海洋芽孢杆菌Bacillus methylotrophicus B-9987中difficidins生物合成基因簇的分析鉴定

目的 对海洋芽孢杆菌B-9987中difficidins生物合成基因簇及其关键基因进行分析、鉴定及功能研究。 方法 通过生物信息学手段对difficidins基因簇的基因组成和功能结构域进行了分析;结合其结构特征及聚酮化合物的生物合成原理,初步推导其生物合成途径;构建了烯酰辅酶A水合酶基因difO双交换阻断突变株,对其功能进行初步验证并对基因簇进行确认。 结果 从B-9987发酵液中分离纯化得到化合物oxydifficidin,鉴定了B-9987中该化合物的生物合成基因簇,其是由位于同一个操纵子的15个基因difA-O所编码的反式酰基转移酶聚酮合酶体系组装而成;difO基因阻断后,oxydifficidin不再产生。 结论 difficidins生物合成基因簇的鉴定为后续研究其生物合成途径及相关基因的功能奠定了基础。     

海洋芽孢杆菌B-9987中macrolactin生物合成基因簇分析及反式酰基转移酶高表达

目的 对海洋芽孢杆菌B-9987中macrolactin生物合成基因簇及其关键基因进行分析、鉴定及功能研究。方法 通过生物信息学手段对基因簇的基因组成和功能结构域进行了分析;构建了用于酰基转移酶基因高表达的大肠杆菌—芽孢杆菌穿梭载体,采用电击转化方法导入B-9987之中进行高表达。 结果 macrolactins是由位于同一个操纵子的8个基因bmmA-I所编码的反式酰基转移酶聚酮合酶体系组装而成,反式酰基转移酶(trans-acyltransferase,trans-AT)BmmA的高表达使macrolactin A的产量提高了约0.6倍。结论 macrolactin生物合成基因簇在具有生物防治活性的芽孢杆菌中普遍存在,且高度保守;反式酰基转移酶的高表达能够增加macrolactin A的产量。     

蜡样芽孢杆菌与类似菌鉴别方法研究

目的:验证和完善蜡样芽孢杆菌与类似菌鉴别方法,降低蜡样芽孢杆菌检验结果假阳性率。方法:按照国标GB/T4789.14-2003对蜡样芽孢杆菌标准菌株与类似菌(苏云金芽孢杆菌,蕈状芽孢杆菌)参考菌株以及我们从食品中分离出的蜡样芽孢杆菌可疑菌株从菌体和菌落形态、生化性状、根状试验、蛋白质毒素晶体试验等几个方面进行鉴别。结果:10株可疑菌中只有1号株菌为蜡样芽孢杆菌。结论:补充和完善后的"蜡样芽孢杆菌与类似菌鉴别方法"能有效地鉴别蜡样芽孢杆菌与类似菌,根状试验和蛋白质毒素晶体试验是最关键的鉴别手段,能明显地降低蜡样芽孢杆菌检验结果假阳性率。     

地衣芽孢杆菌活菌制剂芽孢数的快速检测方法研究

目的：利用高效液相色谱（HPLC）建立地衣芽孢杆菌活菌制剂中芽孢数的快速检测方法。 方法：采用HPLC,以Waters Xbridge C18为色谱柱（4.6 mm×250 mm, 5 μm）、0.1%磷酸溶液：甲醇（92:8）为流动相等度洗脱、检测波长273nm、柱温30℃、流速0.8mL·min-1,建立地衣芽孢杆菌中2,6-吡啶二羧酸（DPA）含量的测定方法。以平板计数法对相应的芽孢悬液中芽孢数量进行统计,建立DPA浓度与芽孢数之间的关系曲线。同时采用上述方法检测3种地衣芽孢杆菌活菌制剂（片剂、胶囊剂和颗粒剂）的芽孢数。 结果：研究表明,所建立的DPA测定方法,检测结果的稳定性、精密度、重复性、加样回收率均良好,DPA线性范围为2.5-80 mg·L-1(r=0.999),平均回收率（n=6）为102.1%;芽孢最终浓度与DPA浓度呈线性关系,芽孢最终浓度线性范围为6.5×108-7.8×109 CFU·mL-1（r=0.993）。采用上述方法同时检测3种地衣芽孢杆菌活菌制剂（片剂、胶囊剂和颗粒剂）的芽孢数,结果无显著性差异。 结论：建立地衣芽孢杆菌活菌制剂中芽孢数的快速检测方法,效果好、简单、快速。     

