小型猪胰腺移植急性排斥反应模型的实验研究

目的　建立小型猪胰腺移植动物模型 ,探索早期诊断急性排斥反应的方法。方法　 4 0只猪随机配对行胰腺移植 2 0次 ,将供胰所带的血管与受体髂血管吻合 ,所带小段十二指肠与空肠吻合 ,术中监测平均动脉压、中心静脉压及血气。术后测定受体的血淀粉酶、血糖 ,监测外周血免疫指标 ,彩色多普勒检测供胰血流及超声引导下活检、组织病理检查。结果　移植手术成功率为 90 % ,受体平均动脉压在吻合血管开放后有明显下降 ,与血流开放前差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,输血有助于手术成功 ,受体术后平均存活 (12 6± 2 3)d。外周血免疫学监测指标早于供胰的组织病理改变 ,两者的改变均早于急性排斥反应的临床表现。结论　小型猪适用于胰腺移植模型的建立 ,加强术中循环功能的管理、及时输血有利于受体成活 ;超声引导下穿刺活检供胰的组织病理学检查与监测外周血免疫指标均适于早期诊断急性排斥反应     

穿孔素和颗粒酶B蛋白表达对胰腺移植急性排斥反应早期诊断的研究

目的 研究移植胰腺局部穿孔素和颗粒酶B的蛋白表达对急性排斥反应的早期诊断和鉴别诊断的意义.方法 将40只四川当地杂种长白猪随机分为3组,即对照组(n=8)、移植组(n=16)、移植 免疫抑制剂治疗组(n=16).移植手术为同种异体经门静脉回流、肠内引流全胰十二指肠移植.免疫抑制剂治疗组在进行同种异体胰十二指肠移植术同时应用环孢A 骁悉 甲强龙三联免疫抑制治疗.分别于术前1 d和术后1、3、5、7 d检测受者的锁骨下静脉血胰岛素、胰高血糖素、血糖水平.术后1、3、5、7 d,开腹取胰腺组织进行常规病理学检查和免疫组化染色检测穿孔素和颗粒酶B的蛋白表达.结果 ①对照组、移植组以及移植 免疫抑制剂组之间受者的血糖、胰岛素、胰高血糖素水平变化有统计学意义(P＜0.05).②胰腺移植 免疫抑制剂组与单纯胰腺移植组相比胰腺组织中穿孔素和颗粒酶B的蛋白表达及穿孔素和颗粒酶B的阳性淋巴细胞计数的差异有统计学意义(P＜0.05).③免疫组化染色检测移植后胰腺组织中穿孔素和颗粒酶B蛋白表达,比常规病理学检查诊断排斥反应早2～4 d.结论 移植胰腺组织穿孔素和颗粒酶B局部蛋白表达变化早于常规病理学改变,结合常规病理学检查可以对胰腺急性排斥反应做出早期诊断和鉴别诊断.     

移植肾早期急性排斥反应的超声诊断

彩色多谱勒超声技术对移植肾急性排斥反应 (AR)的诊断价值已有许多报道 ,但用于诊断早期AR的报道不多。我们对 14 8例移植肾的资料进行了回顾性分析 ,以探讨彩色多谱勒超声技术诊断移植肾早期AR的价值。现报道如下。1　资料与方法1.1　对象　本院 1997年 1月～ 2 0 0 1年 12月间资料完整的肾移植患者 14 8例 ,其中男 88例 ,女 6 0例 ;年龄 17～ 6 7岁 ,平均 4 0 .8岁。研究时段为肾移植术后 6个月。 14 8例中AR 6 2例 ;无AR86例 ,其中环孢霉素A(CsA)急性中毒7例 ,急性肾小管坏死 (ATN) 7例。1.2　方法1.2 .1　随访检查　由专人及专用…     

尿淀粉酶测定监测猫移植胰腺的排斥反应

25只猫接受全胰十二指肠移植手术。A组8只猫，胰腺引流方式采用肠肠吻合，术后5只猫未接受任何抗免疫治疗，另外3只地塞米松肌肉注射，该组平均生存12d，死亡与胰腺坏死有关。B组17只猫，行十二指肠膀胱吻合。5只地塞米松肌肉注射。其余口服环孢霉素A。平均生存17d。9只猫有程度不等的胰腺坏死，其余8只胰腺组织学结构大致正常。术后所有实验猫血、尿淀粉酶均升高。尿淀粉酶升高的幅度差异很大，A组升高16倍，B组升高80倍。其差额可以反应移植胰腺的功能状态。胰腺发生坏死后，尿淀粉酶含量明显降低。胰腺没有坏死，尿淀粉酶仍居高不下。实验结果表明通过胰腺引流膀胱的术式，尿淀粉酶的降低与移植胰腺的坏死及功能丧失有明显关系。胰腺坏死及功能丧失是排斥反应损伤的结果。因此尿淀粉酶的测定可以作为监测移植胰腺排斥反应的发生与强度的重要手段。     

