TRAIL与羟基喜树碱联用协同杀伤人肺腺癌A549细胞

目的探讨羟基喜树碱与肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosisfactor-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)联用对肺腺癌A549细胞是否具有协同杀伤作用,并对其机制进行初步研究。方法MTT法检测细胞毒性作用,流式细胞仪检测细胞凋亡和线粒体膜电位,Western blot分析bcl-2和bcl-xl蛋白水平变化。结果单用100ng/mL TRAIL,4、40和400μg/mL羟基喜树碱对A549细胞杀伤率分别为13·9%、3·0%、23·4%和76·7%,联合用药的抑制率分别为43·6%、52·5%和83·1%。100ng/mL TRAIL和4μg/mL羟基喜树碱有协同作用,可使细胞线粒体膜电位降低,但不影响bcl-2和bcl-xl蛋白表达。结论TRAIL与羟基喜树碱联用对肺腺癌A549细胞有明显的协同杀伤作用,其机制可能与羟基喜树碱降低A549细胞线粒体膜电位有关。     

TRAIL协同多柔比星高效杀伤骨肉瘤细胞

目的：研究TRAIL与多柔比星联合应用对骨肉瘤细胞的杀伤作用，探寻骨肉瘤临床化疗的新方案。方法：将TRAIL与多柔比星单独及联合应用于体外培养的骨肉瘤OS-732细胞，采用MTT法检测细胞毒性作用，流式细胞仪定量分析凋亡细胞所占比例，并镜下观察凋亡细胞超微结构改变。结果：50ng／mL的TRAIL与5μg／mL多柔比星合用于OS-732细胞24h时后，测细胞抑制率为85．47％，明显高于单用TRAIL（50ng/mL）时的9．68％及单用多柔比星（5μg／mL）时的18．41％，P〈0．01。细胞超微结构观察及凋亡率测定均显示。合用比单用有更多的骨肉瘤细胞凋亡。结论：TRAIL与多柔比星可协同、高效杀伤骨肉瘤细胞。这种杀伤效应是通过促进肿瘤细胞的凋亡来实现的。     

1，25二羟基维生素D3对肺腺癌细胞株生长及凋亡的影响

目的：研究1，25二羟基维生素D3[1，25（OH）。VitD3]对肺腺癌细胞株A549生长及凋亡的影响。方法：应用流式细胞仪、免疫组织化学和RT-PCR等方法观察1，25二羟基维生素D3对人肺腺癌A549细胞株生长、细胞周期、调控细胞周期基因和调控凋亡基因表达水平的影响。结果：μmol／L的1，25二羟基维生素D3时A549细胞的生长有抑制作用，1μmol／L的1，25二羟基维生素D3作用后A549细胞G1期比例由59．7％增加至73．2％，P=0．001；S期比例由26．4％降至21．1％，P=0．018；细胞凋亡率由2.6％增至7．2％，P=0．015；可明显上调Fas／FasL的表达量，下调bcl-2表达量；可抑制细胞周期蛋白D1的表达量由0．762减至0．207，P=0．001；同时抑制细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶4的表达量由0．642减至0．129，P=0．002。但较低浓度的1，25二羟基维生素队上述作用不明显。结论：1μmol／L的1，25二羟基维生素D1可通过多种途径发挥抗肺腺癌作用。     

