逍遥散对慢性束缚应激大鼠相关脑区NMDAR2A和NMDAR2BmRNA基因表达的调节作用

目的:观察海马及杏仁核N-甲基D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid(NMDA)受体NMDAR2A(NR2A)和NMDAR2B(NR2B)的蛋白在束缚应激状态下的mRNA表达变化及道遥散的作用。方法:使用捆绑的方法制作束缚应激动物模型,并用逍遥散进行干预,分别于7天后和21天后检测模型大鼠海马CAI区、CA3区、齿状回(DG)、杏仁核NMDA受体NMDAR2A和NMDAR2B的蛋白mRNA表达的情况。结果:NR2AmRNA和NR2BmRNA在海马的CA1,CA3,DG和BLA都有不同程度的基因转录。NR2AmRNA在CA3,DG和BLA区,7天和21天模型组的表达均下调(P0.05和P0.01),在CA1区不明显。NR2BmRNA在CA1,CA3,DG和BLA区,21天模型组的表达均下调(P0.05和P0.01),在CA1和BLA区7天模型组表达不变。逍遥散对CA3和DG区的NR2AmRNA和NR2BmRNA有明显的调节作用,在CA3和DG区7天和21天的表达均上调(P0.05和P0.01)。而在CA1区对NR2AmRNA和NR2BmRNA没有调节作用。其中以CA3区和DG区的调节作用最明显,这里可能是逍遥散的调节靶点。结论:逍遥散在海马和杏仁核区对慢性束缚应激引起的神经传递的改变有明显的双向调节作用,可以影响突触可塑性,以适应机体的功能,主要靶点在CA3和DG区。     

肾虚质大鼠学习记忆能力与海马NMDA受体表达的实验研究

目的观察肾虚质大鼠学习记忆能力与海马N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid,NMDA)受体表达变化,探讨"肾藏志"中医学理论的物质基础与神经生物学机制。方法将40只SD大鼠随机分为模型组、左归丸、右归丸组及空白组(产自正常孕鼠),每组10只,采用"猫吓鼠"经典造模法制备先天不足加后天失养复合型肾虚质仔鼠模型。对仔鼠恐吓同时开始给药,左归丸、右归丸组分别给予左归丸混悬液0.1875 g/mL、右归丸混悬液0.0938 g/mL灌胃,空白组及模型组给予等量生理盐水灌胃,每日1次,每周用药5天,连续2个月。通过Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力,采用免疫组化法检测海马组织NMDA受体亚基NR2A、RN2B蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组Morris水迷宫实验潜伏期及总路程增加(P0.05);与模型组比较,左归丸及右归丸组上述指标均降低(P0.05)。与空白组比较,模型组海马组织NMDA受体亚基NR2A、NR2B蛋白表达明显降低(P0.05);与模型组比较,左归丸、右归丸组NR2A及NR2B蛋白表达明显升高(P0.05)。结论肾虚质大鼠学习记忆能力退化且海马NMDA受体表达低下,补肾药物左归丸、右归丸可上调NMDA受体表达,提高其学习记忆能力,从而改善肾虚质脑功能退化状态。     

恐伤孕鼠对其仔鼠大脑海马区细胞凋亡的影响

目的：观察恐伤孕鼠对其仔鼠大脑海马区细胞凋亡的影响。方法：采用恐伤孕鼠的方法造模，受孕后的雌鼠用随机取数法分为正常组、模型组、补肾组，造模时间为整个妊娠期间。仔鼠出生后14天，取其大脑海马区组织用流式细胞术检测其细胞凋亡率；用免疫组化ABC法观察Bcl-2、Bax在大脑海马区的蛋白表达。结果：模型组仔鼠海马区脑组织细胞凋亡率较正常组和补肾组增加（P〈0．05）。同时，模型组仔鼠海马区脑组织Bcl．2阳性表达数下降、Bax阳性表达数升高，与正常组和补肾组比较均有极显著性差异（P〈0．01）。结论：恐伤孕鼠通过凋亡相关基因Bcl-2蛋白表达下降、Bax蛋白表达增加共同作用引起其仔鼠海马区脑细胞凋亡增加，从而影响到仔鼠脑的发育，而补肾治疗可逆转此效应。     

