺、Sr²⁺、Zn²⁺、Cd²⁺、Ni⁺、F^-、Cl^-、NO₃^-、SO₄^2-和PO₄^3-对测定无干扰,50倍量的多巴胺、抗坏血酸、尿酸几乎不干扰辛基酚测定,而10倍的双酚A和壬基酚对辛基酚测定有一定干扰。结论 该方法简单、快速,可用于样品中辛基酚含量测定。     

碳纳米管-离子液体纳米流体修饰电极用于尿酸的测定

目的:用碳纳米管-离子液体纳米流体修饰玻碳电极,构建测定尿酸的电化学传感器。方法:将构建的电化学传感器置于尿酸的磷酸盐缓冲溶液中,实验结果表明,尿酸在修饰电极上产生一氧化峰,峰电位为0.570 V(vs.SCE),较裸电极负移0.170 V,且峰电流大大增强。据此,建立了测定UA的电化学分析方法。结果:在选定的最佳实验条件下,用线性扫描循环伏安法(LSV)测定尿酸的线性范围为5×10-6mol/L~8×10-4mol/L,检出限为5.5×10-7mol/L。结论:该方法可直接用于人体尿液中UA的测定,结果满意。     

吡咯啶二硫代氨基甲酸铵电化学修饰玻碳电极测定尿中铅的研究

〔目的〕用电化学方法制作吡咯啶二硫代氨基甲酸 电化学修饰玻碳电极。研究铅在该电极上阳极溶出伏安特性,建立一个简便快速的尿中铅的新方法。〔方法〕经配位体ＰＤＣＡ与甲醛来修饰的玻碳电极,在含铅磷酸盐缓冲溶液中,经循环伏安测定铅的阳极溶出峰。〔结果〕本方法的最低检出限为０．０００１μｇ／ｍｌ,在浓度０．０００２５￣０．８５μｇ／ｍｌ,基峰高与铅浓度成良好的线性关系,其相关系数ｒ＝０．９９６,相对偏差ｓ＝０．０５。〔结论〕该方法具有灵敏度高,选择性、重现性好,简便快速及测定中无汞的污染的优点。对尿中铅的分析,不需对样品进行消化而直接测定。     

nano-TiO2修饰玻碳电极微分脉冲阳极溶出伏安法测定全血中砷含量

目的:建立一种电化学测定全血中砷的方法。方法:采用微波消解法处理全血样品,在优化测定条件下以微分脉冲阳极溶出伏安法测定砷的含量。结果:砷的检出限为0.37μg/L;砷标准溶液在1.0μg/L~15.0μg/L范围内线性良好,相关系数为0.998;测定含5.0μg/L As标准溶液的相对标准偏差为2.0%。样品加标回收率为95%~97%。结论:该方法灵敏度、准确度高;操作方便快速;具有较低的检出限,能满足测定全血中砷含量的检测工作。     

鲍氏不动杆菌β-内酰胺酶和氨基糖苷类修饰酶基因研究

目的了解临床分离的鲍氏不动杆菌中β-内酰胺酶、氨基糖苷类修饰酶编码基因存在状况。方法自临床分离39株鲍氏不动杆菌,采用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因(TEM、SHV、PER、VEB、GES、CARB、CTX-M-1群、OXA-23群、OXA-24群、IMP、VIM、DHA、aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰ、aac(6′)-Ⅱ、ant(3″)-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ)。结果39株中TEM阳性13株(33.3%)、OXA-23群阳性20株(51.3%)、aac(3)-Ⅰ阳性25株(64.1%)、aac(6′)-Ⅰ阳性25株(64.1%)、ant(3″)-Ⅰ阳性29株(74.4%),其余基因均阴性。结论在绍兴临床分离的鲍氏不动杆菌β-内酰胺酶、氨基糖苷类修饰酶编码基因携带率高。     