阿司匹林抑制肺癌细胞增殖的实验研究

 目的 观察阿司匹林在体外对肺腺癌细胞A549增殖的抑制作用。方法 采用噻唑蓝（MTT）法观察阿司匹林及与奥沙利铂联用抑制A549细胞的增殖；采用流式细胞仪（FCM）观察阿司匹林处理后A549细胞周期分布的变化；采用HE染色和DNA末端原位标记染色技术（TUNEL）观察阿司匹林处理后诱导A549细胞凋亡的作用。结果 MTT显示阿司匹林呈剂量依赖方式抑制A549细胞增殖。阿司匹林作用后，FCM显示G0／G1期细胞比例增加，S期和G／M期细胞比例降低，TUNEL显示细胞凋亡指数（AI）由3．67％±1．15％增加到26．33％±2．52％，呈一定剂量效应关系。光镜下可见典型的细胞凋亡形态学变化。阿司匹林（2．5mmol／L）与奥沙利铂（≥6．25ug／mL）联用可增强抑制A549增殖的作用，二者呈协同或相加作用。结论 阿司匹林可抑制肺腺癌细胞A549的增殖，其影响细胞周期分布、诱导细胞凋亡可能是其重要的机制。阿司匹林及与奥沙利铂联用有显著的协同抗增殖效应。     

榄香烯联合高温和顺铂对人肺腺癌A549细胞的杀伤作用

目的观察榄香烯联合高温和顺铂对人肺腺癌A549细胞的协同杀伤作用。方法应用MTT法检测高温处理或常温处理细胞对顺铂和榄香烯的敏感性。采用4μg/mL顺铂和15μg/mL榄香烯或60μg/mL榄香烯联合42℃高温处理1.5小时或常温处理,使用MTT法检测细胞抑制率。透射电镜观察细胞形态学改变。结果高温作用后,顺铂对A549细胞的半数抑制浓度（IC50）,从常温时的22.44μg/mL降低至11.74μg/mL;榄香烯对A549细胞的IC50从35.43μg/mL降低至28.68μg/mL;42℃加热1.5小时联合4μg/mL顺铂和15μg/mL榄香烯具有明显的协同杀伤作用,A549细胞可见凋亡形态,可见凋亡小体,同时有大量细胞坏死。结论低浓度榄香烯可以明显提高高温联合顺铂对A549细胞的杀伤作用。     

卡铂联合TRAIL对肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察卡铂联合TNF相关凋亡诱导配体(TRAIL)对人肺腺癌细胞A549增殖和凋亡的影响。方法:经20、40、80 μg/mL卡铂和100 ng/μL TRAIL单用或联用处理后,用MTS法检测A549细胞的增殖能力,在光镜下观察细胞形态学变化;并采用流式细胞术检测细胞凋亡情况;RT-PCR和Western blot法检测死亡受体4(DR4)、死亡受体5(DR5)、Survivin和X连锁凋亡抑制蛋白基因(XIAP)mRNA与蛋白表达的变化。结果:卡铂和TRAIL单用或联用均可浓度依赖性抑制A549细胞的增殖,诱导其凋亡,两药联用比单用卡铂时抑制率和凋亡率更高(P<0.05)。单用卡铂或TRAIL可使A549细胞数减少,漂浮细胞增多,出现明显的凋亡形态变化,且明显降低Survivin和XIAP的mRNA和蛋白表达水平(P均<0.05);但对A549细胞DR4和DR5 mRNA表达均无明显影响,而单用卡铂或TRAIL却能升高A549细胞DR5蛋白的表达(P<0.05)。与单用组相比,TRAIL与卡铂联用A549细胞凋亡形态变化更明显,可明显降低A549细胞Survivin和XIAP mRNA和蛋白的表达水平及升高DR5蛋白表达水平(P<0.05)。结论:卡铂与TRAIL联用可协同抑制肺癌细胞A549细胞增殖,促进其凋亡,且与卡铂能够增加A549细胞DR5蛋白的表达和降低Survivin及XIAP的表达相关。     

