检测结核抗体IgM在结核病早期诊断中的应用

[目的]基于多表位结核分枝杆菌嵌合抗原,建立抗结核抗体IgM检测试剂,并探讨在结核病早期诊断中意义。[方法]克隆表达多表位结核分枝杆菌嵌合抗原包被酶联板,抗人IgM单抗标记HRP,建立间接免疫酶联法检测结核抗体IgM,结核抗体IgG同时检测51例结核病人血清样品,两者检测结果进行比较。[结果]51例结核病人血清抗IgG、IgM抗体分别检测率为70．58％（36／51）,43．13％（22／51）,其中10例结核抗体IgG阴性,IgM抗体为阳性。46例健康人血清样品IgM抗体检测2例阳性,特异性95．7％（2／46）。[结论]结核抗体IgM检测在结核病早期诊断中具有一定意义,可作为结核抗体IgG的补充实验,抗IgG、IgM抗体同时检测可提高检测的灵敏度。     

两种结核分枝杆菌抗原在结核病血清学诊断中应用价值的比较

目的研究结核分枝杆菌脂多糖抗原(LAM)和结核分枝杆菌重组38KD蛋白抗原(r38KD)在结核病血清学检测中的效果,探索更有价值的结核血清学诊断方法。方法应用酶联免疫吸附试验对100例结核病患者血清、100例健康人血清中的抗结核抗体进行检测,并对检测结果进行统计分析。结果结核组中抗LAM抗体和抗38KD抗体均显著高于非结核对照组(P0.05),且两种抗原对结核病检测具有互补性。结论将LAM和38KD两种不同的结核分枝抗原进行组合可提高检测的特异度,有利于结核病的血清学诊断。     

基于结核分枝杆菌分泌抗原的新型结核诊断试剂研究

目的 基于克隆表达多个结核分枝杆菌分泌抗原,研制新型结核酶联抗体诊断试剂,并与国家批准上市的同类试剂进行比较.方法 克隆表达结核分枝杆菌分泌抗原38kD,CFP10,ESAT6,并将其串联实现嵌合抗原表达,研制间接酶联免疫结核抗体诊断试剂,并与市售同类产品同时检测临床结核病患者结核菌阳性或阴性血清样品.结果 47例结核病样品中菌阳35例,菌阴12例,研制的试剂菌阳检出率91.4%(32/35)、菌阴66.7%(8/12) ,而市场同类产品菌阳检出率88.6%(31/35)、菌阴58.3%(7/12).研制的试剂与市场同类产品对45例献血员检测特异度分别为95.6%,91.1%.结论 结核分枝杆菌嵌合分泌抗原研制的结核酶联抗体诊断试剂具有较好的敏感度和特异度,可用于临床结核病的辅助诊断.     

结核分枝杆菌重组蛋白抗原Rv2041c、Rv1419、Rv2991和Rv3428c在结核病血清学诊断中的价值

目的分析结核分枝杆菌重组蛋白抗原Rv2041c、Rv1419、Rv2991和Rv3428c用于辅助结核病血清学诊断的价值。方法选择我院2016年12月至2018年12月河南省胸科医院结核科与呼吸科接诊的234例活动性肺结核患者作为结核组;选择同期我院接诊的非结核病其他肺部疾病者128例作为其他肺部疾病组;选择同期河南省中医学院一附院接受常规体检的110例健康人群作为健康组。检测各组纳入者结核分枝杆菌重组蛋白抗原Rv2041c、Rv1419、Rv2991及Rv3428c水平表达,比较痰菌培养阴阳性结核病患者各结核分枝杆菌重组蛋白抗原水平表达。对各抗原水平表达检测用于结核病血清学诊断的价值行受试者工作曲线(ROC)分析检验。结果结核组患者各血清结核分枝杆菌蛋白抗原水平表达最高,后由高至低依次为其他肺部疾病组、健康组,结核组与其他两组比较差异有统计学意义(P0.05),其他肺部疾病组与健康组比较,差异无统计学意义(P0.05);全部234例结核组患者中,检出痰菌阳性者168例,占比为71.79%;痰菌阴性组与痰菌阳性组各结核分枝杆菌重组蛋白抗原水平表达比较差异均无统计学意义(P0.05)。经受试者工作曲线检验结果显示,结核分枝杆菌重组蛋白抗原Rv2041c、Rv1419、Rv2991、Rv3428c用于结核病血清学诊断曲线下面积分别为:0.821、0.802、0.824、0.852,各抗原用于结核病血清学诊断的特异度分别为86.97%、84.87%、86.97%、87.82%。结论结核分枝杆菌重组蛋白抗原Rv2041c、Rv1419、Rv2991、Rv3428c辅助结核病的血清学诊断均有着较高的特异度,临床实际中,可将各抗原联合检测以提高抗结核抗体检测敏感度,提高结核病的检出率。     

