尼美舒利对大鼠慢性脑缺血损害的保护作用

目的　探讨诱导型环氧和酶 (COX -2 )抑制剂尼美舒利对慢性脑缺血损害的保护作用。方法　大鼠随机分为对照组、缺血组和治疗组 ,治疗组于术后 2 4h开始以尼美舒利 (6mg/kg)每日灌胃 ,连续 60d ,各组于 60d后做病理染色、GFAP免疫组化染色及脑组织内MDA和SOD含量的测定。结果　与对照组相比 ,缺血组GFAP阳性细胞明显增多 ;脑内的SOD含量下降 ,MDA含量增多。治疗组以上变化明显减轻 ,且有显著性差异。结论　COX -2抑制剂尼美舒利对慢性脑缺血损伤有脑保护作用。     

丁苯酞氯化钠注射液对大鼠延髓缺血后微血管密度丙二醛、超氧化物歧化酶的影响

目的探讨丁苯酞氯化钠注射液对大鼠延髓缺血中的影响。方法将Wistar大鼠分为假手术组、丁苯酞氯化钠注射液治疗组(治疗组)、延髓缺血对照组(对照组),采用多点阻断脑动脉方法制造延髓缺血模型。治疗组腹腔注射丁苯酞氯化钠注射液、延髓缺血对照组腹腔注射生理盐水。分别在实验7 d、14 d时取延髓,检测脑组织的SOD、MDA水平及微血管密度。结果治疗组及缺血对照组的微血管灰度值较假手术组均增加,治疗组数值增加的幅度低于缺血对照组(P<0.01)。缺血对照组脑组织SOD水平下降,脑组织MDA浓度含量较高;与缺血对照组相比,治疗组SOD下降的幅度小(P<0.01),MDA浓度降低。结论丁苯酞氯化钠注射液能有效地清除自由基、保护微血管,对延髓缺血具有明显的保护作用。     

COX-2在大鼠脑出血损伤机制中的实验研究

目的观察大鼠脑出血后环氧合酶2(COX-2)蛋白动态表达情况与血肿周围脑组织含水量的相互关系,及COX-2抑制剂对ICH大鼠脑水肿和神经功能的影响,探讨COX-2在ICH损伤机制中的作用。方法应用立体定向技术将自体血注入大鼠壳尾核制备脑出血模型,160雄性SD大鼠分为正常对照组、假手术组、脑出血组和尼美舒利治疗组。后3组每组50只,分6h、12h、24h、72h、7d五个时间点进行神经功能障碍评分,测定血肿周边脑组织含水量,免疫组织化学染色观察COX-2蛋白动态表达。结果脑出血组COX-2表达高于正常对照组(P<0.05),治疗组COX-2表达明显低于ICH组(P<0.05)。治疗组脑组织含水量明显低于ICH组(P<0.05)。治疗组各时间点神经功能评分明显高于ICH组(P<0.05)。ICH组COX-2蛋白表达与血肿周围脑组织含水量相关(r=0.911,P<0.001)。结论ICH后COX-2蛋白表达升高促进脑水肿形成,加重神经功能缺失。尼美舒利能抑制COX-2蛋白表达,减轻脑水肿,改善ICH后大鼠神经功能。     

人参总皂甙对大鼠脑缺血再灌注后MDA、SOD及细胞凋亡的影响

目的:观察人参总皂甙对大鼠脑缺血再灌注的保护作用,探讨其作用机制。方法:将40只大鼠随机分为4 组:假手术组、缺血再灌注组、治疗组1、治疗组2,采用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型,72h断头取脑,Nissel染色光镜下观察海马CA1区病理形态变化,TUNEL法检测细胞凋亡,同时检测脑组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量。结果:与缺血再灌注组相比,人参总皂甙治疗组光镜下病理损伤轻,脑组织中MDA含量降低、SOD含量升高,细胞凋亡数降低。结论:人参总皂甙对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与抑制自由基损伤有关。     

