CYP2D6*10基因多态性与美托洛尔治疗高血压疗效的关系 (英文)

目的：研究CYP2D6＊10基因多态性与美托洛尔治疗高血压疗效的关系。方法：60例原发性高血压患者口服美托洛尔47.5 mg/d三日后,测定口服美托洛尔2h 的血药浓度。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法检测CYP2D6＊10基因型,根据基因检测结果高血压病人被分为 CC型组（野生型纯合子,快代谢型,14例）,CT型组（突变杂合子,中代谢型,25例）和 TT型组（突变纯合子,弱代谢性,19例）3组。根据CYP2D6＊10基因型调整美托洛尔用量,一周后,再次检测口服美托洛尔2h的血药浓度,并检测基因导向治疗前后的平均心率及血压。结果：基因导向治疗前,美托洛尔血药浓度 TT组显著高于 CC和 CT组[（64.74±32.94）ng/ml比（26.57±19.40）ng/ml比（23.88±12.86）ng/ml,P＜0.01];与 TT组比较,CC组平均收缩压[（132.84±13.40）mmHg比（144.14±14.28）mmHg]、舒张压[（76.95±9.07）mmHg比（81.36±7.33） mmHg]、心率[（69.13±11.83）次/min比（76.66±7.33）次/min]明显升高（P 均＜0.05）。基因导向治疗后各组的血药浓度、平均收缩压、舒张压及心率无统计学差异（P 均＞0.05）。与基因导向治疗前比较,CC组治疗后血药浓度显著升高,平均收缩压、舒张压及心率显著降低（P＜0.05）, CT组、TT组的血压及心率与治疗前比较无统计学差异（P＞0.05）。结论：CYP2D6＊10基因多态性影响美托洛尔药物代谢及其治疗高血压病的疗效,基因导向个体化治疗可显著改善疗效,短时间内达到理想治疗目标。     

CYP2D6基因多态性与药物基因组学研究的进展

CYP2D6基因多态性导致有关药物疗效及不良反应的个体差异,本文就此进行综述。     

原发性高血压患者心率震荡现象及美托洛尔的干预作用

心率震荡可以很好地反映自主神经的功能。高血压患者往往有不同程度的自主神经受损,美托洛尔作为选择性β1受体阻滞剂,既可降低患者的血压,还可抑制交感神经的活性,改善患者迷走神经的活性,改善患者心率震荡的功能。本文就高血压患者心率震荡现象及美托洛尔的干预作用作以下综述。     

美托洛尔对CYP2D6和β1-肾上腺素受体基因型一致的高血压病患者降压疗效差异的相关因素分析

目的探讨美托洛尔对CYP2D6和β1-肾上腺素受体基因型一致的高血压病患者降压疗效差异的相关因素。方法筛选CYP2D6*10位基因型为*10*10且β1-肾上腺素受体389位基因型为Arg/Arg的原发性高血压患者63例,给予美托洛尔100mg/d治疗,2周随访一次观察血压、心率变化,8周后分析年龄、基线血压、体质指数、高脂血症、吸烟等因素和美托洛尔降压疗效的关系。结果63例患者中美托洛尔降压总有效者40例,无效者23例,总有效率为63.5%。单因素分析显示,基线收缩压和体质指数显著影响美托洛尔降压疗效(P<0.05)。多因素分析显示,基线收缩压对美托洛尔降压疗效影响最大。结论基线血压和体质指数是导致CYP2D6和β1-肾上腺素受体基因型一致的高血压病患者美托洛尔降压疗效差异的重要原因。     

CYP2D6基因B突变与肌萎缩侧索硬化遗传易感性的关系

肌萎缩佃愫硬化(ALS)是一种选择性侵犯上、下运动神经元的中枢神经系统变性病。15％～20％的家族性AKS厦2％～7％的散发性ALS患者可检测到铜／锌超氧化物歧化酶(SODI)基因突变。我们对汉族人细胞色素P450206(CYP2D6)基因B突变与散发性ALS发病的关系进行了初步研究肌萎缩侧索硬化     

