扶正抗癌方通过cMet通路逆转H1650细胞对吉非替尼耐药的研究

目的探讨扶正抗癌方逆转H1650细胞对吉非替尼耐药的分子机制。方法 CCK8活力检测法分别观察吉非替尼、扶正抗癌方及两者联合给药对H1650细胞增殖的影响;蛋白质印迹法检测扶正抗癌方对p-c Met(Tyr1349)、c Met和pEGFR(Tyr1068)表达的影响。结果 H1650细胞对吉非替尼产生耐药;扶正抗癌方以浓度和时间依赖性抑制H1650细胞的增殖(P0.05);扶正抗癌方联合吉非替尼抑制H1650细胞增殖效果优于扶正抗癌方单药(P0.05);扶正抗癌方以时间依赖性下调p-c Met(Tyr1349)、c Met和p-EGFR(Tyr1068)的表达(P0.05)。结论扶正抗癌方可通过抑制c Met通路逆转H1650细胞对吉非替尼的耐药。     

扶正抗癌方联合吉非替尼对肺癌A549细胞的影响及机制

目的观察扶正抗癌方联合吉非替尼对肺癌A549细胞生长、凋亡的影响,探讨其协同抗肿瘤的可能机制。方法应用MTT法检测扶正抗癌方(0.211、0.316、0.474、0.711、1.067、1.6、2.4、3.6 mg/m L)和吉非替尼(3.95、5.92、8.18、13.33、20、30、45、67.5!mol/L)对A549细胞增殖的影响;用流式细胞术观察对照组(完全培养液组)、中药组(扶正抗癌方,1.6 mg/m L)、西药组(吉非替尼,45!mol/L)、联合组(扶正抗癌方1.6 mg/m L+吉非替尼45!mol/L)A549细胞凋亡;用Western blot检测各组EGFR、p-EGFR、EZH2、PPAR-γ及P53蛋白表达。结果扶正抗癌方及吉非替尼均有抑制肿瘤细胞增殖作用。扶正抗癌方联合吉非替尼干预后细胞凋亡率为(12.6±4.5)%,明显高于扶正抗癌方(4.6±0.7)%及吉非替尼(7.8±2.7)%,差异有统计学意义(P0.05)。与对照组比较,联合组p-EGFR、EZH2下调(P0.05),PPAR-γ及P53蛋白上调(P0.05),西药组及中药组EZH2下调(P0.05),中药组PPAR-γ上调(P0.05);与西药组比较,联合组p-EGFR下调(P0.05),PPAR-γ上调(P0.05);与中药组比较,联合组p-EGFR下调(P0.05)。结论扶正抗癌方联合吉非替尼能显著抑制A549细胞的增殖生长,促使肿瘤细胞凋亡;其协同抗肿瘤活性的机制可能与下调p-EGFR、EZH2及上调PPAR-γ、P53蛋白有关。     

肺岩宁方联合吉非替尼对肺腺癌H1975细胞体外增殖的影响

目的 观察吉非替尼耐药肺腺癌H1975细胞在肺岩宁方、吉非替尼作用下体外增殖情况,探讨肺岩宁方逆转吉非替尼耐药可能的机制。方法 选取肺腺癌T790M突变耐药株H1975细胞,分为对照组、吉非替尼组、肺岩宁方组和联合干预组。CCK-8法检测各组细胞在不同时间点(0 h、24 h、48 h、72 h)的增殖率;Western blot检测EGFR-PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达的影响。结果 CCK-8结果显示,肺岩宁方组对于H1975细胞在体外增殖呈剂量依赖性抑制,即随着药物浓度的提高而增加;联合干预组对于抑制细胞体外增殖效果较单药明显。Western blot显示,联合干预组可下调p-EGFR、p-Akt、pmTOR的表达。结论 肺岩宁方联合吉非替尼可抑制H1975细胞的体外增殖,体外抑制效果较单药治疗明显;其延缓吉非替尼耐药机制可能与下调EGFR-PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白的表达有关。     