地衣芽孢杆菌活菌颗粒杂菌检查方法验证

目的 建立地衣芽孢杆菌活菌颗粒杂菌检查方法。方法 控制菌检查采用平皿涂布法;非致病性杂菌检查以杂菌率不得过0.1%为限度指标,采用营养琼脂平皿涂布法37 ℃培养;真菌计数采用玫瑰红钠琼脂平皿涂布法25 ℃培养。结果 控制菌检查、非致病性杂菌检查和真菌计数方法均满足中国药典2010年版验证试验的基本要求。结论 该方法可作为地衣芽孢杆菌活菌颗粒杂菌检查方法。     

通过阻断GntR家族调控基因ygrA挖掘海洋链霉菌Streptomyces sp. OUC6819中抗MDR菌活性次级代谢产物

激活南海红树林来源链霉菌Streptomyces sp.OUC6819菌株中不表达或表达量低的隐性生物合成基因簇,挖掘具有优良多重耐药菌（MDR）抗菌活性的次级代谢产物。方法 通过生物信息学分析推测Streptomyces sp.OUC6819基因组中可能的GntR家族调控子,采用PCR-targeting策略敲除其中的ygrA基因,HPLC分析突变株和野生株的发酵产物的差异,并比较粗提物对5株MDR菌抑制活性。结果 HPLC分析结果表明与野生株相比,突变株中化合物1和化合物2产量分别产量提高了9倍和7倍;突变株发酵液粗提物对其中3株MDR菌抑制活性较野生株明显提高。结论 通过阻断GntR家族调控子ygrA激活了Streptomyces sp.OUC6819菌株中具有抗MDR菌活性次级代谢产物合成基因簇的表达,为从中发掘新的抗MDR菌抗生素奠定了必要基础;同时,将为其他海洋链霉菌中隐性基因簇的激活提供重要参考。     

枯草芽孢杆菌活菌制剂促进创伤皮肤愈合的实验研究

目的：探讨枯草芽孢杆菌活菌制剂对创伤皮肤愈合的影响。方法：以大鼠后背全层皮肤切除创伤愈合过程为模型，局部外用枯草芽孢杆菌活菌制剂并设对照，制作病理组织切片，测定创面羟脯氨酸含量变化，同时测量创面愈合面积，记录愈合时间。结果：应用枯草牙孢杆菌活菌制剂可促进成纤维细胞增生，提高胶原含量，创面愈合时间较对照组明显缩短。结论：枯草牙孢杆菌活菌制剂具有促进创伤皮肤愈合的作用。     

重症监护室与呼吸科中抗鲍曼不动杆菌的药物应用

鲍曼不动杆菌已成为医院部分科室的常见病原菌,在重症监护室和呼吸科等科室该菌的分离率越来越高。随着抗生素大量应用,多重耐药鲍曼不动杆菌接踵而至,引起国内外的高度重视。本文以药物治疗为重点,对多重耐药鲍曼不动杆菌展开探讨。     

小檗碱抗假单胞菌、单胞菌、芽孢杆菌及其他杆菌的药理作用研究进展

小檗碱具有较为广谱的抗菌作用,其抗菌谱涵盖沙门菌、志贺菌、弧菌、分枝杆菌、克雷伯菌、幽门螺杆菌、大肠埃希菌、假单胞菌、单胞菌、芽孢杆菌等。而该文将对此前关注较少的小檗碱的抗假单胞菌、单胞菌、芽孢杆菌及其他杆菌药理作用进行综述和分析,为今后小檗碱的进一步临床应用开发提供理论支撑。     

凝结芽孢杆菌活菌片联合莫沙必利治疗功能性便秘疗效分析

目的研究凝结芽孢杆菌活菌片联合莫沙必利治疗功能性便秘的疗效。方法 60例患者随机分为两组,治疗组联合应用凝结芽孢杆菌活菌片片与莫沙必利;对照组单用莫沙必利片,疗程均为2周。结果治疗组与对照组总有效率分别为93.75%、50.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论凝结芽孢杆菌活菌片治疗功能性便秘疗效满意,无副作用。     

