丙型肝炎患者血清和外周血单个核细胞中HCV RNA检测及意义

目的 了解丙肝患者血清和外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中ＨＣＶＲＮＡ存在情况及有其临床意义，方法 应用套式ＰＣＲ检测４６例急性丙型肝炎（丙型肝炎以下简称丙肝）和４２例慢性丙型肝炎患者血清和ＰＢＭＣ中ＨＣＶＲＮＡ。结果 慢性丙型肝炎患者ＰＢＭＣ中ＨＣＶＲＮＡ检出率显著高于急性丙型患者（Ｐ〈０．００１），急，慢性丙型肝患者血清和慢性丙肝患者ＰＢＭＣ中ＨＣＶ ＲＮＡ检出率显著高于ＡＬＴ正常的抗－ＨＣＶ阳性     

外周血单核细胞中丙型肝炎病毒RNA正负链检测的临床意义

目的通过对外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）中ＨＣＶＲＮＡ正负链的检测,来探讨其与丙型肝炎慢性化及干扰素治疗的关系．方法慢性丙型肝炎患者４０例,其中干扰素治疗者１０例,分离血清及ＰＢＭＣ．异硫氰酸胍－酚－氯仿抽提法提取ＨＣＶＲＮＡ,应用逆转录－巢式ＰＣＲ技术检测ＨＣＶＲＮＡ正负链．结果血清正链ＨＣＶＲＮＡ阳性率为６７５％,但负链均为阴性,ＰＢＭＣ中正链ＨＣＶＲＮＡ阳性率为５７５％,负链的阳性率为３５０％．其中３例患者血清中正链ＨＣＶＲＮＡ为阴性,而ＰＢＭＣ中为阳性．１０例干扰素治疗者在治疗结束时血清正链ＨＣＶＲＮＡ６０％转阴,ＰＢＭＣ中负链ＨＣＶＲＮＡ８０％转阴,而正链仅３７５％转阴．结论ＨＣＶ能在ＰＢＭＣ中存在和复制,这可能是导致丙型肝炎易发生慢性化的原因之一．ＰＢＭＣ中ＨＣＶＲＮＡ正负链的检测对于临床判断干扰素的疗效及预后有重要意义     

急性丙型肝炎患者抗－HCV－IgM检测的临床意义

采用重组ＨＣＶ抗原片段Ｃ２２和３３ｃ包被酶标板孔，以间接ＥＬＩＳＡ方法，检测４０例输血后急性丙型肝炎患者血清抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ。４０例患者均在起病后４０天内出现抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ阳性，抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ阳性与ＨＣＶＲＮＡ阳性密切相关，抗体阳性持续时间因病程是否转为慢性而不同。２３例自限性急性丙型肝炎（丙肝）患者，在起病后６个月内抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ全部阴转并伴有ＨＣＶＲＮＡ阴转，而１７例转慢的急性丙肝患者中１５例抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ持续阳性，其ＨＣＶＲＮＡ亦持续阳性或间断阳性。提示急性丙肝检测抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ，可作为抗－ＨＣＶ－ＩｇＧ和ＨＣＶＲＮＡ检测的一个补充，在反映病情和判断预后方面有一定作用     

慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞丙型肝炎病毒检测及其意义

目的 探讨外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）在丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的感染中的作用。方法 对２２例慢性丙型肝炎患者２１例抗－ＨＣＶ（＋）血液管析患者及１２例健康献血员的ＰＢＭＣｓ分别进行ＨＣＶＲＮＡ,ＨＣＶ抗原检测及电镜观察。结果 （１）２２生丙型肝炎肝炎患者ＰＢＭＣｓ中有７７．３％（１７／２２）ＨＣＶＲＮＡ阳性,（２）感染ＨＣＶ的ＰＢＭＣｓ中电镜下发现复制的ＨＣＶ颗粒;（３）ＨＣＶ颗粒阳笥者的血清和     