TRAIL与阿霉素联用协同杀伤人结肠癌细胞SW480

背景与目的:肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumornecrosisfactor-relatedapoptosisinducingligand,TRAIL)可选择性杀伤肿瘤细胞,而不影响正常细胞生长。当一部分肿瘤细胞对TRAIL不敏感时,特定的其它药物可增强其杀伤作用。本文旨在探讨结肠癌细胞SW480对TRAIL的敏感性,以及TRAIL与阿霉素联用对细胞的杀伤作用及可能作用机制。方法:常规培养结肠癌细胞SW480。利用MTT法检测细胞毒性作用,流式细胞术定量分析凋亡细胞比例,透射电镜在亚细胞结构形态上证实凋亡细胞,Westernblot分析p53及bcl-2蛋白表达变化。结果:(1)SW480细胞对TRAIL不敏感,100ng/mlTRAIL只能杀伤7.8%的细胞,IC50>1000ng/ml,且不存在浓度依赖性。(2)SW480细胞对阿霉素敏感,存在浓度依赖性作用,IC50=65μmol/L,0.86μmol/L的阿霉素对细胞不表现杀伤作用。(3)TRAIL与阿霉素合用表现出协同作用,亚毒性浓度TRAIL(100ng/ml)与亚毒性浓度阿霉素(0.86μmol/L)联用可杀伤80%SW480细胞。流式细胞学证实这种杀伤作用主要通过诱导细胞凋亡实现,透射电镜亦观察到大量凋亡细胞存在。药物作用前后,p53及bcl-2蛋白表达水平无明显改变。结论:结肠癌细胞株SW480对TRAIL不敏感,但TRAIL与亚毒性浓度阿霉素联用对癌细胞有协同杀伤作用,这种细胞毒性作用主要表现     

草分枝杆菌联合羟基喜树碱对SPCA／Ⅰ人肺腺癌细胞抗增殖效应的研究

目的：探讨草分枝杆菌（mycobacteriumphlei)对人肺腺癌细胞系SPCA／Ⅰ的抗增殖效应，以及不同浓度草分枝杆菌与羟基喜树碱联合应用时的协同效应。方法：应用细胞培养和MTT比色法，检测不同浓度组的草分支杆菌，以及草分枝杆菌与羟基鼓地碱联合应用对SPCA／Ⅰ人肺腺癌细胞生长的抑制作用，波长定于570nm，测定光密度（A值）并计算抑制率。结果：不同浓度的草分枝杆菌，在体外对SPCA／Ⅰ人肺腺朱均 直接的抑制作用，其抑制率与所用药物浓度呈正相关。1．720μg/ml及0．860μg/ml浓度的草分枝杆菌与羟基喜树碱（1．0PPC、0．5PPC）联用，在体外对人肺腺癌细胞的抑制率显著高于单用羟基喜树碱组。结：草分枝杆菌在体外对SPCA／Ⅰ人肺腺癌细胞有直接抑制作用，该药与羟基对碱联合应用有显著的协同抗肿瘤效应。     

热疗与化疗对放射存活曲线影响的实验研究

目的：通过细胞学实验方法，观察加温与羟基喜树碱(HCPT)对人肺腺癌Anip973细胞放射存活曲线的影响，以期为提高肿瘤治疗效果提供更科学的方法。方法：采用细胞集落形成方法，得出加温与羟基喜树碱(浓度为0．5μg/mL)单独或联合与放射作用下的细胞存活曲线，并通过对各组曲线特征参数的分析来观察放射敏感性的变化。结果：单放、加温与放射、HCPT与放射、加温与HCPT并用放射各组的Do、Dq、N、SF2、β值逐渐减小，K、α、α/β值逐渐增大。结论：加温与羟基喜树碱均能增加Anip973细胞的放射敏感性，使细胞修复亚致死性损伤的能力减弱，直接杀伤效应增加，且HCPT作用强于加温，而二者联合则效果更佳。     

环氧化酶-2 抑制剂联合依托泊苷对肺癌细胞增殖凋亡的影响

 目的 探讨环氧化酶-2（COX-2）抑制剂尼米舒利（NIM）与化疗药依托泊苷（VP-16）联用对肺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法 培养人肺癌细胞A549：①NIM（25μmol／L）与VP-16（2～32μg／mL）联合，MTT试验观察干预48h后细胞增殖变化及增殖抑制率；②分为对照组、NIM组（25μmol／L）、VP-16组（8μg／mL）和NIM＋VP．16组，观察12h、24h及48h后A549细胞生长情况，描记生长曲线；流式细胞术检测干预48h后细胞凋亡率。结果 ①VP-16能抑制肺癌A549细胞的增殖，且呈量一效关系（r=-0．908，P〈0．01），NIM与VP-16联用后，抑增殖作用增强，二者有相加或协同作用；②NIM及VP-16均可抑制A549细胞的生长，诱导凋亡，二者联用后作用增强。结论 NIM与VP-16联用可增强对肺癌细胞增殖的抑制和凋亡的诱导，二者具有协同抗肿瘤作用。     

