Efficacy of parthenolide on lung histopathology in a murine model of asthma

BackgroundParthenolide is the active constituent of the plant ‘Tanacetum parthenium’ (Feverfew) which has been used for centuries as a folk remedy for inflammatory conditions.Aim of the studyIn this study we aimed to investigate the effects of parthenolide in a murine model of chronic asthma.Materials and methodsThirty-five BALB/c mice were divided into five groups; I (control), II (placebo), III (dexamethasone), IV (parthenolide) and V (dexamethasone and parthenolide combination). Lung histology was evaluated after treatment with the study drugs. Levels of interleukin (IL)-4 and IL-5 were determined by ELISA.ResultsHistologic parameters except the number of mast and goblet cells improved in the parthenolide group when compared with placebo. All parameters except basal membrane thickness and number of mast cells were improved significantly better in the group receiving dexamethasone when compared with the parthenolide group. Improvement of most of the histologic parameters was similar in Groups III and V. Interleukin-4 levels were significantly reduced in the parthenolide group when compared to the placebo group.ConclusionWe demonstrated that parthenolide administration alleviated some of the pathological changes in asthma. But parthenolide alone is not efficient as dexamethasone therapy and the parthenolide and dexamethasone combination also did not add any beneficial effect to the dexamethasone treatment.     

Efficacy of sulphasalazine on lung histopathology in a murine model of chronic asthma

Sulphasalazine is a specific inhibitor of nuclear factor kappa B (NF-kappa B) which plays a key role in asthma. To determine the impact of sulphasalazine in the treatment of chronic asthma, BALB/c mice were sensitized and challenged with ovalbumin. Mice with experimentally induced asthma in group I received saline, group II sulphasalazine 200 mg/kg, group III sulphasalazine 300 mg/kg, and group IV dexamethasone 1 mg/kg intraperitoneally once a day in the last 7 days of the challenge period. Histological findings of the airways were evaluated by light and electron microscopies. Dexamethasone and sulphasalazine in both doses significantly improved all airway histopathologic parameters of asthma except numbers of goblet cells. Both doses of sulphasalazine improved thicknesses of basement membrane better than dexamethasone. Dexamethasone reduced the number of mast cells better than sulphasalazine (200 mg/kg). Further studies are needed to evaluate the efficacy of sulphasalazine in the treatment of asthma.     

小鼠支气管哮喘模型的研究现状

支气管哮喘(简称哮喘)是一种慢性气道炎症性疾病,近年来用小鼠实验模型进行哮喘的研究越来越多,涉及哮喘免疫发病机制特别是相关的细胞因子的研究以及药物疗效等.成功的小鼠哮喘模型的建立在哮喘研究中具有重要作用,模型的复制涉及到分类、诱导物及其发展等各方面,理想的小鼠哮喘模型建立至今仍有很多方面有待进一步探究.     

重组可诱导共刺激分子融合蛋白治疗过敏性支气管哮喘小鼠的实验研究

目的研究可诱导共刺激分子融合蛋白(ICOSIg)对过敏性支气管哮喘(简称哮喘)小鼠的治疗作用。方法32只健康雌性BALB/c小鼠用分段随机分组法将小鼠随机分成4组。哮喘组(A组)、ICOSIg治疗组(B组)、同型抗体对照组(C组)、生理盐水气雾激发对照组(D组),每组8只,采用重组真核表达技术制备ICOSIg,建立鸡卵白蛋白(OVA)免疫小鼠哮喘模型,给予ICOSIg治疗后观察其气道阻力变化、支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数、各炎性细胞百分比及白细胞介素4(IL4)、γ干扰素(IFNγ)和总免疫球蛋白E(IgE)含量的变化;采用流式细胞仪(FACS)检测T辅助细胞(Th)亚群变化;取肺组织行病理组织学分析观察肺内炎症情况。结果(1)制备的ICOSIg可与哮喘小鼠脾脏B细胞上相应配体结合。(2)B组小鼠气道压力变化为[(33±12)%],与A组[(58±10)%]比较差异有统计学意义(P<0.01)。B组BALF中细胞总数为[(5.9±3.1)×107/L],与A组[(22.6±5.3)×107/L]比较差异有统计学意义(P<0.01);B组嗜酸粒细胞数为0.020±0.020,与A组(0.070±0.030)比较差异有统计学意义(P<0.01);B组IL4水平为(77±31)ng/L,与A组[(179±44)ng/L]比较差异有统计学意义(P<0.01);B组外周血中总IgE水平为(175±33)μg/L,与A组[(282±22)μg/L]比较差异有统计学意义(P<0.01);B组Th2细胞比例为(4.5±1.0)%,与A组[(11.1±2.5)%]比较差异有统计学意义(P<0.01)。(3)与A组比较,B组小鼠肺内炎性浸润明显减轻、上皮细胞完整、管腔内少见分泌物。结论ICOSIg可体内阻断可诱导共刺激通路、减少Th2免疫反应偏移并抑制IgE的生成,对过敏性哮喘有治疗作用。     

