Effect of Bushen Yisui Capsule(补肾益髓胶囊) on Oligodendrocyte Lineage Genes 1 and 2 in Mice with Experimental Autoimmune Encephalomyelitis

Objective: To study the effects of Bushen Yisui Capsule(补肾益髓胶囊, BSYSC) on the oligodendrocyte lineage genes(Olig) 1 and Olig2 in C57BL/6 mice with experimental autoimmune encephalomyelitis(EAE) in order to explore the remyelination effect of BSYSC. Methods: The mice were randomly divided into normal control(NC), EAE model(EAE-M), prednisone acetate(PA, 6 mg/kg), BSYSC high-dose(3.02 g/kg) and BSYSC low-dose(1.51 g/kg) groups. The mice were induced by immunization with myelin oligodendrocyte glycoprotein(MOG) 35-55. The neurological function scores were assessed once daily. The pathological changes in mice brains were observed with hematoxylin-eosin(HE) staining and transmission electron microscope(TEM). The protein expressions of myelin basic protein(MBP), Olig1 and Olig2 in brains were measured by immunohistochemistry. The m RNA expressions of Olig1 and Olig 2 was also determined by quantitative real-time polymerase chain reaction. Results: Compared with the EAE-M mice,(1) the neurological function scores were significantly decreased in BSYSC-treated mice on days 22 to 40(P0.01);(2) the inflammatory cells and demyelination in brains were reduced in BSYSC-treated EAE mice;(3) the protein expression of MBP was markedly increased in BSYSC-treated groups on day 18 and 40 respectively(P0.05 or P0.01);(4) the protein expression of Olig1 was increased in BSYSC(3.02 g/kg)-treated EAE mice on day 40(P0.01). Protein and m RNA expression of Olig2 was increased in BSYSC-treated EAE mice on day 18 and 40(P0.01). Conclusion: The effects of BSYSC on reducing demyelination and promoting remyelination might be associated with the increase of Olig1 and Olig2.     

补肾对脑脊髓炎大鼠生长相关蛋白-43及微管相关蛋白-2的影响

目的观察补肾对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠生长相关蛋白-43(GAP-3)及微管相关蛋白-2(MAP-2)的影响,探讨其对轴突损伤的保护作用。方法应用髓鞘碱性蛋白(MBP)与完全福氏佐剂按1∶1(体积比)制成抗原并注射于大鼠双后足皮下,建立大鼠EAE模型。以醋酸泼尼松作对照,用苏木素-伊红染色(HE)观察各组大鼠造模后14 d、28 d脑和脊髓的组织病理变化,用轴突染色及免疫组织化学染色法观察脑和脊髓轴突损伤及再生情况。结果EAE模型组大鼠脑和脊髓组织中可见大量炎性细胞浸润,轴突存在明显损伤。脑和脊髓GAP-43及MAP-2表达显著降低,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05或0.01),分别用补肾方剂(左归丸和右归丸)干预后,大鼠炎症反应及轴突损伤较EAE模型组明显减轻,GAP-43及MAP-2表达明显高于模型组(P<0.05或0.01),以左归丸更为明显。结论补肾方剂能够上调GAP-43及MAP-2的表达,具有促进和增强轴突再生的作用。     

