革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶的状况及其耐药性监测

目的调查产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的革兰阴性杆菌的耐药状况.方法采用确证试验法检测产ESBLs的革兰阴性杆菌[1].结果187株革兰阴性杆菌中检出ESBLs阳性菌24株,检出率为12.83%;它们对β-内酰胺类抗生素呈现极高的耐药性.结论产ESBLs的革兰阴性杆菌具有极高的耐药性及多重耐药性.检测革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶的状况并探讨它们的耐药谱,有利于指导临床合理使用抗生素.     

超广谱β内酰胺酶在腹泻病人分离156株革兰阴性杆菌中的分布

目的 研究临床腹泻病人粪便标本分离的革兰阴性杆菌产超广谱β内酰胺酶（ESBLs）分布。方法 ESBLs的检测是采用NCCLs推荐的纸片确证试验。结果 腹泻病人粪便标本分离的156株革兰阴性杆菌中产超广谱β内酰胺酶有18株（占11．5％）。结论 在腹泻病原菌耐药的情况中，ESBLs已经占据了一定的地位，与喹诺酮耐药一起成为了腹泻病原菌耐药的两大原因。     

革兰阴性杆菌中AmpCβ-内酰胺酶的检测及其耐药性分析

目的了解革兰阴性杆菌临床分离株AmpCβ-内酰胺酶的发生率及产酶株的耐药性。方法采用三维试验检测AmpCβ-内酰胺酶;用K-B纸片法进行抗菌药物敏感试验。结果236株革兰阴性杆菌中,三维试验阳性菌株29株;17株(7.2%)单产AmpC酶,8株(3.4%)单产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),2株(0.8%)同时产AmpC酶和ESBLs,2株(0.8%)为非产AmpC酶和ESBLs菌株;共检出产AmpC酶菌株19株,检出率为8.1%;药物敏感试验结果显示,除亚胺培南和头孢吡肟外,产酶株的耐药率明显高于非产酶株。结论本院革兰阴性杆菌AmpC酶的检出率为8.1%;产酶菌呈多重耐药特性,治疗产酶菌感染首选第四代头孢菌素及碳青霉烯类药物。     

对产与不产超广谱β-内酰胺酶细菌的耐药分析

现将我院分离的269株革兰阴性杆菌,对产与不产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的耐药情况进行分析,现报告如下.     

检测产超广谱β-内酰胺酶耐药基因寡核苷酸芯片的研制及应用

目的探讨用寡核苷酸芯片检测革兰阴性杆菌耐产超广谱β-内酰胺酶抗生素耐药基因的可行性。方法制备了检测产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性杆菌寡核苷酸芯片。应用该寡核苷酸芯片检测16例临床革兰阴性杆菌耐药株,并与测序结果比较。结果提取的DNA产物随机引物标记后杂交,杂交结果差异无统计学意义。其结果与测序结果相符。结论寡核苷酸芯片可以推广应用到临床作为耐产超广谱β-内酰胺酶抗生素快速诊断的一种有效方法。     

革兰阴性杆菌超广谱β—内酰胺酶检测与耐药性分析

目的：了解本院革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶的产生率及耐药性。方法：按照2000年NCCLS推荐的纸片扩散初筛法和确认法检测ESBLs及K-B法进行药敏试验。结果：8种革兰阴性杆菌ESBLs的检出率以肺炎克雷伯菌最高（43.4％）；检测ESBLs的药物中CTX和CTX/CA的阳性率高于其他药物，分别为89.6％（120/134）、91.8％（123/134）；产ESBLs菌株对各种抗生素的耐药率明显高于非ESBLs菌株，亚胺培南仍然未出现耐药现象。结论：临床微生物实验室应加强革兰阴性杆菌ESBLs与耐药性检测，进一步探讨细菌的耐药机制，指导临床合理用药，减少或减缓细菌耐药的产生。     

革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶检测与耐药性分析

目的了解本院革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶的产生率及耐药性.方法按照2000年NCCLS推荐的纸片扩散初筛法和确认法检测ESBLs及K-B法进行药敏试验.结果8种革兰阴性杆菌ESBLs的检出率以肺炎克雷伯菌最高(43.4%);检测ESBLs的药物中CTX和CTX/CA的阳性率高于其他药物,分别为89.6%(120/134)、91.8%(123/134);产ESBLs菌株对各种抗生素的耐药率明显高于非ESBLs菌株,亚胺培南仍然未出现耐药现象.结论临床微生物实验室应加强革兰阴性杆菌ESBLs与耐药性检测,进一步探讨细菌的耐药机制,指导临床合理用药,减少或减缓细菌耐药的产生.     