急性期和慢性期哮喘小鼠模型在哮喘致病过程中的对比研究

目的 比较卵清蛋白(ovalbumin,OVA)诱导的急性期和慢性期哮喘小鼠模型在气道炎症、气道重塑和气道高反应方面的差异,明确在哮喘致病过程中肺组织的病理变化.方法 48只BALB/c小鼠随机分为急性组和慢性组,其中急性组包括正常对照组(A1组)和急性哮喘组(A2组),慢性组包括正常对照组(B1组)和慢性哮喘组(B2组).OVA致敏和激发方法分别构建急性早期哮喘模型和慢性期哮喘模型后,测定气道阻力,BALF细胞计数和分类计数,酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测IL-4、IL-5、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ).HE染色观察气道炎症,AB-PAS和Masson染色测定气道重塑.结果 与正常小鼠相比,A2组和B2组小鼠气道阻力均明显升高,但B2组小鼠气道阻力在基础值即发生明显改变.相比于慢性组哮喘小鼠,急性组哮喘小鼠BALF中细胞总数和嗜酸粒细胞数,IL-4、IL-5和IFN-γ水平,肺组织气道血管周围炎症细胞聚集,以及气道黏液分泌水平等炎症性改变更为明显.相比于A2组,B2组哮喘小鼠BALF中TGF-β1和VEGF水平,气道平滑肌增厚,上皮下胶原沉积,上皮下纤维化等改变更为显著.结论 在急性早期哮喘中主要是以炎症性改变为主,但在哮喘早期即开始出现轻度的重塑性改变;而在慢性期哮喘中虽然存在炎症性改变,但影响哮喘症状的因素却主要以器质性改变为主.     

血管内皮生长因子受体抑制剂对小鼠支气管哮喘模型气道炎症和气道重塑的影响

目的研究血管内皮生长因子(VEGF)受体抑制剂对变应性气道炎症和气道重塑的影响,阐明VEGF与支气管哮喘(简称哮喘)以及气道重塑的关系。方法BALB/c小鼠按随机数字表法分为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、VEGF受体抑制剂治疗组(C组),每组各10只。用酶联免疫吸附测定(ELISA)法对各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)和血清中VEGF进行定量分析;用免疫组化法检测VEGF在小鼠肺组织内的表达水平。采用医学图像分析软件测定支气管管壁厚度(WAt/P i)、支气管平滑肌厚度(WAm/P i)、支气管平滑肌细胞计数(N/P i)及肺组织切片中的血管计数、血管壁平滑肌厚度、血管壁平滑肌细胞计数。结果BALF中细胞总数和嗜酸粒细胞比值B组分别为(142±63)×107/L、98.0±46.9,A组分别为(30±14)×107/L、0.7±1.1,C组分别为(41±17)×107/L、4.9±3.5,A组和C组BALF中细胞总数和嗜酸粒细胞比值分别与B组比较差异有统计学意义(P均<0.01)。B组BALF中上清液和血清中VEGF水平分别为(55±26)pg/m l、(72±26)pg/m l,A组分别为(37±9)pg/m l、(49±18)pg/m l,C组分别为(34±3)pg/m l、(43±19)pg/m l,A组与B组、C组与B组间比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。免疫组化结果显示,B组大部分支气管平滑肌、黏膜上皮细胞、肺泡上皮细胞和血管周围VEGF均呈阳性表达,而A组和C组几乎没有VEGF的表达。图像分析显示,B组WAt/P i、WAm/P i、N/P i分别为(17±5)μm2/μm、(6.3±2.2)μm2/μm、(0.050±0.020)个/μm,A组分别为(8±3)μm2/μm、(3.2±0.8)μm2/μm、(0.027±0.017)个/μm,A组与B组比较差异有统计学意义(P分别<0.01、0.05)。B组和A组血管计数分别为(19±3)个、(10±5)个,A组与B组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。经抑制剂治疗后C组WAm/P i、血管计数分别为(4.5±1.3)μm2/μm、(11±3)个,C组与B组比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论VEGF在小鼠哮喘模型气道及肺内过度表达,并参与了哮喘的发病和气道重塑过程。VEGF受体抑制剂可明显改善哮喘小鼠的变应性气道炎症和气道重塑的病理生理过程。     

