VEGF、VEGI与大肠癌临床病理特征的关系

目的:测定血管内皮生成因子(VEGF)和血管内皮生成抑制因子(VEGI)在大肠癌组织和远癌切端相对正常大肠组织中的表达水平,探讨其相互关系,并研究与大肠癌临床病理参数的相关性.方法:收集手术切除的大肠癌标本33例,采集大肠癌组织和远癌切端相对正常大肠组织.用RT-PCR测定VEGF和VEGI分子mRNA的转录水平,同时使用Westernblot测定二分子的蛋白表达水平.结果:大肠癌癌组织和远癌切端大肠组织中的VEGF分子和VEGI分子在mRNA转录水平及蛋白表达水平均具有显著性差异,VEGF分子在肿瘤组织中表达水平显著高于远切端相对大肠组织的表达水平,VEGI分子在肿瘤组织和远切端相对大肠组织的表达水平则相反.结论:在大肠癌发生、发展的过程中,VEGF的作用已愈来愈被认识,机体自身产生的VEGI的作用亦不能被忽视.     

Cyclin E在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨Cyclin E蛋白在胃癌组织中的表达及其与临床病理和生存时间的关系。方法采用免疫组化过氧化物酶标记链霉卵白素法（SP法）检测胃癌及正常胃黏膜组织100例、胃癌转移淋巴结组织66例中Cyclin E蛋白的表达,分析其与患者的年龄、性别、肿瘤大小、浸润深度、分化程度、淋巴结转移和远处转移等临床病理因素的相关关系。结果 Cyclin E蛋白在胃癌组织、正常胃黏膜组织及转移淋巴组织中均有表达,三者之间阳性表达率差异有统计学意义（P〈0.01）。Cyclin E蛋白表达与癌发部位、肿瘤大小、组织类型及有无淋巴结转移有显著的相关性（P〈0.05）,与患者的性别、年龄、远处转移、浸润深度及TNM分期无相关关系。结论 Cyclin E蛋白表达与胃癌患者发生淋巴结转移及肿瘤组织分化程度、大小有相关关系,可作为胃癌诊断及判断预后的一项新指标。     

联合检测大肠癌组织中PTEN与CyclinD1的表达及DNA含量的临床意义

目的:探讨大肠癌组织中PTEN和CyclinD1的表达及与DNA含量联合检测的关系及意义.方法:应用免疫组织化学SP法检测58例大肠癌及14例癌旁正常大肠黏膜组织中PTEN和CyclinD1蛋白表达;应用流式细胞术检测以上组织中PTEN和CyclinD1的DNA含量;分析它们之间及与肿瘤分期、分级的关系.结果:PTEN蛋白在大肠癌组织中的表达(65.52%)显著低于癌旁正常组织(100%),CyclinD1蛋白在大肠癌组织中的表达(60.34%)显著高于癌旁正常组织(1.72%),两种蛋白在大肠癌组织中的表达呈负相关(r =-0.71);大肠癌组织的异倍体率(68.97%)显著高于癌旁正常组织(0);PTEN阳性组的DNA指数(DNA index,DI)、S期细胞比率(S-phase fraction ,SPF)均低于阴性组(P<0.05),CyclinD1阳性组的DI及SPF均高于阴性组(P<0.05);两者的表达与肿瘤病理分级、Dukes分期及淋巴结转移相关;淋巴结转移患者的异倍体率及SPF均高于无淋巴转移患者(P<0.05).结论:PTEN和CyclinD1基因的异常改变可能参与大肠黏膜细胞的恶性转化过程,两者的变化存在相关性;DNA含量的变化可能与淋巴结转移有关.联合检测PTEN、CyclinD1蛋白及DNA含量可作为评估大肠癌病理生物学行为和预后的重要指标.     

淋巴管生成调控机制与大肠癌临床病理特征的相关性

目的：研究大肠癌淋巴管生成的相关调控基因,以探寻其淋巴转移机制。方法：收集经手术切除的60例大肠癌组织及远癌切端肠组织标本,应用免疫组织化学技术及基因芯片技术,探寻与大肠癌淋巴管生成密切相关的基因,并分析与临床病理参数的相关性。结果：大肠癌组织和远癌切端肠组织间LVD（lymph vessel density）具有统计学差异（P〈0.05）,不同分化程度、浸润深度和淋巴结转移有无的大肠癌组织间LVD有显著差异（P〈0.05）,而在不同年龄、性别、组织学分型之间无明显差异（P〉0.05）;比较高淋巴管密度和低淋巴管密度大肠癌组织的基因芯片检测结果,有5个基因上调和11个基因下调5倍以上。结论：大肠癌组织的LVD显著高于远癌切端大肠组织,大肠癌组织的LVD与肿瘤分化程度、浸润深度及淋巴结转移有相关性,提示大肠癌组织中LVD随着原发肿瘤分化程度减低、浸润加深以及发生淋巴结转移而增高;高LVD的大肠癌组织与低LVD的大肠癌组织间存在差异表达的基因。     

