抗凋亡蛋白BAG-1在胃癌组织芯片中的表达及意义

胃癌是常见的恶性肿瘤,其发病机制尚未明了。近年来,凋亡障碍及其机制已成为肿瘤学研究的一个热点。研究这些基因在肿瘤中的表达及相互作用,对于揭示肿瘤发生,发展的机制有着十分重要的意义。BAG 1是一种已经被确认的多功能结合蛋白,具有与BCL 2形成复合物促进抗细胞凋亡的作用     

子宫颈癌组织中BAG-1及MCM2的表达及临床意义

目的探讨BAG-1及MCM2在子宫颈癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化EnVision两步法检测121例子宫颈癌及51例正常子宫颈组织中BAG-1及MCM2蛋白的表达;采用RT-qPCR法检测34例子宫颈癌组织及27例正常子宫颈组织中BAG-1及MCM2 mRNA的表达,并分析两者表达与子宫颈癌临床病理特征的关系。结果 BAG-1在子宫颈癌及正常子宫颈组织中的高表达率为70.2%(85/121)及9.8%(5/51),两组相比差异有统计学意义(χ~2=52.545,P0.05);MCM2在子宫颈癌及正常子宫颈组织中的高表达率为82.6%(100/121)及5.9%(3/51),两组相比差异有统计学意义(χ~2=84.836,P0.05)。子宫颈癌组织中BAG-1及MCM2 mRNA相对表达量均高于正常子宫颈组织(P0.05)。BAG-1高表达与FIGO分期和淋巴结转移相关(P0.05),MCM2高表达与淋巴结转移相关(P0.05),两者高表达与患者年龄、肿瘤直径、分化程度、病理类型及浸润深度均无关(P0.05)。经Spearman相关分析显示,子宫颈癌中BAG-1与MCM2表达呈正相关(r=0.370,P0.05)。BAG-1与MCM2共同高表达与FIGO分期和淋巴结转移相关(P0.05)。结论 BAG-1及MCM2可能参与了子宫颈癌的发生、发展、侵袭及转移,检测两者的表达可以作为判断子宫颈癌侵袭及预后的依据。     

大鼠额叶损伤后细胞凋亡及Bax与Bcl-2蛋白的表达变化

本研究目的为探讨大鼠额叶锐器损伤后细胞凋亡的变化规律及调控机制。通过电镜、TUNEL法及免疫组织化学染色方法检测细胞凋亡和Bax、Bcl2蛋白的表达变化,结果发现凋亡细胞在损伤后3h即可发现,24h达到高峰;伤后3hBax和Bcl2表达明显升高,Bax表达12h达到高峰,而Bcl2表达6h即达到高峰;伤后Bax/Bcl2比值上调,24h达到高峰,随后逐渐下降。结果表明大鼠额叶锐器伤后存在细胞凋亡,凋亡细胞数量的变化与伤后时程有关,Bax/Bcl2比值是决定细胞凋亡的重要因素。     

Bcl-2及其相关蛋白与细胞凋亡的调节

在许多类型的细胞中,Bcl-2蛋白抑制由各种不同的信号诱导的凋亡,并且对正常发育以及肿瘤形成都有重要作用.但Bcl-2的作用机制还不清楚。近年来的研究已揭示了一系列对细胞凋亡进行正或负调节的Bcl-2相关基因产物,Bcl-2可与其中的某些蛋白如Bax形成异二聚体。本文综述Bcl-2蛋白家族在细胞凋亡的调节中的作用。     

BI-1蛋白及其相关调控因子在非小细胞肺癌细胞系中的表达研究

目的 研究凋亡抑制因子BI-1与及其相关调控因子Bcl-2 、Bcl-XL在非小细胞肺癌细胞系中的表达差异，分析BI-1与Bcl-2、Bcl-XL的相互作用关系；方法 以9种非小细胞肺癌细胞系（NSCLC）为实验材料，采用RT-PCR和western blot 技术在cDNA和蛋白水平检测三种基因的表达；结果 发现BI-1在NSCLC中高表达，Bcl-2表达较低（在A549、PAa、GLC-82和SPC-1-A几乎检测不到），Bcl-XL表达较稳定，且明显高于Bcl-2；结论 在NSCLC细胞中，BI-1主要与Bcl-XL形成蛋白复合体作用于凋亡通路。     

miR-206及Bcl-2蛋白在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的探讨mi R-206及Bcl-2蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)的表达,以及抑制或过表达mi R-206对Bcl-2蛋白表达的影响。方法实时定量PCR方法检测NSCLC组织mi R-206的表达水平,Western blot方法检测NSCLC组织Bcl-2蛋白表达;将mi R-206 inhibitors及mi R-206 mimics转染至A549细胞,通过CCK-8法测定A549细胞增殖能力的变化,Western blot方法检测转染后Bcl-2蛋白表达变化。结果 mi R-206在非小细胞肺癌组织中的表达量较癌旁组织明显降低(0.01),Bcl-2蛋白在癌组织中较癌旁组织表达明显增高(0.05);转染mi R-206 inhibitor的细胞增殖能力与对照组相比显著升高,细胞内Bcl-2蛋白水平亦明显升高(0.05),转染mi R-206 mimics的细胞增殖能力与对照组相比显著降低,细胞内Bcl-2蛋白水平亦明显降低(0.05)。结论mi R-206在NSCLC组织中低表达,mi R-206抑制能够促进A549细胞增殖和Bcl-2蛋白表达。     