医院感染肺炎克雷伯菌耐药性及氨基糖苷类修饰酶、β-内酰胺酶基因研究

目的明确广州地区引起医院感染的肺炎克雷伯菌耐药性及氨基糖苷类修饰酶、β-内酰胺酶基因存在状况. 方法采用MicroScan微生物鉴定系统NC-21试验板微量肉汤法,测定20株医院感染分离的肺炎克雷伯菌对20种抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应技术分析9种氨基糖苷类修饰酶基因和2种β-内酰胺酶基因. 结果该20株菌呈现多重耐药,除对亚胺培南敏感率高达95%外,对氨基糖苷类抗菌药物的耐药率在75.0%～90.0%之间,其他药物耐药率为55%～100%;18株（90.0%）检出氨基糖苷类修饰酶基因,ant（3″）-Ⅰ、 aac（6′）-Ⅰ、aac（3）-Ⅱ、aac（3）-Ⅰ、aac（6′）-Ⅱ和aph（3′）-Ⅵ基因阳性率分别为80.0%、70.0%、65.0%、35.0%、25.0%和5.0%,aac（3）-Ⅲ、aac（3）-Ⅳ和ant（2″）-Ⅰ基因均阴性;20株菌均检出β-内酰胺酶编码基因,其中TEM基因阳性率85.0%,DHA基因阳性率80.0%. 结论广州地区临床分离的肺炎克雷伯菌多重耐药严重,氨基糖苷类修饰酶基因和β-内酰胺酶编码基因携带率很高,存在DHA型质粒AmpC酶基因.     

水中壬基酚的电沉积碳纳米管修饰电极差分脉冲伏安测定法

目的水样中壬基酚的电沉积碳纳米管修饰电极差分脉冲伏安测定法。方法采用脉冲电沉积法在碳纳米管(CNTs)和氯化钾的混合溶液中制备得到CNTs-玻碳电极(GCE),采用循环伏安法于0.2～1.2 V对壬基酚在修饰电极上的电化学行为进行研究,采用差分脉冲伏安法于0.2～1.2 V优化检测条件并对壬基酚的含量进行测定。结果碳纳米管修饰电极对壬基酚具有明显的电催化作用,电极反应过程是扩散控制过程。催化氧化峰电流与壬基酚浓度在0.1～10.0μmol/L范围内呈良好的线性关系,回归方程为i_(pa)=0.452 4+0.162 1 c,r=0.952 1。该方法的检出限为0.05μmol/L,平均回收率为98.0%～102.0%,RSD为1.3%～2.7%。结论该方法简便、快捷、灵敏度高,适用于水样中壬基酚的测定。     

饮料中大黄酸在多壁碳纳米管修饰玻碳电极上的电化学行为及测定

目的：研究饮料中大黄酸在多壁碳纳米管（MWNTs）化学修饰玻碳电极（GCE）上的电化学行为。方法：建立了一种灵敏、直接检测大黄酸的电化学分析方法。结果：在pH4．7的NaAc-HAc缓冲溶液中于0.10V富集120S后，大黄酸在多壁碳纳米管修饰玻碳电极（MWNTs—GCE）上表现出灵敏的电化学响应，且氧化峰电位出现在-0．34V（VSSCE）。优化了底液的pH、修饰剂的用量、扫描速度、富集时间等测定参数。结论：多壁碳纳米管能催化大黄酸在修饰玻碳电极上的氧化还原。大黄酸的氧化峰电流与其浓度在0．20μg／ml到2．8μg／ml之间有良好的线性关系，回归方程y=40．39X-0，91，r=0．9996。回收率在102．1％～95.2％之间，RSD为1.5％～4．0％，方法的检测限为0．1μg／ml。     

