经冠脉自体骨髓干细胞移植改善左室重构机制的研究

目的研究自体骨髓单个核细胞(BM-MNC)和间充质干细胞(MSCs)移植对急性心肌梗死(AMI)后心室重构的影响,探讨不同干细胞移植对心室重构影响的机理。方法以小型猪为研究对象,通过球囊导管压迫冠状动脉前降支的方法,建立小型猪AMI动物模型。在AMI 90 min时,经冠状动脉腔内进行自体BM-MNC和MSCs移植。于术前及干细胞移植后28 d,观察心功能、心肌微血管计数、心肌核因子_KB、心肌细胞凋亡、心肌血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的mRNA表达。与心功能进行相关性分析。结果(1)术后28 d,BM-MNC组、MSCs组EDD均明显低于AMI模型组(P=0.005),EF明显高于模型组(P=0.0001;P=0.0017)。(2)BM-MNC移植组血管数比梗死组及MSCs组增加(梗死区P=0.000 1,边缘区P=0.000 1)。(3)BM-MNC组及MSCs组心肌细胞凋亡率比梗死模型组减少(梗死区P=0.000 1,梗死边缘区P= 0.000 1,正常区P=0.005 2)。(4)BM-MNC组及MSCs组NF-_KB阳性率比单纯AMI模型组显著降低(P=0.001)。(5)梗死模型组、BM-MNC组以及MSCs组的梗死区及梗死边缘区的VEGF基因表达量与正常对照组的相比增加(梗死区P=0.0001;梗死边缘区P=0.000 1)。BM-MNC及MSCs移植组,心肌梗死区的bFGF基因表达量比梗死模型组及正常对照组均显著增加(P=0.000 1)。LVEF与心肌细胞凋亡呈负相关(r=-0.441 1,P= 0.027 3),与心肌NF-_KB负相关(r=-0.579 6,P=0.000 6);与梗死区、边缘区血管数正相关(r=0.775 0,P=0.000 3);与VEGF表达正相关(r= 0.565 1,P=0.018 1);与bFGF表达正相关(r=0.573 5,P=0.016 1)。结论经冠脉自体BM-MNC及MSCs移植均可减轻心肌梗死后左心室重构,改善急性心肌梗死后心功能,增加心肌血管数量,增加梗死区及梗死边缘区VEGF及bFGF表达,减少心肌细胞凋亡。心功能的改善与干细胞移植后增加心肌血管数量、增加心肌VEGF及bFGF表达、减少心肌细胞凋亡以及减少心肌组织NF-_KB水平有关。     

粒细胞集落刺激因子动员大鼠骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的实验研究

目的 运用粒细胞集落刺激因子诱导骨髓间充质干细胞（MSC）移植归巢到急性心梗区域，研究不同环境下MSC在心肌内的分化状态及程度。方法 选用SD雄性大鼠，体重200～250g，随机分为4组：急性心肌梗死（AMI）干绷胞移植＋粒细胞集落刺激因子（G—CSF）动员组（20只）、AMI干细胞移植组（20只）以及单纯G-CSF组（20只）以及单纯对照组（10只）。于治疗4w后取材，检测心肌梗死区及其周围的血管密度值。免疫组化染色检测抗体增殖细胞核抗原（PCNA）、肌浆蛋白（myogenin）、肌球蛋白（myosin）、缝管连接蛋白43（Cx43）及结蛋白（desinmim）在移植骨髓间充质干细胞中的表达。并用共聚焦免疫荧光双标染色方法标测PCNA、myogenin。结果 胶体金标记的MSC经G-CSF诱导移植到心脏内在梗死部位与心肌生长为一体，颜色为黑色，存HE切片中移植细胞的胞浆呈现紫红色，极易识别。血管密度检测结果显示G-CSF＋MSC移植组心肌梗死区血管密度明显高于其他各组。免疫组化染色检测抗体PCNA、myogenin、myosin、Cx43及desinmim在G-CSF＋MSC移植组心肌梗死区中的表达明显。其他各组未见明显表达。结论 G-CSF能够明显动员MSC归巢，促进梗死区血管新生，在梗死区分化成新的心肌。     