流程再造模式对提高多部门参与多重耐药菌感染管理中的效果分析

目的:分析流程再造模式对提高多部门参及多重耐药菌(Multidrug-resistant bacterial,MDRB)感染管理中的效果,为指导医院多部门协作管理防控MDRB感染提供参考。方法:抽取2015年7月—2016年6月间MDRB感染患者110例资料为流程再造前组,另抽取2016年7月—2017年6月间流程再造后MDRB感染患者106例患者为流程再造后组;比较和分析流程再造多学科协作模式前后发现医院内MDRB感染报告时间、院内感染的检出率、院内感染发生率,以及比较和分析医务人员对MDRB的知晓率及防控措施依从性差异;标本的送检率、抗菌药物的使用率及DDDs的差异。结果:流程再造后组患者所在病区接收到从检验科发出的MDRB报告的时间明显早于流程再造前组(P<0.05),MDRB的检出率、医院感染率均低于流程再造前组(P<0.05),医务人员对MDRB的知晓率及防控措施的依从性均高于流程再造前组(P<0.05);流程再造后组标本的送检率高于流程再造前组,而抗菌药物使用率、使用强度(DDDs值)均低于流程再造前组。结论:流程再造模式的应用提高了各部门的参与度,也提高了院内感染管理的效率。     

我院2017年多重耐药菌分布特点及耐药性分析

[摘要]目的：探讨我院住院患儿多重耐药菌分布特点及耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法：回顾性分析我院2017年多重耐药菌感染病例资料,并对结果进行统计分析。结果：我院2017年共检出多重耐药菌368株,检出率32.20%,主要为大肠埃希菌（31.80%）、肺炎克雷伯菌（31.25%）、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（15.49%）、耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（15.76%）;多重耐药菌标本主要为痰液（198例）、血液（102例）、脓液（25例）、中段尿（16例）、分泌物（14例）,主要集中在新生儿内科NICU 136例（36.96%）、重症监护室（PICU）87例(23.64%)、新生儿外科ICU 67例（18.21%）。大肠埃希菌对美罗培南、亚胺培南敏感,肺炎克雷伯菌对美罗培南、亚胺培南敏感性下降,鲍曼不动杆菌对美罗培南、亚胺培南耐药率达到82.34%;革兰阳性多重耐药菌对利奈唑胺和万古霉素敏感。结论：多重耐药菌已成为医院内感染的重要病原菌,应加强多重耐药菌的监管,加强抗菌药物的合理使用,注意手卫生,减少或避免多重耐药菌的发生。     

新生儿病区多重耐药菌分布及耐药性分析

目的:通过对2016 年7 月至2017 年7 月河南省妇幼保健院住院患儿多重耐药菌的临床分布及耐药性分析,为临床抗菌药物的合理应用提供理论依据。 方法:应用珠海迪尔 DL-96 系统和手工实验相结合的方法进行细菌鉴定和抗菌药物敏感性试验,部分药敏试验结合 K-B 纸片扩散法。 药敏试验结果参照美国 CLSI 标准判读,将数据录入 WHONET 软件进行细菌分布及耐药性统计分析。 结果:河南省妇幼保健院在 2016 年 7 月至 2017 年 7 月住院的新生儿共检出阳性菌株 1 754 株,检出多重耐药菌 337 株,占 19.21%。 多重耐药菌中,耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKPN)比例最高,占 45.70%;多重耐药菌主要分布在新生儿重症监护病房(NICU),且在新生儿和其他儿童病区中,CRKPN 检出率最高。 NICU 与新生儿普通病区相比,多重耐药菌和CRKPN 阳性率比较差异有统计学意义(P<0.01);新生儿病区与其他儿童病区相比,多重耐药菌和 CRKPN 阳性率比较差异有统计学意义(P<0.01)。 药敏结果显示肺炎克雷伯菌对氨苄西林耐药率 100%,对哌拉西林/他唑巴坦耐药率 80.3%,对碳青霉烯类药物美罗培南、亚胺培南的耐药率高达 65.2%,对复方磺胺甲噁唑的耐药率最低为 28.8%。 结论:我院新生儿病区多重耐药菌检出率较高,以 CRKPN 为主,提示应加强多重耐药菌株监测和抗菌药物监管。     

某院重症医学科患者抗菌药物使用情况与多药耐药菌产生的相关性分析

目的:分析重症医学科(ICU)患者抗菌药物使用情况与多药耐药菌产生的相关性.方法:抽取医院2019年7月-2020年6月间ICU收治的重症患者113例临床资料,分析其抗菌药物使用情况(给药途径、用药频度、药物利用指数和联合用药),并采用Logistic回归法分析其使用情况与多药耐药菌产生的相关性.结果:113例重症患者...     

