抗癌药物诱导人B淋巴细胞白血病细胞的凋亡及周期特异性

目的探讨抗癌药物对人Ｂ淋巴细胞白血病细胞株Ｎａｌｍ－６细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）的影响及周期特异性。方法临床常用的抗癌药物与Ｎａｌｍ－６细胞相互作用８～２４小时后,利用低倍体ＤＮＡ－ＦＣＭ测定法和ＴｄＴ测定＋ＤＮＡ染色法进行检测。结果ＡＤＲ、ＶＰ１６、ＣＰＴ、ＭＴＸ和Ａｒａ－Ｃ能明显诱导细胞凋亡,主要作用于Ｓ期。ＣＰＭ、６ＭＰ和ＰＲＤ则有较低的凋亡细胞诱导率,ＣＰＭ在大剂量时主要引起细胞坏死。６ＭＰ诱导Ｇ１和Ｓ期细胞凋亡,ＰＲＤ诱导Ｇ１期细胞凋亡,ＣＰＭ诱导凋亡作用无明显的周期特异性。结论抗癌药物能诱导人Ｂ淋巴白血病细胞株Ｎａｌｍ－６细胞凋亡。低倍体ＤＮＡ－ＦＣＭ测定法能检测细胞的凋亡率,ＴｄＴ测定＋ＤＮＡ染色法能呈现凋亡细胞与细胞周期的关系。临床上可利用此两种方法检测肿瘤细胞的凋亡率,抗癌药物的疗效及其周期特异性。从而有助于化疗方案的设计及预后的评估。     

联合化疗配合中药对进展期胃癌细胞动力学影响

将１５例进展期胃癌随机分联合化疗组和中药加化疗组，治疗前后分别测定胃癌细胞周期各时相比例。结果表明：中药加化疗组有效率（ＣＲ＋ＯＲ）高于对照组，扩展率（ＰＤ）低于对照组（Ｐ＜０．０１）；联合化疗组Ｓ期百分比下降（Ｐ＜０．０５），而中药加化疗组下降更显著（Ｐ＜０．０１），且Ｇ_０／Ｇ_１期百分比明显增高（Ｐ＜０．０１），揭示中药对化疗协同增效的机理是通过阻滞细胞进入新的周期，抑制肿瘤细胞ＤＮＡ合成实现的。     

血卟啉衍生物对鼠肿瘤细胞DNA含量,AgNORs的影响

应用图像分析技术测定大鼠移植Ｗ２５６肿瘤单纯放射治疗组（对照组）和血卟啉衍生物并放射治疗组（实验组）肿瘤细胞的ＤＮＡ含量及ＡｇＮＯＲｓ计数，探讨血卟啉衍生物对恶性肿瘤放射治疗的增敏作用。结果显示实验组大鼠肿瘤细胞ＤＮＡ含量为（５．８４±１．２２）Ｃ，ＡｇＮＯＲｓ计数为２．４２±０．７３；对照组大鼠肿瘤细胞ＤＮＡ含量为（７．８３±０．６８）Ｃ，ＡｇＮＯＲｓ计数为５．３５±０．８４；前者ＤＮＡ含量及ＡｇＮＯＲｓ计数显著低于后者（ｔ＝６．３７，ｔ＝１１．７７，Ｐ＜０．０１）。表明血卟啉衍生物对恶性肿瘤放射治疗有明显的增敏作用     

