小檗碱联合人参皂苷Rb1对脂肪细胞炎症信号通路作用

目的:观察小檗碱联合人参皂苷Rb1对脂肪细胞炎症信号通路的影响。方法:将诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞分在肿瘤坏死因子(TNF-α)作用下给予小檗碱、人参皂苷Rb1、小檗碱和人参皂苷Rb1合用处理后,观察药物对脂肪细胞炎症信号通路的作用。结果:基础状态下,与空白对照组相比,Ber组脂肪细胞的TNF-α和IL-6的mRNA表达量降低更明显(P<0.01)。胰岛素抵抗(TNF-α刺激)状态下,与空白对照组比较,Ber组能显著地抑制TNF-α刺激下上调的TNF-α、IL-6的表达(P<0.01),而Rb1仅抑制TNF-α的表达(P<0.01),Ber+Rb1两药合用,与Rb1单用作用类似,仅抑制了TNF-α的表达(P<0.01)。经TNF-α诱导后,加入Ber处理的脂肪细胞,NF-κB和IKK-β表达水平下调,而加入Rb1处理的脂肪细胞(无论是否+Ber),NF-κB和IKK-β表达水平上调。结论:小檗碱和人参皂苷Rb1两者合用对脂肪炎性细胞未能显示出增效作用。     

一年生栽植黄芪中黄芪多糖对人外周血T细胞增殖的影响

目的观察1年生栽植黄芪中黄芪多糖(APS1)及其与人参总皂苷(TG)联用时对人外周T细胞(hPBTCs)的增殖的影响。方法采用MTT比色法检测hPBTCs的增殖。结果APS1在25~100μg/m l范围内,TG在5~20μg/m l范围内均促进hPBTCs的增殖,增殖百分率分别为127.8%~144.6%和113.9%~163.1%,APS1与TG在上述浓度范围内联用时,增殖百分率为309.5%~529.5%。结论APS1明显促进体外培养的hPBTCs增殖,APS1与TG联用可能增加免疫功能,并具有一定的协同作用。     

附子多糖对胰岛素抵抗脂肪细胞模型葡萄糖摄取的影响

目的:研究附子多糖对胰岛素抵抗脂肪细胞模型葡萄糖摄取的影响,并对其机理进行探讨。方法:1.将3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟的脂肪细胞,在培养液中加入不同浓度的附子多糖,干预培养24h,测定其对葡萄糖消耗及细胞活力的影响,由此确定进一步实验的工作浓度。2.用高糖和高胰岛素联合诱导培养脂肪细胞,造成胰岛素抵抗脂肪细胞模型,实验设对照(control,CON)组,模型(model,MOD)组,附子多糖(Fuzi Polysaccha-ride,FPS)组,罗格列酮(rosiglitazone,ROS)组,干预培养24h,通过H3葡萄糖的摄取实验鉴定各组脂肪细胞对3H-葡萄糖的摄取率。结果:1.附子多糖从0.025g/L到0.8g/L均促进3T3-L1脂肪细胞对葡萄糖的消耗,浓度为0.8g/L时细胞消耗量最大,比对照组增加25%。MTT结果示,除0.8g/L、0.4g/L外,其它浓度对脂肪细胞活力无明显影响(与对照组比较P>0.05)。结果示:1附子多糖最适作用浓度为0.2g/L。2以模型组作为3H-葡萄糖摄取正常基值,各自摄取率,对照组为模型组的399.5%,附子多糖组、ROS组分别为模型组的318.0%、462.6%,与模型组比均有显著差异(P<0.01),与ROS组也存在显著差异(P<0.01)。结论:1.附子多糖在对脂肪细胞毒副作用较小的基础上可促进3T3-L1脂肪细胞对葡萄糖的消耗。2.附子多糖可促进胰岛素抵抗模型脂肪细胞对3H-葡萄糖的摄取。     