环氧合酶-1基因缺失阻断褪黑素对脑缺血的保护作用

目的探讨褪黑素对脑缺血的保护作用及环氧合酶-1(CPX-1)在其中的作用。方法应用光化学法对野生型及COX-1基因缺失纯合型小鼠诱导脑梗死,给予褪黑素(15 mg/kg)及0．9%氯化钠溶液进行治疗。术后第3 d应用TTC染色测量脑梗死体积,应用尼氏染色分别对缺血半暗带区存活神经元进行定量分析。结果(1)COX -1基因对脑梗死体积和缺血半暗带区神经元数目无影响;(2)褪黑素减小野生型小鼠组的脑梗死体积,增加海马区缺血半暗带内的神经元数目,但是对COX-1基因缺失的纯合型小鼠的脑梗死体积和缺血半暗带区的神经元数目无影响;(3)褪黑素治疗与COX-1基因对总梗死体积、皮层梗死体积和海马区缺血半暗带神经元数目有显著的交互影响。结论COX-1基因对光化学法所致的脑缺血无影响。褪黑素对野生型小鼠的脑保护作用随着COX-1基因缺失而消失,其神经保护作用通过或部分通过抑制COX-1实现。     

亚硒酸钠对沙土鼠脑缺血/再灌注损伤的抗氧化作用

目的 探讨亚硒酸钠对沙土鼠脑缺血/再灌注(I/R)损伤的保护作用及其机制.方法 实验分3组.采用夹闭双侧颈动脉法制备沙土鼠前脑I/R(2,4 d)模型,焦油紫染色,光镜下观察各组海马CA1区神经元的形态变化,电镜下超微结构变化.同时测定脑组织中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量.结果 硒处理组沙土鼠脑I/R后,神经元病理损伤减轻,GSH-PX和SOD含量增多,与对照组比较有显著差异(P<0.01,P<0.05).MDA含量减少.结论 亚硒酸钠对沙土鼠脑I/R损伤具有保护作用,其机制可能和增强脑I/R早期脑组织中抗氧化酶的抗氧化作用有关,可能存在对脑缺血耐受的预处理机制.     

G-CSF对局灶脑缺血再灌注大鼠脂质过氧化及神经细胞凋亡的影响

目的研究G-CSF对局灶脑缺血再灌注大鼠缺血区域脑组织脂质过氧化及神经细胞凋亡的影响,为G-CSF应用于缺血性脑血管病的治疗提供进一步的理论依据。方法 18只成年雄性Wistar大鼠随机分成3组:假手术组、盐水对照组和G-CSF治疗组,每组各6只大鼠。改良线栓法建立右侧大脑中动脉阻塞模型(t MCAO)。再灌注2 h后,G-CSF治疗组给予50μg/kg粒细胞集落刺激因子皮下注射一次;盐水对照组注入等量生理盐水;假手术组不作任何处理。再灌注24 h后处死大鼠取脑,化学比色法检测缺血区域SOD、GSH-PX、MDA、NO的含量;免疫组化染色计数p-JNK、p-p38MAPK阳性细胞;Tunel染色检测神经细胞凋亡情况。结果再灌注24 h后,G-CSF治疗组缺血区域SOD、GSH-PX的含量高于盐水对照组而低于假手术组(P<0.05),MDA、NO的含量低于盐水对照组而高于假手术组(P<0.05);G-CSF治疗组p-JNK、p-p38MAPK阳性细胞明显少于盐水对照组(P<0.05),tunel染色可见凋亡细胞数较盐水对照组减少。结论 G-CSF可以显著增加大鼠局灶脑缺血再灌注后SOD、GSH-PX的水平,减轻脂质过氧化反应程度,并且可以通过拮抗JNK、p38MAPK途径减轻神经细胞凋亡,发挥神经保护作用。     