南方红豆杉水提物抑制T790M突变及c-MET扩增导致的吉非替尼耐药体外研究

目的研究南方红豆杉水提物抑制T790M突变及c-MET扩增所致吉非替尼耐药机制。方法应用MTT法检测不同浓度南方红豆杉水提物(0.25、0.5、1、2、4 mg/mL)和吉非替尼(3、6、12、18、30μmol/L)对H1975、H820细胞株增殖的影响,根据结果筛选最佳后续实验药物浓度,计算各组半数抑制浓度(IC_(50))和两药联合指数(CI);将对照组(1640培养液)、南方红豆杉组(0.25μmol/L)、吉非替尼组(3μmol/L)及联合组(南方红豆杉0.25μmol/L+吉非替尼3μmol/L)H1975和H820细胞药物处理72 h后,采用Western Blot检测EGFR、p-EGFR、AKT、p-AKT及PI3K蛋白表达,采用qRT-PCR检测EGFR、PI3K及AKT mRNA表达。结果在H1975和H820细胞中联合组达到IC_(50)所需的吉非替尼浓度明显小于吉非替尼组,且CI1。在H1975细胞中,与对照组比较,南方红豆杉组EGFR、p-EGFR、PI3K及p-AKT蛋白表达降低(P0.01,P0.05),吉非替尼组AKT蛋白表达降低(P0.05),联合组EGFR、p-EGFR、AKT、p-AKT及PI3K蛋白表达降低(P0.01,P0.05)。与吉非替尼组比较,南方红豆杉组EGFR、p-EGFR、p-AKT蛋白表达降低(P0.01),联合组EGFR、p-EGFR、PI3K及p-AKT蛋白表达降低(P0.01)。在H820细胞中,与对照组比较,南方红豆杉组EGFR、PI3K、p-AKT蛋白表达下调(P0.01),联合组p-EGFR、PI3K、p-AKT蛋白表达降低(P0.01)。与吉非替尼组比较,南方红豆杉组EGFR、p-AKT蛋白表达降低(P0.01,P0.05),联合组p-EGFR、PI3K、p-AKT蛋白表达降低(P0.01)。在H1975及H820细胞中,与对照组比较,吉非替尼组AKT及PI3K mRNA表达降低(P0.01,P0.05),南方红豆杉组及联合组EGFR、AKT及PI3K mRNA表达降低(P0.01)。与吉非替尼组比较,联合组EGFR、AKT及PI3K mRNA表达降低(P0.01)。结论南方红豆杉水提物能增强吉非替尼对H1975、H820细胞增殖抑制作用,可抑制T790M突变和c-MET扩增所致的吉非替尼耐药,其机制与抑制EGFR/PI3K/AKT通路有关。     

养阴解毒方对人肺腺癌耐药细胞PC9/R信号蛋白AKT磷酸化及PTEN表达影响研究

目的:研究养阴解毒方对人肺腺癌耐药细胞PC9/R信号蛋白AKT磷酸化及抑癌基因PTEN的表达影响。方法:选择吉非替尼获得性耐药细胞株PC9/R,采用血清药理学的方法,研究养阴解毒方及其结合吉非替尼的体外增殖抑制作用,流式细胞术法检测对PC9/R的细胞凋亡及周期的影响;Western-blot法检测PC9/R细胞株的PI3K/Akt信号通路中的关键激酶Akt磷酸化和PTEN表达。结果:养阴解毒方对耐药株PC9/R有增殖抑制作用,并有量效关系,低剂量组联合吉非替尼抑制PC9/R效果最优(P0.01),增效作用明显(Q值均0.85);养阴解毒联和吉非替尼组较吉非替尼单药组可明显提高PC9/R细胞凋亡的能力,有显著统计学意义(P0.01),养阴解毒方组及联合用药组对PC9/R细胞S期均较吉非替尼单药细胞周期缩短(P0.01);养阴解毒方组与联合用药组均比单药吉非替尼能够明显抑制PC9/R的p-AKT活化位点Thr308和Ser473的磷酸化,有统计学意义(P均0.05),联合用药组PC9/R的PTEN表达显著高于其余各组,有统计学意义(P均0.05)。结论:养阴解毒方可增加人肺腺癌耐药株细胞PC9/R对于吉非替尼的药物敏感性,两药联用有协同作用,养阴解毒方可提高PTEN的表达,抑制信号通路关键蛋白AKT的磷酸化,从而起到抑制肿瘤生长、逆转耐药的双重作用。     