生血胶囊质量标准的研究

目的 :建立生血胶囊质量标准 (黄芪 ,紫河车 ,人参 ,当归 ,鹿茸 ,黄连 ,鸡内金等 )。方法 :1 .采用显微镜鉴别 (1 )种皮石细胞 ,(2 )内果皮纤维 ,(3)不规则碎皮 ;2 .采用薄层色谱鉴别黄芪、紫河车、当归、人参、黄连 ;3 .用双波长薄层反射锯齿扫描测定黄芪甲苷含量 ,SX =7,狭缝 0 .4mm× 0 .4mm ,灵敏度 :X1 ,扫描速度 :1 2mm·min- 1 。结果 :平均加样回收率为 97.0 % ,RSD为 1 .2 0 % (n =6) :在 1 .0～ 5 .0 μg范围内线形关系良好 (r=0 .9977) ;结论 :本法操作简易、准确、重复性好 ,能够控制生血胶囊的质量     

小檗碱对3T3-L1前脂肪细胞及其胰岛素抵抗模型的影响

目的:探查小檗碱的体外安全浓度及其对脂肪细胞的抗胰岛素抵抗(IR)活性。方法:3T3-L1前脂肪细胞分为空白组和小檗碱不同浓度(0.001~10μmol·L-1)组,48 h后MTT法测定各组的A值。成熟的3T3-L1脂肪细胞分为空白组和IR模型组,模型组细胞经10μmol·L-1胰岛素(Ins)诱导24,48 h。检测各组培养液和细胞葡萄糖含量。检测IR模型细胞经小檗碱不同浓度(0.000 1~1μmol·L-1)干预24,48 h后的培养液中葡萄糖含量。结果:小檗碱0.01~1μmol·L-13个浓度和10μmol·L-1作用的前脂肪细胞A值均显著升高或降低(P0.05,P0.01);经Ins诱导24,48 h的培养液和细胞葡萄糖含量均显著增加或减少(P0.01);作用24 h的小檗碱0.01~1μmol·L-1和作用48 h的0.000 1~1μmol·L-1各浓度组培养液中的葡萄糖量均显著减少(P0.01)。结论:小檗碱的体外细胞安全浓度较低,低浓度小檗碱对脂肪细胞即具有显著的抗IR活性。     

小檗碱通过抑制巨噬细胞炎症反应改善脂肪细胞糖代谢异常

目的:研究小檗碱(berberine,BBR)抑制巨噬细胞炎症反应及与脂肪细胞糖代谢的关系。方法:体外培养RAW264.7巨噬细胞,运用MTT法检测不同浓度小檗碱对巨噬细胞增殖的影响;单独加入100ng/L脂多糖(LPS)或者合并加入1.86mg/L小檗碱孵育24小时,分别留取细胞上清,抽提蛋白和mRNA进行检测炎症因子的表达、分泌和炎症信号通路,并收集巨噬细胞上清,加入3T3-L1脂肪细胞中孵育24小时,检测脂肪细胞上清葡萄糖含量和提取蛋白检测炎症信号通路。结果:与正常组细胞比较,0.37mg/L和1.86mg/L的小檗碱对巨噬细胞活性未产生显著影响,而3.72、18.59、37.18mg/L的小檗碱显示出明显的抑制作用;小檗碱(1.86mg/L)能够明显抑制LPS刺激下巨噬细胞肿瘤坏死因子(TNF-α),白介素6(IL-6)和单核细胞趋化蛋白(MCP-1)表达量的上调,减少上清MCP-1、IL-6的含量,并且抑制巨噬细胞炎症信号通路JNK和IKKβ的磷酸化激活,下调NF-κB的p65亚基的表达量;LPS刺激后的巨噬细胞上清能够减少脂肪细胞胰岛素刺激下的葡萄糖消耗,而小檗碱能够促使下降的葡萄糖消耗恢复,同时减轻脂肪细胞JNK和IKKβ的磷酸化激活。结论:小檗碱通过抑制巨噬细胞的炎症反应改善脂肪细胞的糖代谢异常。     

小檗碱对3T3-L1脂肪细胞脂联素表达的影响

目的:探讨小檗碱和胰岛素对3T3-L1脂肪细胞脂联素表达的影响。方法:检测分别经小檗碱及胰岛素处理后3T3 L1脂肪细胞脂联素表达水平改变,以β actin为内对照,半定量法RT PCR测定脂联素mRNA表达。结果:经小檗碱(10μmol·L^-1)干预后3T3 L1脂肪细胞脂联素表达显著增加(P<0.05),加入胰岛素后脂联素的表达受到抑制,高浓度胰岛素有显著抑制作用(P<0.05)。结论:体外实验中,小檗碱使3T3-L1脂肪细胞脂联素的表达增加,而胰岛素可抑制小檗碱增加脂联素表达的作用。     