血管活性肠肽(VIP)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠脑组织IL-17A含量的影响

目的探讨血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)大鼠脑组织IL-17A含量的影响。方法 60只健康雌性Wistar大鼠随机分成正常对照组、EAE对照组、VIP低剂量防治组和VIP高剂量防治组。利用髓鞘碱性蛋白(MBP)+完全福氏佐剂(CFA)诱导建立EAE模型。自造模当日起,每隔一日分别对VIP低、高剂量防治组大鼠腹腔注射VIP 4nmol/kg(0.2 m L)、16 nmo L/kg(0.8 m L),正常对照组及EAE对照组注射0.8 m L生理盐水,连续10 d。观察大鼠发病情况;ELISA法检测脑组织匀浆中IL-17A因子含量变化;免疫组化技术,利用抗胶质纤维酸性蛋白抗体(GFAP)检测脑组织内的星型胶质细胞活化情况。结果 VIP各剂量防治组大鼠发病潜伏期延长、进展期缩短、发病高峰期神经功能障碍评分(NDS)降低,脑组织匀浆中IL-17A含量降低,活化的星型胶质细胞即GFAP~+细胞量减少,且各剂量组间存在一定剂量依赖关系。结论 VIP通过降低脑组织中IL-17A含量、抑制星型胶质细胞活化,发挥对EAE的防治作用。     

黄岑苷对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的影响

目的观察不同浓度黄岑苷(baicalin)对实验性自身免疫脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠模型的作用,并研究其初步机制。方法建立实验性自身免疫性脊髓炎小鼠模型,免疫后第3天给予高低剂量黄岑苷灌胃,每天1次,共20 d。对小鼠活动进行神经功能评分,TUNEL染色检测脊髓组织细胞凋亡情况,ATP水平检测试剂盒检测脊髓组织ATP含量水平,免疫印迹法(Western blot)检测Bax、Bcl-2、cleaved cas-9和cleaved cas-3蛋白表达水平。结果黄岑苷能够提高实验性自身免疫脑脊髓炎小鼠神经功能,延后发病时间;黄岑苷干预后,Tunel染色结果显示脊髓组织凋亡细胞数下降,ATP水平下降,免疫印迹法结果显示Bcl-2的蛋白表达显著上升,Bax、cleaved cas-9和cleaved cas-3的蛋白表达显著下降。结论黄岑苷可通过抑制线粒体内源性凋亡途径抑制细胞凋亡,保护线粒体,提高实验性自身免疫脑脊髓炎小鼠神经功能,为预防疾病提供了实验理论依据。     

丁苯酞联合骨髓间充质干细胞治疗小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的疗效及机制研究

  目的  探索丁苯 探索丁苯酞（3-n-butylphthalide, NBP）和骨髓间充质干细胞（bone mesenchymal stem cells, BMSCs）联合治疗小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE）的疗效和机制。  方法  用髓鞘少突胶质糖蛋白（myelin oligodendrocyte glycoprotein 35-55, MOG35-55）诱导C57BL/6小鼠建立EAE模型,将小鼠随机分为EAE组〔腹腔注射磷酸盐缓冲生理盐水 （phosphate-buffered saline, PBS）〕、NBP处理EAE组（NBP组,腹腔注射NBP）、BMSCs移植EAE组（BMSCs组,BMSCs注入侧脑室,腹腔注射PBS）、BMSCs和NBP联合处理EAE组（BMSCs+NBP组,BMSCs注入侧脑室,腹腔注射NBP）,每组各10只。并设正常小鼠10只为空白对照组（腹腔注射PBS）。每日记录小鼠神经功能评分。诱导EAE 22 d后处死小鼠,劳克坚劳蓝（Luxol fast blue, LFB）脊髓髓鞘染色观察脱髓鞘情况;酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）检测血清白介素（interleukin, IL）-6、IL-10、IL-17、IL-22和转化生长因子-β（transforming growth factor-β, TGF-β）水平;免疫荧光染色检测脑中胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein, GFAP）、微管相关蛋白-2（microtubule-associated protein-2, MAP-2）、髓鞘碱性蛋白（myelin basic protein, MBP）的表达;Western blot法检测脊髓核因子κB〔nuclear factor (NF)-κB〕通路、磷脂酰肌醇-3激酶（phosphoinositide-3 kinase, PI3K）/蛋白激酶（protein kinase B, PKB or Akt）通路及IL-17、叉状头/翅膀状螺旋转录因子（forkhead box P3, Foxp3）的表达。  结果  各治疗组神经功能评分及平均分均较EAE组降低（P<0.05）;BMSCs+NBP组评分下降较单独治疗组（NBP组和BMSCs组）更为明显（P<0.05）;LFB染色与神经功能评分及平均分一致。与EAE组相比,各治疗组EAE小鼠血清促炎因子IL-6、IL-17和IL-22降低（P<0.05）,抑炎因子IL-10和TGF-β增加（P<0.05）;BMSCs+NBP组细胞因子表达的变化较BMSCs组更为显著（P<0.05）。BMSCs+NBP组的GFAP、MAP-2、MBP表达均较BMSCs组增加（P<0.05）。与EAE组相比,各治疗组p-NF-κB/NF-κB比值下降,而p-IκBα/IκBα比值上升,p-PI3K/PI3K及p-Akt/Akt比值均上升,IL-17/Foxp3比值降低,以BMSCs+NBP组最为显著（P<0.05）。  结论  NBP和BMSCs联合治疗可缓解EAE模型小鼠的症状,且疗效优于单独治疗。其机制与抑制NF-κB通路以调节Th17/Foxp3比例及激活PI3K/Akt通路以促进BMSCs成神经分化有关。     