评价血清中结核杆菌特异性蛋白抗体对诊断肺结核的应用价值

目的 评价结核分枝杆菌特异性蛋白抗体检测对肺结核诊断的应用价值.方法 对370例活动性肺结核患者、42例非结核性肺部疾病患者和30例健康献血员进行血清结核分枝杆菌特异性蛋白抗体检测,同时对全部肺结核和非结核性肺部疾病患者进行痰抗酸杆菌涂片和培养.结果 370例临床诊断的活动性肺结核患者,结核分枝杆菌特异性蛋白抗体检测阳性284例,阳性率76.8％;42例菲结核性肺部疾病患者,假阳性4例,假阳性率9.5％;30例健康献血员对照组,假阳性1例,假阳性率3.3％.检测菌阳肺结核的敏感性为81.4％,,菌阴肺结核的敏感性为72.9％;阳性检出率76.8％远高于细菌学的阳性检出率45.1％,x2=77.72,P＜0.05,具有统计学意义.结论 结核分枝杆菌特异性蛋白抗体检测对肺结核的诊断具有较好的敏感性和特异性.     

结核特异性细胞免疫反应试验在结核病中的诊断价值

目的通过对结核特异性细胞免疫反应(TB-IGRA)试验结果进行分析,探讨TB-IGRA在结核病诊断及鉴别诊断中的意义。方法收集甘肃省人民医院2014年1~12月住院的肺结核、疑似肺结核及肺外结核患者共1 366例,采用TB-IGRA检测结核分枝杆菌相关γ-干扰素,进行敏感度和特异性指标分析,与涂片镜检、结核抗体检测及结核分枝杆菌核酸检测方法进行比较。结果 TB-IGRA在肺结核及肺外结核病中的阳性检出率高达85.40%及86.20%,同时与涂片镜检、结核抗体检测及结核分枝杆菌核酸检测比较,其阳性率分别为82.90%、36.60%、11.00%和31.70%。TB-IGRA检测阳性率显著高于另3种方法。结论 TB-IGRA是检测结核分枝杆菌的快速敏感指标,且优于传统方法,在临床结核病诊断中有重要价值。     

Rv0222/ESAT-6融合蛋白对结核病的诊断价值

目的:探讨Rv0222/ESAT-6融合蛋白对结核病的血清学诊断价值。方法:表达、纯化重组Rv0222/ESAT-6融合蛋白,以其为抗原包板、以酶标抗体为二抗、采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结核患者、人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染合并结核患者、非结核患者以及正常人血清,评价该融合蛋白对结核病的诊断价值。结果:以结核分枝杆菌感染T淋巴细胞斑点试验(T-SPOT,简称T-SPOT)为金标准,将Rv0222/ESAT-6融合蛋白作为抗原的ELISA诊断结核病的敏感性为86%,特异性为100%;T-SPOT与ELISA对结核病的阳性检出率差异无统计学意义。结论:以Rv0222/ESAT-6融合蛋白作为抗原的ELISA对结核病(包括HIV合并结核病)的血清学诊断有一定价值。     