外周血穿孔素和颗粒酶B mRNA检测对胰腺移植急性排斥反应早期诊断的价值

目的 研究胰腺移植术后外周血穿孔素和颗粒酶B的基因表达对急性排斥反应早期诊断的价值.方法 实验动物为杂种长白猪,分为3组(n=8):对照组,移植组.免疫抑制剂治疗组.移植手术为同种异体门静脉回流、肠内引流全胰十二指肠移植.免疫抑制剂治疗组在行同种异体胰十二指肠移植的同时应用环孢A 骁悉 甲强龙三联免疫抑制治疗.分别于术前1 d和术后1、3、5、7 d采集受者锁骨下静脉血,抽提总RNA,RT.PCR方法检测静脉血淋巴细胞中穿孔素和颗粒酶B的mRNA表达,检测受者血糖、胰岛素、胰高血糖素水平.在术后1、3、5、7d,开腹取胰腺组织进行常规病理学检查,与血液中穿孔素和颗粒酶B的mRNA表达水平进行比较分析.结果 ①对照组、移植组、免疫抑制剂组之间受体的血糖、胰岛素、胰高血糖素水平变化差异无统计学意义.②与移植组比较,免疫抑制剂组静脉血淋巴细胞中穿孔索和颗粒酶B的mRNA表达水平下降(P<0.05).③胰腺移植术后静脉血穿孔素、颗粒酶B mRNA表达变化比急性排斥反应病理学改变早2～d.结论 监测外周血淋巴细胞中穿孔素和颗粒酶B mRNA表达的变化,可以对胰腺急性排斥反应做出早期诊断.     

胰腺十二指肠移植急性排斥反应病理变化特点

目的：研究猪胰腺移植术后胰腺和十二指肠粘膜急性排斥反应病理变化特点及其相互间的关系。方法：１２头猪作同种异体胰腺十二指肠移植，分为未用药组（ｎ＝６）和治疗组（ｎ＝６）；术后定期取胰腺和十二指肠粘膜作普通病理检查。结果：胰腺急性排斥反应首先并持续损伤腺泡，以后累及胰腺导管，最后为胰岛和血管。胰腺和十二指肠粘膜急性排斥反应大多同时存在；间质性排斥反应评分相同者占７３％，评分不同者中，胰腺评分较高占５８．３％。结论：急性排斥反应最先累及胰腺外分泌系统；最终累及内分泌组织。十二指肠粘膜活检有助于确定有无胰腺急性排斥反应，但不能确定其严重度。     

胎膜早破原因与血清中Th1/Th2细胞因子变化的相关性研究

目的探讨胎膜早破发生的原因和患者血清中Th1和Th2细胞因子的变化。方法胎膜早破组（感染与非感染组）和对照组孕妇血清中Th1类细胞因子IFN-γ、IL-2及Th2类细胞因子IL-4、IL-10的表达水平采用ELISA法检测,同时胎膜行病理检查。结果胎膜早破与细菌性阴道病密切相关。胎膜早破组86例,宫颈炎者48例,占55．81％;阴道炎30例,占34．88％;尖锐性湿疣2例,占2．32％。对照组100例,宫颈炎者49例,占49．00％;阴道炎12例,占12．00％;尖锐性湿疣1例,占1．00％。两组比较P〈0．05,胎膜早破组细菌性阴道病明显高于对照组。胎膜早破与胎位不正、骨盆异常、巨大儿或双胎两组比较P〉0．05无显著性差异。胎膜早破组患者血清中IFN-γ、IL-2的表达水平均显著增高,并随时间延长而含量逐渐上升高（P〈0．05）;绒毛膜或（和）羊膜炎者血清IFN-γ、IL-2高于无绒毛膜羊膜炎及对照组（P〈0．01）;无绒毛膜羊膜炎及对照组IL-4、IL-10的表达水平均显著高于绒毛膜或（和）羊膜炎组（P〈0．05）。结论胎膜早破患者血清中Th1／Th2细胞平衡向Th1细胞为主的模式转化。且与感染、营养缺乏等多种原因有关。     