脑红蛋白对大鼠局灶性脑缺血Na+-K+/ATP酶和SOD、MDA含量的作用

目的观察脑缺血后缺血半暗区脑红蛋白(neuroglobin,NGB)表达与SOD、MDA和Na -K /ATP酶含量的关系,阐明NGB在局灶性脑缺血大鼠中的表达规律及其保护机制。方法大鼠随机分为假手术组(sham组)(n=6)、脑缺血组(cerebral infarction group,CI组)(n=36)、干预组(intervention group,IV组)(n=30)、干预对照组(intervention control group,IVC组)(n=6)。其中CI组造模后按断头时程分为5 min、0.5 h、1 h、6 h、24 h、72 h 6个亚组(n=6);IV组将MoAb-NGB注入左侧尾壳核30 min后造模,分为0.5 h、1 h、6 h、24 h、72 h 5个亚组(n=6);sham和IVC组于24 h断头。取脑作HE和NGB免疫组化染色、测定SOD、MDA和Na -K /ATP酶含量。结果缺血5 min NGB表达明显上升,0.5 h达高峰,随后下降,6 h接近正常;而Na -K /ATP酶和SOD逐步降低,与NGB正相关,干预后明显减少,MDA逐步增高呈负相关;干预后明显增加。结论脑缺血后早期NGB在缺血半暗区升高,调节Na -K /ATP酶、SOD和MDA,发挥脑保护作用。     

尼莫地平对大鼠急性脑缺血再灌注损伤早期保护作用的研究

目的探讨尼莫地平对急性脑缺血再灌注损伤的早期保护作用。方法线栓法复制大鼠急性脑缺血模型。30只雄性Wistar大鼠随机分为假手术、模型、尼莫地平3组。模型组采取缺血2h再灌注2h。尼莫地平组大鼠在缺血0时刻起每小时腹腔注射给药一次,剂量为5mg/kg。各组大鼠在手术4h后实验结束后,行腹主动脉采血,同时取完整脑组织。脑组织切片进行TTC染色,并比较各组脑组织梗死面积。检测各组大鼠血清及脑组织匀浆中SOD、MDA、NO含量。结果与模型组相比,尼莫地平组大鼠脑组织梗死面积显著减少。血清生化指标显示,模型组SOD含量显著低于假手术组,给予尼莫地平治疗后,SOD含量增加明显。模型组MDA、NO含量明显高于假手术组,尼莫地平组明显降低血清中MDA、NO。结论尼莫地平对大鼠急性脑缺血再灌注损伤有保护作用,这种保护作用与NO和氧化应激密切相关。     

敬钊缨毛蛛毒素对小鼠脑缺血再灌注损伤神经保护作用

目的 探讨敬钊缨毛蛛毒素对小鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用. 方法 20只小鼠按随机数字表法分为4组:正常组、假手术组、模型组、蜘蛛毒素组,每组各5只.应用大脑中动脉栓塞法制备小鼠脑缺血再灌注损伤模型.TTC染色检测脑梗死体积,比色法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,RT-PCR和免疫组化染色分析环氧化酶-2(COX-2) mRNA和蛋白的表达变化. 结果 与模型组相比,蜘蛛毒素组脑梗死体积明显减小,血清SOD活性明显增加,MDA表达水平明显降低,COX-2 mRNA和蛋白表达水平明显下降,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 敬钊缨毛蛛毒素对脑缺血再灌注损伤有神经保护作用,其机制可能是提高脑缺血后细胞抗氧化能力和下调COX-2表达量.     

氨基胍对大鼠脑缺血-再灌流损伤保护作用的研究

目的:探讨诱生型一氧化氮合酶抑制剂氨基胍(Aminogunidine,AG)对脑缺血-再灌流损伤保护作用的机制。方法:将大鼠随机分为对照组、AG治疗组、假手术组,测定再灌流各时相点脑内一氧化氮含量,观察光镜下顶叶皮层尼氏染色、HE染色改变。结果:再灌流不同时相点AG治疗组NO含量,顶叶皮层神经元变性程序及数量、微血管数目明显低于对照组。结论:AG可以抑制iNOS活性,降低脑内NO含量,减轻半暗带区神经元变性、微循环障碍和血脑屏障破坏,具有脑保护作用。     