不同外周血标本中HCV RNA检出比较

对５４例抗－ＨＣＶ阳性患者，用多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术检测其外周血不同检材（血清、血浆、外周血单核细胞）中ＨＣＶ ＲＮＡ，结果检出率分别为５９．３％、５０％、５５．６％，以血清标本检出率最高。外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）中亦有较高的检出率，且在部分（６％）血清测不到ＨＣＮ ＲＮＡ时，ＰＢＭＣ中可测及，提示ＰＢＭＣ可贮存ＨＣＶ ＲＮＡ。     

周围血白细胞的复制型丙型肝炎病毒RNA的检测及临床意义

用简并引物作套式反转录。聚合酶链反应检测正、负链丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ。显示３０例急、慢性丙型肝炎患者的血清及血浆中，７例无症状抗－ＨＣＶ阳性者的血清、血浆及周围血白细胞（ＰＢＬ／Ｃ）中，均未检出负链ＨＣＶＲＮＡ。慢性丙型肝炎者ＰＢＩ（中正、负链ＨＣＶＲＮＡ的检出率高于急性丙型肝炎及无症状抗－ＨＣＶ阳性者（Ｐ＜０．０５～０．００１）。１７例经肝组织学检查的患者中，急性肝炎（ＡＨ）者ＰＢＬ／Ｃ的正、负链ＨＣＶＲＮＡ检出率低于慢性活动性肝炎（ＣＡＨ）者（Ｐ＜０．０５）。１例ＡＨ及６例ＣＡＨ患者肝组织内正、负链ＨＣＶＲＮＡ全部阳性。证实丙型肝炎患者的ＰＢＬ／Ｃ确可被ＨＣＶ感染，病程越长，被ＨＣＶ感染的可能性越大；病情活动者，ＰＢＬ／Ｃ中负链ＨＣＶＲＮＡ的检出率越高。提示ＨＣＶ不仅可以感染ＰＢＬＣ，而且可在其中复制；负链ＨＣＶＲＮＡ的出现与病情活动有关。     

急性丙型肝炎患者抗—HCV—IgM检测的临床意义

采用重组ＨＣＶ抗原片段Ｃ２２和３３Ｃ包被酶标板孔，以间接ＥＬＳＩＡ方法，检测４０例输血后急性丙型肝炎患者血清抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ。４０例患者均在起病后４０天内出现抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ阳性，抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ阳性与ＨＣＶ ＲＮＡ阳性密切相关，抗体阳性持续时间因病程是否转为慢性而不同。２３例自限性急性丙型肝炎（丙肝）患者，在起病后６个月内抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ全部阴转并伴有ＨＣＶ ＲＮＡ阴转，而１７例转慢的急     

血液透析患者血液中丙型及乙型肝炎病毒的检测

为了解血液透析患者血液中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）及乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的感染情况，对２２例维持性血液透析患者应用逆转录聚合酶链反应及酶联免疫吸附实验，检测了血清中ＨＣＶＲＮＡ及其抗体水平；同时采用斑点杂交及固相放射免疫法检测了血清中ＨＢＶＤＮＡ及其血清标志物。结果显示，２７％的血液透析患者血清ＨＣＶ抗体阳性，其中３３％的患者血清存在ＨＣＶＲＮＡ。在血清ＨＣＶ抗体阴性的１６例患者中，也有１例（６％）血清ＨＣＶＲＮＡ阳性。在２２例血液透析患者中，３例（１４％）血清ＨＢＶＤＮＡ阳性（ＨＢｅＡｇ也均阳性）。其余１９例ＨＢＶＤＮＡ阴性患者（ＨＢｅＡｇ均阴性），有１２例（６３％）血清抗－ＨＢｃ阳性。在７例血清ＨＣＶＲＮＡ或（和）抗－ＨＣＶ阳性者，５例有既往或现在ＨＢＶ感染的证据，但未见ＨＣＶＲＮＡ与ＨＢＶＤＮＡ同时存在者。提示在相当数量的血液透析患者体内存在肝炎病毒血症，应加强对血液透析患者肝炎病毒感染的监测及预防工作     

