提高骨髓石蜡切片质量的几点体会

随着血液学的高速发展,近年来骨髓活检也越来越多地应用于临床.骨髓活检组织制片也是科研和临床病理经常遇到的重要技术问题.现在大多数单位都采用石蜡切片技术制作骨髓活检组织,但因骨髓组织富含钙盐及含有一定量的脂肪,按常规技术制作,常出现组织切片不完整、结构破坏、染色模糊不清,不利于诊断.另外石蜡制片的程序繁多,任何一个环节出现问题,均可影响切片的质量,而直接影响病理报道的准确性.     

骨髓活检组织制片中改良脱钙液的应用及常见问题分析

正在临床病理外检工作中,骨髓组织由于含有大量的钙盐而比较坚硬,需经过脱钙处理后才能进行常规制片,脱钙不全或脱钙过度均影响骨髓HE染色及免疫组化染色效果,降低病理诊断的准确率。作者在长期的骨髓制片工作中,摸索出一种适合骨髓组织的改良EDTA脱钙液,提高了骨髓制片质量和染色效果。本文现就骨髓活检标本固定及取材、脱钙、制片和染色等环节进行总结,供广大同仁分析交流,共同提高骨髓活检组织制片和染色质量。     

骨髓活检标本脱钙方法的比较

在病理外检制片和科研工作中,血液科送检较多的是骨髓活检标本,也是较难制片的组织之一。骨髓石蜡切片需经完全脱钙,才能制成理想的石蜡切片。如何合理有效地选择脱钙液,这对于制片的完整,保存骨髓细胞结构使ＨＥ染色清晰,提高骨髓制片质量是非常重要的。我科从１９９７年初开始采用混合脱钙液代替传统的５％硝酸用于骨髓活检标本脱钙,经实际应用效果良好。１　　材料与方法①　混合脱钙液［１］：甲醛１００　ｍｌ,甲酸８０　ｍｌ,盐酸７０　ｍｌ,三氯化铝６０　ｇ,冰醋酸２５　ｍｌ,生理盐水１００　ｍｌ。②　经１０％甲醛固…     

微波骨髓活组织快速半薄石蜡切片的制备

骨髓穿刺活组织检查（骨髓活检）是确诊血液疾病的主要技术之一。微波骨髓活检组织快速半薄石蜡切片的制备，把微波辐射应用到骨髓活检组织的固定、脱水、透明、浸蜡及其切片染色等主要步骤中，结果仅需２～３ｈ即可完成切片制作，而且制片质量近似骨髓组织塑料包埋切片技...     

小鼠腺胃常规显微制片的技术优化

正基于石蜡制片和H-E染色的常规显微制片技术在临床病理诊断及基础医学的教学科研中应用十分广泛。高质量的显微切片应能最大程度维持组织的形态,做到切片完整,厚度均匀,无显著人工假象,染色对比清晰等~([1])。要想从根本上提高制片质量,须依靠技术方法的标准化和制片条件的优化。以小鼠腺胃常规制片为例。小鼠的腺胃与人类的胃在层次结构和组织学特点上近似~([2]),常用于教学和科研观察。但小鼠胃制片时常见     

介绍一种改良的快速石蜡切片方法

基层医院手术中通常做快速石蜡切片病理检查,切片质量的好坏直接关系到诊断结果的准确性.我们将微波技术应用到超声波快速石蜡切片中,并在操作过程中作了时间上的改进,结果在制片质量或组织染色对比度上,都有很大的改观,且利于病理医师的诊断.     

影响淋巴结HE制片因素的探讨

淋巴瘤因其组织结构致密、细胞丰富等特点,使组织在脱水、透明、浸蜡、切片、染色等方面都受到一定的影响,导致病理诊断困难。作为一名合格的病理医师,要求懂得组织的石蜡包埋和HE染色的机制,熟练掌握石蜡切片和HE染色技术的操作并能够制出一张优质的病理玻片标本。本实验从石蜡切片和HE染色的机制出发,重点探讨淋巴结HE制片的注意事项。     

超声快速石蜡切片对免疫组化抗原检测的影响

超声快速石蜡切片因其制片质量可以与常规石蜡切片相媲美,并且随着技术的不断改进,制片的时间能满足术中快速诊断的需要,使得超声快速石蜡切片在一些中小医院的应用较为广泛.免疫组化染色技术已经广泛应用到各级医院的临床病理诊断中,对疾病分型和预后判断起着至关重要的作用.我们对超声快速石蜡切片对免疫组化抗原检测是否产生影响这一问题进行探讨,介绍如下.     