内毒素诱导致敏小鼠建立支气管哮喘动物模型的实验研究

目的 评价用内毒素(LPS)诱导卵清白蛋白(OVA)激发、OVA致敏的小鼠,建立支气管哮喘(简称哮喘)模型的方法.方法 采用随机数字表法将120只BALB/c小鼠分为PBS对照组(A组,PBS致敏PBS激发)、OVA组(B组,OVA敛敏OVA激发)、LPS/LPS小剂量组(C1组,50 μg内毒素致敏50 μg内毒素激发)、LPS/LPS大剂量组(C2组,100μg内毒素敛敏100 μg内毒素激发)、OVA/LPS小剂量组(D1组,OVA致敏、OVA雾化吸入激发结合50 μg内毒素滴鼻诱导)、OVA/LPS大剂量组(D2组,OVA致敏、OVA雾化吸入激发结合100 μg内毒素滴鼻诱导).观察小鼠哮喘急性发作症状,检测BALF细胞分类计数,测定乙酰胆碱激发条件下气道反应性(以肺阻力R_L表示);HE染色观察肺组织病理变化.结果 (1)D1组与D2组小鼠喘息症状加重其中D2组更严重.(2)D1组与D2组BALF中细胞总数、巨噬细胞、淋巴细胞、嗜酸粒细胞、中性粒细胞均明显高于A组(均P<0.05).D1组的白细胞总数、淋巴细胞、嗜酸粒细胞、中性粒细胞均明最高于B组(均P<0.01),D2组的白细胞总数、巨噬细胞、淋巴细胞、中性粒细胞均明显高于B组(均P<0.05).(3)以5 g/L乙酰胆碱激发时,D1组RL[(9.32 4±1.51)cm H_2O·ml~(-1)·s~(-1)(1 cm H_2O=0.098 kPa)]和D2组R_L[(44.21±2.88)cm H_2O·ml~(-1)·s~(-1)]明显高于A组RL[(2.41±0.35)cm H_2O·ml~(-1)·s~(-1)]和B组R_L[(5.96±1.83)cm H_2O·ml~(-1)·s~(-1)],均P<0.01.(4)D1组与D2组呈现较为严重的支气管哮喘病变,其中D2组病变程度明显加重.结论 用内毒素诱导OVA致敏小鼠建立支气管哮喘模型的方法可产牛更严重支气管炎症改变以及明显的气道高反应性.     

乳球菌分泌的白介素-12对哮喘小鼠的疗效观察

目的将小鼠白介素-12基因(mIL-12)通过质粒载体pSEC导入乳酸乳球菌(NZ9000)中,观察mIL-12在细菌中的表达;通过鼻腔免疫来观察mIL-12对小鼠哮喘模型气道炎症及辅助T细胞亚群的影响。方法将mIL-12连接到pSEC载体上并将其转化到NZ9000中,用乳链菌肽(Nisin)诱导其表达IL-12蛋白质并做鉴定,将菌液离心浓缩后给小鼠滴鼻。BALB/c小鼠50只,随机分为5组,即对照组(A组);PBS组(B组);野生菌组(C组);rIL-12组(D组);工程菌组(E组)。除A组外,余各组每鼠在1、7、14 d腹腔注射卵白蛋白OVA(100μg/0.5ml),在20~26 d雾化吸入2%OVA,每天1次。B、C、E组在1、2、3、14、19、20、21 d分别给予10μl的PBS,不含质粒载体的野生乳酸菌(约5×108CFU),含IL-12的质粒载体的工程菌(约5×108CFU)。D组20、21、22天给3 ng/只重组白介素-12,第28天杀小鼠测支气管肺泡灌洗液(BALF)中的嗜酸粒细胞(EOS)个数及白介素-4(IL-4)、干扰素(IFN-γ)水平,肺组织HE染色切片观察病变。结果mIL-12能够在NZ9000中高效表达并释放到细胞外。A-E组BALF中EOS的数量分别为(0.51±0.23)×104cell/ml(、21.32±5.71)×104cell/ml(、22.84±6.16)×104cell/ml(、2.15±0.63)×104cell/ml、(2.62±0.73)×104cell/ml;IL-4的含量分别为68.43±9.08 pg/ml、332.13±61.36 pg/ml、324.65±57.27 pg/ml、121.25±35.55 pg/ml、114.22±15.70 pg/ml;IFN-γ的含量分别为110.28±12.19pg/ml、56.25±12.08 pg/ml、70.36±8.27 pg/ml、166.11±57.12 pg/ml、171.75±60.90 pg/ml。B和C组的EOS数I、L-4与IFN-γ含量与A组相比有统计学差异(P<0.01);D、E组与B、C组比较有统计学意义(P<0.01)。工程菌组小鼠肺组织炎症细胞浸润明显减少,气道上皮损害减轻。结论mIL-12在乳酸乳球菌中能高效表达;鼻腔应用mIL-12能减少全身应用的副作用,且经济实用并较好地调节Thl/Th2平衡,对小鼠哮喘气道炎症的保护较为理想。     