穴位埋线对哮喘大鼠Th1/Th2的影响

目的:通过观察哮喘大鼠穴位埋线对外周血IFN-γ和IL—4的影响,探讨穴位埋线对哮喘患者Thl/Th2细胞失衡的影响。方法:将32只wista大鼠分为4组,每组8只。哮喘模型组大鼠采用卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏加雾化吸入激发的方法制成哮喘模型;穴位埋线组大鼠采用和模型组大鼠相同的致敏激发方法,实验第一天同时进行取肺俞、肾俞、定喘三穴进行穴位埋线,氢化可的松组于实验第15天起腹腔注射氢化可的松20mg/kg,每天一次,连续2周;正常对照组小鼠用生理盐水腹腔注射加雾化吸入。治疗结束后采血离心血清,采用ELISA法测定血清中IFN-γ和IL4水平。结果:哮喘组大鼠外周血清中IFN—γ水平降低,IL4水平增高;穴位埋线大鼠与模型组大鼠相比血清中IFN-γ水平增高,IL4水平降低,有显著差异,与正常对照组大鼠相比IFN—γ水平降低,IL4水平增高。氢化可的松组与正常组大鼠相比IFN-γ水平降低,IL-4水平增高,与穴位埋线组大鼠相比IFN-γ水平降低,IL-4水平升高。结论:穴位埋线可在一定程度上控制哮喘大鼠的气道炎症和纠正失衡的Th亚群。     

三仁汤对脾胃湿热证大鼠血清Th1/Th2细胞因子的影响

目的探讨三仁汤改善脾胃湿热证大鼠免疫功能的作用机理。方法将50只雄性SPF级SD大鼠随机分为正常对照组、脾胃湿热模型组、三仁汤(高、中、低剂量)组,观察大鼠体质量、肛温等形态学改变,检测血清Y.干扰素(IFN-y)和白细胞介素-4(IL-4)表达水平,取大鼠胃、十二指肠和结肠组织行病理切片,HE染色观察胃肠道炎症情况。结果与正常对照组比较,模型组大鼠肛温升高,饮水量和摄食量减少,病理提示胃肠道存在炎症损伤,血清IFN-γ和IL-4显著增高(P<0.01),IFN-γ/IL-4比值有升高趋势(P>0.05)。三仁汤高、中、低剂量组对脾胃湿热证大鼠的形态改变有恢复作用;中、低剂量组能降低湿热证大鼠IFN-γ、IL-4水平(P<0.01);高剂量组能降低IL-4水平(P<0.01),有降低IFN-γ水平的趋势(P>0.05),IFN-γ/IL-4比值反而升高(P≮0.05)。结论脾胃湿热证大鼠细胞免疫和体液免疫均呈亢进状态,Th1/Th2平衡有向Th1反应漂移的趋势,三仁汤能调节脾胃湿热证大鼠的免疫功能,保护胃肠道粘膜。     

三仁汤对脾胃湿热证大鼠血清Th1/Th2细胞因子的影响

摘要：目的探讨三仁汤改善脾胃湿热证大鼠免疫功能的作用机理。方法将50只雄性SPF级SD大鼠随机分为正常对照组、脾
胃湿热模型组、三仁汤（高、中、低剂量）组,观察大鼠体质量、肛温等形态学改变,检测血清γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)
表达水平,取大鼠胃、十二指肠和结肠组织行病理切片,HE染色观察胃肠道炎症情况。结果与正常对照组比较,模型组大鼠肛
温升高,饮水量和摄食量减少,病理提示胃肠道存在炎症损伤,血清IFN-γ和IL-4显著增高（P<0.01）,IFN-γ/IL-4比值有升高趋势
（P>0.05）。三仁汤高、中、低剂量组对脾胃湿热证大鼠的形态改变有恢复作用;中、低剂量组能降低湿热证大鼠IFN-γ、IL-4水平
（P<0.01）;高剂量组能降低IL-4水平（P<0.01）,有降低IFN-γ水平的趋势（P>0.05）,IFN-γ/IL-4比值反而升高（P<0.05）。结论脾
胃湿热证大鼠细胞免疫和体液免疫均呈亢进状态,Th1/Th2平衡有向Th1反应漂移的趋势,三仁汤能调节脾胃湿热证大鼠的免
疫功能,保护胃肠道粘膜。
     

系膜增生性肾小球肾炎患者血清Th1/Th2细胞因子表达的变化

目的 观察系膜增生性肾小球肾炎患者血清Th1和Th2类细胞因子(INF-γ、IL-4、IL-10)表达变化.方法 采用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定10例正常人和25例慢性肾小球疾病患者(轻中度系膜增生性非IgA肾小球肾炎)外周静脉血血清INF-γ、IL-4、IL-10细胞因子水平.结果 系膜增生性肾小球肾炎患者血清INF-γ分泌水平较正常人明显增多(P<0.01),而IL-10分泌水平较正常人明显减少(P<0.05),IL-4分泌水平则与正常人无显著差异(P>0.05),系膜增生性肾小球肾炎患者INF-γ/IL-4、INF-γ/IL-10值均显著高于正常人(P<0.05).结论 系膜增生性肾小球肾炎患者在外周血细胞因子水平存在Th1/Th2免疫失衡,可能参与了系膜增生性肾小球肾炎的免疫发病机制.     