大肠癌组织VEGF-C表达与血管生成和细胞增殖关系的研究

目的：研究大肠癌组织血管内皮生长因子C（VEGF—C）表达与肿瘤血管生成及肿瘤细胞增殖的关系。方法：采用SP免疫组织化学方法，检测81例大肠癌VEGF-C、CD34和Ki-67的表达，并分析VEGF-C与微血管密度（MVD）、Ki-67增殖指数（Ki-67PI）的相关性。结果：81例大肠癌中，VEGF-C表达阳性45例（55．56％）；VEGFC表达阳性的肿瘤其MVD和Ki-67PI高于VEGF-C者（P〈0.05）。VEGF-C表达与MVD、Ki-67PI呈正相关（P〈0.05）。有转移组（包括淋巴结转移和远处转移）的VEGF-C表达明显高于无转移组，表达随肿瘤分期的升高而增强。结论：VEGF-C通过诱导新生血管形成，促进肿瘤细胞的增殖生长，影响着大肠癌的浸润和转移。     

胃泌素、生长抑素对大肠癌细胞周期的调控作用

检测79例大肠癌组织中胃泌素（GAS）、生长抑素（SS）、Cyclin D1、Cyclin E、Cyclin A、Cyclin B1、CDK2、CDK4表达情况，探讨大肠癌组织GAS、SS的表达与Cyclins、CDKs表达的相关性，了解胃肠激素对大肠癌细胞增殖的具体调控位点。     

PTEN和p27及cyclin D1蛋白在大肠癌组织中的表达及相关性研究

目的：研究大肠癌组织中PTEN、p27和cyclinD1蛋白的表达及三者间的关系。方法：应用免疫组铡匕学方法检测58例大肠癌组织、58例癌旁组织和14例正常大肠黏膜中PTEN、p27和cyclinD1蛋白的表达情况。结果：大肠癌组织中PTEN和p27蛋白的阳性表达率分别为65．52％（38／58）和53．45％（31／58），较癌旁组织和正常组织明显刚氏（P〈0．05）；cyclinD1蛋白的阳性表达率为60．34％（35／58）,较癌旁组织及正常组织显著升高（P〈0．05）。三者在大肠癌组织中的表达存在相关性，且均与肿瘤的分化程度、有无淋巴结转移和Dukes分期有关（P〈0．05）。结论：PTEN、p27和cyclinD1基因的异常改变参与大，且三者之间存在相关性。联合检测三者表达水平可作为评价大肠癌病理生物学行为的客观指标之一。     

直肠癌组织中Cyclin E、P27kipl和Ki67的表达及意义

目的探讨直肠癌组织中Cyclin E、P27kipl和Ki67的表达及病理意义。方法选取2010年1月至2016年2月直肠癌患者肿瘤组织及其同一患者癌旁3 cm以上癌旁黏膜组织标本70例,免疫组织化学方法检测Cyclin E、P27kipl和Ki67的表达,分析其表达在病理学中的意义。采用SPSS19.0软件,Cyclin E、P27kipl和Ki67在直肠癌组织表达率比较使用χ2检验,与临床病理关系采用秩相关分析。以P0.05表示差异具有统计学意义。结果直肠癌组织中Cyclin E和Ki67阳性表达率分别为61.43%和87.14%,明显高于癌旁黏膜组织,而P27kipl阳性表达率为51.43%,低于癌旁黏膜组织91.42%(P0.05);随着Dukes分期增加,Cyclin E阳性表达和P27kipl阳性表达率有所下降(P0.05),均与直肠癌组织学分化程度无关(P0.05);Ki67表达与Dukes分期、组织学分化程度无关(P0.05)。结论直肠癌中Cyclin E和P27kipl表达能反映直肠癌的恶性情况,为直肠癌的预后提供参考。     

