口腔链球菌对白假丝酵母菌的拮抗作用

目的 观测3种口腔链球菌对白假丝酵母菌的生长有无抑制作用.方法 采用直接点种法、反点种菌落计数法和液体共培养法观测口腔变异链球菌、血链球菌、唾液链球菌对白假丝酵母菌的拮抗作用.结果 1)直接点种法中各组均未观察到清晰的抑菌圈;2)唾液链球菌软琼脂上的白假丝酵母菌菌落数较对照组减少(P<0.05);3)活菌与白假丝酵母菌...     

变异链球菌LuxS基因缺陷突变株的构建及其生物膜结构的初步观察研究

目的:通过同源重组法构建变异链球菌LuxS基因缺陷突变菌株,比较其与变异链球菌UA159标准株在生物膜形成上的差异。方法:运用基因同源重组方法将氯霉素抗性基因(Cmr)与LuxS基因上下游区域的2个基因片段按一定顺序重组到PUC载体的多克隆位点中,构建出带氯霉素抗性标志的重组质粒,将载体质粒转化到含完整LuxS基因的变异链球菌UA159中,利用氯霉素抗性筛选出LuxS基因缺陷的突变株,并利用聚合酶链式反应(PCR)和哈氏弧菌发光实验进行检测。以釉质磨片为载体,在扫描电镜下观察上述两菌株含有20 g/L葡萄糖、20 g/L蔗糖的乳酪消化胨酵母(TPY)液体培养基中形成24 h的生物膜。结果:PCR基因扩增结果显示:突变株LuxS基因已被Cmr基因完全替换,成功的构建了变异链球菌LuxS基因突变株,并且突变株不能诱导哈氏弧菌BB170的生物发光。当用葡萄糖作为补充糖源时,变异链球菌UA159标准株和LuxS基因突变株所形成的生物膜表现型未见明显差异;而用蔗糖作为补充糖源时,两菌株所形成的生物膜有明显不同,UA159生物膜相对平滑均质,而LuxS基因突变株生物膜呈松散的蜂房状,基质间有较大的间隙,形成较大的团簇状菌落。结论:成功构建出LuxS基因缺陷的变异链球菌突变株,与变异链球菌UA159标准株其生物膜结构发生改变,提示LuxS会影响变异链球菌生物膜的形成。     

变异链球菌致龋性及酸性压力对其HtrA表达情况的影响

目的:探讨变异链球菌株HtrA的表达与其致龋性和耐酸性的关系。方法:收集了不同龋敏感性儿童口腔分离的变异链球菌共36株(高、低、无龋各12株),通过RT-PCR的方法对所有菌株HtrA的mRNA的表达水平进行了检测;此外,还检测了在分别含有10、20mmol/L乳酸的培养基中生长的变异链球菌UA159菌株HtrA mR-NA的表达变化。结果:高龋、低龋及无龋儿童口腔变异链球菌临床分离株HtrA mRNA表达存在差异,高龋组>低龋组>无龋组,差异具有统计学意义(P<0.01);酸性环境下变异链球菌中HtrA mRNA的表达水平也发生了明显上调(P<0.01)。结论:HtrA基因的表达与变异链球菌的致龋性和耐酸性有着一定的相关性。     

