新生儿B细胞CD40表达与CD40单抗诱导的B细胞功能

采用流式细胞术检测新生儿Ｂ细胞（ＢＬ）ＣＤ４０表达的同时以ＣＤ４０单抗取代Ｔ辅助细胞（ＴＨ）ＣＤ４０配体（ＣＤ４０Ｌ）作用，观察其诱导的体外ＢＬ增殖及免疫球蛋白（Ｉｇ）产生能力。结果发现新生儿ＢＬＣＤ４０表达水平与成人接近，ＣＤ４０单抗可使新生儿低下的ＢＬ增殖，Ｉｇ产生及类别转换能力明显增高。本文提示新生儿ＢＬ功能低下并非ＢＬ内在缺陷所致，ＴＨ表达的ＣＤ４０Ｌ或细胞因子（ＣＫ）不足可能在其中起重要作用。     

CD40配体对套细胞淋巴瘤细胞系增殖的影响

套细胞淋巴瘤（MCL）是一种表达CD5的非霍奇金B细胞淋巴瘤,以中等大小B细胞侵入外套层为特征。CD40L与CD40间的相互作用对B细胞的增殖与分化有重要意义。对于不同阶段的B细胞,CD40L的刺激可产生抑制或诱导分化的作用。在本次研究中,利用SP49和SP53这两个套细胞淋巴瘤细胞系对CD40L反应作了研究。与表达CD40L的鼠淋巴细胞混合培养后,BrdU结合的SP49及SP53细胞减少了1/2～1/3,而BrdU结合的对照细胞系（包括Ramos,BJAB and BALL-1）无反应或增加。抗CD40L抗体在0～20 ng/ml时能封闭CD40L对SP49细胞增殖的抑制作用。这些结果提示CD40L在活体内可能对MCL增殖有抑制作用。     

抗CD40单克隆抗体诱导树突状细胞增殖和分化成熟作用研究

探讨ＣＤ４０分子在树突状细胞和外周血单核细胞表达的意义。方法将人外周血单核细胞经不同组合的细胞因子共培养共获得了树突状细胞，经流式细胞仪表型分析，活细胞计数，混合淋巴细胞反应等方法测定抗人ＣＤ４０单抗体ＣＤ４０分子的激发作用。结论抗人ＣＤ４０激发型单抗是一种潜在的免疫激动剂。     

鼠抗人CD3单克隆抗体免疫抑制机制探讨

目的探讨鼠抗人CD3单克隆抗体(OKT3)抗排斥作用机制.方法使用OKT3诱导人外周血淋巴细胞凋亡.使用电镜、DNA电泳及原位切口末端标记技术(TUNEL)检测凋亡,同时检测CD95的表达.结果电镜及DNA电泳发现OKT3处理组外周血淋巴细胞(PBL)发生凋亡.TUNEL检测发现处理组凋亡发生率39.8%,显著作者简介郑骏年(1966-),男,江苏徐州人,主治医师,硕士.高于对照组10.2%(P＜0.01).处理组PBLCD95表达率48.7%,显著高于对照组34.9%(P＜0.05).结论上调PBL表面CD95表达,诱导其凋亡是OKT3抗排斥作用的机制.     

Fas/Fas L介导细胞凋亡在多发性骨髓瘤中的作用

细胞凋亡 (ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)是指为维持内环境稳定 ,由基因控制的细胞自主的有序性死亡。它涉及一系列基因的激活、表达与调控。Ｆａｓ抗原 (ＡＰＯ 1,ＣＤ95)及其配体 (Ｆａｓｌｉｇａｎｄ ,ＦａｓＬ)的相互作用是引起细胞凋亡的主要途径之一 ,它们在免疫生物学方面的效应引起了人们广泛的兴趣。在肿瘤的发病机制方面 ,目前认为不仅是瘤细胞无限增殖 ,更重要的是细胞不凋亡 ,才导致肿瘤的发生。多药耐药也与凋亡缺陷有关。多发性骨髓瘤 (ｍｕｌｔｉｐｌｅｍｙｅｌｏｍａ ,ＭＭ )是源于浆细胞的恶性肿瘤 ,其发病机制不清 ,尚不能治愈。对…     