神经干细胞移植治疗大鼠脑缺血再灌注损伤的实验研究

目的探讨胎鼠皮质培养的神经干细胞移植治疗大鼠脑缺血再灌注损伤的可行性及疗效。方法取孕龄15d Sprague-Dawley(SD)胎鼠皮质细胞培养为神经干细胞;用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型;将24只健康SD大鼠分为假手术组、缺血对照组、缺血移植组,在移植后2周、4周依据Garcia的18分评分法对各组大鼠的神经功能进行评分;行脑灌注固定取材,免疫组化染色观察移植后神经干细胞的分化、迁移和整合情况。结果用胎鼠皮质培养的细胞nestin表达阳性;缺血移植组大鼠的神经功能评分明显高于缺血对照组(P<0.05);缺血移植组免疫组织化学染色能够检测到存活的BrdU阳性细胞,移植后4周时可见移植细胞向周围迁移、分化、参与血管形成,并可见梗死区边缘微血管明显增生;缺血移植组大鼠脑GFAP阳性细胞数较缺血对照组明显增多(P<0.05)。结论分离、培养胎鼠皮质细胞Nestin表达阳性,即是大鼠的神经干细胞;移植体外培养的神经干细胞能在脑缺血大鼠脑内存活、迁移、分化,并且对脑梗死大鼠的神经功能修复起到了积极作用。     

养血清脑颗粒对大鼠慢性脑缺血细胞凋亡及神经细胞突触结构的影响

目的 研究养血清脑颗粒对大鼠慢性脑缺血模型的神经细胞凋亡及突触结构的影响.方法 SD大鼠随机分为假手术对照组、慢性缺血组、慢性缺血+养血清脑颗粒治疗组、慢性缺血+养血清脑颗粒预防组.应用大鼠双侧颈总动脉结扎方法制备慢性脑缺血大鼠模型,应用流式细胞术检测细胞凋亡,透射电镜和图像分析观察并测定大鼠海马及皮质突触的形态参数.结果 流式细胞术显示脑缺血14天后,细胞凋亡明显增多,养血清脑颗粒可明显抑制细胞凋亡;缺血组可导致突触结构参数变化,而慢性缺血+养血清脑颗粒治疗组和慢性缺血+养血清脑颗粒预防组可明显减轻这一变化.结论 养血清脑颗粒对慢性脑缺血细胞凋亡及突触结构改变的抑制作用有可能对慢性脑缺血的病理改变起到预防和治疗的作用.     

人白介素-10基因转染对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中NO、SOD、MDA、GSH-Px的影响

目的观察人白介素-10(IL-10)基因转染对局灶脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物(GSH-Px)的影响,探讨其缺血脑保护的作用机制。方法实验分正常对照组、缺血对照组、人IL-10基因转染组和空质粒组,采用Longa法建立大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,采用立体定向脑室内注射的方式进行转染,然后分别用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测其转染效果,氯化三苯四氮唑(TTC)染色测定脑梗死体积,Longa 5分制进行神经行为学评分,同时按照试剂盒说明分别检测脑组织中NO、SOD、MDA、GSH-Px的含量。结果(1)人IL-10基因能有效整合到大鼠脑组织中并能高效分泌人IL-10,同时人IL-10基因转染能减少脑梗死体积和降低神经行为学评分;(2)正常对照组、缺血对照组、空质粒组和人IL-10基因转染组SOD的含量分别为214.28±13.73、170.69±12.26、175.20±13.76和195.77±13.20U/mgprot。GSH-Px的含量分别为25.73±1.72、19.91±1.81、19.32±1.37和22.70±2.22U/mgprot。与正常对照组相比,缺血对照组、空质粒组和人IL-10基因转染组SOD和GSH-Px的含量明显下降(P(0.01)。人IL-10基因转染组SOD和GSH-Px的含量则较缺血对照组、空质粒组明显升高(P(0.01)。缺血对照组和空质粒组之间无显著差异(P>0.05)。(3)正常对照组、缺血对照组、空质粒组和人IL-10基因转染组MDA的含量分别为6.29±0.33、8.75±0.44、8.66±0.51和7.70±0.31nmol/mgprot。NO的含量分别为1.07±0.11、1.87±0.18、1.93±0.33和1.44±0.10μmol/gprot。与正常对照组相比,缺血对照组、空质粒组和人IL-10基因转染组MDA和NO的含量明显升高(P(0.01)。人IL-10基因转染组MDA和NO的含量则较缺血对照组、空质粒组显著下降(P(0.01)。缺血对照组和空质粒组之间无显著差异(P>0.05)。结论人IL-10基因转染能降低大鼠局灶脑缺血再灌注损伤脑组织中MDA和NO的含量,同时能提升SOD和GSH-Px的含量,可能是其发挥缺血脑保护作用的机制之一。     