β-榄香烯联合吉非替尼对肺癌细胞A549肿瘤干性的影响

目的探讨β-榄香烯联合吉非替尼对肺癌细胞A549肿瘤干性的影响。方法采用MTS法检测β-榄香烯联合吉非替尼对肺癌细胞活性的作用;Transwell检测细胞侵袭能力;细胞划痕检测细胞迁移能力;流式细胞检测细胞凋亡、细胞周期;Western blot检测上皮-间质转化相关标记分子(E-Cadherin、N-Cadherin、ZEB1、Vimentin)。结果榄香烯浓度在0～50μmol/L内对肺癌细胞(A549、H522、H1299、PC-9)活性无显著影响。与对照组比较,β-榄香烯(40μg/mL)联合吉非替尼(5μmol/L)能显著抑制A549细胞活性(P0.01);降低S期细胞比例(P0.05),但不影响A548细胞凋亡,抑制A549细胞的侵袭与转移(P0.05,P0.01),上调E-Cadherin蛋白表达,下调N-Cadherin、ZEB1、Vimentin蛋白表达(P0.01)。结论榄香烯(≥50μmol/L)能抑制肺癌细胞增殖,呈剂量依赖;β-榄香烯(40μg/mL)联合吉非替尼抑制肺癌细胞的侵袭、转移及上皮-间质转化(EMT)。     

扶正抗癌方诱导H1650细胞凋亡的分子机制

目的:观察扶正抗癌方对H1650细胞凋亡的影响,并探讨其诱导H1650细胞凋亡的分子机制。方法:以人肺腺癌细胞株H1650细胞为研究对象,用0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0 g·L~(-1)扶正抗癌方处理H1650细胞24,48,72 h,另设空白组,四氮唑蓝盐化合物(MTS)法检测细胞增殖;用0.5,1.0,1.5 g·L~(-1)扶正抗癌方处理H1650细胞24 h,另设空白组,Annexin VFITC/碘化丙啶(PI)流式细胞术检测细胞凋亡;用0.5,1.0,2.0 g·L~(-1)扶正抗癌方处理H1650细胞24 h,另设空白组,半胱氨酸蛋白酶-3/7(Caspase-3/7)活力检测试剂盒检测Caspase-3/7活力;蛋白免疫印迹法检测扶正抗癌方对pro Casapse-3,聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(PARP),Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。结果:与空白组比较,扶正抗癌方能明显抑制H1650细胞的增殖(P0.05),且呈浓度和时间依赖性。与空白组比较,扶正抗癌方明显诱导H1650细胞的早期凋亡,增强Caspase-3/7的活力(P0.05),且呈浓度依赖性。与空白组比较,扶正抗癌方明显下调pro Casapse-3和PARP的表达(P0.05),呈浓度依赖性,明显上调Bax的表达(P0.05),且呈时间依赖性。结论:扶正抗癌方可通过激活Caspase-3和Bax诱导H1650细胞的凋亡。     

扶正抗癌方联合吉非替尼治疗PS≤2分晚期NSCLC的疗效与安全性研究

目的探讨扶正抗癌方联合吉非替尼治疗体力状况评分(PS)≤2分且EGFR基因突变型晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效与安全性。方法连续入组51例PS≤2分的ⅢB/Ⅳ期病理组织学确诊且EGFR基因突变型NSCLC患者,随机分为治疗组25例及对照组26例,分别接受扶正抗癌方汤剂1次/d联合吉非替尼250 mg 1次/d和单药吉非替尼250 mg1次/d治疗,比较2组患者治疗后无进展生存时间(PFS)、总生存时间(OS)、客观缓解率(ORR)、疾病控制率(DCR)及毒性反应。结果治疗组PFS与OS较对照组显著延长(P均0.05),2组ORR及DCR比较均无显著性差异(P均0.05)。2组均出现Ⅰ~Ⅱ度皮疹、腹泻或口腔溃疡,治疗组少于对照组,但无显著性差异(P0.05)。结论扶正抗癌方联合吉非替尼治疗PS≤2分且EGFR基因突变型晚期NSCLC,可延长患者PFS及OS,且两药联合使用毒副反应有减少趋势,提示扶正抗癌方对吉非替尼有增效减毒的作用。     