含MDR基因的人乳腺癌MCF 7/pZMDR多药耐药细胞株的构建

目的：肿瘤细胞的多药抗药性（ＭＤＲ）是化疗失败的主要原因之一，Ｐ－糖蛋白高表达是ＭＤＲ的主要机制，逆转ＭＤＲ成为肿瘤治疗亟待解决的问题。目前用于研究抗药性和筛选逆转抗药性药物的模型较少，本实验拟构建多药抗药性细胞株。方法：采用基因工程技术，重组ＭＤＲ１基因ｃＤＮＡ于逆转录病毒载体ｐＺＩＲ－ＮｅｏＳＶ（Ｘ）的克隆位点，并用脂染胺（ｌｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥ）介导的ＤＮＡ转移技术，将其转入包装细胞ＰＡ３１７中，收集含病毒子的培养上清液感染对药物敏感的人乳癌细胞株ＭＣＦ－７，经筛选培养基筛选，ＰＣＲ、免疫组化及阿霉素在细胞内的分布等实验。结果：含ＭＤＲ基因的逆转录病毒载体ｐＺＭＤＲ的构建方法证明是正确的，ＭＤＲ１ｃＤＮＡ已整合在染色体基因组中并表达Ｐ－糖蛋白。结论：建立的ＭＣＦ－７／ｐＺＭＤＲ细胞为一特异表达Ｐ－糖蛋白的多药抗药性转基因细胞株     

紫外光血液辐照疗法对放射治疗鼠肿瘤细胞DNA含量、AgNORs计数的影响

应用多功能图像分析仪，检测了鼠Ｗ２５６移植性肿瘤细胞ＤＮＡ含量，并同时测定细胞ＡｇＮＯＲｓ计数，探讨紫外光血液辐照疗法（ＵＢＩ）对放射治疗的增敏作用。结果表明；光量＋放疗组肿瘤细胞ＤＮＡ含量为５．３４±１．０９Ｃ，ＡｇＮＯＲｓ计数为２．２４±０．４３；单纯放疗组肿瘤细胞ＤＮＡ含量为７．８３±０．８６Ｃ，ＡｇＮＯＲｓ计数为５．３５±０．８４；前者ＤＮＡ含量及ＡｇＮＯＲｓ计数显著小于后者（Ｐ＜０．０５）。表明ＵＢＩ对放疗恶性肿瘤有明显的增敏作用。     

含MDR基因的人乳腺癌MCF7／pZMR多药耐药细胞株的构建

目的：肿瘤细胞的多药抗药民生（ＭＤＲ）是化学失败的主要原因之定，Ｐ－糖蛋白高表达是ＭＤＲ的主要机制，逆转ＭＤＲ成为肿瘤治疗亟待的问题。目前用于研究抗经性和筛选逆转抗药性药物的模型较少，本实验拟构建多药抗药性细胞株。方法；采用基因工程技术，重组ＭＤＲ１基因ＣＤＮＡ于逆转录病毒载体ｐＺＩＲ－ＮｅｃＳＶ（Ｘ）的克隆位点，并用脂染胺介民的ＤＮＡ转移技术，将其转入包装细胞ＰＡ３１７中，收集含病毒子的培养上清     

秋兰姆二硫化物拮抗博莱霉素DNA损伤的研究

秋兰姆二硫化物拮抗博莱霉素ＤＮＡ损伤的研究王民生，Ｐ．ＳｃｈｍｅｚｅｒＦ．ＡｍｅｌｕｎｇＨ．ＯｓｓｗａｌｄＥ．ＦｒｅｉａｎｄＮ．Ｆｒａｎｋ（江苏省职业病防治研究所毒理科南京２１００２８德国癌症研究中心Ｄ─６９１２０Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ，ＦＲＧ）博莱霉...     

逆转P－糖蛋白介导的多药抗药性化合物的理化特性

逆转Ｐ－糖蛋白介导的多药抗药性化合物的理化特性符立梧潘启超多药抗药性（ＭｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅＭＤＲ）是指肿瘤细胞接触一种抗癌药物产生耐药的同时，也对其他结构和作用机理不同的天然药物亦产生交叉耐药。ＭＤＲ的原因是复杂的，但Ｍｄｒ基因过度...     