亚慢性铝暴露对大鼠学习记忆及2-氨基羟甲基恶丙酸受体蛋白表达水平的影响

[目的]研究亚慢性铝暴露对大鼠学习记忆及2-氨基羟甲基恶丙酸(AMPA)受体蛋白表达水平的影响.[方法]健康成年雄性SD大鼠32只,按体重随机分为4组,分别为生理盐水对照组,低、中、高剂量铝染毒组(染毒剂量分别为15、30、45μmol/kg)].各染毒组腹腔注射麦芽酚铝染毒8周后,采用Morris水迷宫试验检测大鼠空间学习记忆能力,苏木精-伊红(HE)染色观察海马组织病理学改变,Western-blot方法检测大鼠海马组织AMPA受体亚单位谷氨酸受体(GluR)-1、GluR-2和GluR-3的表达量. [结果]HE染色结果显示,随着染铝剂量的增加,海马组织出现锥体层细胞排列紊乱,数目减少,胞核淡染肿胀,轴突走向紊乱等改变.定位航行实验结果显示,低、中、高剂量组及对照组的潜伏期分别为(36.86±3.75)、(44.75±12.82)、(46.48±8.12)、(29.86±10.34)s,中、高剂量组与对照组比较潜伏期增加,差异具有统计学意义(P＜0.05).空间探索实验结果显示,低、中、高剂量组及对照组的目标象限时间分别为(40.58±10.04)、(34.70±9.25)、(32.93±11.28)、(43.11±15.72)s,中、高剂量组与对照组比较目标象限时间降低,差异具有统计学意义(P＜0.05).Western-blot检测结果显示,GluR-1在低、中、高剂量组及对照组的蛋白表达量分别为0.69±0.15、0.54±0.22、0.41±0.14、0.92±0.09,中、高剂量组GluR-1蛋白表达量分别与对照组和低剂量组比较,差异有统计学意义(P＜ 0.05);GluR-2在低、中、高剂量组及对照组的蛋白表达量分别为0.63±0.18、0.62±0.09、0.42±0.09、0.83±0.26,高剂量组GluR-2蛋白表达量与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).GluR-3蛋白含量在各组无明显变化. [结论]亚慢性铝暴露可致大鼠学习记忆能力下降,这可能与大鼠海马AMPA受体蛋白表达水平下降有关.     

肺炎克雷伯菌老年人分离株β-内酰胺酶、氨基糖苷类修饰酶、氯己定-磺胺耐药基因研究

目的:了解肺炎克雷伯菌(KPN)老年人分离株β-内酰胺酶、氨基糖苷类修饰酶、氯已定-磺胺耐药基因存在状况.方法:对20株KPN菌进行了15种β内酰胺酶基因、2种氨基糖苷类修饰酶基因、氯已定-磺胺耐药基因检测.结果:20株KNP菌检出blaTEM、blaSHV、blaCTX-M-1群、blaCTX-M-9群、blaOXA-1群、blaDHA等6种β-内酰胺酶基因,阳性率分别为95%、30%、50%、5%、5%、15%,有15株检出氨基糖苷类修饰酶基因(75%);16株检出qacE△1-sull基因(80%).结论:该20株老年人分离株KPN菌β内酰胺类、氨基糖苷类抗菌药物耐药与产β-内酰胺酶和氨基糖苷类修饰酶密切相关.     

肺炎克雷伯菌中氨基糖苷类修饰酶基因流行特征的研究

目的 了解肺炎克雷伯菌中氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因的流行状况及AMEs与超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的关系,为防治肺炎克雷伯菌感染及指导临床合理用药提供参考.方法 收集2009年10月—2010年12月医院临床分离的无重复肺炎克雷伯菌162株,采用K-B纸片扩散法测定阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、奈替米星的敏感性,并进行ESBLs表型筛选与确证试验;应用PCR方法检测AMEs基因.结果 162株肺炎克雷伯菌中共检出aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰb 、ant(3″)-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ 4种AMEs基因,检出率分别为30.2％、19.8％、13.6％和4.3％,AMEs基因总检出率为38.3％,ESBLs检出率为47.5％;除阿米卡星外,产ESBLs菌株对庆大霉素、妥布霉素、奈替米星的耐药率高于非产ESBLs菌株(P＜0.05);除ant(2″)-Ⅰ基因外,产ESBLs菌株aac(3)-Ⅱ、aac(6)-Ⅰb、ant(3″)-Ⅰ基因的检出率高于非产ESBLs菌株(P＜0.05).结论 AMEs基因在肺炎克雷伯菌中广泛流行,并介导氨基糖苷类药物的耐药性,肺炎克雷伯菌常同时产生AMEs和ESBLs.     