人胚胎生长发育过程中Bcl-2和Bax蛋白在食管组织中的表达

目的探讨人胚胎食管发育过程中食管壁细胞增殖与凋亡的变化规律,以及B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl相关X蛋白(Bax)在食管生长发育中的表达意义。方法应用免疫组织化学ABC法检测第2、3、4月龄段人胚胎(共14例)食管壁组织内Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果第2、3、4月龄段,人胚胎食管壁肌间神经丛、黏膜下神经丛和黏膜层内均有Bcl-2蛋白阳性表达,在食管上皮Bax蛋白呈弱阳性表达。结论Bcl-2和Bax细胞周期调控蛋白与人胚胎食管的生长发育关系密切。     

子宫颈鳞状上皮内病变中BAG-1、MCM2表达及其与p16、HR-HPV的关系

目的检测子宫颈鳞状上皮内病变(squamous intraepithelial lesion, SIL)组织中BAG-1、MCM2及p16蛋白的表达,探讨其与SIL进展程度、p16表达及高危型人乳头瘤病毒(high-risk human papillomavirus, HR-HPV)感染的相关性。方法采用免疫组化EnVision两步法检测36例正常子宫颈/慢性子宫颈炎、77例低度鳞状上皮内病变(low-grade squamous intraepithelial lesion, LSIL)、69例高度鳞状上皮内病变(high-grade squamous intraepithelial lesion, HSIL)组织中BAG-1、MCM2及p16蛋白的表达,并用PCR反向点杂交法对所有样本行HPV基因分型检测。结果 BAG-1、MCM2及p16蛋白的阳性率在正常子宫颈/慢性子宫颈炎组分别为5.6%(2/36)、2.8%(1/36)及0(0/36),在LSIL组分别为40.3%(31/77)、50.6%(39/77)及27.3%(21/77),在HSIL组分别为85.5%(59/69)、91.3%(63/69)及88.4%(61/69),HR-HPV感染率在三组中分别为25%(9/36)、63.6%(49/77)及92.8%(64/69),BAG-1、MCM2、p16阳性率及HR-HPV感染率均随SIL病变程度上升而增高(P均0.05)。不管在LSIL组还是HSIL组,BAG-1、MCM2表达与p16表达、HR-HPV感染均呈正相关(P均0.05)。结论 BAG-1及MCM2表达与SIL病变程度、p16表达及HR-HPV感染状态呈正相关,它们可能参与了子宫颈SIL的发生、发展过程。     

Ptch和Smo蛋白在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的观察非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)及癌旁组织中Ptch和Smo蛋白的表达,探讨Ptch和Smo表达与临床病理学的关系。方法应用免疫组织化学及免疫印迹技术检测NSCLC及癌旁组织中Ptch和Smo蛋白的表达。结果 Ptch和Smo蛋白在癌旁组织中不表达或低表达,但在NSCLC中表达明显增强。Ptch和Smo蛋白的表达与癌组织学分型无关,与癌组织分化程度和淋巴结转移密切相关,分化程度低、淋巴结转移阳性者,表达增强明显。结论过表达的Ptch和Smo蛋白可能参与NSCLC的发生、发展过程。     

非小细胞肺癌中凋亡相关蛋白与伴神经内分泌分化表达的相关性

目的 检测非小细胞肺癌(non-small cell lung carcinoma,NSCLC)中凋亡相关蛋白与神经内分泌(neuroendocrine,NE)分化的表达,探讨其相关性.方法 采用免疫组织化学染色方法,检测NSCLC组织中survivin,bcl-2蛋白与NSE、Syn及CgA等蛋白的表达,并进行相关性作统计学分析.结果 113例NSCLC中,survivin、bcl-2阳性表达率分别为88.5%、58.4%;NSE、Syn和CgA蛋白阳性表达率分别为53.6%、6.2%和26.5%.伴NE分化者占21.2%,其survivin蛋白表达明显高于不伴NE分化组,差异有统计学意义.结论survivin、bcl-2蛋白表达上调可能在NSCLC发生发展中起重要作用.伴NE分化的NSCLC与表达阴性者相比,以survivin为代表的抗凋亡能力明显增强.     

