柯萨奇B组病毒感染的ELISA检测

为了对柯萨奇B(CoxB)组病毒感染进行病原诊断,我们用细胞培养的病毒抗原建立了检测该组病毒(1～6型)抗体的ELISA 法.两年多临床试用表明,该法快速、简便、特异与稳定.现报告如下.     

柯萨奇B组病毒感染的检测方法及评价

柯萨奇Ｂ组病毒感染的检测方法及评价顾国浩，姚学巧，张联璧（苏州医学院附一院，江苏苏州２１５００６）刘恭植（镇江医学院）关键词柯萨奇Ｂ组病毒，中和试验，酶联免疫吸附试验，分子杂交，聚合酶链反应柯萨奇Ｂ组病毒（ＣｏｘｓａｃｋｉｅＢｖｉｒｕｓｅｓ，ＣＢＶ）...     

急性心肌梗死与柯萨奇B组病毒感染关系的研究

目的　探讨柯萨奇B组病毒感染与急性心肌梗死 (AMI)的发病关系。方法　应用SPA吸收IgG结合间接ELISA法检测AMI患者血清中柯萨奇B组病毒特异性IgM抗体及中和抗体。结果　 4 8例AMI患者血清特异性IgM抗体阳性率为 75 % ,血清中和抗体阳性率为 85 4 % ,与正常对照组相比差异非常显著。双份血清试验 ,恢复期血清抗体效价高于初期血清抗体效价 4倍以上。结论　AMI发病与柯萨奇B组病毒感染有关。     

病毒性心肌炎血清柯萨奇B组病毒特异性IgM及RNA检测的临床意义

目的：探讨由柯萨奇Ｂ组病毒所致病毒性心肌炎的病原学诊断价值。方法：应用酶联免疫吸附试验及聚合酶链反应对４６例病毒性心肌炎患者血清柯萨奇Ｂ组病毒（ＣＢＶ）特异性ＩｇＭ和ＲＮＡ进行检测。结果：心肌炎组ＣＢＶ－ＩｇＭ检出率为６０．９０％，ＣＢＶ－ＲＮＡ为４３．５％，非心肌炎组分别为２０％和１２％，两组有非常显著的差异。表明ＣＢＶ是病毒性肌炎的主要病原。心肌炎组２周内检测ＣＢＶ－ＩｇＭ和ＣＢＶ－ＲＮＡ的阳性率分别为７８．６％和８５．７％，２～６周分别为４５．２％和２２．６％，其阳性检出率与病程呈负相关。结论：早期检测对于心肌炎的早期诊断及病因学研究具有指导意义     

病毒性心肌炎血清柯萨奇B组病毒特异性IgM及RNA检测的临床意义

目的：探讨由柯萨奇B组病毒所致病毒性心肌炎的病原学诊断价值。方法：应用酶联免疫吸附试验及聚合酶链反应对46例病毒性心肌炎患血清柯萨奇B组病毒(CBV)特异性IgM和RNA进行检测。结果：心肌炎组CBV-IgM检出率为60.90％，CBV-RNA为43.5％．非心肌炎组分别为20％和12％．两组有非常显的差异。表明CBV是病毒性肌炎的主要病原。心肌炎组2周内检测CBV-IgM和CBV-RNA的阳性事分别为78.6％和85.7％，2～6周分别为45.2％和22.6％．其阳性检出率与病程呈负相关。结论：早期检测对于心肌炎的早期诊断及病因学研究具有指导意义。     

柯萨奇B组病毒与小儿急性短暂性跛行发病关系的研究

目的探讨小儿下肢急性短暂性跛行发病的感染因素,为临床提供诊断依据。方法采用酶联免疫吸附试验对600例小儿急性跛行患儿组、100例上呼吸道感染组(下称上感组)、100例健康儿童对照组进行血清柯萨奇B组病毒1～6型(CVB 1～6型)IgM检测。结果小儿跛行患者组CVB-IgM阳性检出率为51.3%,其中以B1型为主,B4型次之,阳性率分别占36.8%和16.3%,检出双重阳性感染79例,占总阳性病例的25.7%(79/308);上感组CVB-IgM检出率为29.0%,型别亦以B1和B4为主,检出率依次为15.0%和10.0%,双重阳性占阳性病例的20.7%(6/29);健康对照组CVB-IgM检出率为16.0%,型别仍以B1和B4为主,检出率分别为6.0%和5.0%。3组的阳性率跛行组明显高于上感组和健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论柯萨奇B组病毒感染与小儿急性短暂性跛行发病关系密切,可能是其发病的重要感染因素之一,分型检测CVB特异性IgM抗体具有重要的临床诊断意义。     

