日本刺参酸性粘多糖、皂苷和胶原蛋白多肽对血管内皮细胞的保护作用

目的研究日本刺参酸性粘多糖、皂苷和胶原多肽对血管内皮细胞的保护作用。方法采用ox-LDL建立体外培养的人脐静脉血管内皮细胞株(ECV304)损伤模型。MTT法测定血管内皮细胞的增殖活性;硝酸还原酶法测定血管内皮细胞一氧化氮合酶(NOS)活力和NO释放量;TBA法测定细胞内MDA含量;DNA-Ladder法检测血管内皮细胞的凋亡。结果不同浓度的酸性粘多糖、胶原蛋白多肽和低浓度的皂苷能明显抑制ox-LDL对血管内皮细胞的损伤,促进血管内皮细胞增殖(P<0.05,P<0.01);降低细胞内MDA含量(P<0.05,P<0.01);拮抗ox-LDL引起的血管内皮细胞凋亡。酸性粘多糖和胶原蛋白多肽还能明显促进血管内皮细胞NO释放量(P<0.05,P<0.01),提高细胞NOS活力(P<0.05,P<0.01)。结论日本刺参酸性粘多糖、皂苷和胶原蛋白多肽对血管内皮细胞的脂质过氧化物损伤均具有明显的保护作用。     

桂哌齐特拮抗氧化低密度脂蛋白对人脐静脉内皮细胞的损伤

目的研究桂哌齐特对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)损伤人脐静脉内皮细胞系ECV304的保护作用。方法传代培养ECV304细胞,随机分为空白对照组、模型组、桂哌齐特(200mg·L~(-1)和400mg·L~(-1))组,与ox-LDL共同孵育24h制模,观察培养上清液中一氧化氮(NO)与丙二醛(MDA)含量的变化,测定Fura-2/AM负载后的内皮细胞的游离静息钙浓度([Ca~(2+)]_i)。结果 ox-LDL诱导的模型组上清液中NO的浓度明显降低,MDA含量显著升高(均P<0.01)。桂哌齐特组NO浓度增加(P<0.01),MDA含量降低均(P<0.05)。与空白对照组相比,模型组的[Ca~(2+)]_i显著升高,桂哌齐特组能降低损伤导致的[Ca~(2+)]_i升高(均P<0.01)。结论桂哌齐特能拮抗ox-LDL对人脐静脉内皮细胞的损伤作用。     

常春卫矛提取物对 H2O2诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用

摘 要 目的：研究常春卫矛乙醇、乙酸乙酯和正丁醇提取物分别对血管内皮细胞ECV 304氧化损伤的保护作用。方法: 体外培养ECV 304细胞,以H2O2诱导ECV 304细胞氧化损伤为模型,分别将常春卫矛乙醇、乙酸乙酯和正丁醇提取物（终浓度为400,200,100,50,25 μg·ml^-1）作用于细胞24 h后,以MTT法检测细胞存活率;Hochest染色观察细胞凋亡情况;以测定超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮合酶（NOS）和一氧化氮（NO）的含量评价药物对血管内皮细胞氧化应激的影响。结果: 常春卫矛乙醇、乙酸乙酯和正丁醇提取物在25～400 μg·ml^-1 浓度范围内,对ECV 304细胞均无细胞毒作用,其中乙酸乙酯提取物在400 μg·ml^-1浓度下,对细胞有一定增殖作用（P<0.05）;常春卫矛乙酸乙酯（浓度50～400 μg·ml^-1）、正丁醇（浓度100～400 μg·ml^-1）提取物对氧化损伤ECV 304细胞存活率有显著提高,OD值与模型组比较,差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。常春卫矛乙醇、乙酸乙酯和正丁醇提取物能明显提高氧化损伤ECV 304细胞分泌SOD、NO水平（P<0.05或P<0.01）,对NOS水平无影响;常春卫矛乙醇、乙酸乙酯、正丁醇提取物均能抑制氧化损伤细胞凋亡,细胞核形态改善,凋亡率与模型组比较差异有统计学意义（P<0.01）。结论:常春卫矛提取物对H2O2诱导血管内皮细胞氧化损伤有一定保护作用。     