寡发酵链球菌乳酸脱氢酶蛋白质结构的预测

目的 探讨寡发酵链球菌和口腔中不同产酸能力的细菌乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)基因序列和蛋白质各级结构的差异,为进一步研究寡发酵链球菌糖代谢的生化机制提供依据.方法 寡发酵链球菌LDH的基因序列由中科院微生物所测出.通过美国国家生物技术信息中心的Genbank数据库查找变形链球菌、血链球菌和干酪乳杆菌LDH的基因序列,用BLAST软件对各细菌LDH的基因序列和氨基酸序列进行比对.采用蛋白分析专家系统(Expert Protein Analysis System,ExPASy)对寡发酵链球菌、变形链球菌、血链球菌和干酪乳杆菌LDH蛋白质的理化性质、二级结构、结构域和空间结构进行预测并比较.结果 寡发酵链球菌LDH的基因序列共987个碱基对,与血链球菌相似性最高(89％),与变形链球菌的相似性为81％,与干酪乳杆菌相似性最低(70％);寡发酵链球菌LDH氨基酸序列与血链球菌的相似性高达96％,与变形链球菌相似性较低(86％),与干酪乳杆菌的相似性仅为66％;寡发酵链球菌LDH蛋白质的理化性质、跨膜区数目、二级结构的比例、结构域位置与其他3种细菌均相近,LDH的空间结构与变形链球菌、干酪乳杆菌明显不同,与血链球菌也有差异.结论 寡发酵链球菌LDH在基因序列、氨基酸序列及空间结构上与变形链球菌和干酪乳杆菌的差异,可能是导致其LDH生物学功能改变,不能产生乳酸的一个内在原因.     

口腔链球菌对伴放线嗜血菌生长影响的体外实验

目的：研究变异链球菌、血链球菌、远缘链球菌、唾液链球菌对伴放线嗜血菌生长的影响。方法：制备伴放线嗜血菌BHI琼脂板，将4种口腔链球菌菌悬液滴注于其上，兼性厌氧培养48h，观察有无抑菌现象。分别将4种口腔链球菌与伴放线嗜血菌等体积等浓度混合制成双菌种悬液在液体BHI中培养，每隔4h取浮游菌悬液梯度稀释，接种于BHI琼脂板上培养48h，计数伴放线嗜血菌占菌落总数的百分比：扫描电镜观察双菌种生物膜生长情况。结果：琼脂扩散实验显示，变异链球菌、血链球菌、远缘链球菌周围出现抑菌圈，唾液链球菌周围未出现抑菌圈。伴放线嗜血菌所占双菌种混合细菌的比例随时间延长呈下降趋势（p〈0．05）。生物膜观察显示，单菌种伴放线嗜血菌形成生物膜的时间较口腔链球菌时间长；双菌种混合培养时伴放线嗜血菌的量随时间推移而减少。结论：4种口腔链球菌抑制伴放线嗜血菌生长。     

csn2基因缺失对变异链球菌饥饿耐受和寡营养环境下胞外多糖合成的影响

目的探索csn2基因缺失对变异链球菌(Streptococcus mutans, Sm)饥饿耐受和寡营养环境下胞外多糖合成的影响。方法培养Sm csn2基因的缺失菌株及回补菌株, 通过设置不同浓度梯度培养基创造寡营养生长环境供其生长。生长曲线检测寡营养生长环境下Sm的生长, 结晶紫染色, 扫描电镜、激光共聚焦显微镜检测寡营养生长环境下Sm的生物膜表型, 蒽酮硫酸法检测Sm生物膜中胞外多糖的量, 实时荧光定量PCR检测胞外多糖合成相关基因的表达。结果生长曲线结果显示csn2基因缺失抑制了饥饿胁迫下Sm的生长, 激光扫描共聚焦显微镜检测结果显示野生型菌株、csn2基因缺陷株、回补菌株在营养充足培养条件下所得生物膜胞外多糖/细菌比值为0.44±0.07、1.05±0.13和0.57±0.08, 在寡营养条件下所得生物膜胞外多糖/细菌比值为0.93±0.24、3.05±0.21和1.32±0.46, 表明csn2基因缺失增强了Sm在寡营养环境下胞外多糖的合成能力;在饥饿胁迫下, 胞外多糖合成相关基因gtfB、gtfC的表达水平分别显示出2.5和1.8倍的增加, gtfD的表达水平下调2/3。结...     