扶正解毒方药调控T790M及c-Met改善吉非替尼获得性耐药

目的:探讨扶正解毒方药改善吉非替尼获得性耐药的作用机制。方法:建立肺癌干细胞荷瘤小鼠模型,随机分为生理盐水组、吉非替尼组、扶正解毒方药联合吉非替尼组、扶正中药联合吉非替尼组、解毒中药联合吉非替尼组,测定荷瘤小鼠抑瘤率,应用ARMS法检测肿瘤组织T790M突变,RT-PCR法检测肿瘤组织c-Met基因扩增。结果:吉非替尼单药对肺癌干细胞荷瘤小鼠抑瘤率为31.02%;解毒中药联合吉非替尼组为33.43%;扶正中药联合吉非替尼组为37.51%;扶正解毒方药联合吉非替尼组为45.11%。上述各组与生理盐水组比较差异有统计学意义(P0.05或P0.01);扶正解毒方联合吉非替尼组与吉非替尼单药组比较差异有统计学意义(P0.05);吉非替尼单药组T790M基因突变和c-Met基因扩增显著增加,与生理盐水组比较差异有统计学意义(P0.01),扶正解毒方药联合吉非替尼组能够降低T790M基因突变和c-Met基因扩增,与吉非替尼单药组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:扶正解毒方药能够改善吉非替尼获得性耐药,其作用机制与降低T790M突变及抑制c-Met扩增有关。     

蟾毒灵联合吉非替尼对肺癌细胞H1975的影响及机制研究

目的 观察蟾毒灵联合吉非替尼对肺癌细胞H1975生长的影响,探讨蟾毒灵增强吉非替尼抗肿瘤作用的可能机制。方法 应用MTT法检测蟾毒灵（1～100 nmol/L）、吉非替尼（0.1～20 μmol/L）及两药联合干预对H1975细胞增殖的抑制作用;流式细胞术观察蟾毒灵（10 nmol/L）、吉非替尼（1 μmol/L）及联合用药对H1975细胞凋亡的影响;Western blot检测单独用药或联合用药对表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）、Met信号通路相关蛋白表达的影响。结果 MTT结果显示,吉非替尼浓度超过5 μmol/L时才见到其对H1975细胞生长的抑制作用;蟾毒灵与吉非替尼联合后,可明显抑制肿瘤细胞的生长。流式细胞术结果显示,蟾毒灵联合吉非替尼干预后肿瘤细胞凋亡率为（61.64±5.61）%,明显高于单用蟾毒灵的（18.34±3.42）%和单用吉非替尼的（7.32±1.08）%,差异有统计学意义（P<0.01）。Western blot结果显示,蟾毒灵联合吉非替尼能明显下调H1975细胞p-EGFR、p-Met、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）蛋白表达。结论 蟾毒灵联合吉非替尼可显著抑制H1975细胞的增殖,促使肿瘤细胞凋亡;其抗肿瘤活性的机制可能与阻断EGFR－磷酯酰肌醇－3激酶（PI3k）/Akt信号通路有关。     

扶正抗癌方抑制PC9细胞转移的分子机制

目的:探讨扶正抗癌方抑制PC9细胞转移的分子机制。方法:台盼蓝活力检测探索扶正抗癌方对PC9细胞增殖的影响;transwell实验探索扶正抗癌方对PC9细胞侵袭和迁移的影响;基质金属蛋白酶-9(MMP-9)活力检测探索扶正抗癌方对MMP-9活力的影响,Real-time quantitative PCR探索扶正抗癌方对MMP-9 mRNA表达的影响,蛋白质印迹法探索扶正抗癌方对MMP-9、磷酸化的信号转导子及转录激活子3[p-STAT3(Tyr705)]蛋白表达的影响并探讨两者的关系。结果:扶正抗癌方以浓度依赖性抑制PC9细胞的增殖、侵袭和迁移(P0.05);以浓度依赖性下调MMP-9活力、mRNA和蛋白的表达(P0.05),以时间依赖性下调p-STAT3(Tyr705)蛋白的表达(P0.05);过表达STAT3逆转了扶正抗癌方对MMP-9的下调(P0.05)。结论:扶正抗癌方通过抑制STAT3的表达下调MMP-9,进而抑制PC9细胞的转移。     

紫背万年青提取物联合吉非替尼对A549肺癌细胞的协同作用研究

目的:探讨紫背万年青提取物与吉非替尼联用对A549肺癌细胞的协同作用,并阐明其可能的分子机制。方法:采用CCK-8法检测细胞活力和细胞增殖的影响,并通过Isobologram方法进行联用效应分析。采用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期。采用Western blot法检测相关蛋白,包括Bcl-2、Bax、p-PI3K和p-Akt的表达水平。结果:与单用吉非替尼相比,紫背万年青提取物与吉非替尼联用能显著降低吉非替尼抑制A549细胞IC₅₀(P<0.05);Isobologram分析表明联用具有协同效应。联用可以显著诱导细胞的凋亡(P<0.05),同时上调凋亡标记蛋白Bax/Bcl-2的表达比例(P<0.05)。同时,联用也可以显著提高G0/G1期的比例(P<0.05),促进细胞分裂G0/G1停滞。Western blot结果表明,联用可以显著下调p-PI3K和p-Akt的蛋白表达水平(P<0.05)。结论:紫背万年青提取物与吉非替尼联用可协同抑制细胞增殖、阻滞细胞周期和促进细胞凋亡,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路有关。     