梓醇和小檗碱及其配伍对脂肪细胞糖代谢和分化的影响

目的:观察中药提取物梓醇和小檗碱及其配伍对3T3-L1脂肪细胞增殖,葡萄糖代谢及细胞分化的影响,初步探讨药物改善胰岛素抵抗(IR)的可能机制。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法检测3T3-L1前脂肪细胞的增殖;以葡萄糖氧化酶法检测药物干预后培养液中葡萄糖消耗量,并以油红O染色检测细胞分化过程中胞浆脂质的堆积。结果:与对照组比较,小檗碱组使前脂肪细胞MTT值增加29%,而小檗碱加梓醇组、梓醇组均无差异;梓醇、小檗碱及其配伍组分别使成熟脂肪细胞的葡萄糖消耗增加64%、76.5%和98%;小檗碱处理脂肪细胞胞浆脂质堆积明显低于对照组,梓醇组与对照组无差异。结论:小檗碱能促进前脂肪细胞增殖,增加葡萄糖消耗,抑制脂肪细胞分化;梓醇能促进葡萄糖吸收;其作用均不依赖胰岛素的存在。直接增加葡萄糖的吸收可能是这两种药物降低血糖,改善胰岛素抵抗的机制之一。     

球状活性炭对几类中药有效成分的吸附性能研究

目的 研究球状活性炭对几类中药成分的静态吸附性能，探讨其应用于中药精制的可行性。方法 对适宜的高分子树脂进行炭化、活化处理，制备球状活性炭。测定静态吸附条件下球状活性炭对目标成分的吸附等温线，并运用Langmuir单层分子吸附模型对实验数据进行计算机拟合，求出实验条件下吸附剂的表观吸附容量和平衡状态下的理论吸附容量。同时考察75％乙醇溶液的洗脱效果。结果 球状活性炭对盐酸小檗碱和薯蓣皂苷的表观吸附容量以干基计分别为35．46，47．12mg/g，相应的理论平衡吸附容量为96．16，102．04mg／g。对芦丁的表观吸附量也达到40．88mg／g。3种成分的静态洗脱率分别为83．71％，91．45％和87．69％。结论 球状活性炭对生物碱、黄酮和皂苷类物质有良好的吸附与洗脱性能,适于在中药精制纯化中推广应用。     

不同炮制法对黄柏有效成份小檗碱含量的影响

酒黄柏、盐黄柏、黄柏炭、清炒黄柏与黄柏饮片比较.结果4种炮制品的小檗碱含量均有不同程度的下降.     

人参主要成分对大鼠免疫功能的比较研究

人参及其有效成分因具有卓越的增强免疫、调节内分泌及抗氧化应激等作用而著称,然而各成分功效之间的差别并不明确。该文以实验大鼠为对象,研究人参主要有效成分一人参总皂苷、三醇皂苷、二醇皂苷以及人参多糖对机体的影响。结果显示人参二醇皂苷和多糖在提升动物免疫器官质量、血浆白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素6(IL-6)、血浆δ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)方面的作用优于其他组。总皂苷和三醇皂苷可有效增加脾脏天然杀伤细胞(NKC)的含量。二醇皂苷和多糖可以显著增加大鼠血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)和促甲状腺激素(TSH)含量。人参总皂苷在增加大鼠脑组织一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)方面优于其他各组。研究表明,人参各成分在增强免疫、调节内分泌及抗氧化应激方面有不同程度的功效,人参二醇皂苷和人参多糖在增强免疫方面体现优势,人参总皂苷在抗氧化应激方面体现优势。     

