hrHPV-DNA和p16~(INK4a)蛋白在宫颈病变中的表达

目的了解hrHPV-DNA载量及p16INK4a蛋白的表达,探讨hrHPV-DNA和p16INK4a蛋白与宫颈病变的关系,为宫颈癌早期诊断以及预测宫颈病变进展提供可靠的检测指标。方法利用第二代杂交捕获法检测hrHPV-DNA载量,采用免疫化学方法检测p16INK4a蛋白,运用检验与Spearman等级相关研究HPV-DNA和p16INK4a与宫颈病变的关系。结果随着活检分级升高,hr HPV阳性率和p16INK4a阳性表达率增高(P<0.05);正常或慢性宫颈炎中hr HPV阳性率、p16INK4a阳性表达率、HPV(+)/P16(+)表达率低于在CIN1、CIN2、CIN3、SCC中的表达(P<0.05);等级相关性分析在HPV(+)/P16(+)与活检分级呈正相关,在HPV(-)/P16(-)与活检分级呈负相关(P<0.05)。结论 hrHPV-DNA和p16INK4a蛋白均可以作为宫颈癌早期诊断的标志物。联合检测hrHPV-DNA和p16INK4a蛋白可以预测宫颈病变的进展。     

CIN中P16INK4A的表达及与HPV感染的关系探究

目的探讨宫颈上皮内瘤变(CIN)中P16^INK4A的表达及与高危型人类乳头瘤病毒(HPV)感染的关系。方法采用回顾性方法分析,选取本院自2018年2月至2020年2月期间收治的96例CIN患者,采用免疫组化技术SP法检测P16^INK4A的表达水平,并采用杂交捕获二代法检测HPV-DNA感染程度,并分析P16^INK4A的表达与HPV感染的关系。结果CINⅠ级患者的HPV持续感染率明显高于CINⅡ~Ⅲ级和宫颈鳞癌患者,差异有统计学意义(P<0.05)。CINⅠ级患者的P16^INK4A阴性率明显高于CINⅡ~Ⅲ级与宫颈鳞癌患者,差异有统计学意义(P<0.05)。随着HPV阳性率越高,P16^INK4A表达强度也越高。结论CIN患者中P16^INK4A有着较高表达水平,可作为早期筛查宫颈癌的分子生物学指标之一,在HPV持续感染患者中,通过监测P16^INK4A水平,可尽早诊断宫颈瘤变。     

P16INK4A基因与宫颈癌

随着分子生物学的发展,人们发现在宫颈癌的发生、发展过程中,有多种癌基因、抑癌基因及相关因子参与。P16INK4A是人们发现的第一个直接参与细胞周期调控的抑癌基因。它的过表达发生在宫颈癌和癌前病变阶段,可作为一种肿瘤标志物用于宫颈癌的临床筛查及诊断中。     

HPV感染和P16INK4A蛋白表达与宫颈癌关系的研究

目的探讨HPV(16/18型)感染和P16INK4A蛋白表达在人类宫颈鳞癌(SCC)及其癌前病变(CIN)中的关系。方法利用原位杂交和免疫组化方法研究了80例慢性宫颈炎及宫颈上皮内瘤变组织和宫颈鳞癌组织中HPV感染以及P16INK4A表达的情况。结果(1)与慢性宫颈炎相比,CINⅡ级、CINⅢ级、浸润癌HPV16、18杂交信号阳性率显著增高(P<0.01);(2)宫颈鳞癌组织、CINⅠ级、CINⅡ级、Ⅲ级及慢性宫颈炎标本中P16INK4A阳性率分别为100%、20.0%、46.7%、100.0%和10.0%;(3)在宫颈鳞癌及CINHPV16、18感染的标本中P16INK4A表达均是阳性。结论宫颈鳞癌的形成与HPV感染、P16INK4A过表达是呈正相关关系,P16INK4A可作为CIN的标志物对宫颈癌筛查和预防有重要意义。     

p16INK4a蛋白在蒙古族患者宫颈病变组织中的表达及其意义

目的：检测p16INK4a蛋白在蒙古族患者宫颈病变组织中的表达,探讨其与蒙古族患者宫颈癌发生发展的关系。方法：选取100例蒙古族患者宫颈癌、宫颈上皮内瘤变（CIN）、慢性宫颈炎和子宫平滑肌瘤病变组织石蜡切片,分为宫颈癌组25例、CIN组35例、慢性宫颈炎组20例和子宫平滑肌瘤组20例,利用免疫组织化学SP法检测各组石蜡切片组织中p16INK4a蛋白表达。结果：蒙古族患者宫颈癌、CIN、慢性宫颈炎、子宫平滑肌瘤组织中p16INK4a蛋白阳性表达率分别为100.0%、74.3%、25.0%和10.0%。多个样本比较的K-W H秩和检验,宫颈癌组p16INK4a蛋白阳性表达率高于CIN组、慢性宫颈炎组和子宫平滑肌瘤组（P<0.05）。结论：p16INK4a蛋白可以作为筛选蒙古族早期宫颈癌患者的一种检测指标。     