鲍氏不动杆菌氨基糖苷类修饰酶基因的检测及分布

目的了解中山地区鲍氏不动杆菌(ABA)氨基糖苷类药物的耐药表型和基因分布及其相关性。方法用VITEK-2 Compact高级专家系统判定2010年1-9月405株鲍氏不动杆菌对氨基糖苷类药物的耐药表型,并对7-9月连续分离的18株多药耐药鲍氏不动杆菌(MDRAB)采用PCR的方法检测4种氨基糖苷类修饰酶基因。结果 405株ABA对氨基糖苷类药物的耐药表型模式:共11种,主要为表型RESISTANT(庆大霉素、奈替米星、阿米卡星、妥布霉素)+RESISTANT(庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星),占41.5%;连续分离的18株MDRAB对氨基糖苷类药物的耐药表型模式:共有2种,表型RESISTANT(庆大霉素、奈替米星、阿米卡星、妥布霉素)+RESISTANT(庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星)13株,占72.2%,表型RESISTANT(妥布霉素、庆大霉素、奈替米星)5株,占27.8%,检出阳性耐药基因2种:aac(6′)-Ⅰ和ant(3″)-Ⅰ分别为8、13株。结论临床分离的ABA氨基糖苷类药物耐药表型和基因型基本相符,推测该地区氨基糖苷类药物耐药的主要原因是氨基糖苷类修饰酶基因的存在导致。     

鲍氏不动杆菌β-内酰胺酶、氨基糖苷类修饰酶、氯己定、磺胺耐药基因研究

目的了解20株鲍氏不动杆菌(ABA)β-内酰胺酶、氨基糖苷类修饰酶编码基因、氯己定、磺胺耐药基因存在状况。方法对20株ABA进行了9种β-内酰胺酶基因、3种氨基糖苷类修饰酶基因和氯己定、磺胺耐药基因检测,以耐药基因为分子标记作检测结果的样本聚类进行菌株亲缘性分析。结果20株ABA中blaTEM阳性13株(65%)、blaADC阳性12株(60%)、blaSHV阳性1株(5%),其他β-内酰胺酶基因均阴性;20株ABA中氨基糖苷类修饰酶基因aac(3)-Ⅰ阳性12株(60%)、aac(6′)-Ⅰ阳性13株(65%)、ant(3″)-Ⅰ阳性14株(70%);14株检出qacE△1-sul1基因(70%),以耐药基因为分子标记作检测结果的样本聚类分析显示,其中9株为克隆传播。结论该20株菌β-内酰胺类、氨基糖苷类抗菌药物耐药与产β-内酰胺酶和氨基糖苷类修饰酶密切相关,并存在克隆传播。     

3-硝基丙酸尾-壳核损伤动物模型的建立和初步应用

首先以3-硝基丙酸(3-NPA)10mg/kg腹腔注射,每日6次,每次间隔1.5h的染毒方式,在大鼠中复制出一个重复性较好的3-NPA尾-壳核损伤的动物模型。然后利用模型染毒方式研究了3-NPA中毒大鼠血脑屏障的改变情况。结果表明血脑屏障破坏属于继发性改变。     

甘蔗及甘蔗汁中3-硝基丙酸的薄层色谱测定法

甘蔗及甘蔗汁中的3-硝基丙酸经提取、净化后,在硅胶G薄层色谱板上,与酚试剂反应,在长波紫外灯下形成黄色荧光显色物,本法最低检出量为0.2μg,按本方法测定甘蔗及甘蔗样品中3-硝基丙酸的最低检量为2ppm。在样品中加入3-硝基丙酸水平为1～10ppm时,其回收率范围为80.0～106.0%之间。