左旋龙脑对UVB辐射后小鼠皮肤光损伤的影响

目的:研究左旋龙脑对中波紫外线(UVB)照射后小鼠皮肤光损伤的影响。方法:通过UVB照射Balb/c小鼠建立光损伤模型,创面外用左旋龙脑,每天1次,连续给药11 d;在伤后不同时相点取材,HE染色观察皮肤组织的病理变化,对皮肤红斑、水肿反应进行评分;测定左旋龙脑对创面愈合时间、组织含水量、8-OHdG、IL-6和NF-κB的影响。结果:与正常组相比,光损伤小鼠红斑、水肿指数明显增加;与模型组相比,左旋龙脑组红斑、水肿指数明显减轻,结痂脱落时间减少,皮肤组织中8-OHdG、IL-6和NF-κB的水平显著降低(P0.05,P0.01);HE染色显示模型小鼠皮肤表皮增厚明显,伴炎性细胞浸润,经左旋龙脑处理后,上述病理改变减轻。结论:左旋龙脑可能通过清除光产物8-OHdG、抑制NF-κB对IL-6的释放的调节作用,使光损伤组织中IL-6下降而起抗炎作用,促进光损伤伤口愈合。     

玉屏风散抗角质形成细胞光损伤作用的研究

目的探讨玉屏风散对皮肤光老化角质形成细胞生长增殖的影响。方法采用血清药理学方法制备玉屏风散含药血清,紫外线照射建立细胞光老化模型,以不同浓度含药血清处理光老化细胞,观察细胞形态的变化,以MTT法和集落细胞形成能力实验测定细胞活力及增殖能力。结果紫外线能够显著损伤细胞形态,抑制其生长和增殖;玉屏风散含药血清具有抵抗紫外线对细胞损伤的作用,以服用8g生药/kg大鼠的含药血清作用24h效果最佳。结论玉屏风散含药血清能够缓解紫外线对角质形成细胞损伤,具有抗皮肤光老化的作用。     

栀子油对紫外辐射致ICR小鼠皮肤损伤的保护作用研究

目的:通过高强度中波段紫外线(UVB)照射ICR小鼠建立皮肤紫外损伤模型,研究栀子油对UVB所致的小鼠皮肤损伤的保护作用。方法:ICR小鼠按体重随机分为7组,空白对照组、模型组、基质组、维A酸乳膏组、4%栀子油组、7%栀子油组、10%栀子油组,通过UVB灯辐射背部剃毛小鼠建立皮肤紫外损伤模型,给药组紫外照射前2h涂抹药物,连续给药30 d,观察皮肤受损情况并每5天进行小鼠皮肤宏观评分;给药结束后取小鼠背部辐射皮肤进行HE和Masson染色,观察皮肤基底膜分解、表皮增厚、炎症细胞浸润及胶原降解等病理情况;最后采用蛋白免疫印迹法分析皮肤中具有降解基底膜的基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9的表达量。结果:模型组小鼠皮肤损伤严重,紫红溃烂结痂,呈皮革状,模型建立成功;4%、7%、10%栀子油组与模型组相比,皮肤紫外损伤程度明显减轻,炎症细胞浸润减轻,基底膜分解与真皮胶原流失减少,胶原排列更加有序,MMP-2、MMP-9蛋白合成减少。结论:栀子油可以防治UVB所致的ICR小鼠皮肤损伤,其作用机制可能与栀子油抑制MMP-2、MMP-9的表达有关。     

光敏汤对HaCaT细胞表达IL-10影响研究

目的:研究光敏汤对角质形成细胞HaCaT细胞表达IL-10的影响,初步探讨光敏汤的光保护作用。方法:将HaCaT细胞分为光敏汤Ⅰ号组、光敏汤Ⅱ号组、甲氨蝶呤(MTX)阳性对照组、空白对照组、UVB对照组。HaCaT细胞以30m J/cm2剂量的UVB照射后培养6h、12h、24h、48h采用ELISA法检测各组HaCaT细胞IL-10水平。结果:UVB辐射可增强HaCaT细胞IL-10表达;UVB照射后48h光敏汤Ⅰ号组、光敏汤Ⅱ号组、甲氨蝶呤(MTX)阳性对照组均可有效降低HaCaT细胞分泌IL-10,组间比较差异有统计学意义(P0.05);UVB照射后72h光敏汤Ⅱ号组的效果优于甲氨蝶呤(MTX)阳性对照组,组间比较差异有统计学意义(P0.05);光敏汤Ⅰ号组与甲氨蝶呤(MTX)阳性对照组组间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:光敏汤Ⅱ号预防UVB照射所致炎症比传统药物效果更佳,能减少产生HaCaT细胞IL-10。     