扶正抗癌方联合吉非替尼治疗晚期非小细胞肺癌患者血浆差异蛋白比较分析

目的通过比较扶正抗癌方联合吉非替尼治疗晚期非小细胞肺癌患者1个月前后血浆蛋白,找出差异蛋白,为扶正抗癌方联合吉非替尼治疗非小细胞肺癌进一步研究提供差异蛋白组学证据基础。方法收集8例扶正抗癌方联合吉非替尼治疗的晚期非小细胞肺癌患者治疗前及治疗1个月后血浆,采用二维凝胶电泳(2-DE)技术分离血浆蛋白质,PDQuest 7.1.0图像分析软件识别差异蛋白点,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱及液相色谱-电喷雾串联质谱技术鉴定差异蛋白。结果图像分析软件识别出11个差异蛋白点。基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定7种差异蛋白(异构体2的纤维蛋白原α链、载脂蛋白E、簇蛋白亚型2、甲状腺素、未知功能蛋白、皮质类固醇结合球蛋白、载脂蛋白A 4),未鉴定出的蛋白用液相色谱-电喷雾串联质谱技术鉴定出为Ⅱ型细胞骨架蛋白1。结论扶正抗癌方联合吉非替尼治疗晚期非小细胞肺癌对患者血浆蛋白有一定的影响,液相色谱—电喷雾串联质谱技术可作为基质辅助激光解析电离飞行时间质谱的补充使用。     

扶正抗癌方联合吉非替尼对A549细胞的协同抗癌作用及机制

目的:通过体外体内实验观察扶正抗癌(FZKA)方联合吉非替尼(Gefitinib)对人肺腺癌A549细胞增殖,凋亡及侵袭转移能力的影响,并探讨研究其相关作用机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法检测空白组,FZKA方组(0.2,0.4,0.8,1.6,3.2 g·L^-1),Gefitinib组(10,20,40,60,80,100μmol·L^-1)的干预A549细胞24,48,72 h及FZKA方(2 g·L^-1)联合Gefitinib(40μmol·L^-1)组干预A549细胞24 h的增殖能力;流式细胞术分析检测联合用药组细胞凋亡及周期的变化;划痕实验和transwell小室实验检测联合用药组的侵袭转移能力变化;蛋白免疫印迹法检测细胞联合用药组活化的半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved-Caspase-3),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax),F-盒和含蛋白7的WD重复结构域(FBW7)及髓样细胞白血病-1(MCL-1)蛋白表达的变化情况。结果:与空白组比较,FZKA方,Gefitinib呈剂量依赖性、时间依赖性显著抑制A549细胞的增殖(P<0.05);与空白组比较,FZKA方组,Gefitinib组均能减弱细胞划痕愈合能力和侵袭能力,促进细胞凋亡(P<0.05),均能上调Bax,Caspase-3,FBW7蛋白表达,下调Bcl-2,MCL-1蛋白表达(P<0.05);与Gefitinib单独给药比较,FZKA方联合Gefitinib抑制A549细胞增殖能力和诱导细胞凋亡更明显(P<0.05);细胞划痕愈合能力与侵袭能力明显减弱(P<0.05);上调Bax,Caspase-3,FBW7蛋白表达,下调Bcl-2,MCL-1蛋白表达效果明显(P<0.05)。结论:FZKA方与Gefitinib合用后比单用Gefitinib更能诱导A549细胞凋亡,抑制其增殖及侵袭转移能力更强,两者具有协同抗癌作用,其机制可能与调控FBW7/MCL-1通路相关。     