重组腺病毒介导的血管生长素基因转染对大鼠局灶性脑缺血的治疗作用

目的观察重组腺病毒介导的血管生长素(ANG)基因转染对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织的作用。方法制备重组血管生长素腺病毒(Ad-ANG,含绿色荧光蛋白基因)及重组绿色荧光蛋白腺病毒(Ad-GFP)。清洁级雄性SD大鼠随机分成Ad-ANG治疗组和Ad-GFP对照组。线栓法制作脑缺血再灌注模型,缺血90min再灌24h后两组大鼠分别侧脑室注射Ad-GFP或Ad-ANG。Longa法观察两组大鼠神经功能缺失评分;于注射后1d、3d、7d和14d制备脑组织冰冻切片,观察脑内绿色荧光蛋白表达情况,并进行HE染色、vWF因子免疫组化染色、ANG免疫组化染色及细胞凋亡检测。结果 Ad-ANG治疗组在治疗后3d、7d神经功能缺失评分较Ad-GFP对照组有明显改善(P0.05);两组大鼠侧脑室注射重组腺病毒后1d、3d时荧光显微镜下可见室管膜周围及脉络丛有较强的绿色荧光;HE染色可见Ad-ANG治疗组皮层神经元结构清晰,间质水肿、核固缩、核溶解程度较对照组明显减轻;ANG免疫组化结果显示Ad-ANG治疗组大鼠缺血脑组织ANG阳性细胞数在观察各时间点均显著高于Ad-GFP对照组(P0.01);vWF染色及凋亡检测显示3d、7d、14d时Ad-ANG治疗组大鼠缺血侧脑内微血管密度显著高于Ad-GFP对照组(P0.01),凋亡细胞数显著少于Ad-GFP对照组(P0.05)。结论侧脑室注射方式转染Ad-ANG能使脑缺血大鼠脑内ANG阳性细胞数增加,并促使缺血脑区血管生成,减少神经元的凋亡,促进神经功能的恢复,对缺血再灌注损伤脑组织有保护作用。     

雌激素对大鼠脑缺血再灌注损伤脑皮质EAA含量的影响

目的 研究雌激素对雄性大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织兴奋性氨基酸(EAA)含量的影响。方法 采用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。模型建立后5min内腹腔注射雌激素。相应时间断头取脑。然后测定脑梗死体积、脑组织谷氨酸(GLU)、天门冬氨酸(ASP)及γ氨基丁酸(GABA)含量。结果 脑梗死体积治疗组较缺血对照组明显缩小，缺血对照组脑组织GLU、ASP含量明显高于治疗组。结论 雌激素对脑缺血再灌注损伤有保护作用。其可能的机制为：干扰脑缺血再灌注损伤中EAA代谢而发挥脑保护作用。     