人自身抗原CYP2D6 285 bp基因片段克隆、真核表达及免疫性鉴定

目的:真核表达人自身抗原细胞色素P450 2D6(CYP2D6)显性表位285 bp基因片段,获得具免疫学活性的纯化重组蛋白,为自身免疫性肝炎抗体的检测提供特异性抗原．方法:以肝脏的cDNA混合文库为模板作 PCR,将PCR产物与真核表达载体pEGH共同转化酿酒酵母Y258,碱裂解法进行质粒制备, PCR扩增鉴定．表达载体构建成功后,在半乳糖的诱导下表达产生重组融合蛋白,利用 GST亲和层析法进行纯化．然后对其产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS- PAGE)和蛋白质印迹法(WB)及蛋白质质谱学 (MALDI-TOF)检测．结果:PCR产物约290 bp,与预期285 bp接近． pEGH-CYP2D6重组阳性克隆PCR鉴定与预期大小接近,SDS-PAGE和WB结果显示,融合蛋白Mr37 000,具有天然人自身抗原CYP2D6 的免疫原性．质谱蛋白肽指纹数据通过Mascot 在人类蛋白质数据库中分析比对,与CYP2D6 蛋白同源性最高．结论:成功克隆表达人自身抗原CYP2D6的显性表位,为建立新的自身免疫性肝炎抗体检测方法奠定了基础．     

淡色库蚊细胞色素P450 CYP4E2r6基因的克隆、表达及鉴定

目的克隆并表达鉴定淡色库蚊细胞色素P450(CYP4E2r6)基因。方法根据昆虫细胞色素P450氨基酸保守序列设计一对简并引物，采用RT—PCR，从淡色库蚊四龄幼虫mRNA中扩增出目的基因片段。产物经T—A克隆、测序、比对，在抗性品系高表达的CYP4E2r6亚克隆入原核表达载体pGEX-6P1，在大肠杆菌BL21中进行原核表达。将细菌总蛋白进行SDS-PAGE及Western blot鉴定。结果14个阳性克隆中9个为CYP4新序列，由GenBank登录上网(GenBank／NCBI CB074944—51、CB270837，2003年)；经鉴定属CYP4家族CYP4H、CYP4E、CYP4J亚家族；CYP4E2r6基因已成功表达。结论获得的CYP4E2r6融合表达蛋白为进一步研究CYP4基因与抗药性之间的关系奠定基础。     

花生四烯酸细胞色素P450表氧化酶在自发性高血压大鼠血压的调节中的作用

背景与目的花生四烯酸细胞色素P450（CYP）表氧化酶代谢花生四烯酸产生表氧化廿烷酸（EETs），又称为内皮源性超极化因子（EDHFs），在局部微循环的调节中起着重要作用。然而EETs在血压的调节中是否起作用还不清楚。本研究通过对成年自发性高血压大鼠导入花生四烯酸细胞色素表氧化酶基因来观察其血压变化，从而进一步明确EETs在血压调节中的作用。方法：将含人类细胞色素P450表氧化酶CYP2J2 cDNA的真核细胞表达质粒pcDNA．2J2经静脉注射（3mg／kg）人雄性成年自发性高血压大鼠，并以pcDNA3．1对照。然后用尾部血压计测量血压。并在注射后3周和4周时处死动物，检测CYP2J2在不同组织中的表达情况。结果：注射质粒后对照组血压一直无显著性变化，而pcDNA．2J2治疗组大鼠血压显著降低（P〈0．05），这一降压效应持续两周以上。Western blotting显示在实验组动物肺、肝和肾的总蛋白中通过特异性抗-CYP2J2抗体可检测出显著量的人类CYP2J2蛋白的表达。结论：本实验显示对成年自发性高血压大鼠导人人类CYP2J2基因，使CYP2J2可以在动物组织中高表达，从而引起相对持久的降压作用，这些结果提示花生四烯酸细胞色素P450表氧化酶通过产生EDHFs参与了动物血压的调节作用。     

CYP2A6基因多态性及其活性对吸烟行为及戒烟的影响

细胞色素P450 2A6 (CYP2A6)是尼古丁代谢的主要酶,它存在几十种基因型。近年来CYP2A6基因多态性与尼古丁代谢水平及吸烟行为的关系成为研究的重点,并且发现CYP2A6的酶活性与戒烟成功率有一定的关系,可能指导戒烟方法的选择。     