宫颈鳞癌中HPV16E7蛋白表达与微血管计数间的相关性

目的　探讨宫颈鳞癌中人乳头状瘤病毒 16E7(HPV16E7)蛋白表达与肿瘤血管形成间的相互关系。方法　采用免疫组化 L SAB法对 80例宫颈鳞癌组织进行研究。结果　 HPV16E7蛋白表达阳性率为 63.75 % ,其组织中微血管数为 2 1.5 3± 8.82 / 2 0 0 X;阴性表达率为 37.2 5 % ,其组织中微血管数为 2 0 .2 7± 7.14/ 2 0 0 X,P>0 .0 5 ,相关系数为 0 .0 4,表明两者间无明显相关关系。结论　 HPV16E7与肿瘤微血管形成在宫颈癌发病过程中无明显协同作用     

p16INK4a蛋白在宫颈疾病中的表达特点及其与HPV感染的关系

目的 研究伴有高危型人乳头瘤病毒(high-risk human papillomavirus,hr-HPV)感染及无hr-HPV感染的宫颈癌(cervical cancer,CC)、宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及宫颈炎中p16INK4a蛋白表达水平的变化及意义,探讨宫颈癌及癌前病变中p16INK4a蛋白表达与HPV感染的相关性.方法 应用免疫组化方法检测126例宫颈疾病(CC 40例,CIN 67例和宫颈炎19例)组织中p16INK4a蛋白的表达,其中,hr-HPV( )宫颈疾病89例(CC 32例,CIN 48例和宫颈炎9例),hr-HPV(-)宫颈疾病37例(CC 8例,CIN 19例和宫颈炎10例),进行半定量分析及统计学检验.结果 40例CC中,p16INK4a全部阳性表达;48例hr-HPV( )和19例hr-HPV(-)CIN中,p16INK4a阳性表达分别为39例和12例;9例hr-HPV( )和10例hr-HPV(-)宫颈炎组织中,p16INK4a阳性表达均为4例.hr-HPV( )或hr-HPV(-)宫颈炎、宫颈上皮内瘤变和宫颈癌组织中p16INK4a蛋白表达水平均依次升高.CC和CIN中p16INK4a蛋白表达与hr-HPV感染相互间无显著相关性(P＞0.05).结论 细胞周期抑制蛋白p16INK4a在CC及癌前病变中过表达,且与hr-HPV感染无关,提示p16INK4a蛋白在宫颈癌的发生、发展中所起的作用和作用机制可能与其在其他恶性肿瘤中不同.检测p16INK4a蛋白表达有助于CC的早期诊断.     

P16INK4A与MIB-1在宫颈癌及宫颈癌前病变中的表达

目的：探讨P16INK4A与MIB-1在宫颈癌及宫颈癌前病变中的表达情况。方法：采用免疫组织化学方法检测P16INK4A与MIB-1在63例宫颈组织及38例宫颈涂片中的表达。结果：P16在正常宫颈上皮中均无表达。随着宫颈病变级别的增高,其阳性表达率逐渐增大,其中,宫颈癌中P16的表达增强明显。MIB-1随着宫颈病变级别的增高,表达增强,其中,宫颈癌中MIB-1的表达增强明显。在宫颈病变组织中,随着P16阳性表达率的增大,MIB-1表达也相应增高,具有相关性。结论：宫颈上皮内病变中P16及MIB-1过表达,提示两者可以作为宫颈病变的诊断标志物。在宫颈病变及宫颈癌的确切诊断中,P16及MIB-1可以作为诊断依据之-。     