妥泰对沙土鼠脑缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的 研究妥泰对沙土鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及作用机制。方法 采用沙土鼠双侧颈总动脉结扎制成的全脑缺血模型。56只沙土鼠随机分为假手术组、缺血组、治疗组和预防组。预防组的动物分别给予大、小剂量的妥泰(100 mg/kg、50mg/kg)灌胃观察3天而行手术,术后24小时处死动物;治疗组的动物术后立即分别给于大、小剂量的妥泰(100 mg/kg、50mg/kg)灌胃观察7天处死动物。测定各组沙土鼠血、脑组织中的MDA、SOD的含量。光镜和电镜下观察脑组织CA_1区的病理及超微结构改变。结果 与缺血组相比,妥泰治疗组和妥泰预防组脑组织中的MDA含量明显降低(P<0.01),而SOD含量明显增高(P<0.01)。光镜和电镜下观察发现,妥泰治疗组和妥泰预防组的脑CA_1区缺血改变较缺血组减轻,且大剂量组缺血改变明显减轻。结论 妥泰对沙土鼠脑缺血再灌注损伤具有良好的保护作用,且保护作用与妥泰的剂量大小有关。其脑保护作用机制之一为妥泰能有效抑制氧自由基的产生及毒性。     

小檗碱对大鼠脑缺血后MCP-1表达的影响

目的探讨小檗碱处理对大鼠脑缺血后单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）表达的影响及小檗碱对脑缺血的神经保护作用。方法建立大鼠短暂性全脑缺血模型，采用尼氏体亚甲蓝染色观察脑缺血后大鼠脑海马CA1区神经元存活情况；采用免疫荧光染色方法检测脑缺血后大鼠缺血脑组织中MCP-1的表达情况。结果（1）与假手术组比较，脑缺血组大鼠脑海马CA1区神经元明显缺失，而小檗碱处理组大鼠脑海马CA1区神经元存活数明显多于缺血对照组；（2）与假手术组比较，脑缺血组大鼠脑缺血区MCP-1表达显著增多，而小檗碱处理显著降低了大鼠脑缺血区MCP-1的阳性表达。结论脑缺血引起MCP-1表达上调，提示MCP-1可能参与脑缺血损伤。小檗碱可抑制缺血脑组织MCP-1的表达，推测其可能经此途径减轻脑缺血的炎症反应而发挥一定的神经保护作用。     

地高辛抗血清拮抗大鼠缺血再灌注引起的脑损伤

研究地高辛抗血清对缺血再灌注脑损伤的拮抗作用 ,采用了大鼠全脑缺血再灌注模型 ,比色法检测脑匀浆液中超氧化物歧化酶 (SOD)活性、丙二醛 (MDA)含量、脑细胞膜Na K 交换ATP酶活性、血清肌酸激酶(CK)含量 ;用放射免疫法检测脑匀浆液中内洋地黄素含量。结果发现 ,全脑缺血再灌注导致脑组织SOD活性和ATP酶活性显著下降 ,脑组织MDA水平、内洋地黄素水平和血清CK水平显著升高。地高辛抗血清能改善由于脑缺血再灌注所造成的SOD、ATP酶活性的下降以及MDA、CK和内洋地黄素水平的升高。结果表明 ,地高辛抗血清对脑缺血再灌注脑损伤具有保护作用 ,其作用机制与减轻脂质过氧化、促进自由基的清除以及改善脑能量代谢有关。这些作用可能是通过拮抗内洋地黄素的作用而实现的。     

大剂量甲基强的松龙对缺血再灌注大鼠脑保护作用的研究

目的 探讨大剂量甲基强的松（MP）对缺血再灌注大鼠脑保护作用的机制。方法 采用大鼠全脑缺血再灌注模型,观察缺血前后应用大剂量MP对脑组织自由基和超氧化物歧化酶（SOD）含量的影响,同时做脑组织病理学观察。结果 MP治疗组脑组织丙二醛（MDA）水平较对照组（盐水组）明显降低（P＜0．01）,而SOD水平较对照组增高（P＜0．01）;脑组织超微结构观察发现MP可抑制再灌注中脑组织巨噬细胞浸润。结论 MP的脑保护作用与抑制作用自由基产生、减少抗氧化剂消耗以及抑制巨噬细胞浸润有关。