人参总皂苷合黄连小檗碱对慢性心衰大鼠神经内分泌的影响

目的 研究人参总皂苷合黄连小檗碱对慢性心衰大鼠神经内分泌的影响.方法 采用皮下连续注射异丙肾上腺素(ISO)的方法制备慢性心衰大鼠模型,随机分为模型对照组、卡托普利组、参麦注射液组、人参总皂苷合黄连小檗碱组,另设正常对照组,给药4周.测定血浆脑钠肽(BNP)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、去甲肾上腺素(NE)的含量和心功能.结果 模型对照组血浆BNP、AngⅡ、NE水平显著升高,心功能明显降低,与正常对照组相比,有显著差异(P＜0.01);人参总皂苷合黄连小檗碱组血浆BNP、AngⅡ、NE水平明显降低,卡托普利组BNP、AngⅡ显著降低,参麦注射液组NE显著降低,各治疗组心功能也有不同程度的改善,与模型对照组相比,有显著差异(P＜0.05或P＜0.01).结论 人参总皂苷合黄连小檗碱对慢性心衰大鼠神经内分泌失调有良好改善作用.     

黄芪多糖和小檗碱对3T3-L1脂肪细胞糖代谢及细胞分化的影响

目的比较黄芪多糖和小檗碱对脂肪细胞糖代谢和细胞分化的影响,并分析其改善糖代谢的可能机制。方法检测黄芪多糖和小檗碱干预的脂肪细胞对^3H-葡萄糖的摄取,对黄芪多糖和小檗碱干预分化的细胞进行油红O染色并通过比色定量分析脂肪细胞分化程度。逆转录多聚酶联反应(RT—PCR)检测脂肪细胞分化相关基因过氧化物体增殖剂活化受体γ(PPARγ)、CAAT／增强子结合蛋白α(C／EBPα)mRNA的表达。结果黄芪多糖和小檗碱组葡萄糖摄取率分别为正常组的109．3％和182．7％;黄芪多糖明显促进分化及其PPARγmRNA表达,与对照组比较,差异有显著性(P<0．01);小檗碱则明显抑制细胞分化及PPARγ,C／EBPα mRNA表达,与对照组比较,差异有显著性(P<0．01)。结论黄芪多糖促进脂肪细胞葡萄糖摄取及细胞分化和PPARγ mRNA表达,而小檗碱促进葡萄糖摄取但抑制脂肪细胞分化和PPARγ及C／EBPα mRNA的表达。     

人参皂苷RA1与黄芪多糖增强肿瘤坏死因子的抗肿瘤活性

目的：研究人参皂苷单体1（RA）和黄芪多糖增加肿瘤坏死因子-α（TNF—α）抗肿瘤作用。方法：体内外加入不同剂量的RAI和黄芪多糖，用MTT法检测细胞毒性和荷瘤鼠肿瘤抑制率估计对TNF-α增效作用。结果：RAI和黄芪多糖随TNF—α浓度增加增效作用减弱，低浓度时增效作用明显。黄芪多糖体外无直接增效作用。结论：这两者增效剂尚有提高肿瘤病人生活质量，抵抗大剂量放化疗的副作用。由于RA1和黄芪多糖易于制备，无毒副作用，因此可作为TNF-α理想增效剂，并交在临床抗肿瘤治疗中发挥重要作用。     

黄芪多糖、人参茎叶皂甙对手术病人细胞免疫功能的影响

手术病人术后２天和７天外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）的Ｔ淋巴细胞转化及白介素２（ＩＬ２）的生成均明显降低。５０～２５０μｇ／ｍｌ的黄芪多糖（ＡＰＳ）、０．１～１００μｇ／ｍｌ的人参茎叶皂甙（ＧＳＬ）在体外对术后７天ＰＢＭＣ的Ｔ淋巴细胞转化及ＩＬ２的生成均具有不同程度的升高作用，表明ＡＰＳ、ＧＳＬ对手术病人ＰＢＭＣ具有直接的刺激活性。     

人参皂苷RA1与黄芪多糖增强肿瘤坏死因子的抗肿瘤活性

目的:研究人参皂苷单体1(RA1)和黄芪多糖增加肿瘤坏死因子-α(TNF-α)抗肿瘤作用。方法:体内外加入不同剂量的RAI和黄芪多糖,用MTT法检测细胞毒性和荷瘤鼠肿瘤抑制率估计对TNF-α增效作用。结果:RAI和黄芪多糖随TNF-α浓度增加增效作用减弱,低浓度时增效作用明显。黄芪多糖体外无直接增效作用。结论:这两者增效剂尚有提高肿瘤病人生活质量,抵抗大剂量放化疗的副作用[1]。由于RA1和黄芪多糖易于制备,无毒副作用,因此可作为TNF-α理想增效剂,并交在临床抗肿瘤治疗中发挥重要作用。     