骨髓单核细胞移植对大鼠急性心肌梗死后非梗死区域心肌细胞凋亡的影响

目的探讨大鼠急性心肌梗死(AMI)后骨髓单核细胞(BMMNCs)移植对心功能和非梗死区域心肌细胞凋亡的影响以及二者之间的可能关系。方法利用密度梯度离心法获取BMMNCs,并用4′,6-二脒-2-苯基吲哚(4′,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)标记,结扎大鼠前降支,建立AMI动物模型,分别于AMI后1 h(n=10)及1 w(n=10)梗死中央及周边局部注射BMMNCs(2×107个,0.2 ml),对照组(n=10)AMI后1 h局部注射等量生理盐水,AMI后8 w心脏超声检测三组大鼠心脏功能,然后取材,进行非梗死区域心肌细胞凋亡TUNEL分析。结果AMI 1 w移植组左室收缩功能明显高于其他两组,其非梗死区域心肌细胞凋亡则明显低于其他两组。结论大鼠AMI 1 w后BMMNCs移植可以增加改善心梗后心功能,减少非梗死区域心肌细胞凋亡。     

骨髓动员与骨髓细胞移植对急性心肌梗死猪再灌注后心肌修复及血管再生作用的比较研究

目的比较骨髓间充质干细胞移植和骨髓动员对急性心肌梗死再通模型中心功能改善作用,并比较两者的心肌及血管再生作用.方法将模型分为3组,对照组(7头),骨髓动员组(5头),细胞移植组(8头).心梗再通模型制作后,骨髓动员组予G-CSF静脉注射1天,皮下注射连续6天,细胞移植组予骨髓间充质干细胞4～8×106经梗死相关冠脉注入.3周后观察以下指标1超声心动图检测心功能及局部室壁运动.2免疫组织化学染色,行不同区域血管计数,并观察增殖期内皮细胞数和新生心肌细胞数.结果(1)骨髓动员组和细胞移植组心功能及局部室壁运动均见明显改善.(2)细胞移植组在心梗周围区可见分散分布的BrdU标记移植细胞,骨髓动员组中未观察到处于增殖期的心肌细胞;细胞移植组和骨髓动员组均可见大量新生血管,但二者分布区域不同.结论骨髓动员及骨髓间充质干细胞移植均可明显改善心肌梗死后心功能,而骨髓间充质干细胞可通过补充可收缩细胞而使心功能改善更加明显,二者对不同区域的血管再生作用不同.     

VEGF基因转染同种异体骨髓间充质干细胞治疗心肌梗死的实验研究

目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）基因转染同种异体骨髓间充质干细胞（MSCs）对猪急性心肌梗死（AMI）血管再生和心功能的影响。方法体外分离、纯化、培养猪骨髓MSCs，以PCNA染色标记细胞；制备、抽提、纯化质粒pd—VEGF。用球囊堵闭及拉伤冠状动脉法建立AMI模型1W后，随机将其分为4组（n=4），进行经冠状动脉途径移植MSCs和／或Ⅵ犯F转染。组Ⅰ：给予转染VEGF腺病毒的MSCs移植；组Ⅱ：单纯MSCs移植；组Ⅲ：VEGF转染；组Ⅳ：DMEM对照组。4W后行免疫组化和超声心动图检查。结果组Ⅰ及组Ⅱ在梗死区及缺血区均可见较大量的PCNA标记的移植细胞。Ⅶ因子染色阳性的新生血管密度：组Ⅰ〉组Ⅲ〉组Ⅱ〉组Ⅳ。4W后LVEF值：组Ⅰ〉组Ⅱ〉组Ⅲ〉组Ⅳ（均P〈0．01）。结论VEGF基因转染同种异体骨髓MSCs移植猪心肌梗死区及缺血区促进血管再生及心肌细胞的再生，改善心功能。     