扶正抗癌方联合吉非替尼治疗 PS≤2 分晚期 NSCLC 的疗效与安全性研究

目的探讨扶正抗癌方联合吉非替尼治疗体力状况评分（Ps）≤2分且EGFR基因突变型晚期非小细胞肺癌（NSCLC）的疗效与安全性。方法连续入组51例PS≤2分的ⅢB／Ⅳ期病理组织学确诊且EGFR基因突变型NSCLC患者,随机分为治疗组25例及对照组26例。分别接受挟正抗癌方汤剂1次／d联合吉非替尼250mg1次／d和单药吉非替尼250mg1次／d治疗,比较2组患者治疗后无进展生存时间（PFS）、总生存时间（OS）、客观缓解率（ORR）、疾病控制率（DCR）及毒性反应。结果治疗组PFS与OS较对照组显著延长（P均〈0．05）,2组ORR及DCR比较均无显著性差异（P均〉0．05）。2组均出现I～Ⅱ度皮疹、腹泻或I：／腔溃疡,治疗组少于对照组,但无显著性差异（P〉0．05）。结论扶正抗癌方联合吉非替尼治疗PS≤2分且EGFR基因突变型晚期NSCLC,可延长患者PFS及OS,且两药联合使用毒副反应有减少趋势,提示扶正抗癌方对吉非替尼有增效减毒的作用。     

“扶正祛积汤”联合埃克替尼通过细胞周期阻滞机制协同抑制肺腺癌A549细胞裸鼠移植瘤增殖的研究

目的:从诱导细胞周期阻滞机制研究中药"扶正祛积汤"联合埃克替尼对肺腺癌细胞A549裸鼠移植瘤的协同抑瘤作用。方法:(1)将A549细胞裸鼠移植瘤随机分成模型组、埃克替尼组、中药"扶正祛积汤"组和中药"扶正祛积汤"联合埃克替尼联合组(联合组),每组5只,按分组给药,21 d后处死裸鼠,计算各组抑瘤率和联合组增效率;(2)采用流式细胞仪检测各组移植瘤细胞周期分布情况;(3)采用免疫组化法和Western Blot法分别检测CDK4、Rb和Cyclin D1的表达水平。结果:(1)埃克替尼组、中药"扶正祛积汤"组和联合组的抑瘤率分别为14.74%、12.76%和31.25%,联合组增效率为111.11%,说明中药"扶正祛积汤"可以增效埃克替尼的抑瘤作用;(2)联合组G0/G1期细胞比例(54.51±0.35)%均明显高于埃克替尼组(49.39±0.27)%、"扶正祛积汤"组(47.59±1.05)%和模型组(45.88±0.24)%(P0.05),细胞周期G1/S阻滞最更明显;(3)联合组瘤组织Cyclin D1和CDK4表达水平均低于埃克替尼组、中药"扶正祛积汤"组和模型组(均P0.05),Rb表达则均高于上述3组(均P0.05)。结论:中药"扶正祛积汤"可以增效埃克替尼对肺癌细胞A549裸鼠移植瘤的抑制增殖作用,其协同抑瘤机制可能和引起Cyclin D1、CDK4表达进一步下降和Rb表达进一步上升导致细胞周期G0/G1阻滞加重有关。     

扶正抗癌方对H_(22)荷瘤小鼠的抑瘤作用及其对IL-12和Survivin表达的影响

目的:通过实验研究扶正抗癌方对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及其对IL-12和Survivin表达的影响。方法:85只小鼠,随机抽取15只作为正常对照组(A),将剩余70只小鼠共同造模:在右腋皮下种植相同量的H22瘤株悬液,将造膜成功的小鼠随机纳入60只,采用每只右腋皮下接肝癌细胞悬液0.2mL再随机分成4组,于接种瘤细胞悬液24小时候开始给药。空白对照组(A):用生理盐水0.2mL/只/d;荷瘤对照组(B):用生理盐水0.2mL/只/d;连续给药14d,替加氟组(C):给予替加氟配置的液体灌胃0.2mL/只/d;扶正抗癌方组(D):浓度为1.89g/mL的中药煎剂灌胃,0.2mL/20g,1次/d,连续共14d;(扶正抗癌方组+替加氟组)联合用药组(E)组:扶正抗癌方浓缩浓度为3.78g/mL,0.1mL/20g,1次/d,替加氟浓缩浓度为30mg/mL的水溶液灌胃,0.1mL/20g,1次/d,联合灌胃。经口灌胃14d后,取瘤体称重,用免疫组化法检测各组IL-12和Survivin的表达。结果:联合用药组及、扶正抗癌方组、替加氟组各治疗组瘤组织Survivin表达显著下降,与荷瘤对照组比较具有非常显著性差异(P0.01);IL-12检测结果示:联合用药组与扶正抗癌方组及替加氟组比较具有显著性差异(P0.05),扶正抗癌方组与替加氟组比较无显著性差异(P0.05);结论:扶正抗癌方具有抑制肝癌侵袭转移的作用,联合西药治疗可减毒增效,提高免疫功能,改善生存质量;其机制与抗肿瘤下调抑制细胞凋亡的Survivin同时促进IL-12的表达及抗肿瘤侵袭与转移有关。     