多发性骨髓瘤细胞凋亡及其靶向治疗研究进展

多发性骨髓瘤是一种恶性浆细胞疾病。其发生和发展是瘤细胞增殖异常和凋亡受抑的结果。肿瘤细胞凋亡是凋亡相关基因通过启动凋亡信号传导系统来实现。本文主要是从骨髓瘤细胞凋亡的线粒体途径及靶向治疗作一综述。     

抗CD40单克隆抗体诱导树突状细胞增殖和分化成熟作用研究

目的　探讨CD40分子在树突状细胞和外周血单核细胞表达的意义。方法　将人外周血单核细胞经不同组合的细胞因子共培养获得了树突状细胞 ,经流式细胞仪表型分析、活细胞计数、混合淋巴细胞反应等方法测定抗人CD40单抗对CD40分子的激发作用。结果　激发型抗人CD40单克隆抗体 5C11能促使树突状细胞分化成熟 ,并且激发后的DCs 具有明显的激发T细胞的功能。结论　抗人CD40激发型单抗是一种潜在的免疫激动剂。     

B细胞血液肿瘤患者外周血CD40、CD154的表达及意义

目的 分析B细胞血液肿瘤外周血淋巴细胞CD40、CD154表达率的特点。方法 28例B细胞血液肿瘤患者分为多发性骨髓瘤（Multiple Myeloma,MM）17例,B细胞性非霍奇金淋巴瘤（B-NHL）11例;选取30例健康体检人员作为对照组。应用流式细胞术检测B细胞血液肿瘤患者外周血淋巴细胞（Peripheral Blood Lymphocytes,PBL）CD40、CD154的表达率。结果 1MM组：CD40表达率为（17.50±8.32）%,CD154表达率为（1.00±3.26）%;B-NHL组：CD40表达率为（29.84±15.61）%,CD154表达率为（2.01±0.59）%;对照组：CD40表达率为（6.48±3.34）%,CD154表达率为（3.25±1.04）%。2化疗后B-NHL患者外周血淋巴细胞CD40表达低于化疗前,P〈0.05。3MM患者III期组PBLCD40表达率高于I~II期组,P〈0.05。B-NHL患者PBL CD154表达率III~IV期低于I~II期组,P〈0.05。结论 1MM患者、B-NHL患者均存在PBL CD40高表达,B-NHL患者同时存在PBL CD154低表达;CD40高表达提示MM预后差,CD154低表达与B-NHL预后有关。2化疗降低了B-NHL患者PBL CD40表达率。为临床上进行B细胞血液肿瘤诊断与治疗提供一定的依据。     

CD40培养体系的建立及B淋巴细胞的体外培养

采用自行研制成的功能性抗人ＣＤ４０单克隆抗体、转导ＣＤ３２的Ｌ细胞（ＬＣＤ３２）和细胞因子建立体外研究人Ｂ淋巴细胞增殖、生长和分化的ＣＤ４０系统。方法：①流式细胞仪分析ＣＤ４０分子的表达;②在ＣＤ４０激发型单抗（克隆５Ｃ１１）与ＬＣＤ３２共培养中,加入ＩＬ－４及其它细胞因子,组成ＣＤ４０培养系统,观察人扁桃体来源Ｂ细胞的体外生存和增殖等生物学效应。结果：①ＣＤ４０分子表达于人外周血、扁桃体来源的Ｂ细胞及人多发性骨髓瘤（ＭＭ）细胞株ＸＧ２和人Ｂ淋巴瘤细胞株Ｄａｕｄｉ;②用ＣＤ４０激发型单抗（克隆５Ｃ１１和２Ｇ１１）与ＬＣＤ３２细胞联合ＩＬ－４能使静止期Ｂ细胞体外长期生存和增殖。表明用激发型ＣＤ４０单抗５Ｃ１１和２Ｇ１１建立的ＣＤ４０培养体系,能使Ｂ细胞长期生存和增殖,为体外研究Ｂ细胞提供了有效的手段。     