喉癌组织中HPV16及其早期区基因E6、E7蛋白的表达及意义

目的:观察喉癌组织中HPV16及其早期区基因E6、E7蛋白的表达,并初步分析其与喉癌组织临床分期、病理分级的相关性.方法:147例喉组织标本,其中喉鳞状细胞癌组织82例,非癌组织39例(声带息肉27例,距肿瘤＞1.0 cm的癌周正常组织12例),癌前病变(声带白斑)26例.免疫组织化学检测各组标本中HPV16及其早期区基因E6、E7蛋白的表达.分析喉鳞癌组织中3种蛋白表达情况与临床分期、病理分级的相关性.结果:喉鳞癌组织中HPV16蛋白及E6、E7蛋白的阳性率明显高于癌前病变组织(P＜0.05或0.01),后者高于非癌组织 (P＜0.05或0.01).非癌组织中HPV16蛋白阳性率明显高于E6、E7蛋白的表达(P＜0.05或0.01),而喉癌组织及癌前组织中三者间无显著差异.不同临床分期(Ⅰ～Ⅳ期)及不同病理分级(Ⅰ～Ⅲ级)喉癌组织中HPV16的阳性率间有显著差异(P＜0.05);而不同临床分期及病理分级间HPV16 E6、E7蛋白表达率无显著差异.结论:HPV16感染后其早期区基因E6、E7的表达可能是诱发喉癌的因素之一,应用免疫学方法抑制E7蛋白的表达对于喉癌的治疗有积极的意义,但其预防和治疗作用不应过分夸大.     

P16INK4A基因对宫颈癌和癌前病变的诊断价值

目的探讨宫颈癌及癌前病变(CIN)组织中P16INK4A基因表达的临床意义及P16INK4A基因检测对宫颈癌及CIN的诊断价值。方法选取2004—2006年经病理检查证实的宫颈浸润癌患者18例、CIN患者150例和慢性宫颈炎患者57例,采用EnVision免疫组化法检测组织标本中P16INK4A阳性表达情况,并进行比较分析。结果CIN组和浸润癌组患者的P16INK4A阳性表达率与慢性宫颈炎组间差异均有统计学意义(P<0·01);随宫颈病变程度加重,P16INK4A的表达强度和阳性表达率不断升高(P<0·01)。结论P16INK4A基因表达与宫颈癌及CIN病变程度及其进展有关;P16INK4A基因可作为宫颈癌和CIN早期诊断、判断病情、预测病情进展和预后的生物学指标。     

宫颈癌中p16^INK4A蛋白表达的意义

目的探讨p16INK4A蛋白与宫颈癌发生发展以及临床病理指标的关系。方法采用免疫组化法检测宫颈鳞癌组织40例,宫颈上皮内瘤变（CIN）30例,宫颈癌旁正常宫颈组织25例中的p16INK4A表达。结果 p16INK4A在宫颈上皮内瘤变中阳性率为86.6%,宫颈鳞癌组织中阳性率均呈100%表达,正常宫颈组织中为阴性。结论 p16基因在宫颈癌组织中缺失和突变导致其表达降低,使p16抑癌功能丧失,造成宫颈上皮细胞异常增殖和分化失控,导致p16INK4A在子宫颈癌上皮组织全层表达。所以,p16INK4A作为一种免疫组织化学标志物应用于宫颈癌及其上皮内瘤变（CIN）的诊断有广阔的应用前景。     

p16^INK4a在宫颈病变中的研究进展

宫颈癌严重威胁女性健康和安全,是导致女性死亡的主要恶性肿瘤之一。近年来我国宫颈癌的发病率正以每年2%～3%的速度增长,因此早期诊断对于预防和治疗宫颈癌具有决定性的意义。p16INK4 a是近年来发现的肿瘤抑制基因,是一种细胞周期蛋白D依赖性激酶的抑制剂,研究表明p16INK4 a的表达与宫颈癌的发生发展密切相关。目前宫颈癌筛查中的细胞学检查及hr-HPV检测方法都具有一定的局限性,寻求新的筛查方法已成为研究热点。p16INK4 a的检测技术易于普及、操作简便,不仅能提高宫颈癌的早期诊断率、预测宫颈癌的发生发展,且较HC-Ⅱ检测更能区分是否存在病变,从而降低传统宫颈癌筛查的假阳性率及假阴性率,提高筛查的灵敏度和特异度,为宫颈癌的筛查开辟了新途径,值得进一步深入研究。     

肿瘤转移抑制基因KAI1在宫颈癌的表达及其与HPV感染的关系

目的探讨肿瘤转移抑制基因KAI1在宫颈癌中的蛋白表达以及人乳头瘤病毒(HPV)16E6、E7和HPV18E6/E7感染对其表达的影响。方法采用免疫组化SP法检测70例浸润性宫颈癌、15例原位癌、20例正常宫颈组织中KAI1蛋白的表达,采用PCR扩增-琼脂糖凝胶电泳法检测浸润性宫颈癌组织中HPV16E6、E7和HPV18E6/E7的DNA状况。结果宫颈浸润癌及原位癌组织中的KAI1蛋白表达与正常宫颈上皮中的表达相比明显下调(P<0.05),原位癌与浸润癌中的表达差异无统计学意义;HPV16E6、E7和HPV18E6/E7在浸润性宫颈癌中的阳性率分别为67.1%、54.3%和12.9%,HPV16E6、E7和HPV18E6/E7感染与宫颈癌中的KAI1蛋白表达无相关性。结论肿瘤转移抑制基因KAI1在宫颈癌中呈下调表达,HPV16E6、E7和HPV18E6/E7感染不影响其表达。     