海洋细菌Bacillus sp.中环二肽类代谢产物的研究

目的研究海洋细菌Bacillus sp.发酵液的正丁醇萃取物中的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、高效液相色谱等分离手段从海洋细菌Bacillussp.发酵液的正丁醇萃取物中分离得到8个化合物,利用理化性质和波谱分析鉴定它们的结构。结果与结论分离得到8个已知的环二肽类化合物,分别鉴定为3-苄基哌嗪-2,5-二酮(1)、3-甲基哌嗪-2,5-二酮(2)、3-异丁基哌嗪-2,5-二酮(3)、3-异丁基-6-甲基哌嗪-2,5-二酮(4)、吡咯并哌嗪-1,4-二酮(5)、(3S,8aS)-3-甲基-吡咯并哌嗪-1,4-二酮(6)、3-异丁基-吡咯并哌嗪-1,4-二酮(7)、3-异丁基-8-羟基-吡咯并哌嗪-1,4-二酮(8)。8个化合物均为首次从该细菌代谢物中分离得到。     

我院2015年多重耐药菌分布情况分析

目的:探讨我院住院患儿多重耐药菌的分布情况及药物治疗情况。方法:通过目标性监测,收集我院2015年多重耐药菌感染病例资料,对多重耐药菌的分布及治疗情况进行统计分析。结果:我院2015年来共检出多重耐药菌378株,多重耐药菌检出率8.32%,主要为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(38.62%)、大肠埃希菌(26.46%)、肺炎克雷伯菌(14.81%)、阴沟杆菌阴沟亚科(12.17%)、耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(4.50%)、多耐药铜绿假单胞菌(0.79%)。送检的标本主要为痰液、脓液、血液、中段尿,检出的病例多为社区感染,主要集中在重症监护室。结论:我院对多重耐药菌的管理有一定的成效,仍需继续加强控制措施。     

新生儿重症监护室医院获得性感染病原菌监测及多重耐药相关影响因素

目的：探讨新生儿重症监护室（NICU）医院获得性感染病原菌监测及多重耐药相关影响因素。方法：收集我院2015年12月至2019年12月NICU多重耐药菌和医院获得性感染病原菌感染患者病历资料,回顾性分析发生感染的情况,并根据其感染是否为多重耐药进行分组并行多因素分析。结果：NICU共有患儿1 207例,发生医院获得性感染106例,感染率为8.78%。其中呼吸道感染以铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌和肺炎克雷伯菌为主,分别为32株（36.36%）、14株（15.91%）和10株（11.36%）;败血症病原菌分布以铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌和肺炎克雷伯菌为主,分别为10株（25.00%）、8株（20.00%）和8株（20.00%）。单因素及多因素Logistic回归分析显示,胎龄<34周、Apgar评分<7分、抗菌药物使用种类≥3种及抗菌药物使用时间≥7 d是NICU中多重耐药菌感染的危险因素。结论：对NICU获得性感染病原菌及多重耐药菌感染的的患儿应加强医院感染监测与护理干预,针对危险因素采取有效的预防措施,以降低NICU获得性感染病原菌及多重耐药菌感染发生率。     

卫生部全国细菌耐药监测网(Mohnarin)2009年度报告:ICU来源细菌耐药监测

目的了解全国不同地区ICU病房分离细菌病原谱及其对常用抗菌药物的耐药性。方法全国114家医院ICU分离细菌,按照统一方案进行抗菌药物敏感性试验,并按照CLSI 2010版判断结果。结果 2009年度收集各医院ICU分离细菌共8931株,其中革兰阳性菌占26.4%,革兰阴性菌占73.6%。金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌中,甲氧西林耐药株的发生率分别为72.4%,95.4%。葡萄球菌属中,甲氧西林耐药株对β内酰胺类和其他抗菌药物的耐药率显著高于甲氧西林敏感株。对葡萄球菌属较为敏感的药物有磷霉素、复方磺胺、利福平和阿米卡星;未发现对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株。ICU分离的屎肠球菌(n=344)多于粪肠球菌(n=141),并且屎肠球菌对大多数抗菌药物的耐药率高于粪肠球菌。粪肠球菌对氨苄西林(26.1%)和呋喃妥因(17.2%)的耐药率较低;两者均出现了对万古霉素耐药菌株;未发现利奈唑胺耐药株。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌中,产ESBLs酶菌株的发生率分别为73.8%,64.1%和63.6%;产ESBLs酶菌株对抗菌药物的耐药率均比非产ESBLs酶菌株高。肠杆菌科细菌中,已经出现了少数对碳青酶烯类...