骨髓单个核细胞移植治疗急性心肌梗死的实验研究

目的 探讨大鼠急性心肌梗死(AMI)后骨髓单核细胞(BMMNCs)移植对心功能的影响及其可能机制.方法 利用密度梯度离心法获取BMMNCs,并用4',6-二脒-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)标记,结扎大鼠前降支,建立AMI动物模型,分别于AMI后1 h(n=10)及1 w(n=10)梗死中央及周边局部注射BMMNCs(2×107个,0.2 ml),对照组(n=10)AMI后1 h局部注射等量生理盐水,AMI后8 w心脏超声检测3组大鼠心脏功能,然后取材,进行荧光检查及组织学检查.结果 AMI 1 w移植组左室收缩功能明显高于其他两组,荧光检查结果显示所有切片中均未发现DAPI标记的细胞;HE染色血管计数结果显示AMI 1 w移植组梗死局部毛细血管密度明显高于其他两组,其非缺血区域心肌细胞调亡则明显低于其他两组.结论 大鼠AMI 1 w后BMMNCs移植可以增加梗死局部血管新生,改善心梗后心功能,减少非缺血区域心肌细胞凋亡,其心功能改善及血管新生与BMMNCs的横向转化无关.     

转染人血管内皮生长因子165基因的骨髓间充质干细胞移植改善兔心肌梗死后心功能

目的探讨将骨髓间充质干细胞移植和血管内皮生长因子基因治疗相结合治疗兔心肌梗死的疗效及其机制。方法将48只新西兰大白兔随机分为心肌梗死组、骨髓间充质干细胞移植组、血管内皮生长因子组和骨髓间充质干细胞 血管内皮生长因子组。建立兔心肌梗死模型,在心肌梗死后2周取107个骨髓间充质干细胞移植至梗死区。移植后4周测定心功能,梗死区骨髓间充质干细胞进行鉴定及计数,进行Ⅷ因子免疫组织化学染色。结果血流动力学比较发现,骨髓间充质干细胞 血管内皮生长因子组各项参数明显优于骨髓间充质干细胞组;心肌梗死区BrdU阳性细胞数骨髓间充质干细胞 血管内皮生长因子组明显多于骨髓间充质干细胞组(61.24±8.51个/视野比44.21±7.68个/视野,P<0.01);梗死区血管的数量骨髓间充质干细胞 血管内皮生长因子组(48.75±7.96个/视野)明显多于骨髓间充质干细胞组(33.08±6.12个/视野,P<0.01)、血管内皮生长因子组(29.98±8.04个/视野,P<0.01)和心肌梗死组(18.32±3.88个/视野,P<0.01)。结论转染血管内皮生长因子基因的骨髓间充质干细胞移植可改善兔心肌梗死后的心功能,其疗效明显优于单纯骨髓间充质干细胞移植及血管内皮生长因子基因治疗,可能是通过增加骨髓间充质干细胞的存活及改善梗死区的血供而起作用的。     

VEGF基因转染同种异体骨髓间充质干细胞对心肌梗死的治疗作用

目的研究血管内皮生长因子（VEGF）基因转染同种异体骨髓间充质干细胞（MSCs）对猪急性心肌梗死（AMI）的治疗作用。方法体外分离、纯化、培养猪骨髓MSCs,以PCNA染色标记细胞;制备、抽提、纯化质粒pd-VEGF。用球囊堵闭及拉伤冠状动脉法建立AMI模型1周后,随机将其分为4组,每组4只,进行经冠状动脉途径移植MSCs和/或VEGF转染。Ⅰ组给予转染VEGF腺病毒的MSCs移植;Ⅱ组单纯MSCs移植;Ⅲ组VEGF基因质粒;Ⅳ组DMEM对照组。4周后行免疫组化和超声心动图检查。结果Ⅰ组及Ⅱ组在梗死区及缺血区均可见较大量的PCNA标记的移植细胞。Ⅷ因子染色阳性的新生血管密度：Ⅰ组〉Ⅲ组〉Ⅱ组〉Ⅳ组。4周后LVEF值：Ⅰ组〉Ⅱ组〉Ⅲ组〉Ⅳ组（P〈0.05或P〈0.01）。结论VEGF基因转染同种异体骨髓MSCs移植猪心肌梗死区及缺血区可以提高缺血心肌的心功能,这可能和骨髓MSCs促进血管和心肌细胞的再生有关。     