逆转胃肠道肿瘤多药耐药性的研究进展

化疗是治疗人体恶性肿瘤的重要手段之一 ,然而肿瘤细胞耐药性常常限制了疗效的提高。自从发现多药耐药 (ＭＤＲ )现象以来 ,国内外对ＭＤＲ进行了广泛、深入的实验和临床研究 ,证明其机制包括 :多药耐药基因 (ＭＤＲ 1基因 )及其编码的Ｐ -糖蛋白 (Ｐ ｇｐ)过度表达 ;多药耐药相关蛋白 (ＭＲＰ)表达增加 ;谷胱甘肽 (ＧＳＨ )依赖性解毒酶系统活性增加 ;蛋白激酶Ｃ变化 ;ＤＮＡ拓朴异构酶含量减少或性质发生改变等。ＭＤＲ逆转治疗是克服肿瘤耐药、提高化疗效果的 1种重要手段。近年来寻求拮抗或逆转肿瘤细胞ＭＤＲ的研究颇多 ,从报道异搏定…     

多药耐药性相关蛋白研究进展

多药耐药性相关蛋白研究进展李晓冰赵勃然综述方晋平审校肿瘤细胞在某一抗癌药物的诱导下可以产生对结构及功能不同的所有抗癌药物产生交叉耐药性，这一现象称为多药耐药性（Ｍｕｌｔｉ－ｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔｏｎｃｅ，ＭＤＲ），典型的ＭＤＲ由ＭＤＲⅠ基因编码的...     

肺癌、大肠癌患者白细胞对抗癌药物敏感性的测定及意义

作者对２０例肺癌、２１例大肠癌患者做了白细胞对抗癌药物敏感性实验，同时以癌细胞药敏实验作对照。发现肺癌病人癌细胞对ＶＰ１６、ＶＤＳ、ＶＣＲ、ＰＹＭ、５－Ｆｕ、ＩＦＯ、ＣＴＸ等药物的敏感性低于白细胞药敏，其中对ＣＴＸ药敏性差异显著（Ｐ＜０．０５）。大肠癌患者癌细胞对八种抗癌药物敏感性高于白细胞，其中对５－Ｆｕ、ＭＭＣ、ＣＴＸ、ＤＤＰ有非常显著的差异（Ｐ＜０．０５～０．０１）。发现白细胞对抗癌药物敏感性有肿瘤、个体和药物差异性。     

维拉帕米抑制肝癌耐药细胞增殖的研究

目的探讨维拉帕米抑制肝癌耐药细胞增殖的机理。方法同位素掺入法研究细胞的增殖；荧光分光光度法测定细胞内抗癌药物浓度。结果单独应用ＶＰＭ对耐药肝癌细胞ＢＥＬ┐７４０２／ＡＤＲ有不同程度的抑制作用。而与ＡＤＲ合用，ＡＤＲ与对细胞增殖基本无影响的２．５μｇ／ｍｌ浓度的ＶＰＭ合用时，ＩＣ５０较单独用ＡＤＲ时明显降低（Ｐ＜０．０５）；而与５．０μｇ／ｍｌ的ＶＰＭ合用时，其ＩＣ４０较单独用ＡＤＲ降低更显著（Ｐ＜０．０１）。ＶＰＭ可显著增加细胞内的抗癌药浓度（Ｐ＜０．０５～０．０１）。结论ＶＰＭ降低ＡＤＲ的ＩＣ５０、增加抗癌药的细胞毒性，可能与其拮抗ｐ┐１７０糖蛋白有关     

食管癌多部位DNA含量分析及其临床意义

目的;探讨食管癌多部位ＤＮＡ含量与临床及病理特性之间的关系。方法：流工细胞光度术检测１００例食管癌手术切除新鲜标本的癌、癌旁和断端组织的ＤＮＡ含量。结果：癌组织ＤＮＡ非整倍体（ＡＮ）、ＤＮＡ指数（ＤＩ）和细胞增殖活性指数（ＰＩ）都显著高于癌旁和断端（Ｐ〈０．０５）;食管癌ＡＮ与肿瘤细胞分化和局部洒巴结转移密切相关（Ｐ〈０．０１）。在癌体与癌旁或断端组织间存在ＤＮＡ倍体异质性（１４．８％）;切距〈５     

大肠杆菌差异性DNA修复试验

大肠杆菌差异性ＤＮＡ修复试验王吉成，张慧娟，钱蓓丽（上海医药工业研究院毒理室上海２００４３７）大肠杆菌ｒｅｃＡ／ｕｖｒＢ差异性ＤＮＡ修复试验方法（Ｅ．ｃｏｌｉＤＤＲＴ）由Ｍｏｈｎ，ＧＲ等于１９８４年建立，采用一对ＤＮＡ损伤修复缺陷菌株Ｅ．ｃｏｌｉＫ─...     