srtA基因调节变异链球菌氧化耐受的机制研究

目的探究srtA基因对变异链球菌氧化耐受能力的调节作用并初步探讨其机制。方法通过氧化耐受实验,对比变异链球菌UA159菌株及其srtA基因缺失株及回复株在浮游及生物膜状态下的氧化耐受能力差异;用Illumina Hiseq 4000测序平台对UA159菌株及其srtA基因缺失株在对数中期及稳定期的基因转录组测序,比较其氧化耐受相关基因的转录表达差异,进一步探讨srtA基因缺失后变异链球菌氧化耐受能力的变化与其基因转录组的内在联系;并采用qPCR来验证相关基因表达水平的变化。结果srtA基因缺失后变异链球菌在浮游状态、生物膜状态的氧化耐受能力均较UA159降低(P<0.05)。分析33个氧化耐受相关基因在转录组测序结果中的表达水平发现,过氧化物合成与代谢相关酶类基因无明显变化,但稳定期样本中双组份信号转导系统编码基因lrgA、lrgB、lytT表达下调2.2~2.4倍;qPCR结果进一步表明对数中期、稳定期的浮游菌lrgB、lytT表达下调11.01~53.51倍,且另一双组分系统编码基因vicK表达下调6.57~10.88倍(P<0.001)。结论srtA基因缺失后,变异链球菌过氧化物合成及代谢酶类编码基因表达水平不变,但氧化耐受相关转录调节因子表达水平下降,进而减弱变异链球菌的氧化耐受能力。     

csn2基因缺失对变异链球菌饥饿耐受和寡营养环境下胞外多糖合成的影响

目的探索csn2基因缺失对变异链球菌(Streptococcus mutans,Sm)饥饿耐受和寡营养环境下胞外多糖合成的影响。方法培养Sm csn2基因的缺失菌株及回补菌株,通过设置不同浓度梯度培养基创造寡营养生长环境供其生长。生长曲线检测寡营养生长环境下Sm的生长,结晶紫染色,扫描电镜、激光共聚焦显微镜检测寡营养生长环境下Sm的生物膜表型,蒽酮硫酸法检测Sm生物膜中胞外多糖的量,实时荧光定量PCR检测胞外多糖合成相关基因的表达。结果生长曲线结果显示csn2基因缺失抑制了饥饿胁迫下Sm的生长,激光扫描共聚焦显微镜检测结果显示野生型菌株、csn2基因缺陷株、回补菌株在营养充足培养条件下所得生物膜胞外多糖/细菌比值为0.44±0.07、1.05±0.13和0.57±0.08,在寡营养条件下所得生物膜胞外多糖/细菌比值为0.93±0.24、3.05±0.21和1.32±0.46,表明csn2基因缺失增强了Sm在寡营养环境下胞外多糖的合成能力;在饥饿胁迫下,胞外多糖合成相关基因gtfB、gtfC的表达水平分别显示出2.5和1.8倍的增加,gtfD的表达水平下调2/3。结论csn2基因对Sm的生理功能及毒力特性表现出多种影响,包括饥饿耐受和胞外多糖合成,这些改变可能与csn2基因缺失引发复杂的调控网络相关。     