TRAIL联合多柔比星作用于骨肉瘤的实验研究

背景与目的：肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TNF related apoptosis inducing ligand，TRAIL）是近年发现的肿瘤坏死因子家族新成员，显著特点是它仅诱导肿瘤细胞凋亡，对正常细胞无毒性作用。TRAIL可作为骨肉瘤靶向治疗的潜在有效药物，但单独使用时已被证明作用有限。而多柔比星可对肿瘤细胞产生广泛的生化效应，为细胞周期非特异性药物，有强烈的细胞毒性作用，可嵌入DNA而抑制核酸的合成导致细胞死亡。本研究旨在探讨TRAIL联合低剂量化疗药物多柔比星对骨肉瘤MG-63细胞的凋亡诱导效应。方法：MTT法测定TRAIL和多柔比星对MG-63细胞单独及联合作用的细胞凋亡率，DNA凝胶电泳及流式细胞仪检测细胞凋亡。结果：1000ng／ml的TRAIL与4．3μmol／mL多柔比星合用于MG63细胞24h时后，测细胞抑制率为36．65％，明显高于单用TRAIL（1000ng／ml）时的21．67％及单用多柔比星（4．3μmol／ml）时的10.25％（P〈0．01）。细胞超微结构观察及凋亡率测定均显示，合用比单用有更多的骨肉瘤细胞凋亡。TRAIL联合应用多柔比星能显著增强对MG-63的杀伤、抑制增殖及诱导凋亡作用，明显高于单独应用TRAIL组或多柔比星组（P〈0．05），并且这种作用随培养时间延长及药物浓度增加而增强。结论：TRAIL是一种有望应用于临床的新型生物制剂。TRAIL与多柔比星对诱导骨肉瘤细胞凋亡具有协同作用，能高效杀灭骨肉瘤细胞。     

环氧化酶-2抑制剂联合顺铂治疗肺癌的实验研究

目的 探讨环氧化酶-2(COX-2)抑制剂尼米舒利(NIM)与化疗药顺铂(DDP)联合应用治疗肺癌的效应及可能机制。方法 应用MTT试验及流式细胞术分别检测NIM与DDP联用对人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响，裸鼠移植瘤实验检测NIM与DDP联用对A549细胞成瘤性的影响。结果 在一定浓度范围内NIM、DDP均可抑制A549细胞的生长，其抑制作用呈量一效关系。NIM(25umol／L)与DDP合用可增强对A549细胞生长的抑制作用，DDP浓度≥1mg／L时二者有协同或相加作用。NIM及DDP可有效诱导A549细胞凋亡，联用后凋亡率显著增加。裸鼠移植瘤体内实验显示NIM与DDP均可抑制移植瘤生长，联用后抑瘤率显著增高。结论 NIM与DDP联用对A549细胞、肺癌移植瘤有显著的协同抗肿瘤效应，该作用可能是通讨增强对A549细胞增殖的抑制以及诱导其凋亡来实现的。     

