丙型肝炎患者外周血单核细胞中丙型肝炎病毒复制的研究

９例临床诊断为丙型肝炎患者，研究其外周血单核细胞中ＨＣＶＲＮＡ的存在及复制。９例患者血清标本抗－ＨＣＶ及ＨＣＶＲＮＡ均为阳性，采用高敏感的逆转录一套式ＰＣＲ法测定其外周血单核细胞中ＨＣＶ正、负链ＲＮＡ，结果９例患者外周血单核细胞中７例ＨＣＶ正链ＲＮＡ阳性，３例ＨＣＶ负链ＲＮＡ阳性，证实部分丙肝患者外周血单核细胞中存在ＨＣＶ的复制，表明肝细胞并非为ＨＣＶ感染与复制的唯一场所。     

丙型肝炎患者血清和外周血单个核细胞中HCV RNA检测及意义

目的 了解丙肝患者血清和外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中ＨＣＶＲＮＡ存在情况及有其临床意义，方法 应用套式ＰＣＲ检测４６例急性丙型肝炎（丙型肝炎以下简称丙肝）和４２例慢性丙型肝炎患者血清和ＰＢＭＣ中ＨＣＶＲＮＡ。结果 慢性丙型肝炎患者ＰＢＭＣ中ＨＣＶＲＮＡ检出率显著高于急性丙型患者（Ｐ〈０．００１），急，慢性丙型肝患者血清和慢性丙肝患者ＰＢＭＣ中ＨＣＶ ＲＮＡ检出率显著高于ＡＬＴ正常的抗－ＨＣＶ阳性     

外周血单核细胞中丙型肝炎病毒RNA正负链检测的临床意义

目的通过对外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）中ＨＣＶＲＮＡ正负链的检测,来探讨其与丙型肝炎慢性化及干扰素治疗的关系．方法慢性丙型肝炎患者４０例,其中干扰素治疗者１０例,分离血清及ＰＢＭＣ．异硫氰酸胍－酚－氯仿抽提法提取ＨＣＶＲＮＡ,应用逆转录－巢式ＰＣＲ技术检测ＨＣＶＲＮＡ正负链．结果血清正链ＨＣＶＲＮＡ阳性率为６７５％,但负链均为阴性,ＰＢＭＣ中正链ＨＣＶＲＮＡ阳性率为５７５％,负链的阳性率为３５０％．其中３例患者血清中正链ＨＣＶＲＮＡ为阴性,而ＰＢＭＣ中为阳性．１０例干扰素治疗者在治疗结束时血清正链ＨＣＶＲＮＡ６０％转阴,ＰＢＭＣ中负链ＨＣＶＲＮＡ８０％转阴,而正链仅３７５％转阴．结论ＨＣＶ能在ＰＢＭＣ中存在和复制,这可能是导致丙型肝炎易发生慢性化的原因之一．ＰＢＭＣ中ＨＣＶＲＮＡ正负链的检测对于临床判断干扰素的疗效及预后有重要意义     

慢性丙型肝炎患者血清及体液中HCV RNA的检测

慢性丙型肝炎患者血清及体液中ＨＣＶＲＮＡ的检测徐杏芳，钱丽华，吴元龙，冯彦文，周虹本文作者应用逆转录─聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测６０例抗－ＨＣＶ阳性的慢性肝炎患者同期血清、唾液、尿液、精液中ＨＣＶＲＮＡ。并对其中２３例的配偶及子女作调查，评价非...     

丙型肝炎患者血清和外周血单个核细胞中HCV RNA检测及意义

采用套式PCR检测38例急性丙型肝炎和36例慢性丙型肝炎患者血清和外周血单个核细胞(PBMC)中HCV RNA。结果显示74例丙型肝炎患者血清HCV RNA阳性68例,PBMC阳性44例;急性丙型肝炎患者PBMC中HCV RNA阳性15例(39.5％),慢性丙型肝炎患者PBMC中阳性29例(80.5％);3例血清HCV RNA阴性,而PBMC中HCV RNA阳性;8例患者血清抗-HCV阴性,而血清HCV RNA阳性。结果显示,在部分丙型肝炎患者的PBMC中存在HCV RNA,慢性丙型肝炎患者PMBC中HCV RNA检出率显著高于急性丙型肝炎患者(P<0.01)。提示PBMC可能为HCV肝外贮存和复制场所,PBMC中的HCV感染在丙型肝炎慢性化和慢性肝损害中可能起一定作用,血清HCV RNA检测可能有助于抗-HCV阴性丙型肝炎的诊断。     