低聚木糖对变异链球菌生长和产酸影响的体外研究

目的　比较低聚木糖与蔗糖对变异链球菌生长和产酸的影响,为低聚木糖在牙齿保健中的应用提供理论依据。方法　分别采用质量浓度为0、1%、2%、8%、16%和20%的低聚木糖和蔗糖培养基培养变异链球菌24 h,通过Bioscreen C全自动微生物生长曲线分析仪每间隔30 min测定各组培养基的吸光度值（A值）;采用pH计分别于0、5.5、10、24 h测定各组培养基的pH值,运用Origin 2017描绘其变化曲线图。比较变异链球菌培养和发酵前后各组A值及pH值的变化量（ΔA和ΔpH）。结果　（1）低聚木糖组和蔗糖组细菌培养基的ΔA均随着培养时间的延长而增大（F值分别为467.165、3207.610,P < 0.05）;低聚木糖组和蔗糖组不同质量浓度培养基的ΔA比较,差异均有统计学意义（F值分别为11682.528、5483.421,P < 0.05）;且这种差异随着培养时间的延长而增大（F值分别为88.140、41.171,P < 0.05）。（2）变异链球菌培养和发酵24 h后,低质量浓度（1%、2%）低聚木糖在略微或不提高变异链球菌生长水平的同时（P > 0.05）,明显抑制了变异链球菌的产酸能力（P < 0.05）;高质量浓度（16%、20%）低聚木糖在明显抑制变异链球菌生长的同时,变异链球菌的产酸水平略有提升（均P < 0.05）。（3）变异链球菌培养和发酵24 h后,与同质量浓度的蔗糖相比,16%、20%的低聚木糖可明显降低变异链球菌的生长水平（P < 0.05）;1%、2%的低聚木糖细菌培养基的ΔA略高,但差异无统计学意义（P > 0.05）;8%的低聚木糖可提高变异链球菌的生长水平（P < 0.05）;各质量浓度低聚木糖细菌培养基的ΔpH均高于相同质量浓度的蔗糖（均P < 0.05）。（4）与同甜度的蔗糖（质量浓度为8%）比较,低聚木糖（质量浓度为20%）抑制变异链球菌的生长及产酸作用更显著。结论　低质量浓度低聚木糖可抑制变异链球菌产酸,高质量浓度低聚木糖可抑制变异链球菌生长;相较于蔗糖,高质量浓度低聚木糖可降低变异链球菌的生长及产酸水平,提示低聚木糖作为龋病易感人群的食品甜味剂具有良好的应用前景。     

十肽对变异链球菌生物膜生长和结构影响的实验研究

目的：评价人工合成抗菌肽（十肽）对口腔变异链球菌生物膜生长、结构及活性的影响能力。方法???人工合成十肽（氨基酸序列：KKVVFKVKFK-NH2）通过对细菌生物膜药物最低抑制生物膜形成浓度（MBIC）和药物最低清除已形成生物膜浓度（MBRC）2个指标的测定,研究和评估十肽对变异链球菌单菌生物膜的抑制和清除作用;在激光共聚焦扫描显微镜（CLSM）下观察十肽作用下变异链球菌生物膜的形态、结构及活性变化。结果???当十肽浓度为62.5~125μg?mL-1时,能够抑制变异链球菌生物膜的形成;当十肽浓度为250~500μg?mL-1时,可破坏已形成24?h后的生物膜,CLSM下观察到十肽作用后生物膜结构残存,死菌增多,生物膜厚度明显降低。结论??新型人工合成抗菌肽（十肽）不仅可抑制主要致龋菌变异链球菌单菌生物膜的生长形成,而且可破坏已经形成24?h后的生物膜结构。     

Interspecies competition and inhibition within the oral microbial flora: environmental factors influence the inhibition of Streptococcus mutans by Streptococcus oligofermentans

Dental caries is a bacterial infectious disease. Streptococcus mutans is the primary pathogen that causes dental caries. Streptococcus oligofermentans is a new oral streptococcal species that can inhibit the growth of S. mutans specifically. The study aimed to assess the inhibition of S. mutans by S. oligofermentans under different oral environmental conditions. The inhibition under different carbohydrate and oxygen conditions was investigated in vitro using an interspecies interaction assay. The 4-aminoantipyine (4-ATTP) method was used to measure the yield and the initial production rate of H(2) O(2) in S. oligofermentans. The inhibitory effect was enhanced when the bacteria were cultured with carbohydrates and under aerobic conditions, or when S. oligofermentans was inoculated earlier than S. mutans. The initial synthesis rates of H(2) O(2) by S. oligofermentans were higher in the presence of carbohydrates and in aerobic culture conditions. In terms of the total H(2) O(2) yield, the effect of the environmental conditions was as follows: no carbohydrates > sucrose> glucose, and aerobic conditions > anaerobic conditions. We conclude that the presence of carbohydrate and oxygen significantly affect the ability of S. oligofermentans to inhibit the growth of S. mutans. The difference in inhibitory effect may be attributed to changes in the capacity of S. oligofermentans to produce H(2) O(2) .     