骨髓动员与细胞移植对直接经皮腔内冠状动脉成形术后急性心肌梗死治疗作用

目的比较骨髓间充质干细胞移植和骨髓动员对急性心肌梗死再通模型的心脏修复作用.方法人重组粒细胞集落刺激因子静注1d,皮下注射连续5d行骨髓动员,骨髓间充质干细胞(4～8)×106经梗死相关冠状动脉注入行细胞移植.3周后观察超声心动图指标;免疫组织化学染色行不同区域血管计数,并观察增殖期内皮细胞和心肌细胞或再生心肌细胞.结果骨髓动员组和细胞移植组心功能明显改善;二组均可见心肌细胞再生;细胞移植组和骨髓动员组均可见大量新生血管,但二者分布区域不同.结论骨髓动员及骨髓间充质干细胞移植均可明显改善心肌梗死后心功能,二者可促进心肌细胞再生且对不同区域的血管再生作用不同.     

粒细胞集落刺激因子动员自体骨髓干细胞移植对心梗大鼠慢性心力衰竭的治疗作用

目的探讨粒细胞集落刺激因子动员自体骨髓干细胞移植对心梗大鼠慢性心力衰竭的治疗作用。方法建立Wistar大鼠心肌梗死后心衰模型,随机分为移植组、动员组和对照组各10只。移植组于梗死区内注射经标记后的骨髓间充质干细胞,动员组皮下注射粒细胞集落刺激因子,对照组未行任何处理。4周后采用超声和生理记录仪描记左室收缩压（LVSP）、左室舒张压（LVEDP）、左室压力最大上升或下降速率（±LVdp／dtmax）等指标。取心脏组织做病理检查,观察移植细胞分化、促血管生成、细胞凋亡情况。结果细胞移植4周后,移植组及动员组心脏功能较对照组显著改善（P均〈0．05）,梗死区血管密度明显高于对照组,心肌细胞凋亡指数低于对照组（P均〈0．05）。结论骨髓干细胞动员可能为慢性心力衰竭的治疗提供一种新的无创性手段。     

脂多糖预处理增强髓间充质干细胞移植在心肌梗死大鼠模型中的疗效

目的研究脂多糖预处理骨髓间充质干细胞(MSC)后治疗急性心肌梗死(AMI)大鼠的机制。方法将大鼠MSC分为对照1组、脂多糖预处理为预处理1组、Toll样受体4封闭为封闭1组,定量分析多配体蛋白聚糖-4(syndecan-4)mRNA和蛋白表达。45只大鼠建立AMI后分别植入上述各组细胞,依次为对照2组、预处理2组和封闭2组,10周后测大鼠心功能指标;另30只AMI大鼠中,将MSC转染syndecan-4过表达质粒为过表达2组,沉默MSC syndecan-4基因为联合组,每组15只。MTT法测细胞增殖,光镜下观察大鼠新生血管密度,心肌梗死面积,计算死亡率。结果与对照1组和封闭1组比较,预处理1组MSC中syndecan-4基因和蛋白表达显著上升(P=0.000)。与对照2组和封闭2组比较,预处理2组大鼠各项心功能指标变化明显(P<0.01)。过表达2组MSC增殖率及大鼠新生血管密度较对照2组升高(P=0.009)。联合组较对照2组和预处理2组MSC增殖率、心肌梗死面积[(31.2±3.0)%vs(26.8±2.9)%和(19.7±2.5)%,P=0.013]和死亡率(20.0%vs 13.3%vs 20.0%,P=0.000)增高。结论脂多糖预处理能促进MSC中syndecan-4的表达,增强MSC移植在AMI中的治疗效果。     