三种检测方法在肺外结核病诊断中价值的探讨

目的探讨结核分枝杆菌DNA检测、血清结核抗体检测及结核菌素试验3种方法在肺外结核诊断中的价值。方法采用病例对照研究方法,将所观察对象分为两组,非结核病组121例及肺外结核病组132例,各组诊断采用双盲法,且有可比性。对非结核病组的血标本或痰标本及肺外结核组血标本或/和结核性胸膜炎的胸水标本、结核性腹膜炎的腹水标本、结核性脑膜炎的脑脊液标本和泌尿系结核的尿液标本、部分颈淋巴结结核干酪坏死分泌物标本进行PCR扩增及ABI-7 300仪器荧光检测结核分枝杆菌DNA定量。应用统计学分析敏感性、特异性。对所选病例均同时做血清抗结核抗体检测及结核菌素试验。结果结核杆菌DNA检测肺外结核病的敏感性34.85%、特异性85.12%;血清抗结核抗体敏感性62.88%、特异性52.07%;结核菌素试验敏感性65.15%、特异性65.15%。结论结核分枝杆菌DNA分子生物学检测技术快速准确、特异性高、假阴性低、需时短,缩短了肺外结核诊断的检测时间,为早期诊断、早期治疗提供有效支持。血清结核抗体检测及结核菌素试验的敏感性和特异性均较高,阳性结果提示感染结核分枝杆菌。3种方法是诊断肺外结核病必要的辅助方法。     

两种常见非结核分枝杆菌与结核分枝杆菌基因同源抗原、B细胞抗原表位和抗体交叉反应研究

目的 探讨我国常见两种非结核分枝杆菌与结核分枝杆菌蛋白抗原的交叉免疫反应状况，为以非结核分枝杆菌研制新型结核疫苗提供参考依据。方法 平均核酸一致性计算器计算胞内分枝杆菌、脓肿分枝杆菌和结核分枝杆菌的基因组同源性，OrthorFinder软件分析3种菌的同源基因，与结核分枝杆菌B细胞抗原表位编码基因进行比对。分别制备3种菌的灭活菌体抗原和全菌蛋白抗原，对新西兰大白兔进行皮下注射免疫。采用间接酶联免疫吸附试验技术，分别检测3种免疫兔血清抗体Ig G水平及交叉免疫的血清抗体Ig G水平。结果 脓肿分枝杆菌、胞内分枝杆菌与结核分枝杆菌同源基因分别为2 350个和2 740个，其同源基因中分别有479个和521个富含B细胞抗原表位。结核分枝杆菌、胞内分枝杆菌和脓肿分枝杆菌的蛋白抗原均能刺激兔产生较高水平的抗体滴度，分别达到1∶320 000、1∶160 000和1∶80 000。胞内分枝杆菌和脓肿分枝杆菌免疫兔血清均可与结核分枝杆菌抗原产生高水平的交叉反应，抗体滴度分别达到1∶40 000和1∶80 000。结论 胞内分枝杆菌、脓肿分枝杆菌与结核分枝杆菌之间均存在高水平的抗体交叉免疫反应，提示上...     

血清中结核分枝杆菌IgG/IgM抗体检测在肺结核诊断中的应用价值

目的分析血清中结核分枝杆菌IgG/IgM抗体对肺结核诊断的临床应用效果。方法选取我院2018年6月至2019年6月收治的120例肺结核患者,40例非肺结核患者以及30例正常血清标本。通过胶体金法对结核分枝杆菌IgG/IgM抗体进行检测。结果120例临床诊断活动性肺结核患者诊断检测出89例,检出率为74.17%。非结核性肺部疾病感染患者结核分枝杆菌IgG/IgM抗体检测阴性为36例。健康血清标本阴性为28例,检出率为93.33%。结论结核分枝杆菌IgG/IgM抗体检测对肺结核检测诊断有非常重要的临床参考价值,敏感性和特异性比较高,值得大力推广。     

T—SPOT．TB试验快速检测结核杆菌感染的临床应用研究

目的评价结核酶联免疫斑点试验（T—SPOT．TB）快速诊断结核病的临床应用价值。方法利用酶联免疫斑点试验检测对结核分枝杆菌特异抗原刺激反应,分泌γ—干扰素的效应T细胞数量方法,测定30名健康体检者．20例非结核呼吸道疾病患者和78例结核病患者外周血单个核细胞中结核分枝杆菌抗原特异的T细胞的频率。结果78例结核病患者中．75例结核病患者结核抗原特异酶联免疫斑点试验阳性,提示方法敏感性为96．1％,30例健康对照中,2例健康体检者阳性．其他健康体检者和20例非结核呼吸道疾病患者均为阴性,方法的特异性为95％。结论T—SPOT．TB是较灵敏和特异的快速检测结核分枝杆菌感染的方法．可用于结核病的快速诊断．     