早期接种减毒活菌卡介苗对支气管哮喘小鼠气道炎症及黏液形成的预防作用

目的　探讨早期小剂量多次接种减毒活菌卡介苗 (BCG)对支气管哮喘 (简称哮喘 )小鼠气道炎症及黏液形成的影响。方法　选择出生 2 4h内C5 7BL/6幼鼠 2 5只 ,按随机数字表法分为 3组 ,生理盐水对照组 (A组 ,8只 ) ;鸡卵白蛋白 (OVA)致敏 /激发组 (B组 ,9只 ) ;BCG皮下接种组 (C组 ,8只 )。C组小鼠分别于第 0周、1周、2周、3周连续 4次皮下接种 2 5 μl的BCG(含 10 3 CFU/只 ) ,而A、B组小鼠皮下注射 2 5 μl的生理盐水进行对照 ;于第 4 2天和第 5 6天 ,A组以生理盐水致敏 ,B、C组以OVA致敏 ,而从第 6 6天开始雾化吸入生理盐水 (A组 )或 1%的OVA(B、C组 )进行激发 ,连续 3d ,于最后 1次激发后 4 8h收集支气管肺泡灌洗液 (BALF) ,计数白细胞总数及嗜酸粒细胞 (EOS)数 ;肺组织过碘酸 雪呋 (PAS)染色鉴定黏液形成 ,测定杯状细胞化生指数和上皮黏液储备指数 ,以及用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测肺组织黏液素基因MUC5ACmRNA的表达。结果　BALF中白细胞总数A组为 (15 0± 1 4 )× 10 4/ml ,B组为 (12 3 8± 14 5 )× 10 4/ml,C组为 (77 4±14 1)× 10 4/ml,B、C组分别与A组比较差异有统计学意义 (P均 <0 0 1) ;但B组与C组比较差异无统计学意义 (P >0 0 5 ) ;EOS计数A组为 (0 0 90± 0 0 2 0 )×     