乳腺癌发展过程中的bcl-2甲基化及其与蛋白表达的关系

目的建立bcl-2基因甲基化特异的PCR（MSP）检测方法,检测乳腺癌发展过程中的bcl-2甲基化．并探讨bcl-2甲基化与蛋白表达的关系。方法设计bcl-2基因MSP引物,采用MSP方法检测30例正常、25例不典型增生（癌前病变）、40例腋窝淋巴结阴性（癌症初期）和45例腋窝淋巴结阳性（癌症后期）乳腺组织的bcl-2基因5’端启动子CpG岛甲基化状态。另外采用免疫组织化学S-P法检测bcl-2的蛋白表达。结果正常、不典型增生、淋巴结阴性和淋巴结阳性乳腺组织的bcl-2甲基化率分别为10．0％、32．0％、40．0％和53．3％。乳腺癌发展过程中的bcl-2甲基化率渐增（P〈0．01）,bcl-2蛋白表达率渐减（P〈0．01）。不典型增生较正常乳腺组织的bcl-2甲基化水平显著提高（P〈0．05）。在乳腺癌发展过程中的4个阶段,bcl-2甲基化与蛋白表达两者之间均呈显著负相关性（P〈0．01）。结论该研究建立了bcl-2基因MSP检测方法,bcl-2基因MSP引物的设计是合理的。bcl-2启动子甲基化可能成为乳腺癌前病变的分子指标之一。在乳腺癌发展过程中,bcl-25’端调控区CpG岛甲基化可能是下调bcl-2表达的因素。     

EXPRESSION OF BCL-2 PROTEIN IN HYPERPLASTIC POLYPS,ADENOMAS, AND CARCINOMAS OF THE COLON

The proto-oncogene Bcl-2 encodes a protein that protects cells from programmed cell death (apoptosis). The protein is expressed in the proliferative compartment of several normal tissues, including normal colonic crypts. The aim of this study was to test Bcl-2 expression in colorectal neoplasms, assuming that, as a regulator of apoptosis, it might be involved in the progression from adenoma to carcinoma. To this end, Bcl-2 reactivity was tested by immunohistochemistry in hyperplastic polyps, colonic adenomas, and carcinomas and its expression was compared with staining for the proliferation-associated Ki-67 antigen, using the MIB-1 antibody. Bcl-2 expression occurred in 2 out of 10 hyperplastic polyps and in 31 out of 35 (tubular, villous, and tubulovillous) adenomas, irrespective of their degree of dysplasia. Of ten carcinomas, only three were focally Bcl-2-positive, all moderately to well differentiated. In two of four carcinomas in Bcl-2-positive adenomas, no Bcl-2 staining was observed. High numbers of MIB-1-positive cells were found in all hyperplastic and neoplastic lesions, without apparent correlation between proliferation and Bcl-2 expression. These findings suggest that in the pathogenesis of hyperplastic polyps, increased crypt cell proliferation is primarily involved, but in some lesions decreased apoptosis may play a role. Furthermore, the increased Bcl-2 expression in adenomas but not in the majority of the carcinomas suggests either that decreased apoptosis is not usually involved in the pathogenesis of these lesions or that the regulation of apoptosis in colorectal epithelia involves additional regulatory factors.     

抗凋亡Bcl－2蛋白在人骨髓造血组织中的定位与分布

通过双际记免疫组织化学技术，探讨了抗细胞凋亡的Ｂｃｌ－２蛋白在１２例反应性骨髓组织中的定位与分布。结果显示，ｂｃｌ－２特异性单克隆抗体与荆豆素ＵＥＡ－１标记的骨髓造血细胞彼此分离、互不重叠。提示人骨髓中Ｂｃｌ－２蛋白阳性造血细胞源自粒系或淋巴系，而不是红系或巨核系。     

小鼠肺发育中细胞增殖与凋亡及相关调控基因的表达

目的 探讨小鼠肺发育过程细胞增殖与凋亡的变化规律及凋亡相关基因ｐ５３、ｂｃｌ－２ｄ在肺发育中的表达意义。方法 不同发育天数的小鼠肺组织,采用免疫组织化学及ＴＵＮＥＬ法,观察细胞增殖与凋亡及相关基因ｐ５３、ｂｃｌ－２的表达。结果 １．胎１４和１６ｄ肺ＰＣＮＡ阳性细胞数达到高峰;之后ＰＣＮＡ阳性率逐渐下降;生后４到１４ｄ,又恢复低水平的细胞增殖,２．小鼠肺发育过程中出现两个细胞凋亡高峰：即胎１４至１６     