杜仲对紫外线诱导的人皮肤角质形成细胞光老化模型的影响

目的:考查杜仲乙醇提取物对人皮肤角质形成细胞光老化模型的影响,探讨杜仲抗皮肤衰老的作用和机理。方法:UVB照射HaCaT细胞建立光老化细胞模型,用不同浓度的杜仲乙醇提取物进行干预,以倒置显微镜观察细胞形态,使用MTT法检测细胞活性,以细胞培养液中LDH活性为指标评价细胞膜的损伤程度。结果:UVB照射后明显引发HaCaT细胞光老化反应,经50μg.mL-1和100μg.mL-1杜仲乙醇提取物干预后,细胞形态发生改善,细胞活性显著提高,分别为63.52%(P0.01)和62.53%(P0.05),培养液中LDH活性显著下降,分别为2547U.L-1(P0.01)和(2665±87.73)U.L-1(P0.05)。结论:杜仲乙醇提取物可以减轻UVB诱导HaCaT细胞的光损伤,最佳作用浓度为50μg.mL-1,作用机制可能与其能够清除氧自由基、提高细胞活性、保护细胞膜免受损伤而降低LDH的泄漏有关。杜仲具有抗皮肤衰老的潜力。     

不同剂型表没食子儿茶素没食子酸酯对中波紫外线辐射后BALB/C小鼠表皮细胞凋亡的影响

 目的观察不同剂型表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)-epigallocatechin-3-gallate,EGCG]对慢性中波紫外线(UVB)辐射后BALB/C小鼠表皮细胞凋亡的影响。方法不同剂型EGCG(溶液、乳膏及脂质体)局部外用于小鼠背部皮肤后给予30mJ·cm^-2的UVB照射,每天1次持续30d,TUNEL法检测小鼠表皮中的凋亡细胞。结果不同剂型的EGCG均表现为促凋亡作用,乳膏和脂质体组效果强于溶液组(P<0.05),乳膏组和脂质体组之间未显示统计学差异(P>0.05)。结论EGCG对慢性低剂量UVB辐射后的小鼠表皮细胞有促凋亡作用,乳膏和脂质体效果较溶液显著。     

枸杞复方颗粒制剂对紫外线诱导的黄褐斑小鼠皮肤损伤的防治效果研究

目的：观察枸杞复方颗粒制剂防治紫外线（UVB）诱导的黄褐斑小鼠皮肤损伤的效果。方法：40只ICR雌性小鼠随机分为正常组、模型组、阳性组及中药组,每组10只。造模前1 d开始药物干预,阳性组灌胃100 mg/kg维生素C水溶液;中药组灌胃9.3 g/kg枸杞复方颗粒制剂水溶液;正常组和模型组灌胃等体积0.9%氯化钠溶液;连续干预15 d。药物干预第2天除正常组外,其余各组小鼠连续14 d照射UVB （每天2次,每次1 h）诱导小鼠形成黄褐斑。采用苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠皮肤组织病理变化;免疫组织化学法观察小鼠皮肤黑色素表达;分光光度法检测小鼠皮肤组织酪氨酸酶、总抗氧化能力（T-AOC）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）、过氧化氢酶（CAT）和丙二醛（MDA）表达。结果：与正常组比较,模型组小鼠皮肤表现出皱纹和暗沉,表皮上皮细胞、炎症细胞及皮脂腺出现增生,皮肤组织中黑色素、酪氨酸酶和MDA水平增加（P<0.05）;T-AOC、CAT和T-SOD有降低趋势,但差异无统计学意义（P>0.05）。与模型组比较,阳性组和中药组小鼠皮肤损伤有所缓解;皮肤组织中黑色素、酪氨酸酶水平降...     