褪黑素对支气管哮喘小鼠胶原沉积及基质金属蛋白酶9和基质金属蛋白酶组织抑制剂1 mRNA与蛋白表达的动态调节

目的应用小鼠慢性支气管哮喘（简称哮喘）模型，观察褪黑素对慢性哮喘小鼠肺组织中胶原沉积的影响及其机制。方法96只SPF级雄性BALB／c小鼠按随机数字表法分为5组。对照组（21只）腹腔注射生理盐水；哮喘组（22只）腹腔注射生理盐水；褪黑素组（23只）腹腔注射褪黑素；地塞米松组（23只）腹腔注射地塞米松；褪黑素拮抗组（7只）腹腔注射褪黑素拮抗剂2-苯基-N-乙酰色胺。根据实验要求每组采用卵白蛋白致敏并反复雾化吸入2、4、8周时再分为2、4、8周亚组。对照组（每组均为7只）；哮喘组（分别为7、7、8只）；褪黑素组（分别为7、8、8只）；地塞米松组（分别为7、8、8只）；而褪黑素拮抗组只做2周组（7只）。实验造成慢性哮喘模型。用Masson三原色法染胶原纤维；用免疫组化方法标记蛋白；用MetaMorph软件测量单位长度基底膜周径上的胶原面积（Wcol／Pbm）和单位面积上基质金属蛋白酶9（MMP-9）及基质金属蛋白酶组织抑制剂1（TIMP-1）免疫组化阳性面积（PA／UA）；用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法测定肺组织相应蛋白mRNA水平。结果褪黑素组2、4、8周WcoL／Pbm分别为（11．8±1．3）、（12．3±1．1）、（12．7±1．4）μm^2／μm，哮喘2、4、8周组分别为（14．5±1．5）、（15．8±1．8）、（16．2±1．4）μm^2／μm，两组比较差异有统计学意义（td值分别为3．89、5．96、5．50，P均〈0．01）；褪黑素组2、4、8周MMP-9的PA／UA像素分别为（9．7±4．9）、（14．8±4．9）、（11．0±6．8）万，哮喘2、4、8周组分别为（15．7±6．1）、（26．2±6．9）、（24．6±6．0）万，两组比较差异有统计学意义（td值分别为3．00、4．83、5．50，P均〈0．01）；褪黑素组2、4、8周MMP-9mRNA水平表达分别为0．80±0．40、0．68±0．15、0．67±0．24，哮喘2、4、8周组分别为1．48±0.29、1．40±0.50、1.20±0．40，两组比较差异有统计学意义（td值分别为3．92、4．50、3．29，P均〈0．01）；地塞米松组2、4、8周Wcol／Pbm（11．6±1．3、12．3±1．0、13．0±1．7）μm^2／μm、MMP-9蛋白[（12．5±5．6）、（14．0±4．7、13．6±4．8）万]和mRNA水平（0．69±0．11、0．61±0．16、1．10±0．40）均较哮喘2、4、8周组降低。褪黑素拮抗2周组与哮喘2周组以上各指标比较差异均无统计学意义（td值=0．96，P〉0．05）。结论早期使用褪黑素可抑制胶原沉积，其作用与地塞米松相当。褪黑素可能通过MMP-9介导的途径抑制哮喘气道重塑。     

过氧化物酶体增殖物激活受体-γ在兔动脉粥样硬化模型中的表达及阿托伐他汀的干预作用

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)在兔动脉粥样硬化模型中的表达,以及阿托伐他汀的干预作用。方法2005年1月至2006年12月,在吉林大学中日联谊医院心内科将24只雄性日本大耳白兔随机分为高脂饮食组(A组)、高脂饮食 阿托伐他汀组(B组)和正常饮食组(C组)3组,每组8只。各组分别在喂养16周末处死,免疫组化法检测PPAR-γ,全自动生化分析仪检测血脂的表达水平。结果PPAR-γ的表达分别为A组(11·23±1·21)%,B组(11·05±1·02)%,C组(7·68±1·04)%,A、B2组比较差异无显著性意义(P>0·05),A、B2组与C组相比差异均有显著性意义(均P<0·01)。总胆固醇(TC)在A、B、C3组的表达分别为(23·51±10·58)mmol/L,(14·27±3·51)mmol/L,(1·36±0·33)mmol/L,各组间比较差异有显著性意义;低密度脂蛋白(LDL)在A、B、C3组的表达分别为(21·39±10·00)mmol/L,(14·23±4·01)mmol/L,(0·72±0·35)mmol/L,各组间比较差异亦有显著性意义;甘油三酯(TG)在3组间比较差异无显著性意义(P>0·05)。结论在兔动脉粥样硬化模型中PPAR-γ表达增高;阿托伐他汀可促进PPAR-γ的表达。     