经支气管镜灌洗痰热清注射液治疗支气管扩张的临床试验研究

[目的] 观察经支气管镜灌洗痰热清注射液治疗支气管扩张的临床疗效及对气道内中性粒细胞弹性蛋白酶数量的影响.[方法] 将60例支气管扩张症患者随机分为治疗组31例和对照组29例,对照组在常规基础治疗上加用生理盐水进行肺泡灌洗,治疗组在对照组基础上加用痰热清注射液灌洗,观察两组临床疗效及灌洗液中性粒细胞弹性蛋白酶的变化.[结果] 两组总有效率分别为64.5%,65.5%,差异无统计学意义(P>0.05).两组患者治疗前后中性粒细胞弹性蛋白酶的OD值及浓度值差值自身比较,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者治疗后中性粒细胞弹性蛋白酶的OD值及浓度值下降,差异有统计学意义(P<0.05).[结论] 经支气管镜灌洗痰热清注射液能改善患者临床症状,明显减少支气管扩张患者气道内中性粒细胞弹性蛋白酶的数量.     

银杏提取物对自身免疫性脑脊髓炎小鼠脱髓鞘免疫炎性病变的影响

目的探讨银杏提取物(GBE)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠脱髓鞘免疫炎症病变的影响。方法将小鼠分为EAE模型组(腹腔注射生理盐水)和GBE组[腹腔注射GBE 70 mg/(kg.d)],应用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白33-55(MOG33-55)配以完全弗氏佐剂(CFA)免疫小鼠,诱发EAE模型。通过神经功能评分、免疫组化染色以及酶联免疫吸附实验(ELISA),观察GBE对EAE小鼠的影响。结果 GBE组小鼠发病潜伏期[(12.5±0.64)d]较EAE组[(10.7±0.47)d]显著延长(P<0.05),并且GBE组发病高峰期(CFA免疫后第21天)神经功能评分较EAE组显著降低(P<0.05)。海马伞矢状切片免疫组化染色结果证实GBE组CD4+T淋巴细胞较EAE组明显减少,仅可见CD4+T淋巴细胞散在分布。ELISA检测结果显示发病高峰期GBE组TNF-α含量较EAE组明显降低(P<0.05)。结论 GBE可能通过抑制CD4+T淋巴细胞激活、减少炎症介质释放,从而保护延缓EAE小鼠脱髓鞘病变进程。     

大鼠急性实验性变态反应性脑脊髓炎模型的建立

目的建立大鼠急性实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)模型.方法采用豚鼠脊髓和福氏完全佐剂混合乳剂一次性注入Wistar大鼠双足垫和尾部,同时腹腔注射左旋咪唑诱导大鼠发生EAE.观察发病情况;HE染色观察病理变化;Loyez氏髓鞘染色法观察髓鞘改变.结果空白对照组大鼠均未出现症状,HE染色大脑白质及脊髓无炎性细胞浸润;Loyez氏染色未见髓鞘脱失;模型组临床症状发生率为87.5%,HE染色见大脑白质及脊髓血管周围有大量炎性细胞浸润;Loyez氏染色见部分脱髓鞘改变.结论用豚鼠脊髓髓鞘蛋白和福氏完全佐剂混合乳剂同时辅以左旋咪唑成功地诱导Wistar大鼠发生急性EAE.     