病毒性肝炎患者中柯萨奇B组病毒的感染情况

目的：了解柯萨奇B组病毒（coxackie virus B,CVB)在病毒性肝炎中的感染情况。方法：用免疫酶法对203例各型肝炎组进行CVB1至6型免疫球蛋白G（IgG)检测，并与105例病毒性心肌炎组及正常对照组进行分析。结果：肝炎组阳性率（39．9％）高于正常对照组（13．4％），P＜0．005，而低于心肌炎组（53．3％），P＜0．025，B1－6型都有一定的检出率，且以各型交叉感染为主。结论：病毒性肝炎患者对CVB各型普遍易感，其致病性应引起重视与探讨。     

柯萨奇病毒B3诱导大鼠心肌成纤维细胞骨桥蛋白及I型胶原的表达情况

目的检测柯萨奇病毒B3（CVB3）对大鼠心肌成纤维细胞骨桥蛋白（OPN）及I型胶原表达的影响,探讨OPN在病毒性心肌炎的可能发病机制。方法用重复感染率（MOI）为0．5PFU／cell的CVB3感染体外培养的大鼠心肌成纤维细胞,细胞分对照组（12h）、病毒组（感染后12h、1d,2d及3d）。用RT·PCR及WesternBlot、免疫组化检测OPN及I型胶原表达,并将OPN表达与I型胶原表达进行直线相关分析。结果（1）RT-PCR测得对照组12h、病毒组12h、1d、2d及3d5组OPN／13-actin吸光度比值分别为：0．38±0．06、0．56±0．06、0．72±0．05、0．98±0．06、0．86±0．02;WesternBlot测得上述5组的OPN／13-actin灰度值分别为：0．26±0．03、0．36±0．03、0．52±0．04、0．76±0．05、0．62±0．02;感染后12h,OPN表达即增高,于2d达到高峰,3d呈下降趋势,OPN／13-actin吸光度比值、灰度值比较差异均有统计学意义（F值分别为74．965、53．004,P均〈0．05）;（2）RT-PCR测得心肌成纤维细胞对照组12h、病毒组12h、1d、2d、3dI型胶原／13-actin吸光度比值分别为：1．12±0．03、1．184-0．01、r．22±0．02、1．33±0．02、1．28±0．03,感染后12hI型胶原表达即增高,于2d达到高峰,3d呈下降趋势,差异有统计学意义（F=38．241,P〈0．05）;（3）OPN表达与I型胶原有正相关关系（r=0．948,P〈0．001）。结论CVB3可诱导心肌成纤维细胞I型胶原及OPN表达,OPN表达与I型胶原表达呈正相关,提示OPN可能促进心肌成纤维细胞I型胶原表达,参与病毒性心肌炎心肌纤维化的发病机制。     

Disseminated coxsackievirus B fulminant myocarditis in an immunocompetent adult: A case report: Case of disseminated coxsackievirus myocarditis

Coxsackieviral myocarditis is associated with systemic involvement in neonates; however, fulminant coxsackieviral myocarditis is rare in adults, and its dissemination with fatal myocarditis involving kidneys, liver, and adrenal is further rarely reported. We report a case of fulminant myocarditis along with dissemination of coxsackievirus, which was clinically unrecognized.     

Laboratory diagnosis of parvovirus B19 infection.

The sensitivity and application of the polymerase chain reaction (PCR) for the diagnosis of parvovirus B19 (B19) infection was investigated by simultaneously assaying a collection of 279 consecutively received samples for presence of anti-B19 IgM and IgG antibodies by Western blot and for B19 DNA by PCR and dot-blot hybridization (dot-blot); samples were sera from patients with suspected B19 infection. PCR and dot-blot detected B19 DNA in 9% (16/179) and 1% (2/179), respectively of Ab-positive samples (IgM+/IgG-, IgM+IgG+, IgM-IgG+), and in 28% (15/54) and 2% (1/54), respectively, of IgM+ samples. PCR also detected B19 DNA in 2% (2/100) of IgM-/IgG- samples, both of which had normal total IgG and IgM levels. PCR is of unique value because it permits diagnosis of B19 infection even in the absence of specific acute phase (IgM) and in the presence or absence of convalescent-phase (IgG) Ab.     