不同激发方式对小鼠过敏性支气管哮喘模型的影响

目的 探讨不同激发方式对小鼠过敏性支气管哮喘(简称哮喘)模型的影响.方法 模型组用卵清蛋白致敏和激发BalB/c小鼠,第0天、第7天、第14天腹腔注射致敏,从第28天开始分别给予不同次数和方式的激发.根据激发方式的不同,随机分为5组,包括三次滴鼻激发组、二次雾化20 min激发组、三次雾化20 min激发组、三次雾化30 min激发组、四次雾化20 min激发组,每组12只.激发后48 h采用整体体积描记法检测小鼠气道反应性,结果 以增强的呼气间歇(enhanced pause,Penh)表示,测定肺功能后再用磷酸盐缓冲液对全肺进行支气管肺泡灌洗,支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞学分析.结果 哮喘组气道反应性(Penh%)和BALF中嗜酸粒细胞比例(EOS%)与正常组相比差异均有统计学意义(P<0.05).三次滴鼻激发组EOS%和Penh%显著高于其他雾化激发组(P<0.05),其中BALF中EOS%三次滴鼻激发组(46.30±4.55)%,与二次雾化20 min激发组(31.19±12.84)%,三次雾化20 min激发组(29.00±12.33)%、四次雾化20 min激发组(37.08±8.44)%相比有显著差异.与三次雾化30 min激发组(41.17±8.78)%无显著差异.三次滴鼻激发组PCI00[(3.75±1.79)g/L]和三次雾化30 min激发组[(5.94±3.27)g/L],四次雾化20 min激发组[(5.19±1.88)g/L]有显著差异(P<0.05).三次滴鼻激发组激发过程中动物死亡2只,其余各组均无死亡.结论 滴鼻和雾化激发均能成功建立哮喘模型,其中滴鼻激发建立的哮喘模型气道炎症及气道反应性升高更为显著.     

不同激发方式对小鼠过敏性支气管哮喘模型的影响

目的探讨不同激发方式对小鼠过敏性支气管哮喘（简称哮喘）模型的影响。方法模型组用卵清蛋白致敏和激发BalB/c小鼠,第0天、第7天、第14天腹腔注射致敏,从第28天开始分别给予不同次数和方式的激发。根据激发方式的不同,随机分为5组,包括三次滴鼻激发组、二次雾化20min激发组、三次雾化20min激发组、三次雾化30min激发组、四次雾化20min激发组,每组12只。激发后48h采用整体体积描记法检测小鼠气道反应性,结果以增强的呼气间歇（enhanced pause,Penh）表示,测定肺功能后再用磷酸盐缓冲液对全肺进行支气管肺泡灌洗,支气管肺泡灌洗液（BALF）进行细胞学分析。结果哮喘组气道反应性（Penh%）和BALF中嗜酸粒细胞比例（EOS%）与正常组相比差异均有统计学意义（P〈0.05）。三次滴鼻激发组EOS%和Penh%显著高于其他雾化激发组（P〈0.05）,其中BALF中EOS%三次滴鼻激发组（46.30±4.55）%,与二次雾化20min激发组（31.19±12.84）%、三次雾化20min激发组（29.00±12.33）%、四次雾化20min激发组（37.08±8.44）%相比有显著差异,与三次雾化30min激发组（41.17±8.78）%无显著差异。三次滴鼻激发组PC100[（3.75±1.79）g/L]和三次雾化30min激发组[（5.94±3.27）g/L]、四次雾化20min激发组[（5.19±1.88）g/L]有显著差异（P〈0.05）。三次滴鼻激发组激发过程中动物死亡2只,其余各组均无死亡。结论滴鼻和雾化激发均能成功建立哮喘模型,其中滴鼻激发建立的哮喘模型气道炎症及气道反应性升高更为显著。     