白纹伊蚊细胞色素P450 CYP6N3基因的原核表达及鉴定

目的　对白纹伊蚊细胞色素P4 5 0CYP6N3基因进行原核表达 ,以获得高效表达蛋白。方法　根据CYP6N3基因的全长cRNA为模板进行RT -PCR。产物经T -A克隆测序鉴定后 ,亚克隆入原核融合表达载体 pGEX - 4T - 1(含有编码 2 6KDaGST的基因序列 )中 ,在大肠杆菌BL2 1(DE3)中进行原核表达。将细菌总蛋白进行SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 ,通过Westernblot分析鉴定目的蛋白的位置 ,并运用核酸蛋白分析仪扫描凝胶以确定表达产物的含量。结果　获得了高效表达的融合蛋白GST -CYP6N3,表达量占菌体总蛋白的 37 4 9%。结论　本实验成功地异源表达了白纹伊蚊CYP6N3基因 ,为体外重建细胞色素P4 5 0CYP6N3单加氧酶系 ,了解CYP6N3基因结构功能关系奠定基础     

"CYP2D6"基因多态性和NSCLC靶向治疗后肝损伤、皮疹及腹泻的相关性

目的比较非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)患者CYP2D6×10与CYP2D6×5基因多态性的差异与经靶向治疗(吉非替尼、厄洛替尼、克唑替尼)后出现肝损伤,皮疹,腹泻不良反应的相关性,探索靶向药物治疗常见不良反应与CYP2D6基因多态性的关联。 方法选择新疆医科大学附属肿瘤医院2016年1月至2019年12月经靶向治疗(吉非替尼、厄洛替尼、克唑替尼)的NSCLC患者,采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism, PCR-RFLP)检测患者CYP2D6×10与CYP2D6×5基因型分布及等位基因频率。比较基因型分布差异和等位基因差异在出现肝损伤、腹泻、皮疹组与无患者组的差异。 结果CYP2D6×10基因多态性及等位基因频率在发生肝损害组与无肝损害组差异有统计学意义(P<0.05),皮疹组和腹泻组均与CYP2D6×10基因多态性及等位基因频率差异无相关性。腹泻有关的唯一相关因素是否有化疗史(P＝0.002),皮疹相关的因素是分期P＝0.000。 结论NSCLC靶向治疗药物性肝损伤的预测方面CYP2D6基因多态性可能是其中有效的指标之一,可指导NSCLC患者临床用药。     

异烟肼和利福平联合用药对健康成人原代肝细胞CYP450同工酶1A2和3A4活性的影响

目的明确异烟肼和利福平联合用药对健康成人原代肝细胞CYP450同工酶1A2和3A4活性的影响。方法从健康成人肝脏或肝叶中分离出肝细胞,分为CYP450同工酶1A2和3A4两部分,各分为阴性对照组及药物处理组共15组,放入24孔细胞培养板内,每组6个复孔,原代培养3 d,阴性对照组加入等量的细胞培养液,各药物处理组对应加入临床血药峰浓度范围内的异烟肼(25μmol/L,50μmol/L)、利福平(12.5μmol/L,25μmol/L)或两药联用(CYP1A2:利福平12.5μmol/L加异烟肼50μmol/L,利福平25μmol/L加异烟肼50μmol/L;CYP3A4:利福平12.5μmol/L加异烟肼25μmol/L,利福平25μmol/L加异烟肼25μmol/L,利福平25μmol/L加异烟肼50μmol/L),孵育2 d,再加入CYP450同工酶1A2和3A4的相应底物(非那西丁和睾酮),反应终止后用高效液相仪测量代谢产物(对乙酰氨基酚与6β-羟基睾酮)的峰面积(单位:mAU.m in)代表1A2和3A4的活性。结果(1)单用25μmol/L和50μmol/L浓度异烟肼肝细胞CYP450同工酶1A2的活性分别是(3.33±0.65)、(3.03±0.38)mAU.m in,与阴性对照组的(5.23±0.31)mAU.m in比较差异均有统计学意义(P均<0.01);单用12.5μmol/L浓度利福平肝细胞CYP450同工酶1A2的活性为(6.07±0.55)mAU.m in,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),单用25μmol/L浓度利福平肝细胞CYP450同工酶1A2的活性为(4.93±0.57)mAU.m in,与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);异烟肼和利福平2种浓度联合配伍,肝细胞CYP450同工酶3A4的活性分别是(3.27±0.96)、(3.97±0.25)mAU.m in,与阴性对照组比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。(2)单用25μmol/L和50μmol/L浓度异烟肼肝细胞CYP450同工酶1A2的活性分别是(5.40±1.35)、(2.63±0.06)mAU.m in,与阴性对照组的(12.53±0.51)mAU.m in比较差异均有统计学意义(P均<0.01);单用12.5和25μmol/L浓度利福平肝细胞CYP450同工酶3A4的活性分别为(165.17±11.47)、(120.20±15.73)mAU.m in,与阴性对照组比较差异均有统计学意义(P均<0.01);异烟肼和利福平3种浓度联合配伍,肝细胞CYP450同工酶3A4的活性分别是(118.37±8.90)、(77.53±6.91)、(68.73±4.72)mAU.m in,与阴性对照组比较差异均有统计学意义(P均<0.01),但低于相应浓度单用利福平组(P<0.05或0.01)。结论临床血药峰浓度范围的异烟肼与利福平单用或联用对CYP450同工酶1A2活性影响未达到抑制或诱导水平。临床血药峰浓度范围的异烟肼抑制CYP450同工酶3A4的活性,利福平诱导CYP450同工酶3A4的活性,两药联合仍呈诱导作用。     