钛种植体表面粗糙度对细菌黏附的影响

目的：研究钛种植体的不同表面粗糙度对变形链球菌及血链球菌黏附的影响.方法：用光电3-D表面测量系统测定两种纯钛片机械切割表面和大颗粒喷砂酸蚀表面的表面粗糙度.将钛片与变形链球菌和血链球菌共同培养,培养时间分别为4h,1d和5d.通过菌落形成单位（CFU）计数法及结晶紫染色法,比较不同时间点两种细菌在两种粗糙度钛片上的黏附量.结果：机械切割表面和大颗粒喷砂酸蚀表面钛片的表面粗糙度Ra值分别为1.25 μm和4.25 μm.CFU计数显示,在不同的培养时间点,两组钛片上的变形链球菌及血链球菌活菌黏附数量相近,差异无统计学意义（P＞0.05）.结晶紫染色显示,在不同的培养时间点,大颗粒喷砂酸蚀组钛片上血链球菌的细菌黏附总量均多于机械切割组钛片,差异有统计学意义（P ＜0.05）.在培养早期（4h）,大颗粒喷砂酸蚀组钛片上变形链球菌的细菌黏附总量大于机械切割组钛片;但在培养后期（1 d,5 d）两组钛片上变形链球菌的细菌黏附总量相近,差异无统计学意义（P＞0.05）.结论：钛片不同表面粗糙度对变形链球菌和血链球菌的活菌黏附数量无影响,但粗糙表面上黏附的细菌及基质总量大于中度粗糙表面.对于变形链球菌而言,粗糙度对细菌及基质黏附总量的影响随着生物膜的成熟而消失.     

维吾尔族不同龋敏感儿童变链菌临床分离株生物膜状态合成胞外多糖能力的比较

目的:比较维吾尔族高龋和无龋儿童变链菌临床分离株在生物膜状态下合成胞外多糖的能力,以推测其致龋能力的差异。方法:1)选取课题组前期分离鉴定的维吾尔族儿童变链菌临床株27株,其中高龋(dmft≥5)17株,无龋(dmft=0)10株。2)在0.8cm×0.8cm无菌盖玻片上形成变形链球菌生物膜标本。3)采用蒽酮法测定高龋组与无龋组生物膜状态下合成胞外多糖的量。结果:高龋组合成水溶性及水不溶性葡聚糖量平均为(0.3011±0.0398)g/L和(0.3711±0.0372)g/L,高于无龋组的(0.2067±0.0265)g/L和(0.3489±0.0537)g/L,差异有统计学意义(P<0.05)。高龋及无龋组变链菌临床菌株生物膜状态下合成水不溶性葡聚糖量为(0.3656±0.0459)g/L高于水溶性葡聚糖量(0.2539±0.0586)g/L,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:维吾尔族不同龋敏感儿童变链菌临床分离株生物膜状态下合成胞外多糖能力有差异,推测与其致龋性差异有关。     

Effect of chlorhexidine on the relative proportions of Streptococcus mutans and Streptococcus sanguis in hamster plaque

abstract — The effect of chlorhexidine on the proportions of Streptococcus mutans and Streptococcus sanguis in plaque was studied in hamsters fed a diet containing 28% sucrose. In animals given chlorhexidine in their drinking water for 10 d a decrease in the population of S. mutans and an increase of S. sanguis occurred in the plaque. Following the removal of chlorhexidine the population of S. mutans increased again in the presence of sucrose and the number of S. sanguis returned to initial values. When animals were given a sucrose-free diet the low proportion of S. mutans observed following the short-term chlorhexidine period persisted. These data indicate that there is an inverse relationship between the number of S. sanguis and S. mutans in plaque and that the sensitivity in vivo of S. mutans to chlorhexidine can be used to suppress the population of S. mutans with a concomitant rise in the proportion of S. sanguis .     