寡核苷酸法检测结核病患者血清IgG抗体的临床应用评价

目的评价结核分枝杆菌IgG抗体寡核苷酸酶联免疫法在结核病血清学诊断中的临床应用价值。方法对285例结核病[菌阳肺结核（涂片阳性/培养阳性）124例,菌阴肺结核（涂片、培养均为阴性）161例]、38例非结核病的其他呼吸系统疾病患者及49名健康志愿者同步进行抗酸杆菌涂片、培养及结核分枝杆菌IgG抗体寡核苷酸酶联免疫法检测。结果结核分枝杆菌IgG抗体寡核苷酸酶联免疫法诊断菌阳肺结核的敏感性为67.7%（84/124）,诊断菌阴肺结核的敏感性为33.5%（54/161）,诊断结核病的总体敏感性为48.4%（138/285）,总体特异性为92.0%（80/87）,其中在非结核病的其他呼吸系统疾病患者中的特异性为86.8%（33/38）,在健康志愿者中的特异性为95.9%（47/49）。结论结核分枝杆菌IgG抗体寡核苷酸酶联免疫法有极高的特异性和一定的敏感性,可用于结核分枝杆菌IgG抗体的血清学检测,能为临床诊断提供可靠的参考依据。     

结核蛋白芯片检测诊断结核病的价值

目的探讨结核蛋白芯片检测诊断结核病的价值。方法使用结核蛋白芯片系统检测4 093例患者的血清结核抗体,其中结核病441例,非结核病3 652例。采用结核蛋白芯片技术检测结核分枝杆菌中ESAT-6、CFP10、LAM、38KD和16KD 5种成分,分析其结果。结果 441例结核患者中297例结核抗体阳性,3 652例非结核患者中,647例阳性,结核蛋白芯片检测的灵敏度为67.35%,特异度为82.28%。结论结核蛋白芯片是诊断结核病的较有效方法,具有特异性好、快速方便等优点,对快速诊断结核病起辅助作用。     

结核分枝杆菌蛋白抗原诊断试剂的临床价值研究

目的研究和评估基于结核分枝杆菌蛋白抗原(TB-SA)研制的结核诊断试剂盒在结核病诊断中的应用价值。方法运用胶体金法分别检测结核组、非结核其他呼吸系统疾病组、健康对照组血清TB-SA结核抗体。结果 TB-SA结核抗体检测结核的灵敏度为72.2%,特异度95.8%,检测结核病患者阳性率(72.2%)明显高于涂片法(44.9%)和培养法(37.1%),差异均有统计学意义(P0.05)。结论 TB-SA抗体检测具有较好的敏感性和特异性,对结核病诊断和鉴别诊断有较高的临床应用价值。     

结核抗体ELISA检测结核病人的诊断价值

结核抗体ＥＬＩＳＡ检测结核病人的诊断价值巩晓东（甘肃平凉市中医医院检验科，７４４０００）血清特异性抗体用于结核病的诊断，国内外报道的方法大多采用结核抗体单孔定性法，使用的抗原一般为人型ＰＰＤ定。本文从我国的实际情况出发，提出以预包被微孔作结核抗体滴度...     

Trustline结核分枝杆菌IgG/IgM抗体检测试剂盒(胶体金法)的临床应用评价

目的 评价Trustline结核抗体IgG/IgM检测试剂盒临床应用效果。 方法 选用3家医院的1009份血清标本,其中628份为结核病患者血清(308例菌阳病例,320例菌阴病例);对照组381份非结核病血清。采用Trustline试剂盒及一种已上市的试剂盒(对照试剂盒)分别检测1009份血清,计算多项检测指标,从而评价试剂盒的检测效果。 结果 通过检测1009份临床血清标本, Trustline试剂盒检测血清抗体(IgG+IgM)的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、 Youden 指数分别为61.3%、79.8%、 83.3%、 55.6% 和0.411,对照试剂盒检测血清抗体(IgG) 的结果分别为53.7%、89.0%、88.9%、 53.8%和0.426。经统计分析表明Trustline试剂盒的灵敏度显著优于对照试剂盒(P0.01),特异度低于对照试剂盒(P0.01),但阳性诊断效率和阴性诊断效率方面差异无统计学意义,Youden指数相接近。 进一步分析显示Trustline试剂盒对菌阳样本及菌阴样本的检出率分别77.6%和44.7%,对照试剂盒则为67.9%和40.0%,对菌阳样本检出率的差异有统计学意义。检测1009份标本,Trustline试剂盒共得IgM阳性35例,其中结核组阳性30例(4.8%),非结核组阳性5例(1.3%)。 结论 Trustline试剂盒检测结核抗体的灵敏度显著优于对照结核抗体试剂盒,并可同时用于检测IgG/IgM抗体,可以应用于结核病的快速诊断。     