淡色库蚊抗溴氰菊酯品系CYP4家族新成员基因克隆及序列分析

目的　获取淡色库蚊CYP4家族新基因。　方法　根据CYP4氨基酸保守序列设计一对简并引物 ,采用RT PCR的方法 ,从淡色库蚊抗溴氰菊酯品系四龄幼虫总RNA中扩增出与设计相符的基因片段。利用T/A克隆方法 ,将获得的基因片段克隆入 pGEM Teasy载体 ,经PCR鉴定重组成功 ,测序并进行比对。　 结果　共克隆出 3 6个阳性克隆 ,将其中 9个随机挑取的阳性克隆测序及同源性分析 ,表明为CYP4家族中 9个新的cDNA序列 ,由GeneBank登录上网 ;经国际细胞色素P45 0命名委员会鉴定 ,属CYP4家族CYP4H、CYP4J亚家族。为进一步研究细胞色素P45 0的多样性及其与抗药性的关系打下基础。　结论　克隆 9个淡色库蚊基因部分序列 ,被鉴定属于CYP4家族CYP4H、CYP4J亚家族。     

白纹伊蚊细胞色素P450 CYP6N亚家族新成员5‘—及3’—非翻译区序列功能分析

目的 获得白纹伊蚊细胞色素P450 CYP6N亚家族新成员5‘－及3‘－非翻译区（untranslated region,UTR）核苷酸序列,并进行功能分析。方法 以本文作者已获得的白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株－新的细胞色素P450 CYP6基因cDNA片段,设计1对特异性引物,以反向引物,进行5‘-cDNA末端快速扩增（rapid amplification of cDNA ends,RACE）,以正向引物进行3‘-RACE。然后分别进行克隆、测序和鉴定。以获得5‘-UTR及3‘－UTR,并运用PC／GENE软件分析其功能。结果 获得CYP6N家族中两个新成员5‘－UTR及3‘－UTR;其结构特征包括：两个新成员前导序列均为46个核苷酸;起始密码子ATG两侧核苷酸－3位是A、＋4位是T;5‘－UTR区域无稳定性的发卡结构;终止密码子在CYP6N3为TZAA、在CYP6N4为TAG,紧挨其3‘端核苷酸分别为A和G,翻译产物羧基端均为亮氨酸。结论 成功地获得了白纹伊蚊细胞色素P450CYP6N亚家族两个新成员5‘－及3‘－非翻译区序列,进一步分析表明该两个新成员均能进行有效翻译,昆虫细胞色素P450基因翻译起始调控与翻译终止调控有部分类似于脊椎动物mRNA的翻译调控,但具有多态必性的特点。     

花生四烯酸细胞色素P450代谢途径在高血压中作用的研究进展

花生四烯酸是人体必须脂肪酸之一,其代谢产物具有较强生物学活性并在众多生理病理过程中发挥着重要调节作用。其在人体内主要通过环氧化酶、脂氧化酶、细胞色素P450（CYP）三大途径进行代谢。其中,越来越多的研究表明,CYP代谢途径中其关键基因CYP通过调控经ω-羟化酶、表氧化酶作用的下游产物20羟-二十烷四烯酸及表氧一二十碳三烯酸的质／量,从而影响高血压的发生发展,并且对其分子生物学机制及遗传学的研究亦成为当前的研究焦点。本文主要对CYP途径在高血压中的作用简要做一综述。     