火把花根片对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠脑IL-2和IFN-γ mRNA的影响

目的:探讨火把花根片对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)Wistar大鼠的治疗作用及IL-2和IFN-γmRNA的影响。方法:模型组采用豚鼠髓鞘蛋白匀浆和福氏完全佐剂诱发大鼠急性EAE;治疗组在模型组基础上予以火把花根片(300 mg.kg-1,BID)治疗,观察症状并评分;HE染色和Loyez氏髓鞘染色,观察病理和髓鞘改变;RT-PCR法测定脑组织的IL-2和IFN-γ的mRNA表达水平。结果:治疗组未出现EAE症状,脑组织IL-2和IFN-γ的mRNA表达水平分别为0.345±0.032、0.353±0.023,与模型组比较P<0.01;脑和脊髓小血管周围炎症细胞浸润明显减少;髓鞘结构完整。结论:火把花根片对EAE有治疗作用,其机制与抑制了脑组织IL-2和IFR-γ的mRNA表达有关。     

二黄胶囊对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠细胞免疫的影响

目的观察二黄胶囊对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠(EAE)细胞免疫的影响。方法皮下注射髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)与完全弗氏佐剂(CFA)混合的抗原,辅以腹腔注射百日咳毒素(PTX),建立EAE模型。造模后每天记录各组小鼠体质量及神经功能评分;用流式细胞仪检测小鼠外周血T淋巴细胞亚群及自然杀伤(NK)细胞;采用HE染色进行脑组织病理学观察。结果模型组小鼠造模后第9天陆续发病,第22天达到高峰,发病急性期(造模后第25天)T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+明显比正常组增高(P<0.01),CD4/CD8比值也有所升高(P<0.05);发病缓解期(造模后第40天)T淋巴细胞亚群CD8+和NK细胞明显下降(P<0.05);病理检查发现EAE小鼠脑组织神经元细胞核固缩,小静脉周围炎性细胞浸润形成袖套样改变。二黄胶囊治疗后,EAE小鼠神经功能评分比模型组明显降低(P<0.05),脑组织炎性浸润程度减轻,发病急性期外周血T淋巴细胞亚群CD4+/CD8+比值显著降低(P<0.01);恢复期T淋巴细胞亚群(CD3+、CD8+)及NK细胞明显增加(P<0.05)。结论二黄胶囊可在EAE小鼠发病的不同时期通过调节T淋巴细胞亚群(CD3+,CD4+,CD8+,CD4+/CD8+)及NK细胞而起到防治EAE作用。     

α-硫辛酸对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠模型干预的初步研究

目的 研究α-硫辛酸(α-LA)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠模型干预的有效性,探讨α-LA临床治疗多发性硬化的可能性.方法 Wistar大鼠30只,其中22只制作EAE模型,分为α-LA干预组(11只)及免疫组(11只),另8只为非免疫组.α-LA干预组大鼠于免疫当天开始每天1次腹腔注射α-LA(100 mg/kg),至实验28 d结束处死日止;免疫组及非免疫组大鼠每天腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液.对各组大鼠进行神经功能缺损评分、病理学及免疫组织化学检查.结果 α-LA干预组的EAE发病率为5/11,显著低于免疫组的9/11(P<0.01).α-LA干预组大鼠免疫后第14天及第16～28天的神经功能缺损评分显著低于免疫组(P值均<0.05).α-LA干预组大鼠脑组织切片脱髓鞘病灶数为(3.85±1.21)个,脊髓组织切片病灶数为(4.26±2.65)个,均显著少于免疫组的(9.09±5.61)和(14.45±5.10)个(P值均<0.05).免疫组织化学髓鞘碱性蛋白(MBP)染色也显示,α-LA干预组病理切片的髓鞘松散、脱失明显轻于免疫组.结论 α-LA能显著改善EAE大鼠的神经功能,干预EAE的发病.     