逆转录病毒载体介导的核酶基因转移有效恢复肿瘤细胞的？…

目的：为了研究抗ＭＤＲＩ核酶逆转肿瘤细胞中Ｐ－ｇｐ介导的多重耐药性（ＭＤＲ）的作用。方法：首先,我们建立了单纯由Ｐ－ｇｐ介导的、２０倍耐药的人Ｄａｕｄｉ淋巴瘤细胞的模型－Ｄａｕｄｉ／ＭＤＲ２０。同时我们将表达不同抗ＭＤＲ１核酶的逆转录病毒载体（Ｎ２Ａ＋ｔＲＮＡｉｍｅｔ－１９６ＭＤＲ１－Ｒｚ,Ｎ２Ａ＋ｔＢＮＡｉｍｅｔ－１９６ＭＤＲ１－ｓＲｚ和 Ｎ２Ａ＋ｔＲＮＡｉｍｅｔ－ｉＭＤＲＩ－ｓＲｚ）转染到ＧＰ＋ｅｎｖＡＭ１２细胞中进行包装,获得了高滴度的病毒［（１,１～２．５）×１０ｃｆｕ／ｍｌ］。后者用于感染Ｄａｕｄｉ／ＭＤＲ２０。结果：通过一系列分子生物学检测证实,携带３种核酶的逆转录病毒不但整合到ＤＮＡ中,而且也高水平表达相应的核酶ｔＲＮＡｉｍｅｔ－ｉＭＤＲ１－ｓＲｚ,ｔＲＮＡｉｍｅｔ－１９６ＭＤＲ１－ｓＲｚ和ｔＲＮＡｉｍｅｔ－１９６ＭＤＲ１－Ｒｚ。结果表明,ｔＲＮＡｉｍｅｔ－ｉＭＤＲ１－ｓＲｚ和ｔＲＮＡｉｍｅｔ－１９６ＭＤＲ１－ｓＲｚ转导的Ｄａｕｄｉ／ＭＤＲ２０细胞完全逆转了对长春新碱的敏感性,并伴随着ＭＤＲ１　ｍＲＮＡ和Ｐ－ｇｐ表达的阻断。结论：逆转录病毒载体高效介导的抗ＭＤＲ１核酶的基因转移能够完全逆转肿瘤细     

ＤＮＡ双链断裂修复通路与遗传性乳腺癌的关系

遗传性乳腺癌具有家族聚集、早发、双侧等特点,多为易感基因发生胚系突变所致。ＤＮＡ损伤修复是哺乳动物细胞保证遗传物质稳定性的重要机制。双链断裂是最严重的ＤＮＡ损伤之一,修复过程涉及同源重组和非同源末端连接通路。ＤＮＡ双链断裂修复或信号传导相关基因或蛋白功能缺陷可以诱导染色体不稳定而增加乳腺癌的易感性。与ＤＮＡ修复功能相关的链交联剂和ＰＡＲＰ-１抑制剂为ＢＲＣＡ相关遗传性乳腺癌的治疗提供了新的途径。本文就ＤＮＡ双链断裂修复通路相关基因的突变与遗传性乳腺癌发病的关系作一综述。     