青蒿素对UVB照射小鼠表皮c-kit和PAR-2蛋白表达的抑制作用

目的：研究青蒿素对紫外线照射后小鼠表皮c-kit和PAR-2蛋白的表达,探讨青蒿素光保护作用的可能机制。方法：30只BALB/C小鼠分为3组,正常对照组,给予生理盐水灌胃;模型对照组及青蒿素组分别给予生理盐水及青蒿素灌胃后进行UVB照射。各组灌胃均为100mg/（kg.d）,每日1次,持续2周。UVB照射每次剂量1 J/cm2,每日1次,共2周,累积剂量14 J/cm2,采用免疫组化检测各组小鼠表皮中干细胞因子受体（c-KIT）和蛋白酶激活受体-2（PAR-2）表达量的变化。结果：UVB反复照射后,青蒿素组皮肤中c-kit和PAR-2表达水平均明显低于模型对照组（P〈0.05）,且c-kit和PAR-2表达水平呈正相关性（P〈0.05）。结论：青蒿素可明显抑制UVB反复照射小鼠皮肤中c-kit和PAR-2的表达,提示系统性应用青蒿素对UVB致小鼠皮肤光损伤有保护作用。     

黄柏中抑制细胞免疫反应的成分

前文作者曾报道从中药黄柏(Phellodendri Cortex)中分离到季胺生物碱木兰碱和黄柏碱,两者均能抑制小鼠局部移植物抗宿主反应。本文对黄柏碱进行集中研究,观察其对细胞和体液免疫反应的作用。①黄柏碱、强的松龙醋酸酯(Pred)和环磷酰胺(CY)对X-射线辐射小鼠局部移植物抗宿主反应的影响:对CBF_1小鼠以600R X-射线辐射,辐射后立即经皮下注入BALB/c小鼠脾细胞悬浮液,引起细胞转移并产生局部移植物抗宿主     

表没食子儿茶素没食子酸酯下调紫外线诱导小鼠皮肤TNF-α mRNA及p53蛋白水平的研究

目的研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对中波紫外线(UVB)慢性辐射诱导BALB/c小鼠皮肤TNF-αmRNA表达及p53蛋白表达水平的影响。方法EGCG局部外用于小鼠背部及耳部皮肤后给予不同强度的UVB辐射,每日1次,连续1个月,RT-PCR法检测不同处理条件下小鼠背部皮肤组织中TNF-αmRNA的表达水平,免疫组化法检测耳部皮肤组织中p53蛋白表达水平。结果经β-actin内参校正后,RT-PCR示不同剂量UVB慢性辐射后小鼠皮肤中TNF-αmRNA表达水平较对照组升高,但表达水平与UVB辐射强度间无明确的剂量依赖关系。UVB慢性辐射诱导小鼠皮肤p53蛋白表达,且表达水平与UVB辐射强度间呈剂量依赖关系。EGCG处理后可下调UVB辐射诱导的TNF-αmRNA水平及p53蛋白表达。结论UVB辐射能诱导小鼠皮肤TNF-αmRNA及p53蛋白表达,EGCG可干预UVB辐射诱导的上述作用。     

镰形棘豆总黄酮霜防紫外线损伤作用研究

目的:研究镰形棘豆总黄酮霜对中波紫外线(280～320 nm,UVB)致大鼠皮肤损伤的防护作用。方法:采用涂霜(10 mg/cm2)后再照射5 min的方法,连续照射1 w;对各组大鼠皮肤组织进行外观和显微学观察;用比色法测定大鼠皮肤组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、羟脯氨酸(Hyp)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽-S转移酶(GST)、过氧化氢酶(CAT)和羟自由基(.OH)的活力或含量。结果:镰形棘豆总黄酮霜能有效防止紫外线照射对皮肤造成的外观和病理学损伤,提高皮肤组织中SOD(P<0.001)、GSH-Px(P<0.001)、GST(P<0.05)、CAT(P<0.01)活性及Hyp含量(P<0.001),降低MDA、.OH的含量(P<0.001)及GSH的活性(P<0.001)。结论:镰形棘豆总黄酮霜能有效防护紫外线,防止皮肤损伤。     