细菌β-内酰胺酶快速检测及分型试剂盒的应用评估

目的将一种新型快速检测β-内酰胺酶试剂盒(Cica-Beta Test,主要成分为HMRZ-86)应用于临床分离的产β-内酰胺酶革兰阴性杆菌产酶情况的检测并初步分型。方法收集2006年10月至2007年5月瑞金医院临床微生物科临床分离的头孢噻肟和/或头孢他啶耐药革兰阴性杆菌。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌根据临床实验室标准化研究所(CLSI)推荐的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)纸片确证试验确证。根据Cica-Beta Test试剂盒说明书步骤对100株菌进行β-内酰胺酶检测及分型。结果40株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌均产ESBLs。Cica-Beta Test试剂盒检测结果显示,产青霉素酶或窄谱头孢菌素酶17株、ESBLs 47株、AmpC酶8株、金属酶1株、D类酶或复数ESBLs 27株。有3株菌试剂盒检测为产青霉素酶或窄谱头孢菌素酶,而纸片确证试验为ESBLs产生株。结论Cica-Beta Test试剂盒可应用于革兰阴性细菌β-内酰胺酶检测及初步分型,敏感性较高,快速、简便,但如果产酶量过低可能会影响检测结果,应结合细菌鉴定和药敏试验结果作出适当判断。     

AmpC酶及超广谱β内酰胺酶在126株革兰阴性杆菌中的分布

目的：研究临床分离的革兰阴性杆菌不同菌株产AmpC酶及超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的分布。方法：AmpC酶的检测是通过冻融法获得酶粗提物,然后作三维试验,以狭缝与抑菌圈交界处是否出现扩大的长菌区域来判断试验的结果。ESBLs的检测是采用纸片确证试验。结果：126株对第三代头孢菌素耐药或中介的革兰阴性杆菌中产AmpC酶株有58株(占46％),产ESBLs株有28株(占22．6％)。结论：ESBLs及AmpC酶已成为介导革兰阴性杆菌耐药的两大主要因素。     

鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类抗生素耐药性分析

目的对多重耐药的鲍曼不动杆菌进行β-内酰胺类抗生素耐药性分析。方法K-B法、琼脂稀释法检测35株鲍曼不动杆菌对14种β-内酰胺类抗生素的敏感性;碘—淀粉测定法、三维试验、协同法、纸片扩散确证试验检测青霉素酶、头孢菌素酶(AmpCs)、金属β-内酰胺酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs);PCR扩增β-内酰胺类抗生素耐药基因Tem-1。结果35株菌株有28株表现为对β-内酰胺类抗生素多重耐药,其中产青霉素酶的菌株16株,产AmpCs的菌株10株,产金属β-内酰胺酶的菌株2株,产ESBLs的菌株3株;9株同时产青霉素酶和AmpCs,2株同时产金属β-内酰胺酶和ESBLs。多数耐药菌株均扩增出Tem-1基因。结论鲍曼不动杆菌产生β-内酰胺酶是其对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因。     

医院感染主要革兰阴性杆菌的临床分布及耐药性监测

目的了解医院感染主要革兰阴性杆菌的分布及耐药性,为临床合理用药提供依据。方法回顾性分析2015年1月-2016年12月临床送检标本中分离出的846株主要革兰阴性杆菌,包括:铜绿假单胞菌(PAE),鲍曼不动杆菌(ABA),大肠埃希菌(ECO),肺炎克雷伯菌(KPN)的非重复计数株的分布及耐药性。结果 846株主要革兰阴性杆菌中PAE、ABA、ECO、KPN比率分别是31.6%、9.9%、40%、18.4%。PAE对阿米卡星耐药率最低14.2%,ABA对亚胺培南耐药率最低26.2%、产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)ECO和KPN比率分别为59.2%、31.4%,产ESBLs菌株耐药率明显高于非产ESBLs菌株。结论定期对细菌耐药性进行监测,有助于了解细菌耐药性变化,为临床合理使用抗菌药物提供依据。     