CD_(28):CTLA-4/B7及CD_(40)/CD_(40)L与多发性硬化

共刺激分子CD28:CTLA-4/B7及CD40/CD40L对T细胞的活化、调节、B细胞的增殖、分化具有重要作用,共刺激分子在多发性硬化中的表达发生明显变化,它们对多发性硬化的发生、发展起着重要的促进作用,选择性阻断共刺激分子可控制疾病的发展,对多发性硬化治疗具有重要的意义。本文综述了CD28:CTLA-4/B7和CD40/CD40L生物学特性、功能,在多发性硬化的发生、发展中的作用以及相关的治疗前景。     

黄芪注射液对乳腺癌MCF-7细胞增殖周期以及细胞凋亡、迁移影响的实验研究

目的 探讨黄芪注射液对乳腺癌MCF-7细胞增殖、周期、凋亡及迁移的影响。方法 通过MTT法观察药物处理后对乳腺癌MCF-7细胞的生长增殖情况的影响;通过流式细胞术检测黄芪注射液对乳腺癌MCF-7细胞增殖周期、凋亡的影响;利用划痕实验检测黄芪注射液对乳腺癌MCF-7细胞的迁移的影响。结果 MTT结果发现,不同浓度的黄芪注射液（100、200、400、600、800mg/ml）对乳腺癌MCF-7细胞的增殖具有不同程度的抑制作用;流式细胞术结果显示,与空白对照组相比,200和400mg/ml黄芪注射液均能导致G₁期增加,且两个浓度的凋亡率都大于空白对照组;划痕实验结果显示200和400mg/ml黄芪注射液组较空白对照组划痕愈合率低。结论 不同浓度的黄芪注射液在体外对乳腺癌MCF-7细胞增殖具有一定的抑制作用;同时可将细胞增殖周期阻滞在G₁期,促进MCF-7细胞凋亡;一定浓度的黄芪注射液对MCF-7细胞的迁移具有抑制作用,为乳腺癌的临床应用提供实验基础。     

姜黄素对肺癌细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用

目的研究姜黄素对人肺腺癌细胞A2的生长抑制及诱导凋亡作用,探讨其分子机制。方法通过溴化二甲噻唑二苯四氮唑(MTT)比色法检测姜黄素对肺癌A2细胞体外增殖的影响;通过Annexin V-PI染色法的流式细胞术和琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡变化;Western blot法检测凋亡相关蛋白的变化。结果姜黄素能明显抑制肺癌A2细胞的体外生长,且呈时间与剂量依赖性,将量效关系进行直线回归,得到体外增殖的半数抑制浓度(IC50)为40μmol/l。流式细胞分析仪结果显示随姜黄素作用时间的延长肺癌A2细胞凋亡率由1.64%增至21.05%;琼脂糖凝胶电泳检测姜黄素作用48h后DNA降解成规则的大片段出现凋亡特有的"梯状"条带即典型的DNA ladder。Western blot结果显示随姜黄素作用时间的延长Survivin蛋白表达水平明显下降,具有统计学意义(P<0.01)。结论姜黄素能抑制肺癌细胞的生长并诱导其凋亡,此作用是通过下调Survivin蛋白表达实现的,这可能是姜黄素诱导凋亡的又一机制。     

冬凌草甲素对多发性骨髓瘤细胞细胞周期和凋亡的影响及其机制研究

目的探讨冬凌草甲素(oridonin,Ori)对人多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞的细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响及其涉及机制。方法利用MTT比色法检测Ori对细胞增殖活性的影响;碘化丙啶(PI)单染流式细胞术检测细胞周期;TUNEL法检测细胞凋亡;Western blot技术检测p65核蛋白水平。结果 Ori能明显抑制RPMI 8226细胞增殖,其抑制作用呈时间、剂量依赖性;能同时引起细胞G2/M细胞周期阻滞、细胞凋亡和p65核蛋白水平下降;吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)抑制核因子κB(NF-κB)活性后进一步促进了Ori所致的细胞G2/M细胞周期阻滞和凋亡。结论 Ori能明显抑制RPMI 8226细胞增殖,引起G2/M细胞周期阻滞,诱导细胞凋亡,该效应与NF-κB活性抑制相关。     