核心蛋白聚糖对人肺腺癌细胞生长及转移的抑制作用研究

 目的 探讨核心蛋白聚糖（Decorin）对人肺腺癌细胞株A549细胞生长及转移的影响。方法 利用MTT法检测不同浓度不同时间Decorin对A549细胞的杀伤活性，流式细胞仪检测分析Decorin对A549细胞周期及凋亡的影响，体外黏附实验、侵袭实验和迁移实验检测Decorin对A549细胞黏附、侵袭及迁移能力的影响。结果 Decorin在体外能够抑制A549肿瘤细胞增生，且这种增生抑制作用呈剂量和时间依赖性。Decorin在体外能够诱导A549肿瘤细胞凋亡，作用与浓度和时间相关。Decorin 30 μg／ml在体外作用于A549细胞可使A549细胞黏附率下降，迁移细胞数和侵袭细胞数均减少。结论 Decorin在体外能够抑制人肺腺癌A549肿瘤细胞生长，诱导其凋亡，并通过对肿瘤转移多个步骤的抑制而发挥抗转移作用。     

rhTRAIL对耐顺铂人肺腺癌细胞凋亡的影响

背景与目的TRAIL和TNF、Fas一样均属TNF蛋白超家族成员。研究表明,TNFα可用于克服某些肿瘤细胞的化疗耐药性,而一些化疗药物可上调死亡受体DR的表达,从而促进TRAIL诱导的细胞凋亡。本研究旨在探讨重组人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体蛋白rhTRAIL对耐顺铂人肺腺癌细胞凋亡的影响。方法常规体外培养耐顺铂人肺腺癌细胞株A549/DDP,应用MTT比色法、DPA法、流式细胞术和激酶法,检测rhTRAIL对耐顺铂人肺腺癌细胞株A549/DDP细胞增殖的抑制活性及其诱导细胞凋亡的效应。结果单用rhTRAIL时,低剂量rhTRAIL(6.25、12.5、25.0μg/L)对A549/DDP细胞的生长抑制率和各项凋亡指数(细胞凋亡率、DNA片段化比率和Caspase3活性)均无明显影响,P>0.05,但当rhTRAIL浓度在50μg/L时,细胞生长抑制率、细胞凋亡指数、DNA片段化比率和Caspase3活性均明显增高,各达68.6%、(27.13±0.66)%、(37.4±2.0)%和0.117±0.011(P<0.05)。当3mg/LDDP和rhTRAIL联用时,12.5μg/L的rhTRAIL即可使A549/DDP细胞生长抑制率、细胞凋亡指数、DNA片段化比率和Caspase3活性明显增高,各达30.4%、(19.39±0.54)%、(17.3±4.1)%和0.138±0.009(P<0.05)。结论单用较高剂量的rhTRAIL可以诱导耐顺铂人肺腺癌细胞A549/DDP细胞凋亡。低剂量顺铂可以增强rhTRAIL诱导A549/DDP细胞凋亡的效应。rhTRAIL可望成为耐药性肺癌治疗的一种重要的生物制剂。     

TRAIL与低剂量5-Fu联用高效诱导大肠癌细胞凋亡的研究

目的　探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)与 5 -Fu联用是否存在协同性杀伤大肠癌细胞的作用 ,以及这种杀伤作用的可能机制。方法　常规培养大肠腺癌细胞株HT 2 9。TRAIL、5 -Fu、或 2药联用 2 4h ,采用MTT法测试细胞毒作用 ,应用流式细胞术检测细胞凋亡比例 ,透射电镜下观察亚细胞形态。结果　①HT 2 9细胞对TRAIL不敏感 ,10 0ng/mlTRAIL只能杀伤 4.5 0 %± 0 .2 6%的细胞 ,ID 5 0 >10 0 0ng/ml。细胞对 5 -Fu相对敏感 ,存在剂量依赖性细胞毒效应 ,这种效应主要通过诱导细胞凋亡实现。②TRAIL与阿霉素联用呈现高效协同作用 ,表现为亚毒性浓度TRAIL (10 0ng/ml)与亚毒性浓度5 -Fu(10 0 μg/ml)联用可杀死 60 .0 0 %± 0 .45 %的HT 2 9细胞。③流式细胞术分析及透射电镜观察证实协同性杀伤作用主要通过诱导细胞凋亡实现。结论　大肠腺癌细胞株HT2 9对TRAIL不敏感 ,但TRAIL与亚毒性浓度 5 -Fu联用表现出高效的杀灭肿瘤细胞作用 ,这种细胞毒性作用主要由凋亡介导     