酸枣仁汤对抑郁模型大鼠皮质、海马中NMDAR1、NMDAR2A、NMDAR2B基因表达的影响

目的观察酸枣仁汤对抑郁模型大鼠大脑皮质、海马中NMDAR1、NMDAR2A、NMDAR2B基因表达的影响,并探讨其作用机制。方法将大鼠随机分为空白组、模型组、西药组和酸枣仁汤高、中、低剂量组,除空白组外,其余各组大鼠均以慢性应激法复制抑郁症模型,各给药组给予相应药物灌胃。采用RT-PCR检测大鼠皮质、海马中NMDAR1、NMDAR2A和NMDAR2B基因的表达。结果与模型组比较,酸枣仁汤高、中剂量组大鼠皮质和海马中NMDAR1阳性表达均降低(P0.01);酸枣仁汤高、中剂量组和西药组皮质和海马中NMDAR2A阳性表达均降低(P0.05,P0.01),酸枣仁汤低剂量组海马中NMDAR2A表达增高(P0.05);酸枣仁汤高、中、低剂量组和西药组皮质中NMDAR2B阳性表达均降低(P0.01),酸枣仁汤中、低剂量组海马中NMDAR2B表达增高(P0.01)。结论酸枣仁汤可能通过降低大鼠皮质、海马中NMDAR1、NMDAR2A、NMDAR2B基因表达达到治疗抑郁症的作用。     

菟丝子对恐伤孕鼠子代学习记忆及海马m6A修饰的影响

目的 观察菟丝子对恐伤孕鼠所产子代学习记忆能力及海马N6-甲基腺苷（m⁶A）相关修饰酶和m⁶A总水平的影响。方法 将45只孕鼠随机分为空白组、模型组和菟丝子组。在孕1 d~孕19 d,模型组和菟丝子组采用旁观电击法造模,菟丝子组5 g·kg^-1·d^-1菟丝子水煎剂灌胃,其余2组等量纯净水灌胃处理,所产仔鼠延续母代分组。仔鼠于21 d龄进行水迷宫实验观察行为学改变;采用透射电镜观察仔鼠海马神经元发育情况;采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）、蛋白免疫印迹法（Western blot）、免疫组化法（IHC）分别检测仔鼠海马甲基转移酶样蛋白3（METTL3）、甲基转移酶样蛋白14（METTL14）、Wilms瘤1相关蛋白（WTAP）、脂肪量和肥胖相关蛋白（FTO）、Alk B同源蛋白5（ALKBH5） mRNA及蛋白表达水平;采用高效液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS）检测仔鼠海马m⁶A总含量。结果 与空白组比较,模型组仔鼠平均潜伏期延长,进入目标象限次数、目标象限停留时间及穿越平台次数均显著减少（P<0.01）;海马CA1、CA3神经元结构损伤严重,线粒体肿胀,内质网扩张,部分突触结构模糊,数量较少;METTL3、METTL14、FTO、ALKBH5表达水平下降,m⁶A总水平明显下降（P<0.05,P<0.01）。与模型组比较,菟丝子组仔鼠平均潜伏期缩短,进入目标象限次数、目标象限停留时间及穿越平台次数均显著增加（P<0.01）;海马CA1、CA3神经元损伤程度减轻,线粒体、内质网结构较好,突触结构清晰、完整,分布密集;METTL3、METTL14、FTO表达水平上升,m⁶A总水平明显上升（P<0.05,P<0.01）。结论 菟丝子能够有效改善孕期恐伤肾所致的子代学习记忆能力下降,保护海马神经元,上调海马METTL3、METTL14、FTO表达水平及m⁶A总水平。     