超声快速石蜡与常规石蜡在胃肠道间质瘤Sanger测序中结果的对比分析

正随着病理技术的发展,各种利用超声震动、恒温水浴和专用试剂对病理组织完成固定、脱水、透明全过程于一体的病理组织处理仪得到广泛应用,是目前国内病理科常用的快速制片方法之一[1]。因其方法简便快捷、省时省力,很多病理科会用超声快速石蜡方法对胃肠镜活检组织进行制片,据文献报道,在某些活检组织中,超声快速石蜡制片可以获得跟常规制片一致的HE染色的形态学结果[2]。在后续没有手术大标本的情况下,还需要用活检组织对胃肠道间质瘤     

介绍一种骨髓组织脱钙新方法

骨髓组织活检标本来之不易 ,在制片过程中若处理不当 ,会给诊断造成极大的困难。如何既快又好地制作高质量的骨髓病理组织切片对正确诊断尤为重要。笔者通过 2年的反复实践 ,摸索出一种骨髓组织脱钙后的常规制片方法(简称“新法”) ,现介绍如下。1　材料与方法1.1　标本　中南大学湘雅医院骨髓穿刺的活检组织 4 0例。1.2　试剂　脱钙液 :2 %硝酸 ,即浓硝酸 2ml加 98ml自来水 ;固定液 :10 %福尔马林液 ;染色液 :Gill苏木精 ,沉淀酸化伊红Y乙醇液。1.3　方法　穿刺活检组织入 10 %福尔马林液中固定 30min ;入 2 %硝酸脱钙液 ,室温下脱钙。在…     

硬脂酸和组织脱蜡透明液替代二甲苯在病理制片中的应用

目前绝大多数病理切片的制作仍延用传统的石蜡切片制作技术.病理制片过程中,组织的透明和切片染色前后的脱蜡、透明三个环节,普遍采用二甲苯作为透明、脱蜡剂.二甲苯属有毒物质,其毒性主要是对中枢神经和植物神经的麻醉及粘膜的刺激作用[1],且二甲苯在组织处理过程中,易使组织收缩、硬化变脆[2],对切片质量有一定影响.为此,我们通过反复试验,对传统石蜡病理制片方法进行了改良,应用无毒性的硬脂酸和组织脱蜡透明液完全替代二甲苯,取得了良好的制片效果,并有效避免了二甲苯对人体的危害及对环境的污染.     

显示石蜡组织切片脂质的染色方法

在实验动物脂质代谢模型中，为了观察组织中脂质的分布情况，笔者采用石蜡包埋连续切片，进行脂质染色，克服了冷冻切片不能有效原位固定脂质的局限性。经过改进油红乙醇液和Tracy染色法的石蜡制片，获得较好的染色效果。     

HE制片质控要求

病理制片技术是病理学的一项重要组成部分。它广泛地应用于临床病理诊断、教学和科研工作。一位病理技术工作者 ,首先要求能懂得组织的石蜡包埋和ＨＥ染色的机制 ,熟练掌握石蜡切片和ＨＥ染色技术的操作 ,能够制出一张优质的病理玻片标本。由于近年病理科室的迅速建立 ,不少病理技术人员没有得到系统而严格的培训 ,故有对ＨＥ制片质控要求有进一步明确的必要。1　ＨＥ玻片标本的制作病理制片技术可以说是医学科学中的一门工艺。病理技术工作者把来自临床患者、尸体解剖或动物实验的组织标本通过固定、脱水、透明、包埋、切片、贴片、烤片和…     

固定对IgG抗原活性的影响

免疫组织化学染色（ＩＣＳ）以其突出的优点，已广泛用于病理学诊断、鉴别诊断及相关学科的研究之中〔１，２〕，其染色成功与否和抗原性的妥善保存极为重要。影响石蜡切片中抗原性的主要因素有固定、制片、ＩＣＳ中的封闭内源酶、抗原修复或暴露、组织存档时间等〔３～５...     

改良EDTA脱钙液在骨髓活检组织中染色效果观察

正骨髓活检结合免疫组化染色对于血液系统疾病诊断、判断临床预后具有重要意义~([1])。骨髓组织细胞种类多和组织学形态丰富,部分病例需结合免疫组化染色以明确诊断~([2])。骨髓组织质地较硬,需脱钙后才能进行常规制片和免疫组化染色~([3])。其中最常用的酸类脱钙液易造成组织细胞表面抗原破坏或丢失,影响免疫组化染色结果~([4])。EDTA的脱钙作用优于酸性脱钙液~([5]),但脱钙速度慢、脱钙后组织会稍微变硬~([6])。本实验通过比较改良EDTA脱钙液脱钙骨髓与混合酸脱钙液脱钙及不脱钙骨髓的HE染色和免疫组化染色效     

塑料包埋制片技术在骨髓诊断中的应用

塑料包埋制片技术在骨髓诊断中的应用周荣妹骨髓活检标本常用传统的石蜡包埋及ＨＥ染色法，经脱钙和长时间的固定，常使细胞形态失真和某些物质的丧失，从而影响了结果判定。至８０年代初，国外用塑料包埋薄切片技术处理骨髓活检标本，细胞收缩小，能切出１～２μｍ的满意...     