肾移植术后慢性排斥患者外周血Th17细胞的表达

【目的】探讨外周血Th17细胞及相关细胞因子与肾移植术后慢性排斥反应发生的关系。【方法】自2007年1月至2010年8月,在中山大学附属第一医院和第三医院收集尿毒症（尿毒症组）、肾移植术后6个月内未发生慢性排斥反应（非慢排组）及6个月内发生慢性排斥反应（慢排组）患者的外周血共75例,其中每组各25例。采用流式细胞术（FCM）检测外周血中CD4+T细胞中Thl7细胞的频率。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中Th17细胞相关细胞因子白介素-17 (IL-17)、白介素-22 (IL-22)和白介素-23 (IL-23)的水平。分析比较组间差异。【结果】术后慢排组Thl7细胞的频率为（3.82±1.7）%,明显低于非慢排组（22.0±11.0）%和尿毒症组（17.2±8.0）%,差异均有统计学意义（P < 0.01）。肾移植术后慢排组患者产生IL-17的量为（7.8±1.3）pg/mL,明显低于非慢排组（17.0±6.0）pg/mL（P < 0.05）和尿毒症组患者（20.4±9.0）pg/mL（P < 0.01）,差异均有统计学意义。IL-22和IL-23在三组间差异无统计学意义（P > 0.05）。【结论】外周血中Th17细胞可能通过分泌细胞因子IL-17参与了肾移植术后慢性排斥反应的发生。     

电磁辐射急性暴露对Th1/Th2细胞因子平衡的影响

目的 观察电磁辐射对Th1/Th2细胞因子平衡的影响.方法 以平均功率密度为90 mW/cm2 的微波辐照昆明小鼠(4～6周龄,体质量20～25 g,40只,均为雌性)20 min,采用RT-PCR、ELISA检测微波辐照后不同时相点干扰素(interferon-gamma,INF-γ)、白细胞介素4(interleukin4,IL-4)表达量的变化,分析微波辐照对Th1/Th2平衡的偏移.结果 90 mW/cm2 的微波急性辐照会导致INF-γ表达量的增高,辐照后第5天达到峰值,增幅为135.5%(P<0.01);90 mW/cm2 的微波急性辐照使IL-4的表达有降低的趋势,但与对照组相比没有显著差异(P>0.05).结论 平均功率密度为90 mW/cm2 的微波急性辐照会导致昆明种小鼠Th1/Th2平衡向Th1方向偏移.     

3例肾移植术后急性排斥的诊治

目的　提高肾移植术后急性排斥反应 (简称急排 ,AR)的诊治水平。方法　回顾分析 3例肾移植急排患者的临床资料。结果　 3例急排肾移植病人均经抗排斥治疗 ,恢复肾功能。结论　急性排斥反应 ,早期发现、早期诊断并合理应用抗排斥药物 ,有助于急排的治疗。     

除湿止痒合剂对变应性接触性皮炎小鼠模型Th1/Th2相关细胞因子水平的影响

目的:观察除湿止痒合剂对变应接触性皮炎小鼠模型血清中IL-4、INF-γ的变化影响.方法:将48只BALB/C小鼠随机分成4组(空白组,模型组,对照组,中药组),用二硝基氟苯(DNFB)制成变应接触性皮炎小鼠模型,灌胃给药,观察各组小鼠耳部肿胀厚度差的变化,并以酶联免疫吸附试验(ELISA)测定各组小鼠IL-4、INF-γ的水平.结果:中药组及对照组耳厚度差均小于模型组(P<0.05),中药组、对照组小鼠血清中IL-4水平低于模型组小鼠(P<0.05),INF-γ水平无明显差异(P>0.05).结论:除湿止瘁合剂对变应接触性皮炎小鼠模型血清中IL-4有明显抑制作用,提示该药Th2具有一定的调节作用.     