丙型肝炎患者外周血单个核细胞HCV—RNA的检测及其临床意义

为了探讨丙型肝炎(丙肝)患者外用血单个核细胞中HCV—RNA检测的临床意义,采用RT-PCR方法检测血清及外周血单个核细胞中HCV-RNA及原位杂交方法检测外周血单个核细胞(PBMC)中正、负链HCV-RNA.结果显示,采用RT-PCR方法检测35/50例(70%)患者血清中HCV-RNA阳性.47/50例(94%)PBMC中HCVRNA阳性,采用原位杂交方法检测,45/50例(90%)PBMC正链HCV-RNA阳性,5/50例(0.1%)负链HCV-RNA阳性,使用正链探针杂交的标本在较多的细胞中出现杂交信号,负链杂交时,仅在少数细胞胞浆中出现杂交信号.采用RT-PCR方法检测外周血单个核细胞中HCVRNA是一种敏感性很高的检查方法.     

联检C100—3抗体,第2代抗体与HCV RNA诊断丙型肝炎的比较

对江苏省南通市不同人群７７０例份血清联合检测Ｃ１００－３抗体和第２代抗体，并对其中抗－ＨＣＶ阳性和非甲非乙型肝炎患者用多聚酶链反应（ＲＣＲ）法检测了ＨＣＶ ＲＮＡ。在８９例急性肝炎中。检出的１４例急性丙型肝炎（丙肝）ＨＣＶ ＲＮＡ全数阳性，第２代抗体２例阳性，Ｃ１００－３抗体均阴性。慢性肝炎及肝炎后肝硬化２３０例共检出ＨＣＶ感染２４例（１０．４％），４５１例献血员检出丙肝３例（０．７％），以上两组     

丙型肝炎病毒量分析的研究进展

目前，国内大中型医院已普遍开展利用逆转录多聚酶链反应技术诊断丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染，部分医院还开始尝试利用干扰素治疗慢性丙型肝炎（ＨＣ）。但由于缺乏一种检测ＨＣＶ量变化的敏感方法，致使进一步研究ＨＣ发病机理，优化治疗方案，观察和判断疗效等遇到很大困难。为此，本文将介绍国外在ＨＣＶ量分析的方法、应用及意义等方面的进展。     

慢性重型病毒性肝炎患者外周血单核细胞超微结构的初步观察

电镜观察发现１４例慢性重型病毒肝炎患者外周血单核细胞超微结构，结果发现所有患者单核细胞均有不同程度的形态改变，其早期主要表现为细胞表面结构丰富，吞噬泡与细胞颗粒增加，线粒体明显增多等。而极期患者单核细胞结构改变恰好相反，并且有明显的胞质变性，细胞器减少和线粒体肿胀，表明慢性重型病毒性肝炎早期时，单核细胞大多被激活，以后随病情加重逐渐由活化转入抑制和衰退状态。     

原位杂交法检测外周血单个核细胞中HCV RNA

目的比较慢性丙型肝炎患者用干扰素治疗前以及治疗后３个月ＰＢＭＣ中ＨＣＶＲＮＡ。方法应用地高辛素标记ＨＣＶＲＮＡ正链及负链探针，建立原位杂交方法检测外周血单个核细胞（ＰＭＢＣ）中的ＨＣＶＲＮＡ。结果治疗前１９例患者正链ＨＣＶＲＮＡ阳性，８例负链ＨＣＶＲＮＡ阳性，用正链探针杂交在较多的细胞中出现杂交信号，负链探针杂交仅在少数细胞中出现杂交信号，ＨＣＶＲＮＡ在ＰＢＭＣ胞浆中呈均质性分布。用干扰素治疗结束后３个月２０例患者中９例ＨＣＶＲＮＡ转阴性，近期治愈率４５％。结论原位杂交技术的敏感性及特异性较高，且重复性较好，是研究ＨＣＶＲＮＡ在组织中定位分布和病毒复制场所一种切实可行的方法     

病毒性肝炎患者中感染丙型肝炎病毒分析

在377例病毒性肝炎患者中感染HCV42例(11.14％),其中输血后肝炎感染率最高,可达80％。HCV能与其他肝炎病毒存在双重感染,其中与HBV为多见。在各型肝炎中又以慢活肝和肝硬化感染率最高。提示乙肝向慢性化或肝细胞癌变演化过程中,与感染HCV有关。     

HCV RNA的定位及其应用研究近况

ＨＣＶＲＮＡ的定位及其应用研究近况汪荣泉综述周子龙杨建民审校本文将近年来ＨＣＶＲＮＡ定位的方法学——原位杂交、直接原位ＰＣＲ和间接原位ＰＣＲ的研究现状及其应用作一综述。近年来，ＨＣＶ的血清流行病学和分子流行病学取得了突破性进展。为深入探索ＨＣＶ的致病...     

慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞中负链HCV RNA的检测及意义

19例临床诊断慢性丙型肝炎患者,检测其外周血单个核细胞中丙型肝炎病毒(HCV)RNA的存在及复制状态。所选检测对象血清标本抗-HCV及HCV RNA均为阳性。采用逆转录-套式PCR法检测其外周血单个核细胞中HCV正、负链RNA,结果19例患者外周血单个核细胞中14例HCV正链RNA阳性;6例HCV负链RNA阳性。实验结果证实部分慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞中存在HCV复制,表明肝细胞并非为HCV感染与复制的唯一场所。HCV感染慢性化与其外周血单个核细胞中存在HCV复制可能有一定关系。     

血清抗—HCV与HCV RNA检测结果比较

采用逆转录一大一聚合酶链反应（ＲＴ－ｎｅｓｔｅ－ＰＣＲ）及ＥＬＩＳＡ（Ａｂｂｏｔｔ）对一组经第二代抗－ＨＣＶ ＥＬＩＳＡ（上海科华生物技术有限公司，科华）试剂筛选的抗－ＨＣＶ阳性血清及抗－ＨＣＶ阴性的非甲非乙型肝炎患者清，进行了ＨＣＶＲＮＡ与抗－ＨＣＶ检测。对两者检测结果表明相互关系进行了分析与比较。结果显示：Ａｂｂｏｔｔ与科华ＥＬＩＳＡ试剂两者抗－ＨＣＶ检测的阳性符合率及总符合率为７７．７％及７     

国际标准化HCV RNA检测推进丙型病毒性肝炎规范化诊疗

丙型病毒性肝炎是较常见的肝脏疾病之一,是导致肝硬化和肝癌的重要原因。中国丙型病毒性肝炎防治现状可以概括为“三高三低”,即“高隐匿、高漏诊、高慢性化、认知率低、就诊率低、治疗率低”。据估计,我国约有1000万丙型病毒性肝炎感染者。2013年国家卫生和计划生育委员会传染病报告丙型病毒性肝炎感染超过20万例,而诊断率仅为2％,接受抗病毒治疗的患者仅为1％。丙型病毒性肝炎给社会带来严重的医疗经济负担。     

丙型肝炎病毒RNA在血浆及外周血单个核细胞中的检测意义

丙型肝炎属于黄病毒家族的E链RNA病毒。HCV感染的最大特点是极易演变为慢性。且病情有逐步加重的趋势。目前有少数学者在研究丙型肝炎发病机理时,证实了外周血单个核细胞中存在HCV RNA。为进一步探讨患者不明原因ALT升高、查找病原学,我们将细胞内检测HCV RNA技术用于临床,对疑为丙型肝炎的患者同步检测血浆及外周血单个核细胞中HCV RNA,现报道如下。 1 材料与方法     

慢性丙型肝炎患者HCV基因型分析

目的研究慢性丙型肝炎患者HCV基因型概况。方法采用基因芯片法检测HCV基因分型;采用PCR法测定HCV RNA定量。结果在570例患者中,HCV RNA阳性552例（95%）,其中1b型400例（72.4%）,2a型63例（11.4%）,3a型20例（3.6%）,3b型20例（3.6%）,1b＋2a型12例（2.1%）,1a型2例（0.4%）,6型7例（1.26%）,1b＋3a型1例（0.18%）,2a＋1b型3例（0.5%）,未定型24例（4.3%）;不同HCV基因型感染者血清HCVRNA水平无统计学差异（P〉0.05）。结论本组患者HCV基因型以1b型为主,2a型次之,多种混合型的出现提示HCV基因型呈现多样化趋势。     

慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞对HCV不同区抗原的增殖反应

目的 了解ＨＣＶ感染后细胞免疫在其中所起作用，方法 对２７例慢性丙肝患者及１５例正常献血员，以ＭＴＴ法检测慢性丙肝患者外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）对ＨＣＶ不同区抗原的增殖反应。结果 与正常人相比，慢性丙肝患者ＰＢＭＣ对ＨＣＶ抗原Ｃ２２，Ｃ３３有明显增殖反应，（Ｐ值〈０．０１）而对ＮＳＳ却无明显增值，Ｃ２２抗原性最强，结论在慢性ＨＣＶ感染时可同时存在针对ＨＣＶ相关抗原的细胞免疫和体液免疫，这种细胞免疫