自动血培养仪及其临床应用

目的：探寻临床细菌学中血培养检测快速准确方便的途径；方法：使用全自动血培养Bact/Alert120培养系统检测564例患者血标本；结果：生长感染菌138株，阳性率达24．5％，分离出19个菌种；结论：Bact/Alert全自动培养系统能在较短的时间内，检出标本中所存在的全部微生物，有较高的敏感性和快速性。     

Bact/Alert120全自动血培养仪有氧培养600份标本结果分析

目的探讨Bact/Alert120全自动血培养仪的临床应用价值。方法采用回顾性分析,对Bact/Alert120全自动血培养仪检测600份标本,分析其阳性率、假阳性率、阳性最早出现的时间以及对分离出的有意义的病原菌进行评价。结果600份标本中89份为阳性,其中9份为污染所致,其阳性率为14.8%,污染率为1.5%。假阳性率为9.0%,假阴性率为0.6%,24h以内阳性检出率为65.1%,48h内阳性检出率为89.2%,72h内阳性检出率为91.6%。阴性报告时间为7d。结论使用Bact/Alert120全自动血培养仪可提高血液等无菌液体培养的阳性率,缩短检测时间,且操作简便、快速、结果准确。     

BacT／Alert240全自动血培养仪的临床应用与评价

目的评价全自动血培养系统（BacT／Alert240）的临床应用情况。方法回顾性分析了用BacT／Alert240全自动血培养系统检测的1898份血标本,对检出阳性的时间、细菌种类和阳性率进行了评估分析。结果1898份血标本中分离出255株病原微生物,阳性率为13．4％。最早阳性检出时间为2h,24h内检出的阳性数占72．2％,48h检出的阳性数占92．6％。假阳性率为3．1％,假阴性率为0-3％。结论应用BacT／Alert240全自动血培养系统提高了血培养的阳性率,缩短了阳性检出时间,检出细菌种类多,而且操作简便,结果快速、准确。     

2097份HIV感染者痰标本直接涂片与培养法筛查肺结核结果分析

目的 评价痰萋-尼氏染色和结核培养检测方法在HIV感染者中筛查肺结核的临床诊断价值.方法 用直接涂片萋-尼氏染色和结核培养(培养同时做中性罗氏培养基分离培养和Bact/Alert 3D系统培养)检测方法对2097份HIV感染者痰标本抗酸杆菌检测,并将检测结果进行比较.结果 萋-尼氏染色和结核培养法检测痰标本阳性检出率分别为4.6%、15.2%;318份标本培养阳性,其中94份标本涂片阳性,224份标本涂片阴性.结论 结核培养能提高HIV感染者中筛查肺结核阳性检出率,有助于HIV感染者合并结核病的诊断和治疗;直接涂片法阳性检出率低,作为HIV感染者中筛查肺结核意义不大.     

无菌体液细菌培养的新方法探讨

目的:探讨无菌体液培养的最佳方法.方法:对278份无菌体液标本用双相液体培养基法和直接接种法培养分离细菌.结果:双相液体培养基检测278份标本,40份培养出细菌,阳性率为14.4%,直接接种法培养19份标本培养出细菌,阳性率为6.8%,经SPSS 11.5软件处理,χ2检验,P＜0.01,差异有非常显著性.结论:用双相液体培养基法培养无菌体液标本,可明显提高细菌检出率,是较好的方法.     

无菌体液细菌培养的新方法探讨

目的:探讨无菌体液培养的最佳方法。方法:对278份无菌体液标本用双相液体培养基法和直接接种法培养分离细菌。结果:双相液体培养基检测278份标本,40份培养出细菌,阳性率为14.4%,直接接种法培养19份标本培养出细菌,阳性率为6.8%,经SPSS11.5软件处理,χ2检验,P﹤0.01,结果差异有显著性。结论:用双相液体培养基法培养无菌体液标本,可明显提高细菌检出率,是较好好的方法。     