协同刺激分子CD28/B7及CD40/CD40L在哮喘特异性免疫治疗中的作用

目的探讨协同刺激分子CD28／B7—1、CD28／B7—2及CD40／CD40L在哮喘发病中的作用及在特异性免疫治疗前后表达水平的变化。方法选择30例哮喘患者为实验组,30例健康人群为对照组。采用流式细胞仪方法比较两组间T、B淋巴细胞表面CD28／B7—1、B7—2及CD40／CD40L的表达及与血清总IgE水平的相关性,以及哮喘患者特异性免疫治疗前后T、B淋巴细胞表面CD28／B7—1、B7—2及CEl40／CEl40L的表达水平。结果与健康人群相比,哮喘患者CD28、CD40L、B7—2及CD40表达水平均增高。血清总IgE水平与T淋巴细胞表达CD40L水平呈正相关。特异性免疫治疗6个月后,哮喘患者T、B淋巴细胞表达的CD28／B7—2及CD40／CD40L水平均有所下调,但均未达正常水平。结论协同刺激分子CD28／B7—2及CD40／CD40L表达水平的上调在哮喘发病中可能起重要作用,特异性免疫治疗能下调哮喘患者CD28／B7-2及CD40／CD40L的表达水平,并可能由此间接下调血清总IgE水平,起到相应的治疗作用。     

赖氨匹林对宫颈癌Hela细胞增殖及凋亡的影响

目的研究赖氨匹林(aspisol)对人宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡和周期的影响。方法取处于对数生长期的Hela细胞,实验分为4组:阴性对照组只加等体积的低糖DMEM培养液Hela细胞;实验组加入不同浓度的aspisol,使其终浓度分别为1 mmol/L、5 mmol/L、10 mmol/L。采用描计细胞生长曲线法检测细胞增殖状态;HE染色、AO/EB方法进行凋亡细胞形态学的观察。Annexin V-FITC/PI双染检测赖氨匹林对Hela细胞作用24 h后细胞凋亡情况;流式细胞术分析赖氨匹林对Hela细胞作用24 h后细胞周期的变化。结果与对照组比较,aspisol(1,5,10 mmol/L)可呈时间、浓度依赖性抑制Hela细胞的增殖;HE染色光镜下见Aspisol组细胞密度减小,细胞变圆,胞核染色变浅。赖氨匹林(1,5,10mmol/L)作用24 h后诱导Hela细胞的早期凋亡率分别为(5.73±0.87)%、(19.11±2.86)%、(33.72±5.06)%,与对照组(0.46±0.69)%比较,差异有统计学意义(P<0.01),并呈浓度依赖性。细胞周期检测显示赖氨匹林对Hela细胞有G0/G1期阻滞作用。结论 aspisol对宫颈癌Hela细胞有抑制增殖、诱导其凋亡和改变其细胞周期分布,阻滞Hela细胞于G0/G1期。     

川芎嗪对人肾癌细胞增殖及凋亡的影响

目的 分析不同浓度川芎嗪（tetramethylpyrazine,TMP）对人肾癌细胞系（786-O）增殖及凋亡的影响,并探讨其分子机制。方法 体外培养786-O细胞,与不同浓度川芎嗪溶液（0.5mmol/L、5mmol/L）及溶剂组（DMSO组）作用24、48和72h后,四甲基偶氮唑盐比色法测定细胞增殖率;细胞计数法检测药物作用48h后的细胞数量变化;DAPI染色观察药物作用48h后细胞核形态;半定量RT-PCR技术和Western blot法检测药物作用48h后凋亡相关基因在转录和翻译水平的改变。结果 随着川芎嗪药物浓度的增加,786-O细胞增殖率显著降低,凋亡率增加,细胞数量也显著减少,且胞核出现皱缩或肿胀,核裂增多;凋亡相关基因AIF、caspase-3在转录及翻译水平上均显著增强,无论与空白对照组还是溶剂对照组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 本研究证实TMP可以显著抑制人肾癌细胞系786-O细胞的增殖,促进其凋亡,为中药抗癌方面的研究提供实验室证据。     

芳维A酸乙酯对Hut-78细胞增殖及凋亡的影响

目的 观察并评价芳维A酸乙酯对皮肤T细胞淋巴瘤细胞( Hut-78)增殖及凋亡的影响.方法 用不同浓度的维甲酸分别处理Hut-78细胞,用四甲基偶氮唑盐比色法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测细胞增殖的抑制率、流式细胞仪检测细胞凋亡情况.结果 经浓度为10-8 mol/L、10-7...