阿尔茨海默病CYP2D6*10基因多态性与多奈哌齐疗效

目的研究阿尔茨海默病（AD）患者CYP2D6＊10基因多态性对多奈哌齐疗效的影响。方法筛选AD患者110例（AD组）和健康体检者124例（对照组）,应用限制性片段长度多态性一聚合酶链反应（RFLP—PCR）方法对两组患者进行CYP2D6＊10基因多态性测定。AD组给予多奈哌齐治疗6个月,于服药前后,应用简易精神状态量表（MMSE）和阿尔茨海默病评定量表认知分量表（ADAS-Cog）进行认知功能测定;应用高效液相色谱一质谱法测定患者血浆中多奈哌齐的稳态血药浓度。结果AD组与对照组CYP2D6＊10的基因型和等位基因频率分布差异无统计学意义（P〉0．05）;AD组CYP2D6＊10基因突变型（T/T型与C／T型）的血药浓度、MMSE和ADAS．Cog评分与野生型（C／C型）相比,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论多奈哌齐对阿尔茨海默病CYP2D6＊10基因突变型患者的疗效优于野生型患者。     

老年高血压患者血管紧张素转换酶和醛固酮合酶基因多态性与肾素血管紧张素醛固酮的关系

目的分析老年高血压晨峰患者血管紧张素转换酶(ACE)基因I/D、醛固酮合酶(CYP11B2)基因-344C/T多态性与肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)的相关性。方法选择2016年2月~2017年12月云南省第一人民医院老年病科门诊及住院的老年原发性高血压患者200例,根据清晨血压水平分为晨峰增高组58例和非晨峰增高组142例。分析2组患者ACE基因I/D、CYP11B2基因-344C/T多态性和血浆RAAS参数的差异。结果 2组ACE基因型和等位基因频率比较,差异有统计学意义(χ^2=38.020,P=0.000;χ^2=42.040,P=0.000)。2组CYP11B2基因型和等位基因频率比较,差异无统计学意义(χ^2=0.261,P=0.878;χ^2=0.198,P=0.656)。晨峰增高组DD+TC、DD+TT基因型比例明显高于非晨峰增高组,差异有统计学意义(22.4%vs 3.5%,12.1%vs 2.1%,P<0.01);晨峰增高组II+TT、II+TC基因型比例明显低于非晨峰增高组,差异有统计学意义(13.8%vs 29.6%,P<0.05;5.2%vs 22.5%,P<0.01)。晨峰增高组血浆肾素、血管紧张素Ⅱ和醛固酮水平明显高于非晨峰增高组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。logistic回归分析显示,DD+CC、DD+TC、DD+TT、肾素、血管紧张素Ⅱ为血压晨峰的重要影响因素(OR=8.084,95%CI:1.261~51.832,P=0.027;OR=14.459,95%CI:3.804~54.964,P=0.000;OR=9.753,95%CI:2.255~42.181,P=0.002;OR=1.816,95%CI:1.258~2.620,P=0.001;OR=0.634,95%CI:0.437~0.921,P=0.017)。结论 ACE基因DD型、肾素、血管紧张素Ⅱ是血压晨峰形成的主要影响因素。     

贝凡洛尔和美托洛尔对原发性高血压患者心率变异性的影响

目的:研究贝凡洛尔和美托洛尔对原发性高血压患者心率变异性的影响。方法:53例原发性高血压患者洗脱2周后,随机口服贝凡洛尔(n=26,贝凡洛尔组)100～200 mg/日,分两次口服,或美托洛尔(n=27,美托洛尔组)100～150 mg/日,分两次口服,治疗8周。服药前后行24小时动态心电图检查各1次,分析24小时时域和5分钟频域指标。结果:服药后贝凡洛尔组24小时长程时域指标:相邻RR间期之差的均方根(rMSSD),全部RR间期中相邻RR间期之差大于50 ms的心搏数除总的RR间期个数乘以100(PNN_(50))均较用药前增加,有显著性差异(P<0.05～0.01);5分钟短程频域指标:高频(HF)增加,低频(LF)/HF下降,与用药前比较有显著性差异(P<0.05)。而美托洛尔组24小时长程时域指标:rMSSD较用药前增加,有显著性差异(P<0.05),5分钟短程频域指标:HF较用药前增加,LF/AF则降低,均有显著性差异(P<0.05),组间比较无统计学差异。结论:与美托洛尔相比,具轻度α_1受体阻滞作用的高选择性β_1受体阻滞剂贝凡洛尔,同样改善原发性高血压患者的心率变异性。