从菌血症病原体分析观察医院感染动向

菌血症是由致病菌或条件致病菌侵入人体血循环中生长繁殖,产生内毒素引起的全身性感染。本文通过对1979～1994年和1997～2000年两个阶段、20年全院住院患者血培养阳性标本病原菌分布情况的分析,来观察我院医院感染的动向。1 材料与方法1.1 标本收集 由临床护士以无菌操作从病人静脉采血,成人血液5ml,婴幼儿3ml,注入血培养瓶中,轻微振荡,使之充分混合,立刻送微生物室,Bact/Alert120血培养仪     

羟乙基呱嗪乙硫磺酸对人骨髓间充质干细胞纯化培养的影响

目的：探讨羟乙基呱嗪乙硫磺酸对人骨髓间充质干细胞(hMSC)纯化培养的影响。方法：采用全髓直接接种法分离培养13～18周胎龄水囊引产新鲜胎儿股骨骨髓，贴壁细胞达90％以上融合时消化传代。传代细胞分别接种于含100ml／L胎牛血清的L-DMEM培养基(常规培养基)和加入15mmol／L羟乙基呱嗪乙硫磺酸(Hepes)的常规培养基(改良培养基)中，观察细胞生长情况，用酸度计监测培养基pH值变化情况，流式细胞仪鉴定细胞纯度及CD抗原表达情况。并诱导改良培养基培养的hMSC向成骨细胞分化，酶细胞化学法和全自动生化仪检测碱性磷酸酶(ALP)活性，鉴定hMSC的成骨分化能力。结果：2种培养基培养的hMSC在细胞形态、生长特性、CD抗原表达等方面相似，但改良培养基由于pH值较恒定而能提高hMSC纯度及细胞增殖速度，且诱骨分化后可形成矿化结节，ALP染色阳性。结论：Hepes能提高全髓直接接种法培养的hMSC纯度及细胞增殖速度，简化骨髓细胞分离程序，减少细胞损伤及受污染机会，利于hMSC培养的推广应用。     

荧光原位杂交法快速鉴定阳性血培养中的不动杆菌

目的建立一种快速鉴定阳性血培养中不动杆菌的方法。方法Bact／Alert3 D120报警后,取阳性血培养液15uL于玻片上,预处理后50℃杂交45min,荧光显微镜下观察,作荧光原位杂交法（FISH）分析。同时将阳性标本转种至血平板和巧克力平板,用Vitek32系统鉴定,比较两种鉴定方法的符合率。结果探针的特异性经标准菌株和临床分离株证实,最低检测限为10^3CFU／mL。通过对31株临床标本的检测,杂交法的特异性为96．4％。结论荧光原位杂交法可快速鉴定阳性血培养标本中的不动杆菌。     

从家兔分离贾第虫并建立纯培养

浓集、纯化兔粪便中的贾第虫包囊，用生理盐水制成悬液，感染ＢＡＢＬ／Ｃ乳鼠。接种后第８ｄ，在无菌条件下从鼠小肠上段分离滋养体，接种于改良ＴＹＩ－Ｓ－３３培养基内，置３７℃培养。培养后第２０ｄ虫体在管壁形成密集的细胞单层，传代２０余次，并经冷冻及复苏，虫体均生长良好。     

胶质瘤细胞中干细胞分离的实验研究

目的研究应用无血清培养基悬浮法培养U-251胶质瘤细胞系的方法;并分离该细胞系中的脑肿瘤干细胞,鉴定其特异性标志物CD133+的表达并观察其生长和分化特征.方法应用培养大鼠神经干细胞的培养基和培养方法,在无血清培养基中采用悬浮法培养人U-251胶质瘤细胞系;再将分离获得的悬浮生长的脑肿瘤干细胞利用免疫荧光法检测脑肿瘤干细胞特异性标志物CD133+在脑肿瘤干细胞球中的表达.再将脑肿瘤干细胞接种于含血清培养基,观察其分化生长和分化特征.结果 U-251胶质瘤细胞系中有约(2.56±0.2)%的肿瘤细胞在无血清培养基中能够存活,增殖,形成自由漂浮的细胞球;其细胞表达CD133+神经干细胞的标志物,并可连续传代,若重新接种于含血清培养基中可重新贴壁分化,贴壁分化后细胞形态与直接在含血清培养基中培养的U-251胶质瘤细胞系无明显差别.结论用悬浮无血清培养法从U-251人胶质瘤细胞系中成功培养出脑肿瘤干细胞,其肿瘤干细胞能够产生为多种细胞形态的分化细胞,脑肿瘤干细胞的分离培养成功对脑肿瘤的基础和临床研究具有重要价值     