胡椒碱与小檗碱改善脂肪细胞胰岛素抵抗的比较研究

目的:胡椒碱和小檗碱分别是温里药荜茇和清热药黄连的主要成分,二者均可以改善胰岛素抵抗。本研究通过建立3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型[1,2],观察胡椒碱和小檗碱对该细胞模型的糖代谢紊乱的干预作用,意在探讨药效相似、药性相反的胡椒碱是否同小檗碱一样可以通过调节腺苷酸活化蛋白激酶AMPK而改善胰岛素抵抗。方法:诱导3T3-L1脂肪细胞分化为成熟的脂肪细胞后,采用1μM地塞米松作用48h建立脂肪细胞胰岛素抵抗模型,以AMPK激活剂AICAR和罗格列酮为阳性药,观察不同浓度的胡椒碱和小檗碱作用该模型48h后对糖代谢紊乱的调节作用,继而采用Western blot检测药物作用不同时间后细胞中AMPKα的水平变化。结果:胡椒碱、小檗碱同阳性药AICAR、罗格列酮一样在作用该脂肪细胞胰岛素抵抗模型48h后均可改善糖代谢紊乱。Western blot检测结果:与模型组比较,40u M胡椒碱、5u M小檗碱同阳性AICAR一样在作用脂肪细胞胰岛素抵抗模型6h,12h和24h后,P-AMPKα的蛋白表达明显提高。结论:胡椒碱同小檗碱一样能够改善糖代谢紊乱,其机理有可能是通过调节AMPK信号通路中的AMPKα的活性而改善胰岛素抵抗的。     

益气活血解毒方体内外抗肿瘤作用的实验研究

中医视人体为统一整体,辨证论治是中医认识疾病和治疗疾病的基本原则,组方配伍是中医药治疗疾病的精髓.扶正培本、活血化瘀、清热解毒合用是中医治疗肿瘤及防治肿瘤转移的常用大法.本研究依据以往的研究结果,选用扶正培本代表药人参的提取物人参皂苷,活血化瘀药三七的提取物三七皂苷,清热药黄连、黄柏的提取物小檗碱,组成益气活血解毒复方研究其抗肿瘤作用,从而为扶正培本、活血化瘀、清热解毒法治疗肿瘤提供实验依据,也为开发质量稳定、有效成分明确的标准化中药复方新药奠定基础.     

中药鬼箭羽提取物对脂肪细胞葡萄糖摄取作用的影响

目的：在对中药鬼箭羽药效学研究的基础上，初步探讨其各提取组份SML-1，SML-2，SML-3，SML-4对于脂肪细胞的降糖作用机制。方法：采用分离的大鼠脂肪细胞，用高浓度葡萄糖和胰岛素诱导脂肪细胞胰岛素抵抗模型，观察鬼箭羽各提取组份对于胰岛素抵抗模型脂肪细胞的葡萄糖摄取的影响以及对于正常脂肪细胞，低浓度胰岛素刺激脂肪细胞的影响。结果：鬼箭羽各提取组份SML-1，SML-2，SML-4(10μg/ml)对脂肪细胞葡萄糖的基础摄取率有所提高。SML-2，SML-3(100μg／ml)；SML-1，SML-2，SML-3，SML-4(10μg/m1)；SML-1，SML-3，SML-4(1μg／ml)；SML-1，SML-2，SML-3(0．1μg／ml)对于低浓度胰岛素(1．2nmol／L)刺激的外周葡萄糖摄取均有协同增强作用。SML-1，SML-2，SML-3，SML-4(100μg／ml)；SML-1，SML-2，SML-3，SMI-4(10μg／ml)；SML-1，SML-2(1μg／ml)；SML-1，SML-2(0．1μg／ml)可以提高胰岛素抵抗脂肪细胞的葡萄糖摄取水平。结论：鬼箭羽各提取组份可以促进正常脂肪细胞低浓度胰岛素刺激脂肪细胞的葡萄糖摄取，促进胰岛素抵抗脂肪细胞的葡萄糖摄取可能是其降糖作用机制之一。