肝内胆管细胞癌中Cyclin E和Cyclin A的表达及临床意义

目的 探讨肝内胆管细胞癌中细胞周期蛋白E (Cyclin E)和细胞周期蛋白A(Cyclin A)的表达及临床意义.方法 应用免疫组织化学方法检测42例肝内胆管细胞癌组织及癌旁组织中Cyclin E和Cyclin A的表达,并分析其与临床病理特征之间的关系.结果 (1)肝内胆管细胞癌组织中Cyclin E和Cyclin A的阳性表达率分别为64.3％和61.9％,与癌旁组织的阳性表达率(0％和0％)具有统计学差异(P<0.01);(2)Cyclin E及Cyclin A在肝内胆管细胞癌组织中的阳性表达率与患者性别、HBsAg、CA 19-9水平、肿瘤大小无关(P>0.05),而与门静脉癌栓形成、淋巴结转移有关(P<0.05).(3)Cyclin E与Cyclin A之间呈正相关(r=0.617,P<0.01).结论 Cyclin E和Cyclin A在肝内胆管细胞癌组织中表达率均较高,其在肝内胆管细胞癌的发生发展中发挥正性调节因子的作用,联合检测二者对肝内胆管细胞癌的诊断和预后有着重要意义,有望成为肝内胆管细胞癌治疗的新靶点.     

利用组织芯片研究Rb基因在原发性肝细胞肝癌中的表达

目的：研究原发性肝细胞肝癌（HCC）中Rb基因的表达，方法：利用组织芯片技术和免疫组织化学技术（SP法）检测40例HCC有其相应癌旁，远癌正常组织中Rb蛋白的表达情况。结果：40例原发性HCC患者标本中，肿瘤组织中Rb蛋白表达缺失者有17例，癌旁组织中有4例，在远癌 正常组织有1例，HCC肿瘤组织中Rb蛋白缺失率显著高于相应癌旁及远癌正常组织（P＜0．05），Rb蛋白表达的缺失与肿瘤的大小，病理学分级无统计学相关性（P＞0．05），结论：HCC的发生，发展与Rb蛋白的缺失可能有关，组织芯片是一种可高效进行肿瘤分子病理研究的技术平台。     

结直肠癌细胞主要Cyclins(D1、E、A、B1)表达类型与其生物学行为的关系

目的 观察人类主要细胞周期素(Cyclin D1、E、A、B1)在结直肠癌中非时相表达特征,探讨主要细胞周期素表达分型与结直肠癌生物学行为的关系.方法 用流式细胞术(FCM)双参数法半定量检测83例结直肠癌手术切除标本细胞中Cyclin D1、E、A、B1表达.根据不同Cyclin在细胞周期中的作用及其异常表达特征,将其表达分为不同类型及亚型结合临床病理学资料进行分析.结果 结直肠癌细胞Cyclin(D1、E、A、B1)异常表达大致可归为5种类型:Ⅰ型Cyclin(D1、E、A、B1)均高表达;Ⅱ型Cyclin D1低表达,Cyclin(E、A、B1)均不同形式高表达;Ⅲ型Cyclin D1不表达,Cyclin(E、A、B1)均不同形式高表达;Ⅳ型Cyclin D1不表达,Cyclin(E、A、B1)不同形式低表达;Ⅴ型Cyclin(D1、E、A、B1)均不表达;Ⅱ型→Ⅳ型根据不同周期内Cyclin的优势表达分为相应不同的亚型.a亚型:Cyclin(E、B1)表达为主;b亚型:Cyclin E表达为主;c亚型:Cyclin B1表达为主;d亚型:Cyclin(E、A、B1)表达为主.主要Cyclins表达类型与结直肠癌淋巴结转移率、转移程度、浸润程度明显相关(P＜0.01).主要Cyclins表达类型Ⅰ→Ⅴ型结直肠癌淋巴结转移率、转移程度、浸润程度呈上升趋势.结直肠癌的生长方式和细胞分化程度与主要Cyclins表达类型的亚型明显相关(P＜0.01).结论 主要Cyclins(D1、E、A、B1)表达类型与结直肠癌生物学行为有关,可以作为一种体现结直肠癌生物学行为较为客观的分类方法.     