HGV-RNA阳性与阴性慢性乙型肝炎患者的对比研究

目的 研究慢性乙型肝炎（ＣＨＢ）患者庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染的意义。方法 ＲＴ＿ＰＣＲ法对１４６例ＣＨＢ患者血清进行了ＨＧＶ－ＲＮＡ检测,并将ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性与阴性患者进行临床与病理学对比。结果 ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性２３例（１５．７５％）。ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性与阴性２肝功能等生化指标水平,肝脏病理损害程度、ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率均无显著性差异。５例ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性、１６例ＨＧＶ－ＲＮＡ阴性ＣＨＢ患     

原位反转录PCR检测慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞中HCV

目的研究慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞（ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒｃｅｌ，ＰＢＭＣ）中丙型肝炎病毒的定位分布及复制。方法直接原位反转录－ＰＣＲ（标记引物）对２０例慢性丙型肝炎患者的ＰＢＭＣ内丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的分布、定位及存在形式进行研究。结果１６例患者外周血单个核细胞的胞浆内发现ＨＣＶＲＮＡ阳性信号，并有一例患者的胞浆内发现ＨＣＶＲＮＡ负链信号。结论ＨＣＶ可感染ＰＢＭＣ并在其中复制。原位ＲＴ－ＰＣＲ为进一步研究ＨＣＶ进入人体内的分布、潜伏、复制状况以及丙型肝炎治疗、药物研究奠定了基础。     

慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞中HCV RNA和NS5抗原的检测

目的 研究丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染外周血个核细胞（ＰＢＭＣ）的情况及其意义。方法 运用非核素原位杂交法（ＮＩＳＨ）和抗生蛋白链菌素－生物素法（ＳＡＢＣ）分别检测２０例慢性丙型肝炎患者ＰＢＭＣ中的ＨＣＶ ＲＮＡ和ＮＳ５抗原。结果 ２０例患者中有８例（４０％）,ＰＢＭＣ中ＨＣＶ ＲＮＡ呈阳性,其中６例（３０％）ＰＢＭＣ中ＮＳ５抗原同时呈阳性。ＨＣＶＲＮＡ主要分布于胞浆中,而ＮＳ５抗原还可以出现在胞膜     

慢性丙型肝炎患者血清HCVRNA定量分析：竞争性聚合酶链反应

目的：探讨ＨＣＶ复制水平与肝病进展的关系。方法：用竞争性逆转录聚合酶链反应（ＣＲＴ－ＰＣＲ）定量检测２７例慢性丙肝患者（ＣＨＣ）血清ＨＣＶＲＮＡ。结果：ＣＨＣ患者血清ＨＣＶＲＮＡ水平变化范围１０２～１０６ｃｏｐｉｅｓ／５０ｕｌｓｅｒｕｍ。１３例慢性迁延性肝炎（ＣＰＨ）患者血清ＨＣＶＲＮＡ平均水平（５．０６８±１．０４，Ｌｏｇ１０ｃｏｐｉｅｓ／５０μｌｓｅｒｕｍ）明显低于１０例慢性活动性肝炎患者（ＣＡＨ）（５．７９±０．２５）和４例肝硬化（Ｃｉｒ）患者（５．８３±０．７５），Ｐ值均＜０．０５。血清ＨＣＶＲＮＡ水平同ＡＬＴ水平间呈正相关（ｒ＝０．４９９７，Ｐ值＜０．０５）。结论：表明丙肝病毒感染后病毒血症水平低，ＨＣＶ复制水平与肝损伤相关，在慢性感染中ＨＣＶ仍活跃复制，并与肝病进展相关。     

