广东省外环境O1/O139群霍乱弧菌毒力基因分型

目的 分析广东省外环境来源O1/O139群霍乱弧菌毒力基因的携带及基因分型特征,为霍乱防控提供依据.方法 选取2008—2009年广东省O1/O139群霍乱弧菌水体分离株69株,水产品分离株16株和同期病例分离株5株,应用多重聚合酶链反应对ctxA、ace、zot、tcpA、tcpI、hlyA、ompU、toxR等8种毒力基因进行检测和分型分析.结果 90株O1/O139群霍乱弧菌均携带hlyA和toxR基因;5株病例菌株中有3株携带8种毒力基因,另外2株小川型菌株为非产毒株,基因型为hlyA⁺toxR⁺ompU⁺zot⁺tcpA⁺tcpI⁺型和hlyA⁺toxR⁺tcpA⁺型;水体菌株中,稻叶型菌株以hlyA⁺toxR⁺ompU⁺ace+zot⁺tcpI⁺型(34.15%)为主,小川型(66.67%)和O139群(70%)以hlyA⁺toxR⁺型为主;水产品菌株中,稻叶型菌株以hlyA⁺toxR⁺ompU⁺tcpI⁺型(75.00%)为主,小川型菌株各种基因型别均有分布,无明显优势基因型别.结论 广东省外环境来源O1/O139群霍乱弧菌以非产毒株广泛存在,毒力基因型别多样.     

杭州市O139群霍乱弧菌耐药变迁及毒力基因携带

目的 研究杭州市1994～2003年分离的O139群霍乱弧菌耐药性变迁以及携带ctxA、tcpA毒力基因的情况。方法 运用K—B法和PCR，检测90株O139群霍乱弧菌对抗生索的敏感性以及是否携带ctxA、tcpA毒力基因。结果 90株O139群霍乱弧菌中无丁胺卡那耐药的菌株，13株对诺氟沙星和环丙沙星耐药；对氨苄青霉索、复方新诺明分别有5年和6年的耐药率为100％；2002、2003年耐药谱增加到7种。87．87％的O139群霍乱弧菌同时携带ctxA、tepA毒力基因。结论10年来分离自杭州的O139群霍乱弧菌的耐药情况日益严重；O139群霍乱弧菌是否携带ctxA、tcpA毒力基因在对抗生素敏感性方面差异有统计学意义。     

浙江霍乱弧菌O139耐药状况及毒力基因研究

目的了解浙江霍乱弧菌O139的耐药状况及毒力基因携带情况。方法采用WHO推荐的改良K-B法,进行了14种抗菌药物的耐药性测定;以多重PCR法对6种毒力相关基因(ctxA、rtxA、Ace、TcpA、Cri、Zot)进行检测分析。结果霍乱弧菌O139主要对SD、AMP、SM、COS、CAR、FURX耐药,耐药率均在76.7%以上;对FPA、CF、CIPX、AKN、较为敏感,敏感率均在94.5%以上;而且不同年份菌株的耐药情况有所不同。所有菌株均携带3种以上毒力基因,其中93.2%携带ctxA基因,86.3%携带全部6种毒力基因。结论霍乱的治疗和预防中应首选CF、AKN、FPA、CIPX等敏感抗菌药物;霍乱弧菌O139的毒力基因携带率高,致病性和流行性均强,所以今后的霍乱防制中应加强对霍乱弧菌O139监测与研究,及时发现和控制疫情蔓延。     

龙泉市首例O139群霍乱弧菌耐药性及毒力基因携带情况研究

目的：研究龙泉市首例O139群霍乱弧菌耐药性及毒力基因携带情况。方法：运用药敏试验及PCR方法．分要该霍乱弧菌的耐药性以及携带ctxA、tcpA毒力基因的情况。结果：该O139群霍乱弧菌对庆大霉素等9种抗生素多重耐药：仅对丁胺卡那、诺氟沙星和环丙沙星敏感；该O139群霍乱弧菌携带ctxA、tcpA毒力基因。结论：在对O139群霍乱弧菌引起霍乱的防治工作中应密切监测其耐药性以及携带毒力基因的情况。     

广西首次分离 O139群霍乱弧菌的病原学特征

目的 了解O139群霍乱弧菌的病原学特征。方法 采用经典的微生物学、噬菌体-生物分型方法进行生化、药敏和流行菌株的分型,并用家兔肠段结扎方法进行霍乱肠毒素检测。结果 4株菌与O139群霍乱诊断血清发生强凝集反应。与O1群多价血清不凝集;在庆大琼脂平板上菌落较O1群霍乱弧菌混浊、隆起。霍乱肠毒素检测均为中等毒力,对氟哌酸、丁胺卡那霉素敏感,对9种抗菌药物耐药。结论 霍乱肠毒素检测为中等毒力,具备引起流行的能力,为流行株。因此加强监测,及时做好防治措施十分必要。     