正交试验-多元回归法优化葛根的乙醇提取工艺

目的 探讨香椿子正丁醇提取物对脑缺血再灌注致大鼠多器官功能障碍综合征的保护作用。方法 大鼠随机分为正常对照组,假手术组,模型组,溶媒对照组,香椿子正丁醇提取物低、高剂量（20、30 mg/kg）组,阿司匹林（10 mg/kg）阳性对照组,各给药组每天给药1次,连续给药7 d。第8天以大脑中动脉线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,造模后,行神经行为学评分判断神经功能损伤程度,伊文思蓝法观察血脑屏障通透性,分光光度法测定胃肠组织中丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）的量和超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性。结果 与模型组相比,香椿子正丁醇提取物可以改善脑缺血再灌注大鼠神经功能损伤（P＜0.05）、降低血脑屏障通透性（P＜0.05）;减少胃和小肠组织MDA和NO的生成（P＜0.05）,抑制SOD、GSH-Px活性升高（P＜0.05）。结论 香椿子正丁醇提取物通过抗氧化应激效应对脑缺血再灌注致多器官功能障碍综合征发挥保护作用。     

香椿子正丁醇提取物对脑缺血再灌注致多器官功能障碍综合征的保护作用

目的 探讨香椿子正丁醇提取物对脑缺血再灌注致大鼠多器官功能障碍综合征的保护作用。方法 大鼠随机分为正常对照组,假手术组,模型组,溶媒对照组,香椿子正丁醇提取物低、高剂量（20、30 mg/kg）组,阿司匹林（10 mg/kg）阳性对照组,各给药组每天给药1次,连续给药7 d。第8天以大脑中动脉线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,造模后,行神经行为学评分判断神经功能损伤程度,伊文思蓝法观察血脑屏障通透性,分光光度法测定胃肠组织中丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）的量和超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性。结果 与模型组相比,香椿子正丁醇提取物可以改善脑缺血再灌注大鼠神经功能损伤（P＜0.05）、降低血脑屏障通透性（P＜0.05）;减少胃和小肠组织MDA和NO的生成（P＜0.05）,抑制SOD、GSH-Px活性升高（P＜0.05）。结论 香椿子正丁醇提取物通过抗氧化应激效应对脑缺血再灌注致多器官功能障碍综合征发挥保护作用。     

大鼠胸腺内注射MBP诱导免疫耐受对手术SBI引起的脑神经功能缺陷和脑水肿作用研究

为探讨大鼠胸腺内注射髓鞘碱性蛋白(MBP)诱导免疫耐受对手术脑受损(SBI)引起的脑神经功能缺损和脑水肿的影响。选取SD大鼠随机分为假手术组、SBI模型组和MBP处理组,模型组胸腺注射等渗盐水,MBP处理组注射MBP,采用改良神经功能缺陷评分(MNSS)评价各组大鼠神经功能,检测各组大鼠脑水肿体积及血清炎性因子,PCR检测脑组织FasL mRNA表达。结果显示大鼠胸腺内注射MBP诱导免疫耐受,可改善SBI大鼠的脑神经功能缺陷和脑水肿,减轻炎性反应,说明MBP通过诱导免疫耐受,减轻脑受损大鼠的脑神经功能缺陷和脑水肿。     