极化调节蛋白aPKC-ι与cyclin E在肝癌中的表达及意义

目的 探讨细胞极化调节蛋白aPKC-ι与Cyclin E在肝细胞肝癌(HCC)及其癌旁组织中表达情况及关系.方法 采用RT-PCR方法 检测aPKC-ι基冈在9例正常肝、43例HCC及其癌旁组织中的表达}免疫组化检测aPKC-ι,Cyclin E蛋白的表达,对所得结果 进行分类和统计分析.结果 aPKC-ι在HCC中的基因表达值为0.844±0.315,明显高于癌旁0.530士0.217及正常肝组织0.372±0.130(P=0.009);aPKC-ι蛋白在HCC、癌旁组织阳性率分别为58.1%(25/43)、23.6%(10/43),分化程度越低、分级越晚表达越高,表达有显著性差异(P<0.05);Cyclin E蛋白在HCC、癌旁组织阳性率分别为65.1%(28/43)、51.6%(22/43),分化程度越低、分级越晚表达越高,表达有显著性差异(P<0.05);aPKC-ι蛋白的表达与Cyclin E蛋白的表达呈正相关(P<0.05).结论 aPKC-ι和Cyclin E在HCC的表达提示其在HCC侵袭、转移中发挥重要作用;两者在HCC中共表达,为进一步研究肝癌侵袭转移机制提供了理论依据.     

GPAA1在结直肠癌中表达增强及其意义

目的 通过检测GPAA1在结直肠癌组织中的表达以探讨其与结直肠癌增殖、侵袭、转移的关系.方法 取新鲜结直肠癌原发灶组织(52例)、正常结直肠黏膜(52例)和肝转移灶组织标本(11例)分别行免疫组织化学检测;实时定量PCR检测每个组织样本中GPAA1基因表达水平;高表达GPAA1 mRNA结直肠癌组织和低表达GPAA1 mRNA结直肠癌组织行原代细胞培养,将培养获得的原代细胞进行Boyden小室体外增殖、侵袭实验.结果 52例结直肠癌患者标本经免疫组织化学检测,GPAA1在结直肠正常肠黏膜、癌原发灶、肝转移灶中的表达阳性率分别为21.15% ( 11/52)、55.76% (29 /52)、和72.73% ( 8/11).GPAA1在结直肠癌原发灶、肝转移灶中表达阳性率均高于正常肠黏膜组织(P＜0.01).通过实时定量PCR检测发现GPAA1 mRNA表达水平在结直肠癌原发灶、肝转移灶中均高于结直肠正常肠黏膜(P＜0.01);在肝转移灶中的GPAA1 mRNA水平高于癌原发灶(P＜0.05);高表达GPAA1 mRNA的原代细胞穿透Matrigel微孔滤膜细胞数明显高于低表达GPAA1 mRNA组.结直肠癌组织中GPAA1 mRNA的表达水平与组织分化程度相关,而与年龄、性别及Dukes分期无明显相关,(P<0.05).结论 GPAA1表达增强与结直肠癌的发生、侵袭、转移有密切关系.     

金属硫蛋白1E对胰腺癌SW1990细胞生长的影响

目的 观察外源性人金属硫蛋白1E(MT1E)基因对胰腺癌SW1990细胞生长的影响.方法 构建MT1E基因真核表达载体,转染SW1990细胞并获得阳性单克隆细胞.用Westernblot技术检测转染前后MT1E蛋白表达,噻唑蓝(MTT)实验检测其增殖能力的变化,流式细胞仪分析细胞周期时相分布.同时检测Cyclin D1与p53的表达.结果 MT1E融合蛋白在SW1990MT1E细胞中表达.MTT结果表明,与SW1990和SW1990MT1E空细胞比较,SW1990MT1E细胞增殖速度明显增快.SW1990MT1E细胞与SW1990和SW1990空细胞比较,G0/G1期细胞明显减少,S期明显增多,差异有统计学意义.SW1990MT1E较SW1990空的细胞Cyclin D1与p53表达明显升高.结论 MT1E能够促进SW1990增殖,可能和上调Cyclin D1促使细胞进入S期增多,通过失活p53蛋白使细胞恶性变.     

CyclinD1在肾细胞癌中的表达及其意义

目的探讨细胞周期蛋白D1（CyclinD1）在肾细胞癌中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学技术,检测60例。肾细胞癌患者中肾癌组织及癌旁肾组织中CyclinD1的表达,并对Cyclin D1的表达与临床病理参数的关系进行分析。结果CyclinD1在肾细胞癌组织中的阳性率为83．3％,而癌旁肾组织中的阳性率为6．6％,两者具有显著性差异（P〈0．05）。Cyclin D1在肾细胞癌组织中的表达在不同性别、年龄、肿瘤体积组无显著差异（P〉0．05）。结论CyclinD1可作为判断肾细胞癌分化程度的标志物。     

