磁珠浓缩法在低浓度HBsAg检测中的应用

目的:建立一种以磁珠为介质的标本浓缩方法(磁珠浓缩法),提高HBsAg的检测灵敏度和阳性检出率,用于低浓度HBsAg的测定。方法:BCA蛋白检测法检测磁珠吸附前后和洗脱液中HBsAg蛋白含量,判断吸附HBsAg的能力。磁珠浓缩法浓缩HBsAg阳性、HBsAg阴性、已标定HBsAg浓度的血清系列稀释品和低浓度HBsAg的血清标本,比较浓缩前后的S/CO值。结果:在一定的浓度范围内,磁珠吸附HBsAg随着HBsAg浓度的增高而增多,磁珠吸附HBsAg纯品后,10mmol/LNaOH洗脱HBsAg的洗脱率是(71.02±3.24)%。磁珠浓缩后,S/CO值高于浓缩前(P<0.01),不会增加检测HBsAg的非特异性(P>0.05),S/CO值与HBsAg浓度具有良好的线性(r=0.998),最低检测限是0.1IU/mL,对低浓度HBsAg的阳性检出率是80.8%,与浓缩前比较,差异具有统计学意义(χ2=18.513,P<0.01)。结论:磁珠浓缩法可明显提高ELISA检测HBsAg的灵敏度和阳性检出率,具有一定的研究意义。     

ELISA一步法HBeAg阳性HBsAg阴性标本的分析

乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)阳性的样品,其乙肝病毒表面抗原(HBsAg)大多数阳性,但也有少数样品因HBsAg浓度过高致钩状(hook)效应出现HBsAg假阴性,造成HBsAg漏检。我们用ELISA二步法和胶体金免疫层析法(GICA)检测HBeAg阳性HBsAg阴性样本中的HBsAg,同时将此类标本倍比稀释后用一步法推测HBsAg含量以证实hook现象的产生及其对策。     

HBsAg弱阳性及HBsAg和HBsAb同时阳性的结果分析

目的对ELISA法检测乙肝五项结果中的HBsAg弱阳性结果及乙型肝炎HBsAg和HBsAb同时阳性的结果进行分析。方法从35 280例乙肝五项ELISA法检测结果中筛出HBsAg弱阳性115例,HBsAg和HBsAb双阳性结果95例,对筛出的210例标本再进行电化学发光(ECLIA)定量检测。结果 115例HBsAg弱阳性结果用ECLIA检测,结果一致为90例。符合率为78.3%。HBsAg和HBsAb双阳性结果95例用ECLIA检测,结果一致为11例。符合率为11.6%。结论 ELISA法检测乙肝五项对HBsAg弱阳性及HBsAg和HBsAb双阳性结果要慎重。HBsAg弱阳性结果中以HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性和HBsAg、HBcAb阳性标本占大多数。HBsAg和HBsAb同时阳性的结果可靠性差,要慎重发出报告。     

8种国产HBsAg试剂盒检测变异HBsAg的效果评价

目的：评价国内8种HBsAg诊断试剂检测体外表达的18种变异HBsAg的效果。方法：用8种ELISA试剂检测真核细胞表达的18种变异HBsAg的免疫反应性。结果：8种试剂盒检测变异HBsAg的能力不同,漏检率为16．7％～44.4％。K122I、T123N、C124R和G145R变异的HBsAg漏检率最高。结论：8种HBsAg检测试剂盒都不能很好地检出部分变异HBsAg,应改进试剂性能,提高对变异HBsAg的检出率。     

HBsAg/TP联合金标试纸条用于筛查街头无偿献血者的效果分析

目的使用乙型肝炎表面抗原(HBsAg)/梅毒螺旋体(TP)联合金标试纸条筛查街头无偿献血者HBsAg、TP,防止HBsAg、TP强阳性无偿献血者进入采血程序,降低血液总报废率,减少血液资源浪费;降低工作人员HBsAg、TP职业暴露风险。方法酶联免疫吸附试验(ELISA)检测无偿献血者HBsAg、TP,比较献血前使用HBsAg/TP联合金标试纸条与单独使用HBsAg金标试纸条两者阳性率变化情况。结果献血前使用HBsAg/TP联合金标试纸条筛查TP后,无偿献血者TP阳性率由2014年的1.21%下降至2015年2~5月的0.54%(P0.05);献血前使用HBsAg/TP联合金标试纸条筛查HBsAg与单独使用HBsAg金标试纸条阳性率变化差异无统计学意义(P0.05)。结论献血前使用HBsAg/TP联合金标试纸条检测,相比单独使用HBsAg金标试纸条检测,无偿献血者HBsAg阳性率无明显变化,但TP阳性率大幅度降低,减少了血液资源的浪费、工作人员TP职业暴露风险。由于其操作简单、快速、用血量小,值得在TP阳性率高的血站推广。     