降糖复方含药血清对氧化损伤内皮细胞的保护作用

目的：研究降糖复方含药血清对H2O2诱导的血管内皮细胞氧化损伤的保护作用。方法：采用H2O2诱导人脐静脉血管内皮细胞（ECV304）氧化损伤模型,观察细胞形态学变化并测定细胞活力、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的含量,NO含量以及内皮素（ET-1）含量。结果：降糖复方含药血清可明显改善氧化损伤的ECV304细胞形态学变化,提高细胞存活率,降低MDA含量、提高SOD活力、增加NO释放、减少ET-1释放。结论：降糖复方含药血清能对抗H2O2对血管内皮细胞的氧化损伤,起到保护血管内皮细胞的作用。     

高甘油三酯血清对人脐静脉内皮细胞的损伤作用

目的:研究单纯高甘油三酯血清(HTGBS)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的损伤作用。方法:体外培养HUVEC,观察不同浓度的HTGBS对血管内皮细胞活力(MTT法测吸光度A值)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)活性,丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量的影响。运用WesternBlot和酶联免疫吸附测定法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测各组细胞中血红素氧化酶-1(HO-1)蛋白的表达和细胞培养上清液中碳氧血红蛋白(COHb)的含量。结果:5%浓度的HTGBS对血管内皮细胞有明显的损伤作用,显著降低细胞活力、NO含量和SOD、NOS活性(P<0.01),显著升高血管内皮细胞中LDH、iNOS活性和MDA含量(P<0.01),并且5%HTGBS显著诱导细胞HO-1蛋白的表达并增加细胞培养液中CO的生成量(P<0.01)。结论:HTGBS体外诱导HUVEC氧化损伤,使细胞活力和抗氧化能力显著降低,增加其通透性及脂质过氧化程度,影响内皮细胞分泌功能并能诱导HO-1蛋白表达代偿性升高。     

3，4，5，6-四羟基Ⅱ山酮对高糖所致内皮细胞损伤的保护作用

目的研究3,4,5,6-四羟基(口山)酮对高糖诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用.方法在培养的人脐静脉内皮细胞(ECV304)高浓度葡萄糖(30 mmol·L-1)处理48 h引起细胞损伤.荧光分光光度法检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、一氧化氮(NO)生成量与细胞脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量;MTT比色法检测细胞存活数量;流式细胞仪检测细胞周期.结果①3,4,5,6-四羟基(口山)酮能显著抑制高糖所致内皮细胞LDH释放、NO和MDA生成增加;②3,4,5,6-四羟基山酮能显著抑制高糖所致的活细胞数减少;③3,4,5,6-四羟基(口山)酮能显著减轻高糖所致内皮细胞增殖的抑制.结论3,4,5,6-四羟基山酮减轻高糖所致的人脐静脉内皮细胞损伤,其保护作用与抗氧化减少氧自由基生成有关.     

3,4,5,6-四羟基(口山)酮对高糖所致内皮细胞损伤的保护作用

目的研究3,4,5,6-四羟基(口山)酮对高糖诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用.方法在培养的人脐静脉内皮细胞(ECV304)高浓度葡萄糖(30 mmol·L-1)处理48 h引起细胞损伤.荧光分光光度法检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、一氧化氮(NO)生成量与细胞脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量;MTT比色法检测细胞存活数量;流式细胞仪检测细胞周期.结果①3,4,5,6-四羟基(口山)酮能显著抑制高糖所致内皮细胞LDH释放、NO和MDA生成增加;②3,4,5,6-四羟基山酮能显著抑制高糖所致的活细胞数减少;③3,4,5,6-四羟基(口山)酮能显著减轻高糖所致内皮细胞增殖的抑制.结论3,4,5,6-四羟基山酮减轻高糖所致的人脐静脉内皮细胞损伤,其保护作用与抗氧化减少氧自由基生成有关.     

一氧化氮供体氟比洛芬硝基丁酯

一氧化氮 ( NO)作为维持人和动物正常生理状态的一种重要的生物介质 ,是在一类称作一氧化氮合酶 ( NOS)的催化作用下快速形成的。 NOS包括非神经型 NOS(内皮型 NOS,e NOS)、神经型 NOS( n NOS)和诱导型 NOS( i NOS)三种。在 NOS的催化作用下 ,血管内皮细胞中产生少量的 NO对调节血流量和系统压力具有实质性作用 ,如患有冠状动脉组织疾病患者的一个显著指征即 NO生物利用度的明显降低。最新研究表明 ,内皮细胞中产生的 NO具有新的抗动脉粥样硬化、保护内皮细胞免遭前动脉粥样硬化因子所诱导的细胞凋亡 ,帮助调节损伤后的细胞…     