miR-126及VEGF在大鼠心肌梗死交界区表达的动态变化

目的 观察大鼠心肌梗死(MI)后MI交界区微小RNA-126(miR-126)及血管内皮生长因子（VEGF）表达的动态表达变化,初步探讨miR-126及VEGF对缺血局部血管新生的影响。方法 雄性SD大鼠结扎冠状动脉左前降支建立急性心肌梗死模型组(AMI组),另设假手术对照组(Sham组),每组30只。于术后7 d、14 d和28 d分别处死10只大鼠,进行MI面积百分比测定,实时荧光定量PCR法检测心梗交界区miR-126、VEGF mRNA表达水平,免疫组织化学方法检测各组大鼠MI交界区VEGF蛋白的表达。结果 Sham组术后7 d、14 d和28 d心肌组织 miR-126 mRNA和VEGF mRNA的表达均无明显区别,AMI组术后7 d、14 d和28 d,MI交界区mir-126 mRNA表达与相应的Sham组相比,均有不同程度的下降(P<0.01),而VEGF mRNA的表达则均有不同程度的增高(P<0.01);在AMI组,随着MI时间的延长,miR-126和VEGF mRNA的表达均逐渐升高,且在AMI 14 d达到高峰（P<0.05）。VEGF 的蛋白表达情况与其基因表达基本一致。结论 大鼠MI后VEGF mRNA及其蛋白的表达明显升高的同时伴随miR-126基因表达的降低,随着缺血时间延长,miR-126 mRNA表达有所恢复。     

Paracrine effects of direct intramyocardial implantation of bone marrow derived cells to enhance neovascularization in chronic ischaemic myocardium

OBJECTIVE: To determine the optimal bone marrow (BM) cell types, and their potential mechanisms of action for neovascularization in chronic ischaemic myocardium. METHODS AND RESULTS: The functional effects, angiogenic potential and cytokine expression of direct intramyocardial implantation of autologous BM CD31-positive endothelial progenitor cells (EPC, n=9), BM mononuclear cells (MNCs, n=9), and saline (n=9) were compared in a swine model of chronic ischaemic myocardium. Autologous BM cells were harvested and catheter-based electromechanical mapping-guided direct intramyocardial injection was performed to target ischaemic myocardium. After 12 weeks, injection of BM-MNC resulted in significant improvements in left ventricular dP/dt (+21+/-8%, P=0.032), left ventricular pressure (+17+/-4%, P=0.048) and regional microsphere myocardial perfusion over ischaemic endocardium (+74+/-28%, P<0.05) and epicardium (+73+/-29%, P<0.05). No significant effects were observed following injection of BM-EPC or saline. Capillary density (1132+/-69 versus 903+/-44 per mm(2), P=0.047) and expression of mRNA of vascular endothelial growth factor (VEGF, 32.3+/-5.6 versus 13.1+/-3.7, P<0.05,) and angiopoietin-2 (23.9+/-3.6 versus 13.7+/-3.1, P<0.05) in ischaemic myocardium was significantly greater in the BM-MNC group than the saline group. The capillary density in ischaemic myocardium demonstrated a significant positive correlation with VEGF expression (r=0.61, P<0.001). CONCLUSION: Catheter-based direct intramyocardial injection of BM-MNC enhanced angiogenesis more effectively than BM-EPC or saline, possibly via a paracrine effect, with increased expression of VEGF that subsequently improved cardiac performance of ischaemic myocardium.     

养心通脉方含药血清预处理内皮祖细胞对急性心肌梗死兔心肌bFGF、VEGF水平的影响

目的观察养心通脉方含药血清预处理内皮祖细胞(EPCs)对急性心肌梗死(AMI)兔心肌血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)水平的影响。方法从35只雄性SPF级兔中随机选取25只建立急性心肌梗死兔模型,随机分为模型组、中药EPCs心肌注射组、中药EPCs耳缘静脉注射组、EPCs心肌注射组、EPCs耳缘静脉注射组,每组5只,另设正常组和假手术组,各5只,通过移植干预后14 d取梗死心肌区及缺血心肌区组织,荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测bFGF、VEGF的mRNA表达,蛋白质印迹法(Western Blot)检测bFGF、VEGF蛋白表达。结果在梗死心肌区及缺血心肌区,中药EPCs心肌注射组和中药EPCs耳缘静脉注射组bFGF、VEGF的mRNA及蛋白表达明显高于假手术组、模型组、EPCs心肌注射组、EPCs耳缘静脉注射组,差异均有统计学意义(P<0.05),但中药EPCs心肌注射组bFGF、VEGF的mRNA及蛋白表达与中药EPCs耳缘静脉注射组比较差异均无统计学意义(P>0.05),EPCs心肌注射组bFGF、VEGF的mRNA及蛋白表达与EPCs耳缘静脉注射组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论养心通脉方含药血清预处理EPCs,能够明显增加损伤心肌bFGF、VEGF表达,但耳缘静脉注射与心肌注射疗效相当。     