乙型肝炎病毒表面抗原和表面抗体同时阳性样本的体外中和反应特性分析

目的 研究同时阳性样本的乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎病毒表面抗体(抗-HBs)的体外中和反应特性.方法 运用化学发光定量检测技术在HBsAg阳性样本中收集抗-HBs同时阳性的样本血清作为研究对象;选择单纯HBsAg阳性的样本和单纯抗-HBs阳性的样本分别与同时阳性的研究组样本中的抗-HBs和HBsAg进行体外血清学中和反应,测定中和物中的HBsAg和抗-HBs含量;测定HBsAg单阳性样本的基因型和HBsAg亚型,记录各测定结果.结果 获取1例HBsAg(130.21 ng/mL)和抗-HBs(50.6 U/L)双阳性样本,HBV基因型为B型,HBsAg亚型为adw;20例HBsAg单阳性样本中有6例能中和研究组样本中的抗-HBs(中和物抗- HBs≤6.5 U/L);20例抗-HBs单阳性样本均能中和研究组样本中的HBsAg(中和物HBsAg≤0.06ng/mL).结论 同时阳性样本中的抗-HBs不是与其共存的HBsAg的特异性抗体.     

1例供血者经数种乙型肝炎表面抗原筛选试验不能检出的乙型肝炎突变型

背景 乙型肝炎病毒的包膜突变型阻碍了HBV抗体的识别能力,一直有报道乙型肝炎表面抗原(HBsAg)集团特异性“a”抗原决定簇的单一或多个位点突变型。感染上了这种HBsAg突变型的HBV供血者可能被HBsAg筛选试验漏检,因而可能会影响血液的安全。病例报道 一名多次献血的供血者HBsAg酶免反应变为阳性。HBsAg放免确证试验和4项酶免筛选试验呈阴性。在第一次酶免中,HBsAg反应的特殊性是由HBsAg抗体与HBsAg中和试验证实。附加HBV确证实验乙型肝炎核心抗体和乙型肝炎e抗体均为阳性,HBsAg抗体和乙型肝炎e抗原为阴     

HBsAg/TP联合金标试剂在献血者筛查中的使用评价

目的初步评价乙型肝炎病毒表面抗原/梅毒螺旋体抗体联合诊断试剂-胶体金法(简称HBsAg/TP联合金标试剂)在献血者筛查中的应用价值。方法采用HBsAg/TP联合金标试剂和梅毒螺旋体抗体胶体金试剂(简称TP金标试剂),分别检测TP结果阳性的血液标本;采用HBsAg/TP联合金标试剂和HBsAg胶体金试剂(简称HBsAg金标试剂),分别检测HBsAg结果阳性的血液标本;用HBsAg/TP联合金标试剂检测TP、HBsAg阴性标本和强阳性混合血液标本。结果观察时间5min和10min时,HBsAg/TP联合金标试剂对TP阳性标本的检出率分别为47%和72%,TP金标试剂分别为39%和52%;联合金标试剂对HBsAg阳性标本的检出率分别为47%和54%,HBsAg金标试剂分别为47%和60%;联合金标试剂对TP、HBsAg阴性标本的阴性检出率为100%,能检出强阳性混合血液标本。结论HBsAg/TP联合金标试剂,可检出较高浓度的HBsAg和抗-TP,可在短时间内检出大部分ELISA阳性标本,能有效降低血液报废率和保证血液质量,可用于无偿献血者的快速筛查。     

羧基磁珠吸附乙型肝炎病毒表面抗原的性能研究

目的研究羧基磁殊吸附乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）的性能，为磁珠在蛋白质分离纯化中的应用打下基础。方法检测羧基磁珠吸附HBsAg前后的蛋白量，判断磁珠用量、HBsAg浓度、吸附温度、吸附时间对磁珠吸附HBsAg的影响。使用10mmol／LNaOH洗脱HBsAg，测定洗脱后HBsAg的洗脱率和生物活性保留率。结果羧基磁珠吸附HBsAg的性能与磁珠用量、HBsAg浓度、吸附温度和吸附时间有密切关系。磁珠吸附浓度为524．24ug／mL的血源性HBsAg纯品后，10mmol／I。NaOH溶液洗脱HBsAg的洗脱率是71．02％，活性保留率为88．15％。结论带有羧基的磁珠可以吸附HBsAg，有望用于HBsAg的分离回收，为磁珠在蛋白质分离纯化中的应用打下基础。     