直接接种法与薄膜过滤法在小容量注射剂无菌检查中的应用比较

目的探讨薄膜过滤法在小容量注射剂无菌检查中应用的可行性。方法以1%地卡因注射液与10%普鲁卡因注射剂为样本,同时采用直接接种法与薄膜过滤法进行无菌检查。结果两种方法检查结果完全一致。结论在小容量注射剂无菌检查中薄膜过滤法可以代替直接接种法,方法简便、可靠。     

降钙素原与血培养诊断血流感染比较

目的比较血培养与血清降钙素原（Procalcitonin,PCT）对血流感染的诊断作用。方法对我院2008年5月-2009年7月同时进行血培养与降钙素原检测患者资料进行回顾性分析,应用全自动连续性检测系统BacT／Alert3D进行血培养,VETEKII微生物全自动鉴定仪对病原菌进行鉴定,半定量免疫色谱法检测降钙素原。结果PCT和血培养的阳性率分别为23．8％和22．9％;PCT诊断的敏感性为78．3％、特异性为77．3％,阳性预测值和阴性预测值分别为52％、91．9％。结论半定量PCT检测具有一定的敏感性和特异性,操作简单,容易判读,可用于常规实验检测。     

塑料袋细菌培养法的建立及应用

目的　应用塑料袋建立起操作简单、检出率高和污染率低的细菌培养法。方法　盛有血浆或保养液的被检塑料袋经离心处理后 ,按无菌操作规程用三叉管把上层血浆或保养液排出 ,底层保留约 5 ml被检液 ,然后将培养基压入被检袋内 ,热合封口 ,按规定条件作培养。结果　用塑料袋作容器对培养基的质量及细菌的生长均无影响 ,而且操作简便 ,检出率高 ,污染率较试管法、薄膜过滤法低。结论　该方法特别适合血站对塑料袋盛装的血浆或保养液进行无菌检查 ,也适用于血液成份分离的无菌监控。     

快速检测食品中微生物方法的进展

快速检测食品中微生物的方法在食品卫生检验方面起着越来越重要的作用,最终将达到预防肠道传染病和食物中毒的发生的目的。快速方法包括即用型纸片法、生物化学技术、选择鉴定用培养基法、免疫学技术、细菌直接计数法、全自动微生物分析系统等。本文对上述各种快速检测食品中微生物的方法的研究进展作一综述。     

悬浮法培养C6胶质瘤细胞系和该细胞系中脑肿瘤干细胞的分离

目的研究应用无血清培养基悬浮法培养C6胶质瘤细胞系的方法;并分离该细胞系中的脑肿瘤干细胞,观察其生长方式和分化特征.方法应用培养大鼠神经干细胞的培养基和培养方法,在无血清培养基中采用悬浮法培养大鼠C6胶质瘤细胞系;再将分离获得的悬浮生长的脑肿瘤干细胞接种于含血清培养基,观察其分化;应用有限稀释和单克隆形成实验确定该细胞系中肿瘤干细胞的比例.结果C6胶质瘤细胞系中有约1.18%的肿瘤细胞在无血清培养基中能够存活、增殖,形成自由漂浮的细胞球;这种细胞球具有人脑肿瘤干细胞球的特征,并可连续传代,若重新接种于含血清培养基中可重新贴壁分化,贴壁分化后细胞形态与直接在含血清培养基中培养的C6胶质瘤细胞系无明显差别.结论C6大鼠胶质瘤细胞系中含有比例较低的、具有增殖和分化能力脑肿瘤干细胞(约1.18%),该细胞系可在含生长因子的无血清培养基中悬浮生长,并维持细胞系.     