结核分支杆菌抗体金免疫测定法的建立及应用

为寻求快速、简便、敏感、特异的检测抗结核杆菌抗体的方法,用于结核病的诊断,以脂阿拉伯甘露糖为抗原,胶体金标记抗人IgG单抗为探针,建立快速检测TB抗体的金免疫测定法。用该法检测41份痰菌阳性血清和58份痰菌阴性的活动性TB病人血清,以及160份非结核人群的抗分支杆菌抗体,发现DIGFA的敏感性为85．9％,特异性为92．5％;DIGFA与ELISA比较,其符合率达98．1％。结果提示DIGFA检测抗分支杆菌抗体敏感性高,特异性强,在结核病诊断中具有一定的实用价值。     

酶联免疫斑点试验快速诊断结核分枝杆菌感染的临床应用价值

目的探讨酶联免疫斑点试验（ELISPOT）检测结核分枝杆菌特异抗原T淋巴细胞的频率，在快速诊断结核病中的临床应用价值。方法利用ELISPOT检测对结核菌特异抗原刺激反应，分泌γ干扰素的效应T淋巴细胞数量方法，测定30名健康体检者，24例丙肝患者，65例非结核呼吸道疾病患者和112例结核病患者外周血单个核细胞中结核菌抗原特异的T淋巴细胞的频率。结果112例结核病患者中，107例结核病患者结核抗原特异ELISPOT阳性，提示方法敏感度为95．5％，30名健康对照中，2名健康体检者阳性，其他健康体检者阴性，24例丙肝患者和65例非结核呼吸道疾病患者均为阴性，方法的特异度为93．3％。结论ELISPOT是较灵敏和特异的快速检测结核菌感染的方法，可用于结核病的快速诊断。     

结核分枝杆菌CFP10和MPT48及TB8.4融合蛋白的表达与临床应用

目的 构建结核分枝杆菌CFP10、MPT48和TB8.4融合蛋白,评价其用于结核病血清学检测的价值.方法 选取2008年上海市肺科医院肺结核患者150例,非结核肺部疾病患者70例,健康体检者103名,采集血清标本共323份.构建结核分枝杆菌CFP10、MPT48和TB8.4融合表达载体.融合蛋白经免疫印迹分析后,采用酶联免疫吸附试验检测血清标本,运用Medcale11.5对结果进行统计学分析.结果 成功构建重组质粒pET21a-cfp10-mpt48-tb8.4,获得95％以上纯度的融合蛋白.免疫印迹法发现融合蛋白与血清抗体发生免疫反应.融合蛋白检测血清抗体敏感度56.7％(85/150),特异度90.8％(157/173),其中非结核病患者特异度为85.7％ (60/70),健康体检者特异度为94.2％(97/103).结论 CFP10-MPT48-TB8.4融合蛋白所具有的免疫反应性,有可能成为结核病血清学诊断的候选抗原.     

噬菌体扩增技术在结核分枝杆菌检测中的应用

目的评价FASTPlaque TB结核分枝杆菌快速检测方法在结核病诊断中的应用价值。方法应用FASTPlaque TB、BACTEC-460及涂片法共同检测112份临床标本。结果31例涂片阳性、BACTEC-460阳性的标本中,FASTPlaque TB方法阳性29例（93．5％）;27例涂片阴性、BACTEC-460阳性的标本中,FASTP1aque TB方法阳性19例（70.3％）;54例涂片阴性、BACTEC-460阴性的标本中,FASTPlaque TB方法阳性14例（25．9％）。结论FASTPlaque TB方法能快速、简便地检测结核分枝杆菌,且检出率较高,可作为结核病诊断的重要方法。