姜黄素对UVB辐射诱导HaCaT细胞凋亡的抑制作用

目的:建立中波紫外线(UVB)对体外培养的永生化人角质形成细胞(HaCaT细胞)辐射损伤病理模型,探讨姜黄素(Cur)对其细胞辐射损伤的保护作用。方法:以10、20、30、40和50m J/cm2的UVB辐照其细胞,分别在辐照后6、12、18、24、48和72h,用MTT和流式细胞仪检测细胞活性及其凋亡的变化,建立辐照损伤病理模型;用30m J/cm2的剂量辐照其细胞后,立即分别给予0.625、1.25、2.5和5μg/mL的Cur处理,在处理18h后检测其细胞凋亡。结果:HaCaT细胞经UVB辐照后,以剂量和时间依赖方式抑制其细胞存活,且主要由于细胞凋亡引起;Cur以浓度依赖方式抑制由UVB所致的细胞凋亡。结论:Cur能抑制UVB辐射诱导的HaCaT细胞凋亡,对UVB辐射损伤HaCaT细胞具有保护作用,其作用机制可能与Cur清除体内自由基而增强细胞的抗氧化能力有关。     

川芎嗪对中波紫外线辐射后细胞光产物影响及其光保护作用机制的研究

目的观察中波紫外线(UVB)辐射后永生化角质形成细胞株(HaCaT细胞)中光产物环丁烷嘧啶二聚体(CPDs)的产生和清除情况,观察川芎嗪对UVB辐射后细胞光产物的影响并探讨其保护作用机制。方法采用30mJ/cm2UVB照射培养的HaCaT细胞,加入川芎嗪干预处理,采用免疫组织化学法检测CPDs,以RT-PCR法和Western blotting法检测各受试组中p53和增殖细胞核抗原(PCNA)的mRNA和蛋白的表达水平。结果UVB辐射后HaCaT细胞中CPDs生成,0.5h达高峰,辐射后4h内清除速率较快,4h后清除速率较慢直至辐射24h。川芎嗪处理UVB辐射的细胞中CPDs少于单纯照射组(P<0.05)。川芎嗪可下调p53(34.9%)和PCNA(30.9%)的mRNA表达,还可下调p53(23.1%)和PCNA(24.9%)的蛋白表达。结论HaCaT细胞对UVB照射所致光产物CPDs的清除存在快速期及慢速期;川芎嗪可降低光产物CPDs水平。川芎嗪的光保护作用可能与其下调修复相关调控分子p53和PCNA基因及蛋白表达有关。     

UVA/UVB联合照射治疗马拉色菌毛囊炎132例疗效观察

目的:观察UVA/UVB联合照射治疗马拉色菌毛囊炎的疗效及安全性。方法:我科采用上海希格玛公司生产的紫外线光疗仪SS-03A,行UVA/UVB联合照射治疗马拉色菌毛囊炎132例。结果:治愈127例,显效5例。不良反应主要表现为照射部位出现皮肤轻度红斑、脱屑,有轻度瘙痒、辣痛感及色素沉着。结论:UVA/UVB联合照射治疗马拉色菌毛囊炎疗效好、不良反应少、患者易于接受。     

参附汤对移植小鼠造血干细胞归巢干预作用的研究

目的:观察参附汤对移植后小鼠造血干细胞归巢的影响。方法:以转GFP基因的Balb/c荧光小鼠作为供鼠,以普通Balb/c小鼠为受鼠,进行造血干细胞移植,移植后抽取4只小鼠作为单纯照射组以观察照射剂量是否充足外,其余小鼠随机分为参附组和空白组,参附组给予参附汤,空白组给予0.9%生理盐水灌胃,分别于移植后+3、+7、+14天随机抽取骨髓标本,用激光共聚焦显微镜观察荧光细胞的归巢数量,流式细胞仪检测骨髓单个核细胞的sca-1+细胞的表达率。结果:激光共聚焦显微镜检测显示,参附组小鼠造血干细胞归巢的数量较空白组增多,并随移植时间的推移,呈逐渐增多的趋势。流式检测显示,骨髓单个核细胞的sca-1+细胞+3、+7、+14天的表达率分别为(5.36±1.27)%、(5.77±1.14)%、(5.42±1.14)%,与空白组相比,二者间有显著性差异(P<0.05)。结论:具有温阳补肾作用的参附汤能促进自体移植小鼠造血干细胞的归巢。     