多药耐药基因表达及凋亡指数对胃癌预后的影响

目的：探讨胃癌多药耐药（ＭＤＲ）表达与预后，凋亡指数（ＡＩ）与预后及ＭＤＲ与ＡＩ表达之间的关系。方法：应用免疫组化的方法及ＴＵＥＮＬ法。结合１９８７年－１９９１年的完整胃癌病例进行１０年随访，对胃癌ＭＤＲ的主要指标Ｐ－ｇｐ、ＧＳＴ－π、ＤＮＡＴＯＰＯⅡ及细胞ＡＩ进行检测。结果：Ｐ－ｇｐ表达与临床分期有关（Ｐ〈０．０５），正常组织表达Ｐ－ｇｐ高者生存期长（Ｐ〈０．０５）。ＧＳＴ－π表达强度与预后有关     

高转移人肺巨细胞癌细胞67—KD层粘连蛋白受体基因表达

在逆转录ＰＣＲ特异扩增６７－ＫＤ层粘连蛋白受体（简称ＬＮ－Ｒ）ｃＤＮＡ片段并制备成探针的基础上，观察了高转移人肺巨细胞癌（简称ＰＧ）细胞和低转移人肺腺癌（简称ＰＡａ）细胞６７－ＫＤＬＮ－Ｒ ｍＲＮＡ表达水平。结果表明，两种细胞存在大小相同的特异转录体，约１．７ｋｂ左右；高转移ＰＧ瘤细胞比低转移ＰＡａ瘤细胞表达较高水平的６７－ＫＤＬＮ－Ｒ ｍＲＮＡ，同时ＰＧ瘤细胞存在明显的该基因扩增；不同剂量６７－     

DNA与AgNOR在甲状腺良、恶性病变中的定量研究

本研究采用Ｆｅｕｌｇｅｎ染色和ＡｇＮＯＲ银染色，检测ＤＮＡ及ＡｇＮＯＲ物质，发现：ＤＮＡ含量Ⅲ级为甲状腺癌组＞非典型结节组＞结甲肿组＞对照组，而Ⅰ级则反之；ＡｇＮＯＲ均数为甲状腺癌组（９．２７±２：７２）＞非典型结节组（４．７８±１．６６）＞结甲肿组（３．１６±１．３８）＞对照组（３．０８±０．４１）；甲状腺癌组与各组间差异有显著意义（Ｐ＜０．０１），非典型结节组与结甲肿组、对照组间差异也有显著意义（Ｐ＜０．０１），而结甲肿组与对照组间则无差异（Ｐ＞０．０５）。作者认为Ⅲ级ＤＡＮ含量的细胞出现频率越高或／和ＡｇＮＯＲ均数越高，恶性的可能性就越大或分化程度越低；本研究提示ＡｇＮＯＲ的均数与ＤＮＡ含量具有显著的相关性，并与细胞增生的程度呈正比，故对鉴别良、恶性肿瘤及交界性病变有肯定价值。     

甘草甜素抑制致癌过程中对DNA损伤修复的影响

本文检测外周淋巴细胞非程序ＤＮＡ合成（ＵＤＳ），探讨甘草甜素（ＧＬ）在抑制二乙基亚硝胺（ＤＥＮ）致肝癌前病变发生过程中，对ＤＮＡ损伤修复的影响。结果显示；大鼠腹腔注射ＤＥＮ(１００ｍｇ／ｋｇ）后５小时，ＵＤＳ值（１６８．５±３６．５ｃｐｍ／５×１０５ＬＣ）显著低于正常大鼠（２２６．７±４７．０）（Ｐ＜０．０５）；在加用ＧＬ的影响下，ＵＤＳ值（２１２．３±６９．２）显著提高，与正常者相接近（Ｐ＞０．０５）。在注射ＤＥＮ后４周，肝癌前病变的发生受到ＧＬ抑制，同时ＵＤＳ值（５０１．０±１４０．０）也显著高于不用ＧＬ者（３６７．０±３６．３）（Ｐ ＜０．０１），而与正常者（６０６．８±８３．８５）无明显差别(Ｐ＞０．０５）。提示ＧＬ抑制ＤＥＮ致肝癌作用与ＧＬ保护ＤＮＡ损伤修复有关。