四种脱钙液对骨和骨髓组织及结构影响的比较

背景：由于骨和骨髓组织结构非常特殊,在常规的病理制片过程中,要同时显示坚韧质硬的骨组织和含有多种幼稚娇嫩造血细胞的骨髓组织是非常困难的。目的：选择一种既能完全除去骨组织中的钙质,又能保护骨髓组织及细胞结构不受破坏的最佳脱钙液。方法：将含骨髓组织的犬长骨组织随机分4组,同等条件下,14%硝酸甲醛生理盐水溶液;14%硝酸水溶液;20%甲盐酸甲醛生理盐水溶液和20%甲盐酸水溶液4种不同脱钙液脱钙,记录脱钙时间,常规脱水、切片、苏木精-伊红染色,镜下观察,对比4种脱钙液对骨和骨髓组织常规病理切片质量和其苏木精-伊红染色效果。结果与结论：14%硝酸甲醛生理盐水溶液组脱钙能力最强,脱钙最均匀,耗时最短,既能有效完全除去骨皮质中的钙质,又能保护骨髓组织及细胞的形态完好,切片质量和苏木精-伊红染色的效果最佳;14%硝酸水溶液组脱钙液,使骨组织疏松发泡,组织变黄,对组织的损伤大,脱钙不均匀,组织切片不完整,制片质量和苏木精-伊红染色的效果最差;20%甲盐酸甲醛生理盐水溶液组对组织的脱钙能力、损伤程度、制片质量和苏木精-伊红染色效果都比14%硝酸甲醛生理盐水溶液组稍差;20%甲盐酸水溶液组对骨和骨髓组织的损伤小,脱钙效果好,切片质量和苏木精-伊红染色的效果佳,介于20%甲盐酸甲醛生理盐水溶液组和14%硝酸水溶液组之间。结果表明,4种脱钙液对骨和骨髓组织都具有良好的脱钙能力,制片质量及苏木精-伊红染色效果比较,14%硝酸甲醛生理盐水溶液> 20%甲盐酸甲醛生理盐水溶液> 20%甲盐酸水溶液> 14%硝酸水溶液;14%硝酸甲醛生理盐水溶液最适用于临床常规病理制片中骨和骨髓组织的脱钙。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

石蜡切片在检查甲真菌病中的应用

石蜡切片在检查甲真菌病中的应用杨群胥维勇△夏邦志△兰长贵采用石蜡切片，ＰＡＳ染色是一种检查真菌的常用方法，但该法用于指（趾）甲真菌病标本检查有一定的困难，因甲组织过硬，病甲易脆，制片难度大而未被广泛采用。我们经过反复实验摸索出一种用石蜡切片检查甲真菌...     

微波技术在快速石蜡切片中的应用

目前在手术快速病理诊断中多采用冰冻切片及快速石蜡切片等方法,由于冰冻切片需要昂贵的冰冻切片机,在基层很难推广,而快速石蜡切片则由于耗时较长,往往耽搁了诊断时间。为了进一步改进快速石蜡切片方法,提高制片速度,本文应用微波技术于快速石蜡切片中,旨在探讨其应用价值。1 材料与方法     

显示DNA含量的快速Feulgen染色技术及应用

细胞的DNA含量分析对判断肿瘤的良恶性及预后有重要参考价值[1 3 ] ,然而传统的Feulgen染色操作时间较长 ,无法应用于冷冻切片、快速石蜡切片或组织印片等快速病理制片过程。我们尝试了应用微波处理的快速Feulgen染色 ,大大缩短了染色时间 ,并取得了良好效果 ,满足了快速病理诊断的要求。一、材料和方法1.材料 :复旦大学华山医院近期外科手术切除的各 5例乳腺纤维腺瘤及乳腺癌标本 ,例 1～ 5为纤维腺瘤 ,例 6～ 10为腺癌 ,均分别制成印片、冷冻切片、快速石蜡切片各 2份。2 .试剂及仪器设备 :常规配制的Schiff试剂、0 .5 %偏重亚硫酸钠溶…