川芎嗪对脂多糖诱导的血管内皮细胞损伤的影响

目的探讨川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导引起的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)损伤的保护作用。方法以人脐静脉内皮细胞为实验对象,MTT法检测细胞活力,比色法测定一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性,硝酸还原酶法测上清液一氧化氮(nitric oxide,NO)含量,荧光法测定胞内NO及ROS水平,流式细胞仪法测定细胞凋亡与周期。结果川芎嗪与脂多糖同内皮细胞孵育后没有引起细胞活力的明显改变,排除了实验模型中药物直接细胞毒作用。脂多糖可以抑制细胞NOS活性(P<0.05)及胞内外NO含量(P<0.05),增加胞内ROS水平(P<0.01),促进细胞凋亡(P<0.05),抑制正常细胞周期的进程(P<0.05),而川芎嗪可以恢复脂多糖所致的上述效应,并具有一定的浓度依赖性。结论川芎嗪可以通过有效抑制脂多糖诱导的HUVEC NO、ROS水平改变所引起的细胞凋亡,从而起到内皮细胞损伤的保护作用。     

基于nNOS途径的天麻素注射液改善甲基苯丙胺诱导大鼠神经毒性损伤的作用机制研究

目的:研究天麻素注射液通过神经型一氧化氮合酶(nNOS)途径改善甲基苯丙胺诱导大鼠神经毒性损伤的作用机制。方法:将SD大鼠随机分为对照组、甲基苯丙胺组、常规剂量天麻素组、加倍剂量天麻素组、阴性对照(NC)腺病毒组、NC腺病毒+甲基苯丙胺组、NC腺病毒+天麻素组、n NOS腺病毒+天麻素组,每组10只。对照组大鼠腹腔注射生理盐水,每日2次;甲基苯丙胺组大鼠腹腔注射甲基苯丙胺(7.5 mg/kg),每日2次;常规剂量、加倍剂量天麻素组大鼠提前30 min分别腹腔注射不同剂量天麻素注射液(10、20 mg/kg),每日1次,再按甲基苯丙胺组方法注射甲基苯丙胺。NC腺病毒组大鼠在纹状体一次性注射NC腺病毒(4.8×107PFU)3μL+腹腔注射生理盐水,每日2次;NC腺病毒+甲基苯丙胺组大鼠同法注射NC腺病毒,然后腹腔注射甲基苯丙胺(7.5 mg/kg),每日2次;NC腺病毒+天麻素组大鼠同法注射NC腺病毒+甲基苯丙胺,同时在注射甲基苯丙胺之前30 min腹腔注射天麻素注射液(20 mg/kg),每日1次;nNOS腺病毒+天麻素组大鼠同法注射nNOS腺病毒和甲基苯丙胺,同时在注射甲基苯丙胺之前30 min腹腔注射天麻素注射液(20 mg/kg),每日1次。各组大鼠每次腹腔注射体积均为1 mL/100 g,均连续注射给药3 d。观察大鼠刻板行为并评分,检测大鼠纹状体的细胞凋亡率、凋亡相关因子[Bcl-2、Bax、活化胱天蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)]蛋白表达量、氧化应激相关因子[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)]水平,以及一氧化氮(NO)水平和nNOS蛋白表达量。结果:与对照组比较,甲基苯丙胺组大鼠的刻板行为评分和纹状体的细胞凋亡率、Bax、Cleaved caspase-3、nNOS蛋白表达量及MDA、NO水平均显著升高,Bcl-2蛋白表达量及SOD、GPx水平均显著降低(P<0.05或P<0.01);与甲基苯丙胺组比较,常规剂量、加倍剂量天麻素组大鼠的刻板行为评分和纹状体的细胞凋亡率、Bax、Cleaved caspase-3、n NOS蛋白表达量及MDA、NO水平均显著降低,Bcl-2蛋白表达量及SOD、GPx水平均显著升高,且加倍剂量天麻素组大部分上述指标均显著优于常规剂量组(P<0.05或P<0.01)。与NC腺病毒组比较,NC腺病毒+甲基苯丙胺组大鼠纹状体的细胞凋亡率、Bax、Cleaved caspase-3、n NOS蛋白表达量及MDA、NO水平均显著升高,Bcl-2蛋白表达量及SOD、GPx水平均显著降低(P<0.01);与NC腺病毒+甲基苯丙胺组比较,NC腺病毒+天麻素组大鼠纹状体中细胞凋亡率,Bax、Cleaved caspase-3、n NOS蛋白表达量以及MDA、NO水平均显著降低,Bcl-2蛋白表达量以及SOD、GPx水平均显著升高(P<0.01);与NC腺病毒+天麻素组比较,n NOS腺病毒+天麻素组大鼠纹状体中的细胞凋亡率、Bax、Cleaved caspase-3、n NOS蛋白表达量及MDA、NO水平均显著升高,Bcl-2蛋白表达量及SOD、GPx水平均显著降低(P<0.01)。结论:天麻素注射液对甲基苯丙胺诱导的大鼠神经毒性损伤具有明显的保护作用,且这一作用与抑制n NOS介导的细胞凋亡及氧化应激反应有关。     