H2型松弛素对慢性支气管哮喘小鼠气道重塑与肺组织细胞周期蛋白D1表达的影响

目的 研究H2型松弛素(H2Relaxin)对慢性支气管哮喘(简称哮喘)模型小鼠气道重塑及肺组织细胞周期蛋白D1 (cyclin D1)表达的影响,探素松弛素在哮喘治疗中的可能作用.方法 将40只BALB/c小鼠按随机数字表法分为健康对照组、哮喘组、阴性对照组(vehicle)、松弛素组4组,每组10只;卵清白蛋白(OVA)致敏、激发建立慢性哮喘小鼠模型;vehicle组和松弛素组每日分别给予生理盐水和松弛素(0.25 mg·kg-1 ·d-1)皮下注射.HE和马森(Masson)染色观察各组小鼠气道炎症及胶原沉积情况;采用免疫组织化学半定量法测定气道壁α-平滑肌肌动蛋白( α-SMA)的表达;酶联免疫吸附测定( ELISA)法检测肺组织羟脯氨酸含量;用逆转录-PCR(RT-PCR)及免疫印迹法(Western blot)分别测定各组小鼠肺组织中cyclin D1mRNA和蛋白表达水平.结果 哮喘组、vehicle 组与健康对照组相比,嗜酸粒细胞浸润增多,气道管腔狭窄,平滑肌层增厚,胶原纤维增生,而松弛素组上述改变较此2组轻.与健康对照组相比,哮喘组、vehicle组小鼠支气管α-SMA阳性染色面积/支气管基底膜周径显著增加(均P ＜0.05),松弛素组小鼠支气管α-SMA阳性染色面积/支气管基底膜周径低于哮喘组和vehicle组(均P＜0.05);哮喘组和vehicle组小鼠羟脯氨酸含量[每克肺组织中分别为(0.68±0.10)mg、(0.67±0.10) mg]高于健康对照组的(0.26±0.05)mg(q值分别为16.61和16.01,均P＜0.01),松弛素组小鼠羟脯氨酸含量为(0.40±0.06)mg,低于哮喘组和vehicle组(q值分别为10.88和10.26,均P＜0.05);Western blot检测结果显示,cyclin D1在哮喘组、vehicle组和松弛素组的表达(分别为1.38±0.18、1.50±0.10和0.72±0.13)高于健康对照组的0.38±0.10(q值分别为13.00、14.65和4.49,均P＜0.05),而松弛素组表达量低于哮喘组与vehicle组(q值分别为8.51和10.16,均P＜0.05).哮喘组与vehicle组各项检测指标间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 松弛素可以显著减轻慢性哮喘小鼠气道炎症反应和平滑肌层的增厚,延缓哮喘小鼠气道重塑进程,该作用可能部分与其下调cyclin D1表达有关.     

不同剂量虫草活力素对大鼠支气管哮喘模型慢性气道炎症的作用机制研究

目的 对不同剂量虫草活力素(简称虫草)在大鼠支气管哮喘(简称哮喘)模型慢性气道炎症中的抑制作用及相关机制进行初步探讨.方法 Wister大鼠,随机分为对照组、单纯模型组、虫草20 mg/kg、50 mg/kg组、布地奈德(BUD)组及BUD联合虫草素干预组.卵蛋白致敏建立大鼠哮喘模型后给予药物干预8周,对各组支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)进行细胞分类计数及观察肺组织的病理变化,同时应用双抗体夹心ABC-ELISA法测定血清和BALF的哮喘相关细胞因子水平.结果 与单纯模型组比较,虫草两种剂量治疗组均降低慢性哮喘大鼠BALF的细胞总数和嗜酸粒细胞数,差异有统计学意义(P<0.05),并呈剂量相关性;HE染色显示大剂量虫草、BUD治疗组及联合用药组较单纯模型组炎症细胞浸润、平滑肌肥厚及黏膜肺组织水肿等炎症表现明显减轻;较单纯模型组,虫草治疗组血清及BALF的白介素4(IL-4)、IL-14水平下降,干扰素γ升高,差异有统计学意义(P<0.05),并呈剂量相关性.结果 一定剂量的虫草可通过上调T辅助细胞1(Th1)相关细胞因子,下调Th2相关细胞因子,减少嗜酸粒细胞等炎症细胞渗出,抑制哮喘的慢性气道炎症,并与糖皮质激素具有协同作用.     

阿托伐他汀对动脉粥样硬化大鼠血浆溶血磷脂酸的干预作用

目的探讨动脉粥样硬化(AS)大鼠血浆溶血磷脂酸(LPA)的变化及阿托伐他汀的干预作用。方法将33只W istar雄性大鼠随机分为对照组、AS模型组、阿托伐他汀治疗组,每组11只。模型组和治疗组在实验开始时,一次性腹腔注射维生素D360万U/kg,以后喂食高脂饮食;对照组喂食基础饲料。4周后治疗组灌胃给予阿托伐他汀治疗,第8周末处死大鼠,取主动脉观察形态及病理学变化,并检测血脂、血浆LPA及LPA相似磷脂水平。结果AS模型组主动脉出现典型AS斑块,与对照组比较,其血浆LPA水平为(4.7±0.8)μmol/L,显著高于对照组的(2.3±0.6)μmol/L及阿托伐他汀治疗组的(3.5±0.6)μmol/L(均P<0.05)。与模型组比较,阿托伐他汀治疗组的血脂水平均明显改善(P<0.05),主动脉AS程度也较轻。结论LPA参与了AS的形成过程,而阿托伐他汀可以降低AS大鼠血浆LPA水平,对AS的发生发展有明显的抑制作用。     

Treatment with Mycobacterium vaccae ameliorates airway histopathology in a murine model of asthma.