酸枣仁汤加味对抑郁大鼠海马谷氨酸受体表达的影响

目的:观察酸枣仁汤加味对慢性束缚应激抑郁大鼠海马谷氨酸受体表达的影响,探讨其基于谷氨酸受体的抗抑郁机制。方法:将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、酸枣仁汤加味低、中、高剂量组、氯胺酮组,每组10只。除正常组外,其余各组采用慢性束缚应激(CRS)制备大鼠抑郁模型,酸枣仁汤加味低、中、高剂量组分别灌胃酸枣仁汤加味6,12,24 g·kg~(-1),氯胺酮组腹腔注射氯胺酮15 mg·kg~(-1),正常组和模型组灌胃等体积生理盐水,1次/d,给药干预21 d。采用Morris水迷宫和新奇摄食实验评价大鼠的抑郁行为;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马组织NMDAR1,NMDAR2A,NMDAR2B,GluR1,mGluR1,CaMKⅡα和CaMKⅡβ蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组新奇摄食时间及逃避潜伏期显著延长(P0.01),空间探索时间显著缩短(P0.01);模型组大鼠海马组织NMDAR1,NMDAR2A,NMDAR2B,mGluR1和CaMKⅡβ表达水平均显著升高(P0.01);而GluR1,CaMKⅡα水平均显著降低(P0.01)。与模型组比较,酸枣仁汤加味中、高剂量组新奇摄食时间、逃避潜伏期显著缩短(P0.01),空间探索时间显著延长(P0.01);酸枣仁汤加味中、高剂量组NMDAR1,NMDAR2A,NMDAR2B,mGluR1和CaMKⅡβ蛋白表达水平均显著降低(P0.01);而GluR1,CaMKⅡα蛋白表达显著增高(P0.01)。结论:酸枣仁汤加味可显著改善慢性抑郁大鼠行为学,其机制可能与下调NMDAR2A,NMDAR2B,mGluR1和CaMKⅡβ表达水平,上调GluR1和CaMKⅡα表达有关。     

恐伤孕鼠所产80日龄仔鼠情志与母鼠促肾上腺皮质激素、糖皮质激素的相关性研究

目的:考察恐伤孕鼠所产80日龄仔鼠情志与母鼠促肾上腺皮质激素(Adrenocorticotropic Hormone,ACTH)、糖皮质激素(Glucocorticoids,GC)的相关性。方法:应用旁观电击法建立恐伤肾孕鼠模型,通过对80日龄仔鼠进行旷场试验、糖水偏好实验和悬尾实验,观察其情志改变;采用酶联免疫法(ELISA),检测孕鼠和80日龄仔鼠血浆中ACTH、GC的含量。结果:与对照组比较,模型组80日龄仔鼠垂直得分、水平得分、糖水消耗量和糖水偏好值均降低,空中停止挣扎时间增长,差异有统计学意义(P0.05);与对照组比较,模型组恐伤孕鼠血浆ACTH、GC水平均升高,差异具有统计学意义(P0.05);旷场试验中,80日龄仔鼠垂直得分与母鼠GC存在负相关,水平得分与母鼠ACTH、GC均存在负相关,差异有统计学意义(P0.05);糖水偏好实验中,80日龄仔鼠糖水偏好值与母鼠ACTH、GC均存在负相关,差异有统计学意义(P0.05);悬尾试验中,80日龄仔鼠停止挣扎的时间与母鼠ACTH、GC存在正相关,差异有统计学意义(P0.05)。结论:恐伤孕鼠所产80日龄仔鼠的情志改变与母鼠ACTH、GC的变化密切相关。     

左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠海马神经元GR、NR2A及NR2B的影响

目的研究左归降糖解郁方(ZGJTJYF)对模拟糖尿病并发抑郁症(diabetes mellitus with depression,DD)环境下大鼠胎鼠海马神经元糖皮质激素受体(Glucocorticoid Receptor,GR)、N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate,NR)亚基NR2A和NR2B的影响。方法分离、纯化、培养并鉴定胎鼠海马神经元(neuron,NE),将培养的海马神经元随机分为5组:空白组、空白血清组、模型组、阳性药物(二甲双胍+氟西汀)含药血清组和ZGJTJYF含药血清组。模型组、阳性药物组、ZGJTJYF组分别给予葡萄糖(150 mmol·L~(-1))和皮质酮(200μmol·L~(-1))用以构建模拟糖尿病并发抑郁症(DD)环境下海马神经元体外模型,阳性药物组和ZGJTJYF组分别给予10%相应含药血清,另空白血清组加入10%空白血清,干预18 h。采用高内涵细胞成像分析技术(High Content Analysis,HCA)检测GR、NR2A和NR2B蛋白的表达。结果与空白血清组相比,模型组GR蛋白表达降低,NR2A、NR2B蛋白表达升高;与模型组相比,阳性药物组和ZGJTJYF组GR表达上升,NR2A、NR2B蛋白的表达明显降低。结论左归降糖解郁方对模拟DD环境下海马神经元GR、NR2A及NR2B蛋白的调控作用,可能是抗DD大鼠神经元损伤的保护机制之一。     