Real-time interaction of oral streptococci with human salivary components

Oral streptococci are present in large numbers in dental plaque and several types interact with the enamel salivary pellicle to form a biofilm on tooth surfaces. The respective affinity of individual streptococci for salivary components has an influence on the etiologic properties of oral biofilm in the development of dental caries. We studied real-time biospecific interactions between oral streptococci and salivary components utilizing biosensor technology to analyze surface plasmon resonance. Streptococcus sanguis and Streptococcus mutans showed significant responses for binding to salivary components, in comparison with other bacteria. Further, the association rates (4.1 x 10-11/bacterium) and dissociation rate (5.7 +/- 0.9 x 10-3 Second(s)-1) were higher for S. sanguis than for S. mutans (2.4 x 10-11 and 2.9 +/- 0.8 x 10-3) and Streptococcus mitis (1.3 x 10-11 and 3.5 +/- 1.3 x 10-3). However, the association equilibrium constants (8.2 S/bacterium) for S. mutans was 2 times higher in than S. mitis (3.8) and slightly higher than S. sanguis (7.2). These findings may provide useful information regarding the mechanism of early biofilm formation by streptococci on the tooth surface.     

葡萄糖浓度影响寡发酵链球菌抑制变形链球菌作用的研究

目的 研究不同葡萄糖浓度对寡发酵链球菌(Streptococcus oligofermentans,So)与变形链球菌(Streptococcus mutans,Sm)之间相互作用的影响,及对So产过氧化氢能力的影响.方法通过平板培养法观察在不同葡萄糖浓度下So与Sm之间的相互作用;运用4-氨基安替吡啉-辣根过氧化物酶法测定不同葡萄糖浓度下So过氧化氢的初始产生速率和产量.结果环境葡萄糖浓度为0、10、50 mmol/L时均可见So对Sm有抑制作用;Sm受抑制区面积占菌膜面积比值:同时接种So和Sm时,无糖环境比值为0.202±0.005,10、50 mmol/L葡萄糖环境分别为0.467±0.025和0.468±0.028;先接种So再接种Sm时,无糖环境比值为0.394 ±0.004,10 mmol/L葡萄糖环境为0.811 ±0.075,50 mmol/L葡萄糖环境为0.816 ±0.007.葡萄糖浓度为10、50 mmol/L时So对Sm的抑制作用均较无糖环境下显著(P＜0.05),但两种浓度抑制作用差异无统计学意义(P＞0.05).葡萄糖浓度为10、50 mmol/L时So的过氧化氢初始产生速率[(23.573±0.263)、(23.337±0.473) μmol·L-1·min -1]均显著高于无糖环境[(10.513 ±0.516) μmol·L-1·min-1],P ＜0.05.无糖环境下So对数生长期各时段过氧化氢产量高于有糖环境(P＜0.05).1000 mmol/L葡萄糖环境下未见So抑制Sm,亦未能检测到So产生过氧化氢.结论So抑制Sm的能力受糖环境的影响,在10、50 mmol/L葡萄糖环境下,So具有更强的抑制Sm能力.     

变形链球菌ComCDE密度感应参与不同菌种的竞争

目的 研究口腔变形链球菌( S.mutans )ComCDE密度感应系统参与血链球菌(S.sanguinis)的相互竞争作用.方法 采用LIVE\DEAD BacLightTM荧光染色结合激光共聚焦显微镜,观察变形链球菌(简称变链菌)在CSP信号肽诱导下群体细菌自身死亡变化;通过荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定细菌素以及细菌素免疫蛋白相关基因表达变化,分析变链菌ComCDE系统参与菌群生存竞争的调控机制.结果 在细菌竞争中,变形链球菌△comC、△comD 、△comE突变株失去不同菌种间的竞争力,无法抑制相邻Ssanguinis的正常生长;只有野生株保持竞争力,抑制相邻S.sanguinis生长,形成缺陷菌环.CSP信号肽诱导下,变链菌群体死菌/活菌率增高58.1％(P＜0.05);细菌素及免疫蛋白相关SMU.151、SMU.423、SMU.1913c基因分别升高23.3倍(P=0.00)、15.9倍(P＜0.05)、19.3倍(P＜0.05).结论 变形链球菌ComCDE密度感应系统调控变链菌的变链素及免疫蛋白产生、参与不同菌种间竞争生存.     