CGRP对大鼠急性心肌梗死后心脏干细胞募集及心功能的影响

目的 观察降钙素基因相关肽（calcitonin gene related peptide,CGRP）对心脏干细胞（cardiac stem cells,CSCs）募集及心功能的影响。方法 建立大鼠急性心肌梗死（AMI）模型，随机分为假手术组、CGRP注射组（CGRP组）和等体积磷酸盐缓冲液（PBS）注射组（对照组），每组30只。模型建立后于不同时间点获取标本，采用免疫荧光染色法观察CSCs募集情况，超声心动图评估大鼠心肌梗死后心功能，苏木素-伊红（H-E）染色、Masson染色评估心脏病理学改变，2，3，5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色测定心肌梗死面积。结果 免疫荧光染色显示，与假手术组相比，对照组和CGRP组CSC细胞数均在第3天增加，7 d达高峰,14 d明显减少，其中，CGRP组较对照组增加更明显（均P<0.05）。术后28 d大鼠超声心动图检测大鼠心功能提示CGRP组较对照组心功能各项指标明显改善（均P<0.05），形态学分析显示术后28 d CGRP组心肌纤维化程度及梗死面积明显小于对照组（P<0.05）。结论 CGRP可促进AMI后CSC在梗死区域募集，于第7天达高峰，并能改善大鼠心功能。     

冠状动脉内移植自体骨髓单个核细胞和内皮祖细胞对小型猪心肌缺血再灌注损伤的疗效比较

目的比较自体骨髓单个核细胞（BM—MNC）和内皮祖细胞（EPC）移植对小型猪心肌缺血再灌注损伤后修复梗死心肌和改善心功能的疗效。方法23头小型猪心肌缺血再灌注损伤模型分为BM—MNC组[（3．54±0．90）×10^8个细膨头,n=9]、EPC组[（1．16±1．07）×10^7个细胞／头,n=7]以及对照组（n=7）,比较细胞移植前以及移植4周时超声心动图、血液动力学和心肌梗死范围的变化。结果与移植前比较,移植4周时BM-MNC组、EPC组左室射血分数（LVEF）分别降低2％[（68±10）％比（66±7）％,P〉0．05]和0[（69±7）％比（69±8）％,P〉0．05],对照组则降低10％[（70±9）％比（59±7）％,P〈0．05],三组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。LVEF、左室收缩末压（LVESP）、心输出量（CO）和左室等容收缩压力最大上升速率（＋dp／dtmax）的变化值在BM—MNC组和EPC组间的差异无统计学意义（P〉0．05）,而显著小于对照组的变化值（P〈0．05）。舒张末压（LVEDP）和等容舒张压力最大下降速率（-dp／dtmax）在细胞移植前后各组变化不明显（P〉0．05）。EPC和BM—MNC移植的心肌梗死面积均小于对照组[心肌梗死面积百分比分别为[（4．1±0．6）％、（8．4±3．8）％和（11．4±3．2）％,均P〈0．05],EPC组较BM-MNC组有减小的趋势,但差异无统计学意义（P=0．067）。结论心肌缺血再灌注损伤后,自体BM—MNC和EPC移植均可明显改善左室收缩功能,这种作用可能通过减小心肌梗死面积实现。移植EPC与BM-MNC改善心功能的疗效相当,但还需进一步评价。     