肺炎支原体感染患儿Th1/Th2细胞免疫类型及SOCS1/3 mRNA的表达

目的:观察肺炎支原体(MP)感染患儿早期血清中IFN-γI、L-4的含量和单个核细胞(MNC)中SOCS1、SOCS3的表达,以探讨MP感染的免疫学机制。方法:选取MP感染患儿30例,留取其入院时血样,以健康体检儿童为对照。RT-PCR法测血样MNC中SOCS1,SOCS3的表达,采用ELISA法检测血清中IFN-γ,IL-4的表达水平,并分析其相互关系。结果:MP感染患儿早期IFN-γ的表达和IFN-γ/IL-4的比值比对照组明显增高(P<0.01),IL-4亦稍高(P<0.05);SOCS1的表达较正常对照高(P<0.01),SOCS3的表达较对照无明显差异(P>0.05)。结论:在MP感染早期Th1/Th2均参与了患儿机体的免疫应答,以Th1细胞为主;SOCS1、SOCS3参与了Th1/Th2细胞免疫调节。     

原位同种心脏移植术后早期急性排斥反应的监测与治疗

我院心外科于１９９４年３月成功地为１例１３岁晚期扩张型心肌病女性患者施行了原位同种心脏移植术。术后存活２８ｄ．因第三次心肌急性排斥反应抢救无效死亡。作者强调应采用多种抗排斥反应药物，且需小剂量，对使用抗胸腺细胞球蛋白药物应谨慎．尽管拥有众多的非侵入性检查，但没有一种非侵入检查技术能直接有效地诊断心肌排斥反应，心内膜心肌活检是监测心肌排斥反应最直接可靠的手段而不能被取代。     

消风活血冲剂对哮喘豚鼠BALF Th1/Th2细胞因子产生的影响

目的 观察消风活血冲剂对哮喘豚鼠中支气管肺泡灌洗液(BAIF)Th1、Th2细胞因子产生及调节影响.方法 采用卵白蛋白致敏豚鼠,激发前7 d予以药物干预,测定引喘潜伏期,于诱喘后采集标本,计数BAIF中白细胞总数,并采用ELISA法测定Th1细胞分泌的细胞因子IFN-γ,Th2细胞分泌的细胞因子IL-4、IL-5,采用比色法测定NO含量.结果 消风活血冲剂高剂量13 g/kg及低剂量6.5 g/kg可明显延长引喘潜伏期,减少BALF中白细胞总数,提高IFN-γ水平,降低IL-4、IL-5水平,可降低NO含量.结论 消风活血冲剂可能通过调节NO水平从而调节Th1/Th2细胞之间功能平衡,减轻气道炎症.     

Th1／Th2漂移与高血压患者冠状动脉粥样硬化的关系及意义研究

目的：探讨Th1／Th2漂移与高血压患者冠状动脉粥样硬化的关系。方法：采ELISA法检测，对30例合并冠状动脉粥样硬化的高血压患者（简称AS组）、22例排除冠状动脉粥样硬化的高血压患者（简称EH组）和25例健康体检者的外周血血浆中IFN-γ和IL-4水平进行检测。结果：AS组IFN-γ水平显著增高，与EH组及健康组相比差异有统计学意义（P〈0．01），EH组与健康组相比IFN-γ差异无统计学意义；三组间IL-4差异无统计学意义；AS组IFN-γ与IL-4比值较另两组增大。结论：Th1细胞活性亢进，导致Th1／Th2漂移，促进了高血压患者冠状动脉粥样硬化的发生。     

粉尘螨抗原对脐血Th1/Th2细胞因子表达的影响

目的观察新生儿脐血单个核细胞（CBMCs）Th1/Th2细胞因子的表达,探讨家族过敏史和过敏原刺激对健康足月新生儿Th1/Th2细胞偏移的影响。方法健康足月新生儿30名,家族过敏史阳性组（AD组）及阴性组（对照组）各15名,分离CBMCs,经不同浓度的粉尘螨刺激后,用ELISA法检测培养上清中白细胞介素-4（IL-4）和γ-干扰素（IFNγ-）的含量。结果 （1）低浓度粉尘螨刺激后,与对照组相比,AD组IL-4显著增高,IFNγ-显著降低（均P〈0.01）;（2）高浓度粉尘螨刺激后,与对照组相比,AD组IL-4显著增高（P〈0.01）,但IFNγ-无明显变化（P〉0.05）。（3）对两组新生儿随访观察1年,AD组过敏性疾病发生率明显高于对照组（P〈0.05）。结论母亲有家族过敏史的新生儿,CBMCs呈现Th2相对优势,提示家族过敏史对新生儿Th1/Th2平衡存在影响。