干扰素联合病毒唑对肝炎患者正,负链丙型肝炎病毒RNA的影响

为评价干扰素联合病毒唑的抗病毒效果，用套式反转录－聚合酶链反应技术观察其对慢性丙型肝炎患者正、负链丙型肝炎病毒ＲＮＡ（ＨＣＶＲＮＡ）的作用。结果显示，在对联合抗病毒治疗有反应的患者中，多数患者ＡＬＴ降至正常，血清正链阳性率由９２．３１％降至３８．４６％（Ｐ＜０．００５），周围血单核细胞（ＰＢＭＣ）中负链阳性率由７６．９２％降至３８．４６％（Ｐ＜０．０５），但对ＰＢＭＣ中正链ＨＣＶＲＮＡ影响不大。治疗停止后，半数以上患者病情复发，病情复发者均为ＰＢＭＣ中正链及负链ＨＣＶＲＮＡ持续阳性者。提示单纯检测血清正链ＨＣＶＲＮＡ作为疗效考核及病情转归的判断指标有一定的局限性。同时检测血清及ＰＢＭＣ中正、负链ＨＣＶＲＮＡ，具有重要的临床意义。本研究干扰素联合病毒唑的抗病毒效果与单用干扰素接近，似说明病毒唑并未增加干扰素的疗效     

血清抗-HBs阳性慢性肝病患者的病因研究

目的部分抗－ＨＢｓ阳性者仍有活动性肝病存在，其病因还不十分清楚．本研究旨在探讨血清抗ＨＢｓ阳性慢性肝病患者的病因．方法应用套式聚合酶链反应检测血清抗ＨＢｓ阳性慢性肝病患者血清中ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ．患者３２例，男２５例，女７例，平均年龄４１７岁（２１岁～６３岁），其中慢性肝炎１８例，肝硬变１４例．９例慢性肝炎和５例肝硬变经肝活检证实，其余为临床诊断．结果血清中ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ的检出率分别为６２５％（２０／３２）和２８１％（９／３２）；ＨＢＶＤＮＡ和（或）ＨＣＶＲＮＡ总检出率为８１３％（２６／３２）．结论血清抗ＨＢｓ阳性慢性肝病患者的病因多数与ＨＢＶ和（或）ＨＣＶ感染有关．     

慢性HCV感染者IFN治疗前后血清HCV RNA水平

目的评价ＩＦＮ对丙肝患者病毒血症水平的作用．方法竞争性逆转录聚合酶链反应（ＣＲＴＰＣＲ）法定量检测１２例慢性ＨＣＶ感染者（男８例，女４例，ＨＣＶＲＮＡ阳性，ＡＬＴ异常持续６个月以上）ＩＦＮ治疗（ＩＦＮａ２ｂ３ＭＵ，肌注，３次／周，疗程３个月）前后（随访６个月）血清ＨＣＶＲＮＡ水平．结果慢性ＨＣＶ感染者１２例，３例呈完全反应，６例呈部分反应，另外３例无反应．９例有反应者中４例复发，有反应者治疗结束时血清ＨＣＶＲＮＡ水平明显下降（５１７±０４０８ｖｓ２０６±１５５，１０ｃｏｐｉｅｓ／５０μｌｓｅｒｕｍ，ｘ±ｓ，Ｐ＜００５），无反应者血清ＨＣＶＲＮＡ水平未见明显下降（５６７±０５８ｖｓ４５±０８７，ｘ±ｓ，Ｐ＞００５）．３例完全反应者仅１例血清ＨＣＶＲＮＡ持续阴性，３例无反应者２例血清ＨＣＶＲＮＡ水平略有下降．结论ＩＦＮ治疗丙肝有效，但ＩＦＮ不能有效清除病毒，仅抑制病毒复制，未见治疗前血清ＨＣＶＲＮＡ水平与复发与否有关．     