恐伤孕鼠对其仔鼠大脑海马区乙酰胆碱代谢的影响

目的：观察恐伤孕鼠对其仔鼠脑发育关键期大脑海马区乙酰胆碱代谢相关酶的影响。方法：采用恐伤孕鼠的方法造模,造模时间为整个妊娠期间。雌鼠分娩后,在仔鼠出生后14d取右侧大脑海马组织匀浆,检测乙酰胆碱代谢相关酶的活力。结果：模型组仔鼠海马区脑组织乙酰胆碱酯酶（AchE）和乙酰胆碱转移酶（CHAT）的活力均明显升高,与正常组和补肾组样本比较,有极显著性差异（P〈0.01）。结论：恐伤孕鼠可以影响仔鼠脑发育关键期大脑海马区乙酰胆碱代谢。     

脑出血后抑郁大鼠脑内NMDA受体NR1 mRNA、NR2B mRNA表达及中药干预作用

目的:观察脑出血后抑郁大鼠脑内NMDA受体亚单位NR1mRNA、NR2BmRNA的表达及中药颐脑解郁方的干预作用.方法:建立脑出血后抑郁模型,采用逆转录PCR(RT-PCR)实验方法,研究NR1mRNA、NR2B mRNA在脑出血后抑郁模型及假手术大鼠脑内左前额叶皮质、海马的表达及中药颐脑解郁方的干预作用.结果:模型组及假手术组大鼠海马、前额皮质的NR1、NR2B表达明显高于正常组,中药颐脑解郁方干预后可明显降低NR1 mRNA、NR2B mRNA在脑内的表达.结论:卒中后抑郁模型大鼠脑内NR1 mRNA、NR2B mRNA表达升高,中药颐脑解郁方可使之明显下调,中药颐脑解郁方的抗抑郁作用可能与下调NMDAR的表达有关.     

恐伤孕鼠所产21日龄仔鼠的认知发育与海马区GLU、GABA、GLY的相关性研究

目的:考察恐伤孕鼠所产21日龄仔鼠认知发育与海马区谷氨酸(Glutamic acid, GLU)、γ-氨基丁酸(Gamma-aminobutyric acid, GABA)、甘氨酸(Glycine, GLY)的相关性。方法:应用旁观电击法建立恐伤肾孕鼠模型,通过对21日龄仔鼠进行Morris水迷宫实验,观察其认知发育;通过脑立体定位仪在右侧海马区采集脑透析液,应用HPLC-ECD法测定仔鼠脑透析液中GLU、GABA、GLY含量。结果:与对照组比较,21日龄模型组仔鼠平均逃避潜伏期时间久、游泳速度慢、跨台次数少、20%边缘区域停留时间长,差异均有统计学意义(P0.05);21日龄模型组仔鼠海马组织细胞外液中GLU、GLY的水平在各个灌流时间点均升高,而GABA的水平在各个灌流时间点均降低,差异有统计学意义(P0.05);21日龄仔鼠海马区氨基酸类神经递质GLU、GLY与其平均逃避潜伏期、跨台次数存在负相关,与20%边缘区域停留时间呈正相关关系,差异有统计学意义(P0.05);神经递质GABA与其平均逃避潜伏期、跨台次数存在正相关,与20%边缘区域停留时间呈负相关关系,差异有统计学意义(P0.05)。结论:恐伤孕鼠可影响其21日龄仔鼠的认知发育及海马区GLU、GABA、GLY的含量,其认知发育水平与海马区GLU、GABA、GLY的含量改变有一定的关系。     