O139霍乱弧菌分子遗传学研究动态

O139霍乱弧菌作为一种新出现的霍乱病原体,有许多重要的分子特征:溶源性噬菌体CTXΦ具有生物特异性免疫机制,而且有不依赖TCP菌毛的普遍性转导的感染方式;VPI毒力岛由噬菌体VPIΦ携带,可以在菌株间水平转移,这些都为设计生物安全性菌苗提出了难题。染色体上的RTX毒素家族具有细胞毒性;SXT携带多种抗生素抗性基因,可以发生位点特异性重组;pTLC,一种静息质粒也与噬菌体的复制等功能有关;该菌携带多种菌毛噬菌体,可能参与遗传交换,这些对O139霍乱弧菌的致病性和流行都将产生影响。     

O1群和O139群霍乱弧菌致病性的比较研究

目的:比较O1群和O139群霍乱弧菌的致病性。方法:对O1群霍乱弧菌Eltor型小川1b型3株和稻叶1d型3株,及O139群霍乱弧菌6株,从酸敏感性、肠粘膜粘附、产肠毒素及相关基因等方面对两群菌株的致病性做以比较。结果:O1群和O139群霍乱弧菌的酸敏感范围为pH3.05～4.60;平均肠粘膜吸附菌数分别为4.04×106和3.58×106cfu/cm2;兔肠段积液平均分别为1.85和1.80ml/cm;兔红细胞凝集效价分别为1∶128和1∶64;12株霍乱弧菌都携带有ctxA、zot、ace、tcpA基因。结论:O1群和O139群霍乱弧菌的致病性是一致的。     

O139霍乱弧菌分子遗传学研究动态

Ｏ１３９霍乱弧菌作为一种新出现的霍乱病原体,有许多重要的分子特征：溶源性噬菌体ＣＴＸХ具有生物特异性免疫机制,而且有不依赖ＴＣＰ菌毛的普遍性转导的感染方式;ＶＰＩ毒力岛由噬菌体ＶＰＩХ携带,可以在菌株间水平转移,这些都为设计生物安全性菌苗提出了难题。染色体上的ＲＴＸ毒素家族具有细胞毒性;ＳＸＴ携带多种抗生素抗性基因,可以发生位点特异性重组;ｐＴＬＣ,一种静息质粒也与噬菌体的复制等功能有关;该菌携带     

活白水鱼体表检出O139群霍乱弧菌

目的 了解奉贤区海水产品中霍乱弧菌的污染状况,为霍乱防治工作提供实验依据.方法 依据<霍乱防治手册第5版进行霍乱弧菌分离培养、生化及血清学鉴定,同时用PCR方法进行检测.结果 从活白水鱼体表检出1株O139剪群霍乱弧菌.结论 本次检出的1株O139剪群霍乱弧菌为流行株,具有引起流行和大流行的潜力,因此要加强对海水产品的主动监测,预防霍乱的散发和暴发流行.     

霍乱弧菌O139和El Tor菌株tcpA分子特征的研究

[目的]从霍乱弧菌XJ93006、MO45、XJ89079中克隆毒素协同调节菌毛亚单位A（tcpA）基因（包括侧序列）并测序比较。[方法]PCR扩增tcpA片段;克隆该片段;提取质粒经鉴定后测序并利用DNAMAN对该序列进行序列分析,比较。[结果]成功构建XJ93006、MO45、XJ89079 tcpA基因的重组质粒。三株霍乱弧菌及与N16961 tcpA基因及其两侧核酸序列同源性XJ89079和N16961为100%,XJ93006和XJ89079为99.8%,XJ93006和MO45为99.5%,XJ89079和MO45为99.7%。[结论]该研究初步认为我国新疆VC O139与本地EVC关系密切。     

与O139霍乱弧菌血清交叉凝集的麦氏弧菌

目的：对基层实验室上送的6株疑似O139霍乱弧菌进行检测及研究。方法：参照1999年《霍乱防治手册》第五版及相关资料进行检测。结果：该6株菌均系与O139霍乱弧菌血清有交叉凝集的麦氏弧菌。结论：该批菌株不是O139霍乱弧菌。而是麦氏弧菌。     

Reemergence of epidemic Vibrio cholerae O139, Bangladesh

During March and April 2002, a resurgence of Vibrio cholerae O139 occurred in Dhaka and adjoining areas of Bangladesh with an estimated 30,000 cases of cholera. Patients infected with O139 strains were much older than those infected with O1 strains (p<0.001). The reemerged O139 strains belong to a single ribotype corresponding to one of two ribotypes that caused the initial O139 outbreak in 1993. Unlike the strains of 1993, the recent strains are susceptible to trimethoprim, sulphamethoxazole, and streptomycin but resistant to nalidixic acid. The new O139 strains carry a copy of the Calcutta type CTX(Calc) prophage in addition to the CTX(ET) prophage carried by the previous strains. Thus, the O139 strains continue to evolve, and the adult population continues to be more susceptible to O139 cholera, which suggests a lack of adequate immunity against this serogroup. These findings emphasize the need for continuous monitoring of the new epidemic strains.     