尘粒引起人支气管肺淋巴结巨噬细胞的凋亡和bcl-2表达

目的 研究人支气管肺淋巴结尘细胞和大鼠腹膜腔巨噬细胞吞噬碳粒后的凋亡和bcl-2表达,探讨巨噬细胞凋亡与淋巴结结构变化之间的关系。方法 取人支气管肺淋巴结,作石蜡切片和超薄切片,观察尘粒分布、凋亡尘细胞和组织结构变化。用TUNEL染色法和bcl-2抗体标记法观察淋巴结内尘细胞和碳粒处理后的巨噬细胞的凋亡变化和bcl-2表达。结果成人淋巴结巨噬细胞的尘粒明显沉积,淋巴组织减少,胶原纤维增生,血管密度增加。在超薄切片上,尘细胞的细胞核固缩,出现空泡。淋巴结尘细胞和巨噬细胞吞噬碳粒后24h都出现TUNEL染色和bcl-2抗体标记阳性细胞。分解尘粒和碳粒活跃的巨噬细胞,bcl-2表达特别明显。结论 尘粒沉积引起人支气管肺淋巴结巨噬细胞的凋亡和凋亡抑制基因bcl-2高表达,尘细胞凋亡与成人支气管肺淋巴结的结构变化有关。     

缺氧复氧致神经细胞凋亡中Bcl—2、Bax基因蛋白的表达

目的 探讨缺氧复氧致原代培养的大鼠大脑皮层神经细胞凋亡中Bcl-2、Bax基因蛋白的表达及其与凋亡的关系。方法 用胎龄17－18d Wistar大鼠的大脑皮层神经细胞进行原代分离培养。采用TUNEL染色方法、流式细胞术确立缺氧复氧神经细胞凋亡病理模型,并用免疫组织化学方法显示缺氧复氧不同时间Bcl-2、Bax基因的动态表达。结果 1.缺氧复氧可以使大鼠大脑皮层神经细胞发生凋亡,在分别缺氧2、4、6、8h,复氧0h和18h组中,缺氧4h开始出现凋亡细胞,随缺氧时间的延长,凋亡细胞数逐渐升高,两者呈显著负相关,而凋亡的发生也与Bax基因、Bcl-2基因表达呈显著正、负相关性。在缺氧复氧组中,未发现相关性。结论 缺氧复氧可致胎鼠大脑皮层神经细胞发生凋亡;缺氧复氧所引起Bcl-2基因表达增高,Bax基因表达降低,可能是胎鼠大脑皮层神经细胞发生凋亡的机制之一。     

脑缺血过程中B细胞淋巴瘤-2基因家族基因的表达及与细胞死亡的关系

为了了解Ｂ细胞淋巴瘤－２基因（ｂｃｌ－２）家族基因在脑缺血后表达规律及其调节细胞死亡的作用，通过阻塞大鼠双侧颈总动脉和椎动脉建立全脑缺血模型，观察了Ｂａｘ、ｂｃｌ－ｘＬ及ｂｃｌ－２基因表达变化以及与细胞死亡的关系。在缺血再灌流６ｈ，Ｂａｘ免疫染色增加，２４～４８ｈ达到高峰，ｂｃｌ－ｘＬｍＲＮＡ在２４ｈ后表达下降，ｂｃｌ－ｘＬ蛋白在４８ｈ可见明显降低，并且在缺血敏感神经元Ｂａｘ和ｂｃｌ－ｘＬ表达变化显著，与细胞凋亡发生的部位一致，相反，ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ和蛋白表达未见明显变化。提示ｂｃｌ－ｘＬ和Ｂａｘ可能参与脑缺血再灌流中神经细胞死亡的调节，其表达变化与神经元对缺血的敏感性相关     

银杏叶提取物对缺氧复氧致神经细胞凋亡中Bcl-2蛋白表达的影响

为探讨缺氧 /复氧致原代培养的大鼠大脑皮层神经细胞凋亡中 Bcl-2的表达及银杏叶提取物的调节作用 ,本实验使用胎龄 16～ 17d Wistar大鼠的大脑皮层神经细胞进行原代分离培养。采用 TUNEL染色方法、透射电镜技术确立缺氧复氧神经细胞凋亡病理模型 ,并应用免疫组织化学方法显示缺氧复氧不同时间 Bcl-2基因的表达。结果显示 :缺氧复氧可使大鼠大脑皮层神经细胞发生凋亡 ,随缺氧时间的延长 ,凋亡细胞数渐多 ,至缺氧 8h,复氧 18h达高峰 ,银杏叶提取物预保护可使凋亡细胞数减少 ;随缺氧时间延长 ,Bcl-2表达逐渐下降 ,银杏叶提取物可逆转缺氧复氧时 Bcl-2的表达。结果提示 ,银杏叶提取物对缺氧复氧时Bcl-2表达具有明显的抑制作用 ,这种抑制作用可能是银杏叶提取物对抗缺氧复氧时胎鼠大脑皮层神经细胞发生凋亡的机制之一。