复合型肾虚质大鼠神经行为障碍与NMDA受体表达研究

目的探讨肾虚质与脑功能衰退的相关性及肾藏志理论的物质基础与神经生物学机制。方法采用"猫吓鼠"造模法造成先天不足加后天失养复合型肾虚模型,随机分为模型组、左归丸组和右归丸组;空白组产自正常孕鼠。对仔鼠恐吓同时开始灌胃,左归丸组、右归丸组分别给予左归丸、右归丸混悬液,空白组和模型组给予等量生理盐水,1次/d,连续2个月。悬吊试验和Y迷宫实验观测大鼠运动和空间学习记忆能力,免疫组化法检测N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体亚基NR2A、NR2B蛋白表达。结果悬吊试验:模型组持续时间低于空白组(P0.05),左归丸组和右归丸组高于模型组(P0.05);Y迷宫实验:模型组跑至安全区正确次数低于空白组(P0.05),左归丸组和右归丸组高于模型组(P0.05);模型组NR2A、NR2B光密度值较空白组降低(P0.05),左归丸组和右归丸组光密度值较模型组升高(P0.05)。结论肾虚质大鼠神经行为学异常且海马NMDA受体亚基表达降低;左归丸、右归丸可上调NMDA受体表达且改善大鼠脑功能,揭示了肾虚质与脑功能衰退的相关性及肾藏志理论的物质基础与神经生物学机制。     

滋补脾阴方药对脾阴虚痴呆大鼠脑内NMDA受体mRNA表达的影响＊

目的：观察滋补脾阴方药对脾阴虚痴呆大鼠脑内N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDAR）亚单位NR1、NR2A、NR2B mRNA表达的影响。方法：运用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术,对NMDAR亚单位NR1、NR2A、NR2B mRNA在各脑区的表达状况作相应的检测。结果：痴呆组以及脾阴虚痴呆组大鼠NMDAR亚单位NR1、NR2A、NR2B mRNA在各脑区表达均明显减弱下调（P<0.05）;ZBPYR治疗组NMDAR亚单位NR1、NR2A、NR2B mRNA均明显上调（P<0.05）。结论：使用ZBPYR治疗的大鼠NMDAR mRNA的表达水平在各脑区均明显上调,这表明ZBPYR以提升NMDAR mRNA的方式,使得NMDAR蛋白的含量显著增多,而发挥其抗痴呆作用。     

滋补脾阴方药对脾阴虚痴呆大鼠脑内NMDA受体mRNA表达的影响

目的：观察滋补脾阴方药对脾阴虚痴呆大鼠脑内N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDAR）亚单位NR1、NR2A、NR2B mRNA表达的影响。方法：运用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术,对NMDAR亚单位NR1、NR2A、NR2B mRNA在各脑区的表达状况作相应的检测。结果：痴呆组以及脾阴虚痴呆组大鼠NMDAR亚单位NR1、NR2A、NR2B mRNA在各脑区表达均明显减弱下调（P<0.05）;ZBPYR治疗组NMDAR亚单位NR1、NR2A、NR2B mRNA均明显上调（P<0.05）。结论：使用ZBPYR治疗的大鼠NMDAR mRNA的表达水平在各脑区均明显上调,这表明ZBPYR以提升NMDAR mRNA的方式,使得NMDAR蛋白的含量显著增多,而发挥其抗痴呆作用。     