羟基喜树碱联合放射对人肺腺癌细胞协同杀伤作用的实验研究

目的 研究羟基喜树碱联合放射对人肺腺癌细胞的协同杀伤作用。方法 应用四唑盐比色试验（ＭＴＴ）检测细胞抑制百分比,ＤＮＡ琼脂糖电泳检测ＤＮＡ“Ｌａｄｄｅｒ”及流式细胞术检测细胞周期及凋亡峰的比例。结果 羟基喜树碱对该细胞的抑制呈剂量及时间依赖关系,且明显阻滞细胞于Ｓ期,低浓度的羟基喜树碱（１μｇ／ｍｌ）作用４８小时,细胞开始出现凋亡小峰,高浓度的羟基喜树碱（５０μｇ／ｍｌ）作用２４小时就出现明显的凋     

TRAIL蛋白与顺铂协同诱导横纹肌肉瘤细胞凋亡的实验研究

目的探讨肿瘤坏死因子（INF）相关凋亡诱导配体（TRAIL）蛋白和顺铂联合应用对人横纹肌肉瘤细胞生长抑制和诱导凋亡作用。方法将不同浓度的TRAIL作用于培养的人RD横纹肌肉瘤细胞，通过MTT比色法、流式细胞仪检测细胞凋亡和Fas蛋白表达的方法，观察其对横纹肌肉瘤细胞的作用，及其与顺铂协同作用的效果和机制。结果TRAIL浓度为1．0、10．0、100．0ng／ml时，细胞毒性指数分别为18．9％、20．8％和43．5％；顺铂浓度为1．0、5．0、10．0μg／ml时，细胞毒性指数分别为9．8％、23．4％和37．1％。而浓度为100ng／ml的TRAIL与浓度为5μg／ml的顺铂联合作用时，细胞毒性指数明显增加达66．4％，结合FCM分析显示联合应用提高了Fas蛋白的表达，与细胞凋亡率增加相一致。结论TRAIL和顺铂均能有效诱导横纹肌肉瘤细胞凋亡，联合应用具有明显的协同效果。     

肺腺癌细胞DR4基因启动子甲基化与TRAIL敏感性的相关性研究

目的 探讨DR4基因启动子甲基化水平与肺腺癌细胞株对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）敏感性之间的相关性。方法 选取未经5-氮杂-2'-脱氧胞苷（5-Aza-CdR）处理和10 μmol/L 5-Aza-CdR处理3 d后的肺腺癌细胞A549、LTEP-α-2,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,倒置显微镜下观察细胞形态学改变,流式细胞仪检测细胞凋亡率;采用RT-PCR法、免疫印迹法和甲基化特异性PCR（MSP）法分别检测肺腺癌细胞株（A549、LTEP-α-2）DR4基因mRNA、蛋白表达和启动子区甲基化状态。结果 肺腺癌细胞（A549、LTEP-α-2）对低浓度TRAIL高度耐受,提高TRAIL浓度（15.625、31.25、62.5、125、250、500 μg／ml）作用细胞24、48 h后,细胞生长受到不同程度抑制,且呈剂量和时间依赖性;经5-Aza-CdR处理后,TRAIL对肺腺癌细胞的增殖抑制作用均较处理前显著增强（P＜0.05）,倒置显微镜下细胞形态表现出变圆、皱缩甚至脱落等特征。应用5-Aza-CdR处理后,125 μg／ml TRAIL诱导肺腺癌细胞的凋亡率较处理前明显升高（P＜0.05）。A549、LTEP-α-2细胞存在DR4 mRNA及蛋白的低表达,其基因启动子处于甲基化状态;经5-Aza-CdR处理后,肺腺癌细胞中DR4 mRNA及蛋白的表达均显著升高（P＜0.05）,其基因启动子处于非甲基化状态。结论 5-Aza-CdR可以逆转DR4基因启动子甲基化状态,上调基因表达,增强TRAIL诱导肺腺癌细胞凋亡的能力,从而逆转TRAIL耐药。5-Aza-CdR联合TRAIL可能是治疗肺腺癌的一种新策略。     