仙人掌对辐射小鼠bcl-2和p53基因表达影响

目的测定仙人掌对辐射小鼠bcl-2与p53基因表达影响。方法以UVB辐照制备损伤模型,预先给予仙人掌,以RT-PCR测定仙人掌对辐射小鼠bcl-2与p53基因表达量的影响。结果仙人掌对辐射小鼠bcl-2的基因表达降低有保护作用,使辐射后p53基因表达降低。结论仙人掌具有一定的防辐射作用。其抗辐射作用与其调控细胞bc1-2与p53基因有关。     

Photoprotective Activity of Vulpinic and Gyrophoric Acids Toward Ultraviolet B‐Induced Damage in Human Keratinocytes

Vulpinic and gyrophoric acids are known as ultraviolet filters for natural lichen populations because of their chemical structures. However, to the best of our knowledge, there has been no reference to their cosmetic potential for skin protection against ultraviolet B (UVB)‐induced damage and, consequently, we propose to highlight their photoprotective profiles in human keratinocytes (HaCaT). Therefore, vulpinic acid and gyrophoric acid were isolated from acetone extracts of Letharia vulpina and Xanthoparmelia pokornyi, respectively. Their photoprotective activities on irradiated HaCaT cells and destructive effects on non‐irradiated HaCaT cells were compared through in vitro experimentation: 3‐(4,5‐dimethylthiazol‐2‐yl)‐2,5‐diphenyltetrazolium bromide and lactate dehydrogenase assays, 4′,6‐diamino‐2‐phenylindole and tetramethylrhodamine B isothiocyanate‐phalloidin staining protocols. Both of the lichen substances effectively prevented cytotoxic, apoptotic and cytoskeleton alterative activities of 2.5 J/cm² UVB in a dose‐dependent manner. Moreover, vulpinic and gyrophoric acids showed no toxic, apoptotic or cytoskeleton alterative effects on non‐irradiated HaCaT cells, except at high doses (≥400 μM) of gyrophoric acid. The findings suggest that vulpinic and gyrophoric acids can be promising cosmetic ingredients to photo‐protect human skin cells and should therefore be further investigated by in vitro and in vivo multiple bioassays. Copyright © 2015 John Wiley & Sons, Ltd.     

In vitro and in vivo anti-photoaging effects of an isoflavone extract from soybean cake

Ethnopharmacological relevance

Soy has been used in traditional Chinese medicine for thousands of years for its health and nutritional benefits, as well as to treat and care for the skin. Advanced skin care research has shown that soy isoflavone and genistein are effective in reducing damage to the skin from the sun.

Aim of the study

To study the protective effects of isoflavone extract from soybean cake against the UVB-induced skin damage.

Materials and methods

The in vitro effects and possible mechanisms of soybean extract on UVB protection were determined in HaCaT cells. In the in vivo study, ICR-Foxn/^nu mice were irradiated with UVB. The epidermal thickness, catalase and the expressions of cyclooxygenase-2 (COX-2) and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) were detected to evaluate the antioxidant and anti-inflammatory activities of the isoflavone extract.

Results

Our in vitro studies showed that UVB-induced HaCaT cell death and the phosphorylation of p38, JNK, and ERK1/2 decreased in the presence of isoflavone extract. In the in vivo studies, we found that the topical application of isoflavone extract before UVB irritation decreased the epidermal thickness and the expressions of COX-2 and PCNA and increased catalase concentration. These results showed anti-photoaging effect of isoflavone extract from soybean cake involved the inhibition of UVB-induced apoptosis and inflammation.

Conclusions

It is shown that isoflavone extract from soybean cake may be functional cosmeceutical candidate for skin photoaging.