血链球菌细菌素对牙龈卟啉单胞菌形貌及力学性质的影响

目的:研究血链球菌细菌素(简称血链素)对牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)形貌特征及力学性质的影响。方法:1)复苏、传代并鉴定血链球菌标准菌株ATCC10556、牙龈卟啉单胞菌标准菌株ATCC33277。2)将血链球菌低温高速离心、细胞破碎等方法提取血链素,使之作用于P.g,于37 ℃厌氧培养48 h。3)采用原子力显微镜(AFM)的接触模式,观察血链素作用前后P.g菌体的形貌变化。4)利用AFM测定血链素作用前后P.g的力-距离曲线,并计算黏附力及杨氏模量。结果:1)通过AFM的观察:P.g在血链素的作用下,菌体直径缩小、平均粗糙度及平均峰高度增加(P<0.05)。2)通过AFM的观察:血链素作用后,P.g的黏附力、杨氏模量显著降低(P<0.001)。正常P.g的黏附力平均值为(0.70±0.10) nN、杨氏模量平均值为(5.54±0.16) MPa;经血链素作用后P.g的黏附力平均值为(0.50±0.10) nN、杨氏模量平均值为(3.97±0.64) MPa。结论:1)血链素可引起牙龈卟啉单胞菌形貌特征发生改变。2)血链素可导致牙龈卟啉单胞菌的黏附力及杨氏模量降低。     

血链菌死菌在生物膜再形成中的作用观察

目的　探讨血链菌死菌在生物膜更新形成中的作用。方法　利用激光共聚焦扫描显微镜和死菌 /活菌荧光染色技术相结合 ,对人工口腔内覆盖死菌 (实验组 )和未覆盖死菌 (对照组 )盖玻片表面血链菌生物膜的形成进行动态观察。结果　血链菌生物膜形成 3 0min时 ,实验组生物膜厚度和对照组相比 ,无显著性差异 ;但其细菌密度明显大于对照组 (P <0 .0 5 ) ,至 60min ,12 0min ,2 4 0min时 ,实验组生物膜厚度和对照组相比 ,有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,但其细菌密度几乎一致。结论　在生物膜的形成初期 ,死菌具有一定的促进作用。     

氟磷灰石晶体膜对变异链球菌早期粘附和生物膜形成的作用

目的:研究牙本质表面再生氟磷灰石晶体膜(Fluorapatite crystal film,FACF)对变异链球菌(S.mutans)早期粘附和生物膜形成的作用。方法:近生理条件下(37℃,1 atm,pH 6.0~7.4),在牙本质表面沉积FACF,并将牙本质、羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)和氟磷灰石(fluorapatite,FA)样本作为对照组,SEM观察表面形貌。激光共聚焦显微镜(CLSM)和SEM观察牙本质和FACF表面S.mutans的早期粘附情况。HA、FA、牙本质及FACF表面培养S.mutans生物膜,CLSM观察并计算生物膜量。结果:FACF厚5~10μm,晶体呈标准的六棱柱样,排列规则紧密,直径0.5~1.0μm。FACF表面S.mutans粘附量显著少于牙本质(P<0.05),单位面积生物膜量显著低于HA、FA及牙本质(P<0.05),且阻挡了S.mutans向牙本质小管内生长。结论:在近生理条件下,可在牙本质表面再生出厚5~10μm的FA有序致密晶体膜,该层晶体结构可减少S.mutans的初期粘附及生物膜的形成,并对S.mutans向牙本质小管内生长起到物理屏障作用。