丹酚酸B镁盐对缺氧复氧内皮细胞内钙和一氧化氮的影响

目的:研究丹酚酸B镁盐对缺氧复氧引起的内皮细胞内钙升高和一氧化氮释放增加的影响.方法:培养的人脐静脉内皮细胞(ECV304)暴露在95％ N_2 5％CO_2条件下缺氧30分钟,后在含5％CO_2的空气中复氧30分钟.内皮细胞的损伤用染料排除实验、SOD的活性和MDA的生成来评价.胞内游离钙浓度用钙荧光探针Fura 2-AM测定.一氧化氮含量用一氧化氮试剂盒测定.内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA的表达用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测.结果:缺氧复氧引起内皮细胞的活力由正常条件下(93.1±1.2)％降至(88±3)％(P<0.01),SOD的活性也由(0.24±0.07)kNU/L下降到(0.18±0.03)kNU/L(P>0.05),但其使内皮细胞MDA的生成由(1.12±0.06)mmol/L增至(3.78±0.03)mmol/L(P<0.01).丹酚酸B镁盐2.5,5,10 mg/L能明显降低缺氧复氧引起的内皮细胞MDA生成量的增加,并且显著提高细胞活力和SOD的活性.同时,缺氧复氧还增加内皮细胞的胞内游离钙浓度(F_(340)/F_(380)由 1.65±0.16增至 1.89±0.28)和一氧化氮释放[由(7.5±1.3)μmol/L增至(16±5)μmol/L],并上调其eNOS mRNA的表达,但降低iNOS mRNA的表达(P<0.05).但在无钙的条件下,缺氧复氧对内皮细胞的胞内游离钙浓度、一氧化氮含量、eNOSnRNA和iNOS mRNA表达     

金雀异黄素对低密度脂蛋白诱导的内皮细胞c-myc mRNA表达的影响(英文)

目的 :研究金雀异黄素对氧化型低密度脂蛋白诱导的人血管内皮细胞c mycmRNA表达的影响。方法 :低密度脂蛋白采用密度梯度超速离心法从健康人血浆中提取 ,经铜离子氧化制备成氧化型低密度脂蛋白。培养的人血管内皮细胞给予氧化型低密度脂蛋白 2 0 0mg·L- 1或同时给予金雀异黄素 10 0 μmol·L- 1诱导不同时间 (1,2 ,4h) ,提取细胞总RNA进行Northernblot杂交。结果 :2 0 0mg·L- 1氧化型低密度脂蛋白刺激内皮细胞c mycmR NA在 1h增加为对照水平的 3倍 ,2h增加为对照水平的 3.3倍 ,4h降到对照水平以下 ;给予氧化型低密度脂蛋白诱导的同时给予金雀异黄素 10 0 μmol·L- 1其c mycmRNA表达量在 1h为单独给予氧化型低密度脂蛋白诱导的 80 % ,2h为 6 0 %。结论 :金雀异黄素能有效抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的人血管内皮细胞c mycmRNA表达增高     

Effect of simvastatin on endothelium-dependent vaso-relaxation and endogenous nitric oxide synthase inhibitor