VEGF-A及PI3K/AKT通路在结直肠癌中的表达及临床意义

目的 研究血管内皮生长因子（VEGF）-A及磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）通路在结直肠癌中的表达及临床意义。方法 选取我院2013年9月到2015年9月间收治的结直肠癌患者80例,作为观察组,同时切取患者癌旁正常肠黏膜组织作为对照组。分别采用免疫组化法检测癌组织和癌旁组织的VEGF-A及PI3K及 AKT表达水平,并分别统计其阳性表达率,比较两组间差异。同时单因素分析结直肠癌组织中VEGF-A、PI3K及AKT表达水平与患者临床病理资料相关性,同时Spearman相关性分析VEGF-A与PI3K及AKT表达相关性。术后随访5年,比较VEGF-A、PI3K及AKT阳性和阴性表达患者生存率。结果 观察组的VEGF-A及PI3K及AKT表达阳性率均明显高于对照组（P<0.05）。结直肠癌患者的VEGF-A及PI3K及AKT表达水平与性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤部位等临床资料无明显相关性（P>0.05）,与TNM分期、分化程度、淋巴结转移及浸润深度明显相关（P<0.05）。结直肠癌组织中的VEGF-A表达与PI3K、AKT表达呈正相关（r=0.625, 0.517; 均P<0.05）。结直肠癌VEGF-A及PI3K及AKT阳性表达患者的5年生存率均低于阴性组（P<0.05）。结论 结直肠癌组织中的VEGF-A及PI3K及 AKT均存在高表达现象,且与肿瘤分期、淋巴结转移、分化及浸润深度呈现明显相关性,同时可减少患者生存期,可能参与结直肠癌病情发生发展,对临床诊断及治疗具有重要意义。     

A better cell cycle target for gene therapy of colorectal cancer: Cyclin G

The purpose of this study was to evaluate the overexpression of cyclin G in colorectal neoplasia, which may be a more frequent event than cyclin D1 during the cell cycle and thus may have a more enhanced therapeutic potential in treating colorectal cancer. Ninety formalin-fixed, paraffin-embedded human colon and rectal specimens were obtained from the Pathology Department of Norris Cancer Center/ University of Southern California. The tissues had been obtained after surgical resection between 1995 and 2001, and had been processed by routine clinical histopathologic methods. Ninety-one percent of colorectal tumors had cyclin G overexpression. These cyclin-positive patients were evenly distributed between men and women, and between tumor locations, that is, 36% rectal tumors and 34% rightsided tumors. Thirty-two percent were well differentiated, and 66% were moderately differentiated. Thirty patients (38%) had stage I disease, 16 (20%) had stage II disease, 25 (32%) had stage III, and seven (9%) had stage IV disease. Eight patients (10%) in this group had recurrent disease during follow-up. There was no correlation between cyclin G overexpression and clinical and pathologic characteristics. Cyclin D1 overexpression was found to be present in only 42% of colorectal adenocarcinomas. There was no correlation between cyclin D1 overexpression and clinical and pathologic characteristics. The present study demonstrates that cyclin G overexpression is a frequent event in colorectal cancer. This frequent event in colorectal carcinogenesis may facilitate new therapeutic approaches acting as a target for gene therapy, possibly directed at downregulating cyclin G in colorectal cancer. Presented at the Forty-Fourth Annual Meeting of The Society for Surgery of the Alimentary Tract, Orlando, Florida, May 18-21, 2003 (poster presentation).     

Clinical significance of Ki-67 proliferation index in disease progression and prognosis of patients with resected colorectal carcinoma

BACKGROUND: The prognostic role of proliferation markers in patients with colorectal neoplasia is inconclusive. The aim of this study was to evaluate proliferation markers in patients with colorectal carcinoma, to relate these to standard clinicopathological findings and to investigate their potential role in the prediction of long-term survival. METHODS: Archived formalin-fixed, paraffin-embedded tissue samples from a cohort of 106 patients who underwent curative resection for colorectal carcinoma were analysed to determine a Ki-67 (MIB-1)-derived proliferation index (PI) using a double immunostaining technique. The relationship between PI and standard clinicopathological variables was assessed and its association with long-term survival evaluated. RESULTS: A significant association was found between PI and tumour (T) status (P = 0.001), lymph node (N) involvement (P = 0.0098), the presence of distant metastases (P < 0.010) and advanced stage of disease (P < 0.001). On multivariate analysis, PI was shown to be an independent prognostic factor for long-term survival (hazard ratio 2.1 (95 per cent confidence interval 1.1 to 4.1); P = 0.032). CONCLUSION: Cell proliferation is significantly associated with tumour progression and may be used to identify patients with a predicted adverse outcome after resection of colorectal carcinoma.