乙型肝炎表面抗原家系聚集的观察

对乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性和阴性病人各5例的家庭成员共38人作了连续3年的观察,进一步证实HBsAg的家系聚集现象,可以通过密切传播或“垂直传播”。HBsAg阳性病人的家庭成员61%HBsAg阳性,HBsAg阴性病人的家庭成员无1例阳性。11名长期HBsAg阳性者,e抗原阳性5人。在HBsAg携带者中未发现非特异性细胞免疫缺陷。     

宫内感染乙型肝炎病毒诊断指标分析

目的:探讨乙型肝炎病毒表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)阳性母亲其新生儿出生时HBsAg与乙型肝炎病毒脱氧核苷酸(hepatitis B virus DNA,HBV-DNA)同时阳性对HBV宫内感染的诊断价值.方法:选择1 532例分娩孕妇及其对应新生儿1 545例(双胎13例),检测新生儿出生时HBsAg和HBV-DNA,复查1月龄时HBsAg,计算HBV宫内感染率,分析HBsAg与HBVDNA同时阳性对HBV宫内感染初步诊断的准确性.结果:1 545例新生儿中,HBsAg和HBV-DNA 同时阳性者36例(2.33%).至1个月龄时剔除失访148例后,随访婴儿出生时HBV-DNA阳性36例中32例持续HBsAg阳性,而出生时HBsAg阳性、HBV DNA阴性婴儿中10例HBsAg持续阳性,HBV宫内感染率2.72%(42/1545);与出生时HBsAg和HBV-DNA同时阳性率2.33%相近.结论:HBsAg阳性母亲其新生儿出生时HBsAg和HBV-DNA同时阳性可作为HBV宫内感染的初步诊断指标.     

低水平乙型肝炎病毒表面抗原核苷类似物经治患者序贯α干扰素治疗的初步研究

目的观察经核苷(酸)类似物(NA)治疗获得病毒学应答,且HBsAg低水平的HBeAg阴性慢性乙型肝炎(CHB)患者序贯α干扰素(IFNα)治疗的疗效,并探讨HBsAg消失的相关因素。方法长期接受NA治疗并获得病毒学应答(HBV-DNA1000拷贝/mL,持续时间12个月),且HBsAg低水平(HBsAg≤2 000 U/mL)的HBeAg阴性CHB患者,转为IFNα治疗48周。检测患者治疗前和治疗12、24、48周时血清HBV-DNA定量,HBV血清学标志物,肝功能和血常规,停药后随访24周。以HBsAg消失或血清学转换、HBsAg10 U/mL为疗效评价指标。Logistic回归用于分析相关因素,受试者工作特征曲线(ROC曲线)用于确定HBeAg阴转史及HBsAg变化情况对治疗后HBsAg消失的预测价值。结果 83例患者被纳入研究。停药24周时,15例(18.1%)获得HBsAg消失,5例(6.0%)获得HBsAg血清学转换,9例(10.8%)达到HBsAg10 U/mL。HBsAg消失组中HBeAg自发阴转的患者比例高于HBsAg未消失组,差异有统计学意义(χ~2=9.527,P=0.002)。治疗12周时HBsAg水平较基线下降≥0.5 log U/mL者治疗后更易实现HBsAg消失(χ~2=16.576,P0.001),其预测HBsAg消失的曲线下面积(AUC)为0.810(95%CI:0.686~0.935,P0.001)。结论经NA治疗获得病毒学应答,且HBsAg低水平的HBeAg阴性CHB患者,序贯IFNα治疗可获得较高HBsAg消失率;HBeAg阴转史及治疗早期HBsAg变化情况可用于预测及指导治疗。     

ELISA酶标法与胶体金试纸法检测HBsAg时的漏检情况分析

ELISA酶标法测定HBsAg时,当标本中HBsAg滴度太高时,出现hook现象,造成假阴性漏检.胶体金纸条法检测HBsAg时,对HBsAg低滴度的标本,因检测不出而产生假阴性漏检.本文对用这两种方法检测5539份献血员血清HBsAg时造成的漏检情况进行了分析.     