革兰阴性杆菌产β-内酰胺酶及其耐药分子机制的研究

目的分析革兰阴性杆菌所产β-内酰胺酶的表型及基因分型,并研究其耐药分子机制。方法用纸片扩散初筛试验、扩散确证试验进行超广谱β-内酰胺酶（extended spectrum beta-lactamases,ESBLs）表型检查,头孢西丁三维试验进行AmpCβ-内酰胺酶的表型检查,纸片协同试验筛选产金属β-内酰胺酶（metallo-beta-lactamase,MBL）菌株;用多重PCR技术扩增β-内酰胺酶基因并进行DNA测序;用PCR技术扩增基因元件整合子、插入序列ISEcp1B和转座子tnpU;用MIC药敏法分析革兰阴性杆菌的药物敏感性。结果①革兰阴性杆菌β-内酰胺酶的表型总检出率为24.28%（42/173）,主要由单产ESBLs引起,占13.29%,β-内酰胺酶的基因型总检出率为24.86%;②整合子检出49株占28.32%,ISEcp1B插入序列检出29株占16.76%,转座子tnpU检出28株占16.18%,基因元件阳性的菌株大多数β-内酰胺酶表型为阳性;③β-内酰胺酶阳性菌株对抗生素的耐药率显著高于阴性菌株。结论革兰阴性杆菌可携带多种β-内酰胺酶,基因元件广泛分布于革兰阴性杆菌中,可能在多重耐药机制中起重要作用。     

本地区常见革兰阴性杆菌种类及其耐药性分析

目的：探讨、总结本地区细菌苗种分布及其耐药现状。收集894株革兰阴性杆菌，分析其菌种分布、耐药性。方法：细菌分离、培养按常规方法。菌种鉴定采用MicroScanWalkAWay-40、Vitek-32全自动微生物分析仪，药敏实验采用微量液体稀释法，超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）检测采用纸片确证试验，高产AmpC β-内酰胺酶检测采用Thomson推荐的液体稀释法。结果：在894株革兰阴性杆菌中，分离出大肠埃希菌340株、铜绿假单胞菌152株、肺炎和产酸克雷伯菌101株、不动杆菌66株。超广谱β-内酰胺酶检出率：大肠埃希菌28．3％、克雷伯菌39．6％；高产AmpCβ-内酰胺酶检出率：铜绿假单胞菌为45．7％、变形杆菌为13．1％，枸橼酸杆菌为72．4％、沙雷菌为27．3％、肠杆菌屑为49％。在革兰阴性杆菌中。亚胺培南、头孢哌酮／舒巴坦、哌拉西林／他唑巴坦药物敏感性较高。结论：本地区革兰阴性杆菌菌种分布以大肠埃希占首位。超广谱-内酰胺酶检测结果分别是：大肠埃希菌为28．3％，克雷伯菌为39．6％；高产AmpCpβ-内酰胺酶检出率分别是；铜绿假单胞菌为45．5％、变形杆菌为13．1％、枸橼酸杆菌为22．4％、沙雷菌为27．3％、肠杆菌属为49％。在革兰阴性杆菌中，亚胺培南、头孢哌酮／舒巴坦、哌拉西林／他唑巴坦可以作为首选药物。     

重症监护病房感染病原菌的监测及耐药性分析

目的了解重症监护病房(ICU)感染病原菌的分布及耐药性,为临床合理用药提供依据。方法收集2010年1月至2012年6月ICU患者标本中分离的475株病原菌,进行细菌鉴定和药敏试验,并对革兰阴性杆菌进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的监测。结果 ICU病房感染以革兰阴性杆菌为主(75.4%),革兰阳性球菌为12.2%,真菌为12.4%,产ESBLs大肠埃希菌的检出率为42.0%,产ESBLs肺炎克雷伯菌的检出率为20.4%。结论革兰阴性杆菌是ICU病房感染的主要病原菌,病原菌的耐药率呈上升趋势。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶的基因型与临床的关联

产超广谱和耐酶抑制剂β-内酰胺酶是革兰阴性菌对β-内酰胺类抗生素耐药的重要原因。近年来由于超广谱β-内酰胺抗生素在临床的大量应用，致使革兰阴性杆菌产生超广谱β-内酰胺酶ESBLs，ESBLs按编码基因同源性的不同主要分4型，即TEM型、SHV型、CTX—M型、和OXA型，而我国主要以CTX—M型为主，包括CTX—M-14-3922、27、24、28、29、13型等，其次为SHV型。在产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs基因型中以CTX—M-14型和CTX—M-3型最常见，有的菌甚至产2种至3种酶型，造成临床多重耐药。因此，掌握它们的分型、分类、构效关系和耐药模式等方面的知识，对临床合理使用抗生素和防止耐药菌的产生具有重要的意义。     