不同检测方法对隐匿性乙型肝炎病毒感染的诊断价值分析

目的：探讨隐匿性乙型肝炎病毒（HBV）感染的不同诊断试验方法。方法选取该院行肝脏活检的患者68例,A 组12例为乙型肝炎表面抗原（HBsAg）阳性患者;B 组27例为乙型肝炎表面抗体（HBsAb）阴性、乙型肝炎核心抗体（HBcAb）阴性,且丙型肝炎抗体阳性的患者;C 组11例为 HBsAb 阳性,且 HBcAb 阳性的患者;D 组18例为 HBsAb 阴性、HBcAb 阳性的患者。检测外周血清乙型肝炎标志物,外周血单核细胞（PBMCs）,肝组织 HBV DNA 的表达。结果 A 组患者为显性乙型肝炎患者,经血清学、PBMCs 、肝组织 HBV DNA 检测均提示 DNA 阳性。 HBcAb 阳性的患者（C 、D 组）其隐匿性 HBV 感染的比例较 HBcAb阴性（B 组）的患者明显升高,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论隐匿性 HBV 感染在人群中有一定的发病率,对于高危患者（合并丙型肝炎或 HBcAb 阳性）应常规检测 HBV DNA ,联合多种检测方法可提高隐匿性 HBV 感染的诊断率。     

柯萨奇病毒B3诱导HeLa细胞凋亡

目的：观测柯萨奇病毒B3（CVB3）诱导HeLa细胞凋亡的动态过程。方法：用CVB3感染HeLa细胞后,在不同时间点收集细胞,通过相差显微镜、电子显微镜、流式细胞仪和DNA缺口末端标记法（TUNEL）检测HeLa细胞的病变。结果：CVB3感染HeLa细胞4h后,细胞发生凋亡（11.79%±0.962%比4.07%±0.665%,P〈0.05）并呈时间依赖性增高,36~48h达高峰。但在病毒感染CVB3后1h时,CVB3则抑制细胞凋亡的发生（2.21%±0.448%比3.73%±0.637%,P〈0.05）。结论：CVB3可诱导HeLa细胞发生凋亡,但感染早期病毒则抑制细胞凋亡。     

尿中HBsAg检测对乙肝相关性肾炎诊断价值的探讨

目的探讨尿中HBsAg的检测对乙肝相关性肾炎的诊断意义。方法对85例肾小球疾病患者分别进行肾组织活检检测肾组织HBsAg沉积和应用Elisa法检测尿中HBsAg。结果尿HBsAg检测与肾组织HBsAg沉积检测有一致性。结论尿HBsAg检测可为乙肝相关性肾炎的诊断提供重要的依据。     

661名疗养员乙肝感染情况调查

目的了解疗养员乙型肝炎感染率,探讨乙肝预防对策与措施。方法对2004年5月～2008年10月来沈阳军区大连疗养院小平岛疗养区疗养的661名军官进行乙肝表面抗原检测,采用酶联免疫吸附法对其中阳性者进行乙肝"两对半"检测,按年分组,进行分析比较。结果总阳性率为1.51%,2004年阳性率为1.87%,2008为0.66%,差异有统计学意义(χ2=16.12,P0.01)。结论疗养员乙肝感染率明显低于全国平均水平(9.8%),但为了将乙肝发病率降至最低,建议制订乙肝疫苗扩大免疫计划,及时对易感人群接种乙肝疫苗。     

2016年湖北省部分地区手足口病肠道病毒病原谱及柯萨奇病毒A6型和A10型基因特征分析

目的 了解2016年湖北省部分地区手足口病病原谱特征,对其中的柯萨奇病毒A组6型（Cox A6）和A组10型（Cox A10）基因特征进行分析。方法 采集2016年湖北省部分地区手足口病患者阳性标本,提取病毒核酸,通过一步法反转录-PCR扩增肠道病毒VP1序列并测序,经Blast比对确定病毒基因型。对其中Cox A6和Cox A10的VP1全长序列进行同源性和系统进化分析。结果 病原学监测结果显示,肠道病毒71型（EV71）阳性率为29.4%（599/2 035）,柯萨奇病毒A组16型（Cox A16）阳性率为25.7%（522/2 035）,其他肠道病毒阳性率为44.9%（914/2 035）。对该地区收集的83份肠道通用阳性的非EV71和非Cox A16进行病毒分型分析,Cox A6阳性检出率为56.6%（47/83）,Cox A10阳性检出率为22.9%（19/83）,还检测出其他肠道病毒如Cox A2（2株）、Cox A4（7株）、CB4（2株）、CB5（2株）、CB6（1株）、Echo5（1株）、Echo9（1株）和Echo25（1株）。对Cox A6和Cox A10的VP1基因同源性比对及系统进化分析显示,2016年湖北省22株Cox A6的VP1基因核苷酸同源性为95.1%~100.0%,11株Cox A10的VP1基因核苷酸同源性为95.2%~100.0%。我国与其他国家Cox A6和Cox A10可分别划分为8个（A~H）和7个基因谱系（A~G）。湖北省Cox A6与我国其他Cox A6位于H基因谱系上;湖北省Cox A10与我国其他Cox A10位于G基因谱系上。结论 2016年湖北省部分地区手足口病病原体除了EV71和Cox A16两种主要病毒外,还检测出Cox A6和Cox A10等手足口病的病原。其他肠道病毒中以Cox A6和Cox A10为主,仍需进一步加强对其他肠道病毒的监测和分子流行病学特征的分析。