HBsAg浓度与HBV复制水平的相关性分析

目的探讨HBsAg浓度与HBV复制水平的相关性。方法用时间分辨免疫荧光法(TRFIA)定量测定的乙型肝炎患者血清HBsAg浓度,比较HBV DNA复制或HBeAg患者HBsAg的滴度,同时进行HBsAg与DNA复制或HBeAg相关性分析;应用ROC曲线分析单独应用HBsAg或联合HBeAg,判断HBV DNA结果及复制状态的可靠性,分析判断DNA结果的符合率。结果HBsAg滴度和HBeAg水平或HBV DNA复制水平呈正相关。ROC曲线分析表明HBsAg滴度可用于HBV DNA阴性或阳性的判断,并且能够提高单独应用HBeAg滴度的ROC曲线下面积。以HBsAg 150ng/ml评估HBV DNA水平具有较高的阳性、阴性预测值和符合率。结论HBsAg浓度与HBV复制水平密切相关。     

液相芯片技术检测乙型肝炎病毒表面抗原

目的建立乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)液相芯片检测法并进行评估。方法将4种不同来源的HBsAg单克隆抗体分别包被在不同的羧基化微球上,利用双抗体夹心法原理建立液相芯片检测HBsAg的方法。检测定值血清、标准血清盘以及本中心献血者筛选保留的随机43份HBsAg阳性标本和500份HBsAg阴性标本,并评估方法的敏感性和特异性。结果液相芯片法检测HBsAg灵敏度可达到0.2IU/ml。在标准血清盘中,HBsAg阳性符合率为25/25,阴性符合率为14/15。在收集的43份阳性标本、500份阴性标本中,HBsAg阳性标本符合率为100%,阴性标本符合率分别为99.4%。4种不同来源HBsAg单克隆抗体的检测结果存在差异,可以互补。结论建立的液相芯片方法可有效检测HBsAg。     

早期乙肝病毒表面抗原及其突变体检测:五种试验方法比较

概 述 乙肝病毒(HBV)表面抗原(HBsAg)血清学检测是了解献血者和肝炎患者是否感染HBV的基础。HBsAg的检测方法现面临两方面的挑战:即现行乙肝病毒DNA检测技术敏感性程度与存在的HBsAg变异体检出。为研究当前HBsAg检测方法敏感性,我们对11种血清转化的系列样品和3种经系列稀释的标准HBsAg样品以及9种“a”决定簇有多个变异的重组HBsAg样品进行了检测,并对HBsAg检测的5种方法进行了比较。     

入学新生HBsAg携带者调查分析

为了解入学新生的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)携带情况,我院从 1992～1996年对入学新生作了 HBsAg血清学检查,对HBsAg阳性者再进行“两对半”的检查.HBsAg阴性者注射乙肝疫苗.报道如下.     

金免疫层析试验检测HBsAg等项目结果分析

目的 比较金免疫层析试验(GICA)与酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)的结果符合率,以了解GICA的特异性与敏感度.方法 用GICA和ELISA平行检测受检者血清标本HBsAg.结果 通过1 205份血清样本的分析,发现GICA和ELISA检测HBsAg的结果符合率为99.09%,GICA检测HBsAg存在漏检(即假阴性).结论 GICA较ELISA敏感度低,用GICA检测HBsAg等项目存在一定程度的漏检率,GICA只能筛查HBsAg,检测HBsAg低含量的血清标本不宜使用.GICA快速诊断法可用来大规模普查人群HBsAg的感染情况,也适用于临床急症标本等快速检测的需要.     

乙型肝炎病毒表面抗原确认试验方法的建立

目的建立适用于国产酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂测定为乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阳性样本的确认试验方法。方法以特异性抗-HBs中和样本中的HBsAg并设立加对照液的对照孔,然后按常规方法检测样本中HBsAg含量(吸光度表示),按公式求得加抗-HBs孔的抑制率,如抑制率≥50%即表示该样本被确认为HBsAg阳性。结果确定以混合抗-HBs阳性人血清为特异性中和抗体,选定确认试验常规操作步骤。对109份HBsAg阳性样本用确认试剂进行测定,结果均被确认。对4份乙型肝炎5项血清标志阴性的样本进行确认试验,结果均为HBsAg阴性。对17份HBsAg阳性血清用本法与Murex HBsAg确认试剂作比对试验,二者结果一致,17份HBsAg阳性者均被确认。结论本研究建立的HBsAg确认试验方法和试剂适用于对HBsAg阳性样本进行确认,填补国内确认试剂缺如的空白。经进一步临床试验后,值得推广应用。     

新余市2006年高考学生HBsAg检测结果分析

目的了解本市中学生人群中乙型肝炎病毒感染情况,为医疗卫生防疫部门的防治提供依据。方法采用酶联免疫吸附试验检测HBsAg。结果2006年5240名高考学生中,HBsAg阳性率为17.8%,其中男生为19.5%,女生为13.8%,市区考生HBsAg的感染率为15.8%,而乡镇考生HBsAg的感染率为24.8%。结论本市2006年高考考生HBsAg的感染率显著高于全国的HBsAg感染的平均水平,乡镇考生高于市区考生,男生高于女生。