杏芎氯化钠注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制

研究杏芎氯化钠注射液对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响。将大鼠随机分为伪手术组、模型组、银杏内酯注射液组(3 mg/kg)、杏芎氯化钠注射液高(14 mg/kg)、低(7 mg/kg)剂量组,除伪手术组外其他大鼠均采用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注损伤模型,尾静脉给药3 d,检测大鼠脑神经功能学损伤程度、脑组织含水量、脑梗死面积、脑组织病理形态学改变及脑组织生化学指标。结果表明,与模型组比较,杏芎氯化钠注射液在7和14 mg/kg的剂量下能明显改善脑缺血再灌注所致的大鼠神经功能损伤,降低脑含水量、减小脑梗死面积;此外14 mg/kg杏芎氯化钠注射液剂量组能显著改善脑病理组织学改变,降低脑组织中H₂O₂和丙二醛(MDA)含量,提高微量还原型谷胱甘肽(GSH)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力、超氧化物歧化酶(SOD)活力及抵抗超氧阴离子自由基和羟自由基的能力。杏芎氯化钠注射液可提高脑组织抗氧化能力,明显改善大鼠脑缺血再灌注损伤。     

雷帕霉素通过上调TGF-β/smad信号通路减轻小鼠的实验性自身免疫性脑脊髓炎

目的观察雷帕霉素对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠的治疗作用,并研究相关机制。方法建立C57BL/6小鼠 EAE模型,免疫成功后将小鼠分为试验对照组,雷帕霉素小剂量组（0.3 mg/kg/d）和雷帕霉素大剂量组（1 mg/kg/d）。应用Knoz 评分观察小鼠的临床评分,免疫组化法观察IL-17浸润情况,流式细胞仪观察外周Treg细胞的分化情况,ElISA法观察小鼠细胞 因子的变化情况,Western blot法观察p-smad2和p-smad3表达情况。结果大剂量雷帕霉素可以明显改善EAE小鼠的神经功能 缺损评分,在发病初期,高峰期及缓解期大剂量雷帕霉素组评分分别为（0.14±0.38）,（0.43±1.13）和（0.14±0.37）,而实验对照组 分别为（1.14±0.69）,（2.14±1.06）和（2.2±0.75）;大剂量雷帕霉素组中可IL-17炎性细胞在在中枢神经系统的浸润为（43±1.83）, 而实验对照组为（153.5±7.02）;大剂量雷帕霉素可以抑制IL-12,IFN-γ,IL-17和IL-23炎性细胞因子同时诱导IL-10和TGF-β抗 炎性细胞因子;大剂量雷帕霉素组外周Treg 细胞为（10.17±0.68）,较实验对照组（3.52±0.32）明显增多（P<0.05）;雷帕霉素和 TGF-β具有协同免疫抑制作用,体外实验发现雷帕霉素和TGF-β共同作用淋巴细胞后Treg细胞为（13.66±1.89）,较单用雷帕霉 素（6.23±0.80）或单用TGF-β（4.87±0.85）均明显增多（P<0.05）;雷帕霉素可以上调p-smad2 和p-smad3 的表达,并呈剂量依赖 关系。结论雷帕霉素通过上调p-smad2 和p-smad3表达来促进Treg细胞分化,进而改善EAE的神经功能缺损评分。     

Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎模型的建立

目的 研究用牛的髓鞘碱性蛋白(MBP)诱导Wistar大鼠发生实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)。方法 一次性给Wistar大鼠双后腿足垫皮内注射牛MBP-福氏完全佐剂(CFA)混合乳剂，同时辅以百日咳杆菌。结果 实验组大鼠全部发病，对照组无一发病。结论 用牛脊髓MBP的粗提品可成功地诱导Wistar大鼠发生EAE。     