The objective of this study was to evaluate the effect of intratracheal (i.t.) or subcutaneous (s.c.) Mycobacterium vaccae treatment on lung histopathology and cytokine responses in a murine model of asthma. BALB/c mice were divided into four groups. To establish an asthma model, Groups I, II and III received intraperitoneal (i.p.) ovalbumin (OVA) and were challenged with i.t. OVA three times (days 41-47). On the same days, mice in Groups I and II were treated with i.t. and s.c. Mycobacterium vaccae, respectively. Mice in Group IV served as controls. On day 49, lungs were taken out for histopathological evaluation. Cytokine levels were determined in splenocyte culture supernatants by ELISA. The thickness of basement membrane and hyperplasic goblet cells in small airways were found to be significantly more in Group III than Group I. Furthermore, smooth muscle and epithelial thickness in small and large airways and hyperplasic goblet cell numbers in all sized airways of this treatment group were not significantly different from controls. Epithelial thickness in medium and large airways, hyperplasic goblet cells in all sized airways, and basement membrane in small and large airways were not significantly different in Group II when compared to controls. OVA-stimulated IL-5 levels was significantly higher in Group I when compared to Group III. OVA-stimulated IL-5 and spontaneous IL-5 levels were significantly higher in Group II than Group III. We demonstrate that subcutaneous and intratracheal Mycobacterium vaccae administered along with allergen has an ameliorating effect in the modulation of airway histopathological changes in OVA sensitized mice.     

阿托伐他汀对兔动脉粥样硬化模型血管壁炎症的影响

目的　探讨阿托伐他汀对血管壁炎症的影响。方法　将 2 9只新西兰白兔随机分为正常组 (n=7)、模型组 (n=7)、用药 5周组 (n=7)及用药 9周组 (n=8)。实验前后分别抽血测 C反应蛋白 (CRP) ,采用兔抗人抗胰蛋白酶(AAT)多克隆抗体标记血管内膜炎症细胞。结果　用药 9周组、用药 5周组与正常组相比 ,血 CRP水平明显降低 ,用药 9周组与模型组相比 ,内膜 AAT阳性指数减少。结论　阿托伐他汀具有抑制粥样硬化血管壁炎症的作用     

不同剂量虫草活力素对大鼠支气管哮喘模型慢性气道炎症的作用机制研究

目的对不同剂量虫草活力素（简称虫草）在大鼠支气管哮喘（简称哮喘）模型慢性气道炎症中的抑制作用及相关机制进行初步探讨。方法Wister大鼠,随机分为对照组、单纯模型组、虫草20mg／kg、50mg／kg组、布地奈德（BUD）组及BUD联合虫草素干预组。卵蛋白致敏建立大鼠哮喘模型后给予药物干预8周,对各组支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）进行细胞分类计数及观察肺组织的病理变化,同时应用双抗体夹心ABC—ELISA法测定血清和BALF的哮喘相关细胞因子水平。结果与单纯模型组比较,虫草两种剂量治疗组均降低慢性哮喘大鼠BALF的细胞总数和嗜酸粒细胞数,差异有统计学意义（P〈0．05）,并呈剂量相关性;HE染色显示大剂量虫草、BUD治疗组及联合用药组较单纯模型组炎症细胞浸润、平滑肌肥厚及黏膜肺组织水肿等炎症表现明显减轻;较单纯模型组,虫草治疗组血清及BALF的白介素4（IL-4）、IL-14水平下降,干扰素γ升高,差异有统计学意义（Pd0．05）,并呈剂量相关性。结论 一定剂量的虫草可通过上调T辅助细胞1（Th1）相关细胞因子,下调Th2相关细胞因子,减少嗜酸粒细胞等炎症细胞渗出,抑制哮喘的慢性气道炎症,并与糖皮质激素具有协同作用。     

阿托伐他汀对不稳定型心绞痛患者C-反应蛋白的影响

目的探讨阿托伐他汀对不稳定型心绞痛(UA)患者C-反应蛋白(CRP)和血脂的影响。方法选择76例UA患者,随机分成两组,治疗组给予常规治疗加阿托伐他汀每晚10mg口服,对照组给予常规治疗,持续8周。然后比较两组患者治疗前、后CRP和血脂水平的变化。结果经用药后治疗组血清CRP水平及血脂水平较对照组降低明显,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论阿托伐他汀可降低UA患者血清CRP及血脂水平。