恐伤孕鼠对仔鼠大脑皮质Reelin、VLDLR及ApoER2mRNA表达影响

目的观察恐伤孕鼠对仔鼠大脑皮质组织形态学影响及对大脑皮质Reelin、VLDLR及ApoER2的mRNA表达影响。方法将受孕后的雌鼠用随机取数法分为正常组、模型组、补肾组,每组各10只。运用恐吓为主的复合应激法刺激模型组和补肾组孕鼠,正常组不予刺激。同时补肾组每日以中药左归丸浓缩剂2ml/100g体重灌胃,正常组及模型组则根据雌鼠体重予以等量生理盐水灌胃,造模时间为自分组第1天直至产下仔鼠。雌鼠分娩后,仔鼠出生当天每窝随机取1~2只仔鼠断头取全脑,固定,染色,切片,在光镜和电镜观察其组织结构和超微病理改变。另每窝随机取1~2只仔鼠断头取全脑匀浆做定量PCR,观察各组仔鼠大脑皮质Reelin、VLDLR及ApoER2mRNA表达变化。结果模型组仔鼠大脑皮质区光镜下可见细胞较松散,组织结构较模糊,存在散在片状水肿,水肿区域神经细胞数目减少;电镜下可见到多数神经细胞出现细胞器结构异常,如线粒体肿胀,高尔基复合体肥大,部分伴有细胞核固缩。补肾组与正常组比较,仔鼠大脑皮质在形态学上无明显改变。补肾组和模型组仔鼠大脑皮质Reelin、VLDLR及ApoER2mRNA表达均低于正常组(P0.01),模型组仔鼠大脑皮质Reelin、VLDLR及ApoER2mRNA表达低于补肾组(P0.01)。结论恐伤孕鼠可以引起仔鼠大脑皮质发育异常,而左归丸通过补肾填精法调节Reelin信号通路从而阻断或降低仔鼠大脑皮质发育障碍损伤的发生。     

金匮肾气丸对“恐伤肾”模型仔鼠皮质酮水平的调节作用

目的:观察金匮肾气丸对恐伤孕鼠孕仔数及仔鼠体质、血清皮质酮(CORT)水平的影响。方法:采用模拟地震的生物学实验,造成"恐惧"心理应激,建立"恐伤肾"模型,观察孕鼠每胎孕仔数、仔鼠体重、翻身能力及CORT水平。结果:中药金匮肾气丸能显著提高"恐伤肾"孕鼠的孕仔数(P<0.01),增加仔鼠平均体重,提高仔鼠翻身能力(P<0.01),改善应激条件下仔鼠CORT水平的变化(P<0.01)。结论:中药金匮肾气丸可预防恐伤孕鼠肾精不足,同时通过对仔鼠CORT的调节,有效地改善仔鼠恐惧应激反应,具有良好的抗恐惧应激损伤作用。     

电针对SAMP8小鼠学习记忆与海马神经元NMDA受体表达的影响

目的观察电针"百会""大椎""肾俞"对SAMP8小鼠学习记忆与海马神经元NMDA受体NR2A和NR2B表达的影响,探讨电针治疗阿尔茨海默病的机制。方法 6月龄SAMP8小鼠24只,随机分为模型组和电针组,同龄正常老化SAMR1小鼠12只为对照组。电针组电针"百会""大椎""肾俞"30d。Morris水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力,免疫组化染色和Western blot检测海马神经元NR2A和NR2B的表达。结果与对照组比较,模型组小鼠逃避潜伏期明显延长(P0.01),原平台象限停留时间明显缩短(P0.01),跨越原平台次数明显减少(P0.01),海马神经元NR2A相对表达量明显升高(P0.01),NR2B相对表达量明显下降(P0.01);与模型组比较,电针组小鼠逃避潜伏期明显缩短(P0.05),原平台象限停留时间明显延长(P0.01),跨越原平台次数明显增加(P0.05),海马神经元NR2A相对表达量明显下降(P0.05),NR2B相对表达量明显升高(P0.01)。结论电针能改善SAMP8小鼠的学习记忆能力,其作用机制可能与电针抑制海马神经元NMDA受体NR2A的表达和促进NMDA受体NR2B的表达有关。     

推拿手法对神经病理痛大鼠背根神经节和脊髓背角NMDAR2B表达的影响

目的通过观察坐骨神经慢性压迫性损伤大鼠模型(CCI)大鼠背根神经节和脊髓背角N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体2B亚单位(NR2B)的表达和推拿手法干预对其的影响,探讨推拿手法干预神经病理痛的作用机制。方法清洁级雄性SD大鼠,随机分成空白组、假手术组、CCI模型组、CCI模型+推拿组,每组8只。空白组不做任何处理;假手术组只分离坐骨神经但不进行结扎; CCI模型组及CCI模型+推拿组均参照Bennett G J的方法稍作改进制备神经病理痛模型; CCI模型+推拿组于造模后第4～17天实施每天1次、每次10 min的推拿干预。疗程结束后Western blot检测背根神经节和脊髓背角组织NR2B蛋白的表达。结果与空白组、假手术组相比,CCI模型组、CCI+推拿组的背根神经节NMDAR2B的表达量均上调(P 0. 01); CCI模型组、CCI+推拿组的背根神经节NMDAR2B的表达量的差异无统计学意义(P 0. 05)。与空白组、假手术组相比,CCI模型组的脊髓背角NMDAR2B的表达量上调(P 0. 01);与CCI模型组比较,CCI+推拿组的脊髓背角NMDAR2B的表达量被逆转(P 0. 05)。结论背根神经节和脊髓背角NMDA受体亚单位NR2B参与大鼠神经病理痛的形成和维持,推拿手法可通过抑制脊髓NR2B蛋白表达,从而抑制脊髓背角中枢敏化以发挥镇痛的作用。     