益肺解毒方联合顺铂对人肺腺癌A549细胞的影响

目的研究益肺解毒方联合顺铂对人肺腺癌A549细胞的影响。方法 CCK8法、流式细胞术分别检测高剂量益肺解毒方、顺铂、两药联合对A549细胞增殖、凋亡的影响,Transwell、细胞划痕实验检测三者对A549细胞侵袭转移的影响,Western blot、qRT-PCR检测三者对A549细胞Bax、Bcl-2、MMP2、E-cad表达的影响。结果高剂量益肺解毒方、顺铂、两药联合对A549细胞增殖均有显著抑制作用(P0.05),以两药联合最强,联合指数为1.21;三者均可明显诱导A549细胞凋亡(P0.05),两药联合组更显著(P0.05)。与空白对照组比较,3组划痕愈合距离缩短,穿过的细胞数量减少,差异有统计学意义(P0.05),两药联合组更显著(P0.05)。与空白对照组比较,3组Bax、E-cad表达显著升高,Bcl-2、MMP2表达显著降低(P0.05),两药联合组变化更明显(P0.05)。结论益肺解毒方联合顺铂对抑制人肺腺癌A549细胞具有联合增效作用,其机制可能与抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡(促进Bax表达,抑制Bcl-2表达)、抑制细胞侵袭转移(下调MMP2表达,上调E-cad表达)有关。     

中药“扶正祛积汤”联合埃克替尼对肺癌移植瘤凋亡的影响

目的:从诱导细胞凋亡机制研究中药"扶正祛积汤"联合埃克替尼对肺腺癌A549细胞裸鼠移植瘤的抑瘤作用。方法:以A549细胞皮下注射裸鼠腋下形成移植瘤,随机分成模型组、埃克替尼组、中药"扶正祛积汤"组和中药"扶正祛积汤"联合埃克替尼组(联合组),每组5只,给药21 d,计算各组移植瘤的抑瘤率和联合组的增效率。采用TUNEL法检测各组移植瘤细胞凋亡率。采用免疫组化法和Western Blot法分别检测凋亡相关蛋白Fas、Bax和剪切caspase-3的表达情况。结果:埃克替尼组、中药"扶正祛积汤"组和联合组的抑瘤率分别为14.74%、12.76%和31.25%,联合组增效率为111.11%。联合组凋亡率(46.03±9.26)%均明显高于埃克替尼组(28.40±3.36)%(P0.01)。与埃克替尼组相比,联合组瘤组织Fas、Bax和剪切caspase-3表达均增加(均P0.05)。结论:中药"扶正祛积汤"可以明显提高埃克替尼对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的抑瘤作用,协同增效抑瘤机制可能和引起Fas、Bax和剪切caspase-3表达上升导致诱导细胞凋亡增加有关。     

知母皂苷AIII促进曲美替尼对肺癌A549细胞抑制活性的研究

目的:观察曲美替尼与知母皂苷AIII联合作用时对肺癌A549细胞的抑制效应。方法:曲美替尼单独或与知母皂苷AIII联合作用于肺癌A549细胞;利用CCK8试剂盒检测细胞生长,单细胞集落形成实验检测细胞增殖能力,划痕实验检测细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞周期分布。结果:曲美替尼与知母皂苷AIII联合使用时对A549细胞生长和迁移的抑制效果明显高于曲美替尼单独使用时的抑制效果(P 0. 05);当曲美替尼与知母皂苷AIII联用时单细胞未能形成集落克隆;曲美替尼与知母皂苷AIII均能使A549周期阻滞于G0/G1期,但二者联合使用时的阻滞效果并未显著高于曲美替尼单独使用时的阻滞效果(P0. 05)。结论:知母皂苷AIII显著提高了曲美替尼对肺癌A549细胞生长、增殖和迁移能力的抑制。