嗜醇黄酐菌引起的败血症1例

患者 ,女 ,37岁。因高热 ,颈强直 ,休克急诊入我院ＩＣＵ病房抢救。该患者有甲亢病史 ,1周前有过手指刀伤 ,入院时体温 39 5℃ ,入院时曾考虑真菌感染性脑膜炎。实验室检查 :血ＷＢＣ8 0× 10 9/Ｌ ,Ｎ0 .80 ,Ｌ0 .18,Ｅ0 .0 2 ;ＣＳＦ常规正常 ,墨汁染色阴性 ,培养 7日无菌生长。痰、血培养分别于入院 2ｈｒ,18ｈｒ连续二次送检 ,均分离培养出嗜醇黄杆菌。①细菌鉴定 :培养特性 :无菌采血 5ｍｌ接种于酚红葡萄糖血培养基中 ,35℃培养 2 4ｈｒ,见血培养基血球变黑 ,涂片革兰染色为阴性杆菌 (细小 ) :转血平板 35℃培养 18ｈｒ长出浅黄色 ,针…     

改良式微量肝素钠在染色体血培养中的应用

目的 比较采血做染色体检查中微量肝素钠抗凝剂不同方法应用对染色体血培养及复种再次培养的效果影响.方法 随机抽取采血做染色体检查的400例患者.单号为改良组:注射器吸取0.1 ml肝素钠湿润管壁后,尽量排尽注射器内的肝素钠,采2 ml静脉血混匀后,接种0.3～0.5 ml的血到培养液中混匀进行培养.双号为对照组:用注射器采血后,加1滴(5号针头)肝素钠抗凝剂于培养液中,接种0.3～0.5 ml血至培养液中混匀培养.比较两组患者采血穿刺点出血及穿刺点皮下淤血情况、注射器内血液保存时间及染色体血培养效果情况.结果 两组患者穿刺点按压时间、穿刺点皮下淤血、染色体初次血培养效果均无显著差异性(P﹥0.05).改良组血液标本不会凝固;保存3～5天再次培养效果好,两组比较有显著性差异.结论 用改良式微量肝素钠方法,可以将血标本集中培养,不增加患者采血穿刺点出血和皮下淤血的发生率,能有效保存患者的血液标本,再次培养效果好,减少患者再次抽血的痛苦.     

3 784份儿童血培养结果分析

我院自1997年6月引进全自动BacT/Alert全自动血培养仪及ATB鉴定系统，用于小儿败血症及严重感染的病原学诊断，为临床提供了快速而正确的报告，现介绍如下。 1　材料和方法 　　标本来源：我院自1997年6月至1998年9月疑为败血症及严重感染的患儿，于入院当日或次日清晨采集血标本，血培养瓶为一次性全封闭瓶，采血新生儿0.5～1 ml，幼儿1～2 ml。 　　操作方法：将培养瓶放入全自动细菌培养仪，在恒温35 ℃条件下，培养瓶连续震荡(60 r/min)，每分钟检测1次(1 d 144次)，其原理依据概率最大似然模型法，如培养瓶生长的细菌绝对似然值与内存模型菌值大于或相等即为阳性，报警通知鉴定人员，检测人员将培养瓶取出转种血琼脂平板，分离单个菌落，再调正一定浓度的菌液，经ATB系统鉴定出细菌种类。培养5 d后无细菌生长，即可取出培养瓶，按常规报告无细菌生长。     

血培养中肠球菌的检出分析

目的：对血培养中肠球菌做检测分析。方法：无菌法采取患者血液1～3ml,接种于BD公司的血培养瓶,Bactec9120血培养系统检测阳性后,用MicoyScan微生物签定仪鉴定。结果：选择我院1250例感染患者的血培养,检测出肠球菌35例,30例诊断为菌血症。结论：探讨肠球菌的检测及其耐药性对诊断菌血症具有重要意义。