捏脊疗法对自闭症模型大鼠焦虑样行为及NF-κB通路的影响

目的 基于NF-κB通路探究捏脊疗法对自闭症模型大鼠焦虑样行为及海马神经炎症的影响。方法 将12只Wistar孕鼠随机分为正常组和造模组，每组6只。于妊娠12.5 d, 2组孕鼠均按体质量0.24 mL/100 g,腹腔注射给药，造模组腹腔注射250 mg/mL丙戊酸钠溶液(VPA),正常组腹腔注射等体积生理盐水；所产子代经睁眼试验、方向趋向性实验筛选后确定为自闭症模型大鼠。造模成功后将自闭症模型大鼠随机分为模型组和捏脊组，每组12只；正常组随机选取12只作为正常对照组。捏脊组出生后第23 d开始干预，每天1次，21遍/次，连续干预30 d。末次干预后采用旷场实验检测大鼠焦虑水平，Western blot检测大鼠海马组织中NF-κB p65、TNFR 1和TNFR 2蛋白表达，Real-time PCR检测大鼠海马组织中TNF-α、IKKα mRNA表达水平。结果 与正常组仔鼠比较，造模组仔鼠睁眼时间更晚，方向趋向性机能降低(P<0.01);与正常对照组比较，模型组Rd值下降(P<0.01),NF-κB p65、TNFR1蛋白和TNF-α mRNA表达升高(P<0.0...     

海马NMDAR亚单位参与电针胃俞募配穴调节胃运动的实验研究

目的:观察电针对功能性消化不良(FD)大鼠胃运动、原癌基因c-fos及海马N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体亚单位表达的影响,探讨海马参与胃俞募配穴调节FD模型大鼠胃运动的分子机制。方法:选用SD大鼠84只,随机分为正常组、模型组、胃俞组、中脘组、中脘+胃俞组、非经非穴组6组,每组14只。除正常组外,其余大鼠均采用适度夹尾激怒法联合不规则喂养法建立FD大鼠模型。胃俞组、中脘组、中脘+胃俞组、非经非穴组分别选取相应穴位进行电刺激,每次20 min,每日1次,连续干预7 d。空白组与模型组不施加干预措施,模型组抓取固定。采用应力传感器记录大鼠胃窦部胃运动波形,免疫组化法检测海马c-fos的表达,Western blot法测定大鼠海马NMDA受体亚基NR1、NR2A、NR2B的表达。结果:与正常组比较,模型组胃运动幅度降低(P0.05),海马c-fos表达差异无统计学意义(P0.05),海马NR2A表达降低(P0.05),NR1、NR2B表达上升(均P0.05);与模型组比较,胃俞组、中脘组和中脘+胃俞组胃运动幅度增高(均P0.05),海马c-fos表达升高(均P0.05),海马NR2A表达升高(均P0.05),NR1、NR2B表达下降(均P0.05),非经非穴组胃运动幅度、海马c-fos及海马NR1、NR2A、NR2B表达差异均无统计学意义(均P0.05);与中脘组、胃俞组比较,中脘+胃俞组胃运动幅度增高(均P0.05),海马c-fos表达上升(均P0.05),海马NR2A表达升高(均P0.05),NR1、NR2B表达下降(均P0.05)。各组大鼠胃运动频率比较差异均无统计学意义(均P0.05)。结论:电针胃俞募穴能够增强FD模型大鼠胃运动,胃俞募穴针刺信息可能通过激活海马神经元、上调海马区NR2A、下调NR1及NR2B水平实现对胃运动的调节。