Fasudil对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠致脑炎性T细胞的免疫调节作用

目的：探讨法舒地尔(Fasudil)修饰的脾单个核细胞(mononuclear cells,MNCs)治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的疗效及可能的分子机制。方法：雌性C57BL/6小鼠采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35–55诱导,建立主动免疫EAE模型,免疫后第9天制备脾MNCs,和/无Fasudil培养。作用72 h后收集上述细胞,检测T细胞亚群的变化、Rho激酶(Rho kinase,ROCK)活性和细胞因子水平;以5×107个细胞/只小鼠腹腔注射诱导,建立被动转移EAE模型,并将小鼠分为PBS-MNCs组和Fasudil-MNCs组,每组8只。观察各组小鼠临床评分和体质量变化。结果：免疫第9天EAE小鼠脾致脑炎性MNCs可通过被动转移实验诱导EAE模型的建立,而体外Fasudil修饰的MNCs不能诱导EAE的发生;与PBS-MNCs组相比,Fasudil-MNCs组小鼠体质量减轻较少(P<0.05)。体外实验显示：Fasudil处理的MNCs ROCK活性降低(P<0.01);Fasudil可抑制IFN-γ和IL-17的CD4+T细胞比例(IFN-γ：P<0.01;IL-17：P<0.05),并增强TGF-β和IL-10的CD4+T细胞分泌(均P<0.001);此外,Fasudil可降低细胞因子IL-17水平(P<0.001)和增强细胞因子IL-10分泌(P<0.05)。结论：Fasudil介导的细胞治疗通过抑制辅助性T细胞1(helper T cell 1,Th1)和Th17炎性反应,促进Th2免疫调节作用,影响EAE的发生和发展。     

匹多莫德联合痰热清治疗手足口病疗效观察

目的观察匹多莫德联合痰热清注射液治疗手足口病的效果。方法100例手足口病患儿随机分为两组,对照组给予痰热清注射液静滴,治疗组采用匹多莫德口服联合痰热清注射液静滴治疗。结果治疗组的总有效率高于对照组（P〈0．05）,治疗组体征消退的时间明显短于对照组（P〈0．05）,治疗组血清IL-2、IFN—γ水平升高显著（P〈0．05）。治疗期间,患儿未发生严重不良反应。结论匹多莫德联合痰热清注射液治疗手足口病具有协同作用,疗效显著,安全可靠。     

阿托伐他汀对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠血清TNF-α和IL-10的影响

目的探讨阿托伐他汀对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）大鼠血清TNF-α和IL—10的影响。方法120只雌性Wistar大鼠随机分为正常对照组、EAE模型组、泼尼松治疗组及阿托伐他汀治疗组,每组30只,每组再分为免疫后第7、14、21天亚组,每亚组10只。正常对照组大鼠不造模及用药。后三组大鼠于四肢足垫皮下注射新鲜豚鼠全脊髓匀浆＋完全弗氏佐剂制作EAE模型。自免疫后第1天开始泼尼松治疗组按3．9mg／（kg·d）给予泼尼松灌胃,阿托伐他汀组给予阿托伐他汀10mg／（kg·d）灌胃,EAE模型组给予生理盐水灌胃。观察各组大鼠发病率及神经功能评分。各组大鼠于免疫后第7d、14d、21天处死,HE染色并于光镜下观察脊髓内病变情况,ELISA方法测定TNF—α和IL—10水平。结果与EAE模型组比较,阿托伐他汀治疗组及泼尼松治疗组大鼠的发病率均明显降低,神经功能评分、脊髓内病灶数减少,差异有统计学意义（P〈0．05）。阿托伐他汀治疗组及泼尼松治疗组免疫后第14、21天TNF-α表达水平较EAE模型组降低,免疫后第7、14、21天时IL—10表达水平较EAE模型组升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。阿托伐他汀治疗组与泼尼松治疗组在大鼠发病率、神经功能评分、病灶数、TNF-α和IL-10表达水平方面差异无统计学意义（P〉0．05）。结论阿托伐他汀能改善EAE大鼠的临床症状,抑制脊髓内炎症反应,其机制可能与降低血清TNF-α和升高IL-10水平有关。