原位杂交法检测外周血单个核细胞中HCV RNA

目的比较慢性丙型肝炎患者用干扰素治疗前以及治疗后３个月ＰＢＭＣ中ＨＣＶＲＮＡ。方法应用地高辛素标记ＨＣＶＲＮＡ正链及负链探针，建立原位杂交方法检测外周血单个核细胞（ＰＭＢＣ）中的ＨＣＶＲＮＡ。结果治疗前１９例患者正链ＨＣＶＲＮＡ阳性，８例负链ＨＣＶＲＮＡ阳性，用正链探针杂交在较多的细胞中出现杂交信号，负链探针杂交仅在少数细胞中出现杂交信号，ＨＣＶＲＮＡ在ＰＢＭＣ胞浆中呈均质性分布。用干扰素治疗结束后３个月２０例患者中９例ＨＣＶＲＮＡ转阴性，近期治愈率４５％。结论原位杂交技术的敏感性及特异性较高，且重复性较好，是研究ＨＣＶＲＮＡ在组织中定位分布和病毒复制场所一种切实可行的方法     

用套式PCR方法检测慢丙肝患者唾液和尿液中的HCVRNA

本文用套式ＰＣＲ方法对１６例慢性丙肝患者的血清，唾液和尿液进行了ＨＣＶＲＮＡ检测，１６份血清ＨＣＶＲＮＡ均阳性，而１６份唾液和尿液ＨＣＶＲＮＡ均阴性。结果表明，丙肝患者唾淮和尿液中不存在ＨＣＶＲＮＡ，或即存在也是极微量的，传播丙肝的危险性很小。     

66例慢性非甲非乙型肝炎患者的丙型肝炎病毒感染研究

以ＨＣＶ－Ｔ３序列为引物，结合ＲＴ－ＰＣＲ和寡聚核甘酸探针Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，检测６６例慢性非甲非乙型肝炎（ＮＡＮＢＨ）患者的血浆ＨＣＶ－ＲＮＡ，阳性４２例（６３．６％）。同样病例以相当于ＨＣＶＣ区基因编码和ＮＳ３区编码的人工合成肽抗原检测抗ＨＣＶ，阳性４９例（７４．２％）。这６６例慢性ＮＡＮＢＨ病例，抗ＨＣＶ和ＨＣＶ－ＲＮＡ双阳性者３８例（５７．６％）；抗ＨＣＶ阴性而ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性者４例（６．１％）；抗ＨＣＶ阳性而ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性者１１例（１６．７％）。其中诊断为散发型ＮＡＮＢＨ者３５例，检出ＨＣＶ－ＲＮＡ者１７例（４８．６％），为输血后ＮＡＮＢＨ者３１例，检出ＨＣＶ－ＲＮＡ者２５例（８０．７％）。     

联检C100－3抗体、第2代抗体与HCV RNA诊断丙型肝炎的比较

对江苏省南通市不同人群７７０例份血清联合检测Ｃ１００－３抗体和第２代抗体，并对其中抗－ＨＣＶ阳性和非甲非乙型肝炎患者用多聚酶链反应（ＲＣＲ）法检测了ＨＣＶＲＮＡ。在８９例急性肝炎中。检出的１４例急性丙型肝炎（丙肝）ＨＣＶＲＮＡ全数阳性，第２代抗体２例阳性，Ｃ１００－３抗体均阴性。慢性肝炎及肝炎后肝硬化２３０例共检出ＨＣＶ感染２４例（１０．４％），４５１例献血员检出丙肝３例（０．７％），以上两组患者３项标记阳性率相近。在检出的４２例ＨＣＶ感染中，仅１４例有输血史。比较３项标记，ＰＣＲ法检测ＨＣＶＲＮＡ最灵敏，对急性丙肝尤有诊断价值，并能直接反映ＨＣＶ复制；抗－ＨＣＶ可用于慢性ＨＣＶ感染的检测，第２代抗体优于Ｃ１００－３抗体。     

丙肝患者血清抗一HCV IgM与HCV RNA的比较

丙肝患者血清抗一ＨＣＶＩｇＭ与ＨＣＶＲＮＡ的比较雷周云，逯好英，韩凤连，施红，陆江春丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染后血清ＩｇＭ抗－ＨＣＶ抗体（抗－ＨＣＶＩｇＭ）及ＨＣＶＲＮＡ检测结果对丙型肝炎早期诊断、肝病的活动及病毒复制的判断都具有一定的意义。我们对住...