痰标本中产超广谱β-内酰胺酶菌株的药敏分析

[目的] 了解从痰标本中分离到的革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶(BSBLs)及产超广谱β-内酰胺酶菌株的药敏情况。[方法] 收集2001年1月至2002年6月从我院呼吸道感染患者中分离出的革兰阴性杆菌共543株，用双纸片协同试验检测超广谱β-内酰胺酶阳性株，并用K-B琼脂扩散法做药敏试验。[结果] 196株肺炎克雷伯杆菌，278株大肠埃希杆菌，69株阴沟肠杆菌。共检出产BSBLs137株，检出率为25．23％，其中肺炎克雷伯杆菌BSBLs阳性率为28．06%；大肠埃希杆菌BSBLs检出率为23．74％；阴沟肠杆菌BSBLs检出率为23．19%，除亚胺培南、美洛培南、头孢哌酮／舒巴坦、哌拉西林／他哇巴坦外，产BSBLs株对其它抗生素的耐药率明显高于非产BSBLs株。[结论] 呼吸道感染患者中大肠埃希杆菌、阴沟肠杆菌、肺炎克雷伯杆菌产BSBLs情况严重，而且BSBLs株多为多重耐药株。亚胺培喃、美洛培喃、头孢哌酮／舒巴坦、哌拉西林／他唑巴坦是治疗由产ESBLs菌引起感染的有效抗生素。     

超广谱β-内酰胺酶细菌耐药性分析

[目的]观察大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中超广谱β-内酰胺酶的分布情况及其耐药性分布。[方法]采用NCCLS纸片确证试验检测超广谱β-内酰胺酶。[结果]218株大肠埃希菌中有60株超广谱β-内酰胺酶阳性；239株肺炎克雷伯菌中有46株阳性。检出的这些阳性菌株几乎对所有β-内酰胺类抗生素耐药；对氨基糖苷类、氟诺喹酮部分耐药；对亚胺培南全部敏感。[结论]革兰阴性杆菌中超广谱β-内酰胺酶的检测应作为临床微生物实验室的常规应用项目，以利于指导临床用药。     

革兰阴性菌超广谱β-内酰胺酶及耐药性的检测结果分析

[目的]调查产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌(E．coil)和肺炎克雷伯菌(K．Pneumoniae)的耐药性。[方法]对166株革兰阴性菌进行药物敏感性试验,同时,对其中的104株肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌进行超广谱β-内酰胺酶的检测。[结果]20．8％肺炎克雷伯菌和13．6％的大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶,显示产超广谱β-内酰胺酶株组对头孢他啶(CAZ)、头孢噻肟(CTX)、头孢哌酮(CFP)及头孢唑啉(CEZ)、头孢三嗪(CET)、丁胺卡那(AMK)耐药率明显高于非产酶组,这些菌株对IMP的耐药率最低,产ESBLs的大肠埃希菌对环丙沙星(CIP)、庆大霉素(GM)和复方新诺明(SMZ)的耐药率高于肺炎克雷伯菌。[结论]产超广谱β-内酰胺酶对所测试多数抗菌素的耐药程度比不产酶株为高,但所有产酶株对IMP均敏感。     

239株革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

目的：检测超广谱β—内酰胺酶(extended spectrum β-lactamases,ESBLs)在革兰阴性杆菌中的表达及耐药特点，为临床积累经验。方法：应用双纸片协同试验和确证试验对239株革兰阴性杆菌进行ESBLs检测，同时分析药敏结果。结果：239株革兰阴性杆菌中ESBLs的检出率为20．5％(49／239)，其中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、其他菌种的检出率分别为23．3％(21／90)、33．3％(8／24)、16．0％(20／125)。产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌菌株对青霉素类、第三代头抱菌素、β—内酰胺酶抑制药、β—内酰胺类、氨基糖苷类的耐药率分别为100％，57％～95％、19％～71％、0～90％、38％～90％，其中耐药率最低的为β—内酰胺类的亚胺培南-西司他丁(0)、β—内酰胺酶抑制药的哌拉西林-三唑巴坦(19％)和氨基糖香类的阿米卡星(38％)。结论：不仅大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌可产ESBLs，其他革兰阴性杆菌也可产ESBLs；对产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌感染的治疗可首选亚胺培南-西司他丁。     

临床分离的革兰阴性杆菌的耐药性研究

β－内酰胺酶是细菌最常产生的、能水解β－内酰胺类抗生素的一种酶,是革兰阴性杆菌对β－内酰胺类药物产生耐药的最主要机理。β－内酰胺类抗生素是临床治疗感染性疾病中应用最多的一类药物,近年来,随着头孢３代抗生素等在临床广泛应用,出现了产超广谱β－内酰胺酶的细菌,这其中大多数为肺炎克雷伯菌和大肠埃希氏菌,而且目前在临床分离的比率有逐年上升趋势。我们应用纸片扩散法检测革兰阴性杆菌对常见抗生素的敏感性,应用双纸片协同试验筛选产超广谱β－内酰胺酶的细菌,确证实验采用头孢他啶联合克拉维酸纸片扩散法,来研究临床分离的革兰阴性杆菌的耐药性及产超广谱β－内酰胺酶的比率,并分析常见革兰阴性杆菌的耐药趋势,为临床合理应用抗生素提供科学的依据。