同种异体移植骨髓间充质干细胞治疗大鼠心肌梗死

目的　探讨同种异体骨髓间充质干细胞 (MSCs)在梗死大鼠心脏局部存活、迁移、分化及对心功能的影响 ;明确同种异体细胞移植治疗心肌梗死 (MI)的可行性及效果。方法　雌性Wistar大鼠 3 5只 ,随机分为正常对照组、急性心肌梗死 (AMI)组及MI MSCs治疗组。分离纯化雄性Wistar大鼠骨髓MSCs ,于左冠状动脉前降支结扎后 1～ 3h植入到雌性大鼠心脏组织 ,移植后 10周检测心功能并取心脏检测各种相关指标。结果　异体大鼠MSCs经纯化后可在梗死心脏组织定居、生存 ,并与宿主心肌纤维排列方向一致 ,免疫组化检测胞质心肌特异蛋白染色阳性 ,与MI组比较 ,异体细胞移植组左室收缩压升高 (P <0 0 5) ,舒张末压明显降低 (P <0 0 1)、左心室内压最大上升和下降速率显著增快 (P <0 0 5) ,梗死边缘区心肌面毛细血管数目明显增加 (P <0 0 5) ,多功能真彩色病理图像分析系统显示MI面积缩小 (P <0 0 5)。结论　同种异体MSCs移植治疗MI可行、有效     

Bone marrow-derived myocyte-like cells and regulation of repair-related cytokines after bone marrow cell transplantation

OBJECTIVE: Whether bone marrow cells injected following acute myocardial infarction (MI) transdifferentiate into cardiomyocytes remains controversial, and how these cells affect repair-related cytokines is not known. METHODS: Autologous bone marrow-derived mononuclear cells (BM-MNCs) labeled with DiI, 1,1'-dioctadecyl-1 to 3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine perchlorate, or saline were intravenously injected into rabbits 5 h following a 30-min ischemia and reperfusion protocol, and cardiac function and the general pathology of the infarcted heart were followed up 1 and 3 months post-MI. To search for regenerated myocardium, electron microscopy as well as confocal microscopy were performed in the infarcted myocardium 7 days post-MI. Expression levels of repair-related cytokines were evaluated by immunohistochemistry and Western blotting. RESULTS: Improvements in cardiac function and reductions in infarct size were observed in the BM-MNC group 1 month and 3 months post-MI. Using electron microscopy 7 days after infarction, clusters of very immature (fetal) and relatively mature cardiomyocytes undergoing differentiation were identified in the infarcted anterior LV wall in the BM-MNC group, though their numbers were small. These cells contained many small and dense DiI particles (a BM-MNC marker), indicating that cardiomyocytes had regenerated from the injected BM-MNCs. The expression of both transforming growth factor-beta, which stimulates collagen synthesis and matrix metalloproteinase-1, a collagenase, were both down-regulated 7 days and 1 month post-MI in the BM-MNC group. Stromal cell-derived factor-1, which is known to recruit BM-MNCs into target tissues, was overexpressed in the infarcted areas of BM-MNC hearts 7 days post-MI. CONCLUSIONS: Intravenous transplantation of BM-MNCs leads to the development of BM-MNC-derived myocyte-like cells and regulates the expression of repair-related cytokines that facilitate repair following myocardial infarction.     

骨髓间质干细胞移植治疗急性心肌梗死的实验研究

目的 研究同种异体骨髓间质干细胞（bone marrow mesenchymak stem cells MSCs）移植至梗死心肌后对兔的一般情况、心功能、梗死面积和血管新生的影响.方法 开胸结扎冠状动脉左前降支建立急性心肌梗死动物模型,将5-溴脱氧尿核苷（bromodeoxyuridine,BrdU）标记的MSCs注入心肌梗死区.测定各组手术前后体重和心功能并取出心脏作相关检查.结果 与急性心肌梗死组比较,MSCs组术后一般情况好,6周时体重明显增加（P＜0.05）,术后3周、6周左心室射血分数（left ventricular ejection fraction,LVEF）均明显增加（P＜0.05）,梗死面积明显缩小（P＜0.05）,毛细血管数目显著增多（P＜0.01）.MSCs组心肌梗死区可见BrdU阳性细胞,电镜下可见不成熟的心肌样细胞.结论 同种异体MSCs移植治疗急性心肌梗死除提高心功能外,尚可改善兔子的一般情况,增加体重.