Vibrio cholerae O139 Bengal: a descriptive study

A prospective study was conducted to determine the clinical and laboratory characteristics and the clinical course of cholera due to Vibrio cholerae O139 Bengal. The study subjects included 22 adult males with stool culture-proven V. cholerae O139. On enrollment, mean +/- SD concentrations (mmol/L) of serum sodium, potassium, chloride, and bicarbonate were 134 +/- 3, 4 +/- 1, 102 +/- 4, and 13 +/- 4 respectively, and stool sodium, potassium, chloride, and bicarbonate concentrations were 120 +/- 24, 18 +/- 6, 93 +/- 16, and 37 +/- 9 respectively. Seventeen patients (7.8%) had faecal leukocytes ranging from 11 to 50 per high-power field. All V. cholerae O139 isolates (100%) were susceptible to tetracycline, erythromycin, and ciprofloxacin, 92% to furazolidine, and only 5% to trimethoprim-sulphamethaxazole. The median (interquartile) volume of liquid stool during the first 24 hours was 9 (5-12) litre. The median (interquartile) volume of liquid stool and the amounts of intravenous and oral rehydration fluids required during the entire study period were 16 (9-24) litre, 9 (6-18) litre, and 14 (9-20) litre respectively. The median (interquartile) duration of diarrhoea was 80 (48-104) hours. The median (interquartile) duration of excretion of V. cholerae O139 in stool was 5 (3-6) days. Clinical and laboratory features, and case management of cholera due to V. cholerae O139 are very similar to conventional cholera due to V. cholerae O1.     

Vibrio cholerae O139 in Thailand in 1994.

Vibrio cholerae O139 first appeared in India and Bangladesh in 1992. Surveillance for O139 was started at three hospitals in Thailand in 1993. By 1994 all three hospitals surveyed in Thailand had experienced an increase in Vibrio cholerae O139 infections.     

用脉冲场凝胶电泳方法对O139霍乱弧菌分型的研究

目的：利用脉冲场凝胶电泳（PFGE）技术探讨O139群霍乱弧菌的分子分型方法。方法：用SfiⅠ酶和NotⅠ酶切O139群霍乱弧菌染色体DNA，经脉冲场凝胶电泳进行片段分离。结果：14株O139群霍乱弧菌经SfiⅠ酶切后电泳分离可得一个PFGE型，用NotⅠ酶切电泳可分为2个PFGE型。结论：脉冲场凝胶电泳技术分析O139群霍乱弧菌，分型发现微小差别有助于分析追踪疫情和来源。     

O139群霍乱弧菌L型诱导实验观察

目的：探讨O139群霍乱菌的L型变异。方法：采用抗生素,胆盐和蒸馏水实验室诱导方法进行观察,结果：发现O139群霍乱弧菌MO45菌株经上述3法诱导可发生L型变异,其菌落特征和菌体形态均与L型的描述相符,结论：实验结果证实O139群霍乱弧菌可诱导成L,其变异过程与ElTor弧菌相似,检测自然界中亦存在O139群霍乱弧菌的L型。     

霍乱弧菌O139感染棘阿米巴的实验研究

目的探讨霍乱弧菌能否在阿米巴原虫内生存。方法采用霍乱弧菌O139与多噬棘阿米巴的共培养方法，通过倒置显微镜、革兰染色和电镜超薄切片观察霍乱弧菌在阿米巴滋养体和包囊内生存情况。结果培养24h，革兰染色可见霍乱弧菌O139已进人阿米巴滋养体的吞噬泡内，随共培养时间的延长，可见吞噬泡内霍乱弧菌O139增多。电镜下可见霍乱弧菌O139在阿米巴环境中的不同感染期：包括胞饮期、吞噬泡形成期、增殖期及滋养体裂解释放，部分感染的滋养体发生包囊化，胞浆吞噬泡内可见存活O139弧菌。结论霍乱弧菌O139能在棘阿米巴滋养体内生存繁殖，并存活于包囊胞浆的吞噬泡中，因此棘阿米巴原虫可能是霍乱弧菌O139的环境贮存宿主之一。     

湖北省咸宁市学龄前儿童营养不良危险因素的病例对照研究

营养不良威胁儿童的生存、生命质量和后续发育，也关系到我国人口素质的提高。本研究旨在了解湖北省咸宁市学龄前儿童营养不良的危险因素，为有效防治儿童营养不良提供科学依据。