P16INK4A在宫颈鳞癌中的表达研究

目的:检测P16^INK4A在宫颈病变（包括宫颈上皮内瘤变Ⅰ,宫颈上皮内瘤变Ⅱ,宫颈上皮内瘤变Ⅲ,宫颈上皮鳞状细胞癌）中的表达,探讨P16^INK4A在宫颈癌的发生发展中所起的作用。方法:采用免疫组化SP法检测32例宫颈鳞状上皮细胞癌、20例CINⅠ,18例CINⅡ,16例CINⅢ和20例因子宫肌瘤手术切除的正常宫颈组织作为对照组的P16^INK4A蛋白的表达。结果:①20例正常宫颈组织无P16^INK4A蛋白表达;②宫颈鳞癌组织中P16^INK4A阳性表达率（96.88%）,明显高于宫颈上皮内瘤变组织（43.18%）,P<0.05。CINⅠ中15例阴性（-）,4例弱阳性（+）,1例中度阳性（++）,阳性表达率为25%;CINIⅠ中8例阴性（-）,3例弱阳性（+）,6例中度阳性（++）,1例强阳性（+++）,阳性表达率为55.56%;CINⅢ中2例阴性（-）,3例弱阳性（+）,5例中度阳性（++）,6例强阳性（+++）,阳性表达率为87.5%;宫颈鳞状细胞癌中1例阴性（-）,6例弱阳性（+）,8例中度阳性（++）,17例强阳性（+++）,阳性表达率为96.88%。P16^INK4A在正常宫颈、CIN和宫颈癌组织中阳性表达率及表达强度逐渐增高,差异有统计学意义。CINⅢ和宫颈癌组织中P16^INK4A阳性表达率及表达强度差异无统计学意义。结论:P16^INK4A与宫颈鳞癌的发生发展密切相关。     

湖北地区宫颈癌组织HPV16 E7和E5转化基因变异分析

目的:分析湖北地区宫颈癌组织HPV16E7和E5基因序列变异情况。方法:对87例宫颈鳞癌组织分别采用多重HPV16E7引物进行巢式PCR扩增和HPV16E5特异引物进行PCR扩增,并选择阳性扩增的基因片段DNA进行纯化、测序,检测基因变异。结果:测序成功的20例宫颈癌组织DNA中,HPV16E7基因的5个突变位点为:T846C、A647G、T732C、T789C、T795G,突变频率分别为85%(17/20)、70%(14/20)、15%(3/20),10%(2/20)、5%(1/20);HPV16E5基因的4个突变位点包括:A3979C、A4042G、G3868A、C3991T,突变频率分别为:80%(16/20)、90%(18/20)、5%(1/20)、5%(1/20)。结论:湖北地区宫颈癌的宫颈组织中HPV16E7热点突变为A647G和T846C,HPV16E5的热点突变为A3979C和A4042G,本研究为湖北地区宫颈癌流行病学的研究打下基础。     

HPV16 E7蛋白编码基因原核表达与鉴定

目的研究HPV16E7蛋白的生物学特性及其细胞转化机制,对HPV16E7蛋白原核表达质粒进行构建、表达和鉴定。方法以临床确诊的HPV16感染患者子宫颈细胞DNA为模板,采用PCR方法扩增HPV16E7基因,经BamH Ⅰ和Hind Ⅱ双酶切后插入相同酶切pET32a（＋）载体,转化JM109感受态细胞,并进行阳性克隆筛选。经IPTG对重组质粒进行蛋白诱导表达,SDS—PAGE和Western blot检测目标蛋白表达情况。结果成功构建了原核表达质粒pET32／E7,HPV16E7-TRX融合蛋白在BL21（DE3）菌株中高效表达,在1mmol／L IPTG、30℃诱导条件下融合蛋白表达量占菌体总蛋白的30％左右。结论pET32／E7原核表达质粒的构建、HPV16E7融合蛋白的表达为进一步深入研究HPV16E7蛋白的生物学特性及其致细胞转化的作用机制奠定了基础。     

P16INK4a、Ki-67在宫颈上皮病变组织中的表达规律及其与HPV负荷量的相关性研究

目的 探讨P16INK4a、Ki-67、高危型人乳头瘤病毒(hr-HPV)对宫颈病变的诊断价值.方法 采用免疫组织化学染色法检测P16INK4a、Ki-67在120例宫颈上皮病变组织中的表达情况;采用第二代杂交捕获法检测病例的13种hr-HPV DNA负荷量.分析P16INK4a、Ki-67、hr-HPV的临床诊断价值...