AIM: To investigate the effect of simvastatin on endothelium-dependent vasorelaxation and endogenous nitric oxide synthesis inhibitor asymmetric dimethylarginine (ADMA) in rats and cultured ECV304 cells. METHODS: Endothe-lial injury was induced by a single injection of low density lipoprotein (LDL) (4 mg/kg, 48 h) in rats or incubation with LDL (300 mg/L) or oxidative-modified LDL (100 mg/L) in cultured ECV304 cells, and vasodilator responses to acetylcholine (ACh) in the aortic rings and the level of ADMA, nitrite/nitrate (NO) and tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) in the serum or cultured medium were determined. And the adhesion of the monocytes to endothe-lial cells and the activity of dimethylarginine dimethylaminohydrolase (DDAH) in the cultured ECV304 cells were measured. RESULTS: A single injection of LDL decreased endothelium-dependent relaxation to ACh, markedly increased the serum level of endogenous ADMA and TNF-α, and reduced serum level of NO. Pretreatment with simvastatin (30 or 60 mg/kg) markedly attenuated inhibition of vasodilator responses to ACh, the increased level of TNF-α and the decreased level of NO by LDL, but no effect on serum concentration of endogenous ADMA. In cultured ECV304 cells, LDL or ox-LDL markedly increased the level of ADMA and TNF-α and potentiated the adhesion of monocytes to endothelial cells, concomitantly with a significantly decrease in the activity of DDAH and serum level of NO. Pretreatment with simvastatin (0.1, 0.5, or 2.5 μmol/L) markedly decreased the level of TNF-α and the adhesion of monocytes to endothelial cells, but did not affect the concentration of endogenous ADMA and the activity of DDAH. CONCLUSION: Simvastatin protect the vascular endothelium against the damages induced by LDL or ox-LDL in rats or cultured ECV304 cells, and the beneficial effects of simvastatin may be related to the reduction of inflammatory cytokine TNF-α level.     

扇贝裙边糖胺聚糖对血管内皮细胞的抗氧化活性

目的：探讨扇贝裙边糖胺聚糖（SS-GAG）的抗氧化活性。方法：用体外培养的人脐静脉内皮细胞株，建立过氧化氢（H2O2）诱导的血管内皮细胞损伤模型，用硫代巴比妥酸反应物法测定血管内皮细胞内氧化损伤产物丙二醛（MDA）的含量，用黄嘌呤氧化酶法测定细胞内的超氧化物歧化酶（SOD）的活性。结果：SS-GAG可明显减少MDA的生成，对细胞内的SOD活性有明显增强的作用。结论：SSGAG通过拮抗H2O2对血管内皮细胞的过氧化损伤，发挥其抗氧化活性。     

Protective effect of quercetin on the homocysteine-injured human umbilical vein vascular endothelial cell line (ECV304)

Homocysteine is responsible for the occurrence of many cardiovascular diseases for instance by injuring the vascular endothelial cells. Quercetin has many beneficial effects on the cardiovascular system, but it is unknown whether it provides protection against homocysteine-injured vascular endothelial cells. The aim of the present study was to investigate the protective effect and mechanism of quercetin on the homocysteine-injured human umbilical vein vascular endothelial cell line (ECV304) (i.e. morphology, viability and nuclear factor kappa B (NF-kappaB) expression of ECV304 injured with 1.0 mM homocysteine) by determination of lipid peroxidant and endothelium-derived factors in the cultural medium of homocysteine-injured ECV304. Quercetin at 6.25, 12.5, 25, 50 and 100 microM attenuated the morphological changes and increased viability of homocysteine-injured ECV304 in a dose-dependent manner (P < 0.05 or P < 0.01 versus the homocysteine-injured group). At the same time, quercetin at 12.5, 25 and 50 microM decreased malondialdehyde level, endothelin release and NF-kappaB expression, and increased superoxide dismutase activity, nitric oxide and 6-keto-prostaglandin F1alpha releases in homocysteine-injured ECV304 (P < 0.05 or P < 0.01 versus the homocysteine-injured group). These results suggest that quercetin has a protective effect on homocysteine-injured vascular endothelial cells by antioxidant and anti-inflammatory mechanisms.     

扇贝裙边糖胺聚糖对过氧化氢损伤的内皮细胞释放血管活性物质的影响

目的:观察扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)对过氧化氢(H2O2)损伤的血管内皮细胞产生血管活性物质的影响。方法:用体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV304建立H2O2诱导的内皮细胞损伤模型组、不同浓度的SS-GAG组以及正常对照组,用放射免疫法测定培养液中6-酮-前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)、血栓素B2(TXB2)、内皮素(ET)的含量;用硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)的含量。结果:与模型组比较,不同浓度的SS-GAG组均可使血管舒张因子6-keto-PGF1a、NO含量明显增加;缩血管因子TXB2、ET含量明显减少(P<0.05,P<0.01)。结论:SS-GAG可能通过增加舒血管因子、降低缩血管因子的分泌来减轻H2O2对内皮细胞的氧化损伤。