p73基因过量表达对人肺癌细胞A549凋亡及其化疗敏感性的作用

背景与目的：部分非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）表达野生型p53基因（wild-type p53,wt-p53）,因此在基因治疗中克服这些NSCLC对wt-p53的抵抗机制就非常重要。P53基因家族的新成员p73是p53的同源体,本研究旨在探讨对wt-p53基因治疗抵抗的人肺腺癌细胞A549在外源p73基因转染或联用化疗药后凋亡程度和对化疗药物敏感性的变化。方法：将真核表达重组质粒pcDNA3-HA-p53或pcDNA3-HA-p73α转染入A549细胞,G418筛选,Western blot检测P53或P73α的表达。MTT法分析转染细胞对顺铂和阿霉素的敏感性,用流式细胞术、TUNEL法和DNA片段法分析化疗药作用下转染细胞的凋亡变化,克隆形成实验观察细胞生物学性状的改变。结果：转染p53或p73α基因的A549细胞可以稳定高表达p53或p73α蛋白。转染p73α的A549细胞在原本没有明显抑制和杀伤作用的药物浓度（6．25μmol／L的顺铂或0．25μmol／L的阿霉素）作用下生长明显受到抑制。顺铂的IC50值从22．65μmol／L降至3．75μmol／L,阿霉素的IC50值从4．20μmol／L降至0．06μmol／L。p73能使A549细胞受顺铂和阿霉素诱导的细胞凋亡增加。而p53没有明显作用。流式细胞术显示p73α基因转染后,顺铂诱导的细胞凋亡率从10．6％升高到36．8％（P〈0．01）,阿霉素诱导的细胞凋亡率从13．0％升高到41．1％（P〈0．01）。克隆形成实验显示．p73α基因转染能明显降低顺铂和阿霉素作用后A549细胞的克隆形成数（P〈0．01）。对顺铂和阿霉素的化疗增效倍数分别为2．0和2．4倍。结论：外源性p73基因的导入增加了wt-p53型A549细胞对顺铂和阿霉素等化疗药的敏感性。该作用可能与p73基因能不依赖于p53基因诱导细胞凋亡有关。p73基因可用于治疗wt-p53不能发挥作用的恶性肿瘤。     

氟达拉滨与TRAIL联用诱导肺癌细胞凋亡及 其作用机制

目的：研究氟达拉滨（Fludarabine）在低浓度下与TRAIL联合处理是否能够诱导人肺癌A549细胞发生凋亡,并探讨其作用机制。方法：实验设对照组、Fludarabine组、TRAIL组、Fludarabine和TRAIL联合组,CCK-8法检测Fludarabine与TRAIL联合处理时对A549细胞及人脐静脉内皮细胞（HUVEC,人正常细胞作为对照）增殖活力的影响,流式细胞术检测A549细胞凋亡情况,Western blot法检测凋亡相关蛋白Survivin、Bcl-2、Bcl-xl、caspase-8、caspase-3、JNK和p38的表达情况。结果：25、50 μmol/LFludarabine或50 ng/mL TRAIL单独处理时对A549及HUVEC细胞增殖活力均无明显影响（P均>0.05）,两者联合处理后对A549细胞增殖活力抑制率分别为30.9%和44.9%。Fludarabine或TRAIL单独使用时对A549细胞凋亡无明显影响,联合处理时可使A549细胞凋亡率达到89.3%。与对照组、Fludarabine组和TRAIL组相比,Fludarabine与TRAIL联合处理可使A549细胞中Survivin、Bcl-2、Bcl-xl表达降低（P均<0.05）,促进caspase-8及caspase-3的激活,并能促进JNK和p38的磷酸化（P均>0.05）。结论：Fludarabine与TRAIL联合处理可促进A549细胞凋亡。