中药葛根及同属植物的化学模式识别

应用主成分分析法（PCA）对来源于全国不同产地的野葛及葛属的其它8种植物进行了化学模式识别研究，为葛属植物的药材质量评价及分类提供了依据。     

清瘟解毒片的质量标准研究

目的:研究和修订清瘟解毒片质量标准。方法:采用薄层色谱法(TLC)对清瘟解毒片中的葛根、赤芍、白芷进行定性鉴别;采用HPLC法测定黄芩苷的含量。结果:葛根、赤芍、白芷的TLC鉴别法专属性强,简单可行。HPLC含量测定,黄芩苷在21～1.68 mg.L-1与峰面积成良好的线性关系(r=0.999 9,n=5);黄芩苷的回收率为97.49%,RSD 0.32%。结论:该法能更为有效的控制清瘟解毒片的质量。     

中国十字花科独行菜属植物的叶表皮特征研究

目的:对中国十字花科独行菜属植物进行分类鉴别研究。方法:利用光学显微镜和扫描电镜观察了中国十字花科独行菜属10种植物的叶表皮形态。结果:独行菜属植物气孔器在叶上、下表皮均有分布,气孔类型主要为不等细胞型,其次为无规则型,在少数植物种类中偶见平列型;叶表皮细胞形状为多边形或不规则形,垂周壁一般为平直或弓形、浅波、波状;独行菜属植物在叶表皮特征上具有较强的一致性,同一种植物叶上、下表皮同形或近同形,叶表面仅被单毛或无毛;扫描电镜下叶片角质层通常具有条状波纹,气孔外拱盖内缘通常为浅波状或近平滑。叶表皮细胞形态、垂周壁式样、气孔类型、气孔指数与气孔器大小以及叶片角质层特征等对该属种的区分具有重要的参考价值。结论:叶表皮特征研究可用于中国独行菜属种间分类鉴别研究,为该属药用植物资源的合理应用和开发提供了新的依据。     

星点设计-效应面法优化葛根素提取工艺

目的:采用星点设计-效应面法优化葛根素提取过程中的有关工艺参数。方法:以提取时间、料液比为考察因素,葛根素提取率为指标,分别用多元线性模型和二次多项式模型描述考察指标和两个考察因素之间的数学关系,绘制效应面图,确定较优参数并进行验证实验。结果:确定的最佳提取工艺为:料液比1∶8.88(W/V),提取时间为150 min;二项式拟合的相关系数为0.9977,提取率预测值与理论值偏差0.59%。结论:实验结果与模型预测值相符,该工艺可用于葛根中葛根素的提取。     

RAPD技术在葛属药用植物分类和鉴定中的应用

为探讨葛属植物间的亲缘关系,并为分类和鉴定提供依据,采用ＲＡＰＤ技术对葛属６种植物进行分析,利用ＲＡＰＤ（Ｖｅｒｓｉｏｎ４．０）及ＰＨＹＬＩＰ（Ｖｅｒｓｉｏｎ３．５Ｃ）软件包进行数据处理,ＵＰＧＭＡ法聚类分析得到系统树。结果发现,峨嵋葛与野葛间的遗传距离小,应归并为野葛,野葛与粉葛、山葛间的遗传距离大,粉葛、山葛应独立成种。ＤＮＡ指纹图谱可用于葛属植物间的鉴别。     

大别山野葛根异黄酮超声辅助提取工艺的响应面优化与还原力测定

 目的 确定大别山野葛根异黄酮的超声辅助最佳提取工艺与还原力。方法 在单因素实验的基础上,进行4因素5水平的Box-Behnken中心组合实验设计,利用响应面分析优化工艺条件,并测定优化工艺条件下葛根异黄酮提取液的还原力。结果 大别山野葛根异黄酮300 W功率的超声辅助提取最佳工艺条件为乙醇75%、液料比35 mL·g^-1、处理时间35 min、处理温度50 ℃,此工艺条件下葛根异黄酮得率为24.18%,相对误差仅3.02%;葛根异黄酮还原力的EC₅₀值为0.135 mg·mL^-1。结论 响应面法适用于对葛根异黄酮超声辅助提取得率进行回归分析和参数优化。     

中药葛根及其近缘种的rDNA-ITS序列分析

 目的探讨中药葛根及其近缘种的分类地位及系统发育关系，同时为葛根的指纹图谱鉴别提供分子标记。方法测定并分析葛属3种植物的内转录间隔区(ITS)序列及5.8S-rRNA基因序列。结果测得该属3种植物的片段包括ITS1，5.8S和ITS2全长序列以及18S，26S部分序列。野葛与粉葛的ITS1，ITS2的差异性分别在2.10%和2.09%以内,而山葛与野葛、粉葛在ITS1，ITS2的差异性则分别达到8.14%和12.82%以上。根据ITS序列特征构建的系统树，不同产地的野葛首先聚类，然后与粉葛聚在一起，山葛最后聚类。结论根据分子性状特征，粉葛作为野葛的变种，山葛独立成种较为合理。ITS序列特征是中药葛根鉴别的有效分子标记。     

黄蜀葵花红外指纹图谱的研究

目的:建立黄蜀葵花的红外指纹特征图谱,为其品种的鉴定及品质评价提供新技术.方法:溴化钾压片,采用峰位、相对吸光度的定性分析方法.结果:通过对10批次样品的分析,初步建立了黄蜀葵花的傅立叶变换红外指纹图谱,方法学考察结果显示符合要求,但其反映黄蜀葵花花冠和花萼区别的特征不明显.结论:该方法简便、重复性好、特征性强.     

几种中药提取物和药物对乙醇脱氢酶活性影响的研究

目的：探讨了六种中药水提取物和醇提取物及几种药物对乙醇脱氢酶活性的影响，为中药解酒保肝药物的开发提供酶学依据。方法：选择古方中常用的几味解酒保肝中药及临床常用的药物，应用瓦勒一霍赫（Valle＆Hoch）法体外测定这些药物对乙醇脱氢酶活性的影响。结果：白豆蔻和葛花的水提物、葛花醇提物、市售解酒保肝茶、九宝、葛花王、L-半胱氨酸，三七皂甙等对乙醇脱氢酶有激活作用，激活率分别为2．8％、16．0％、3．3％、40．1％、16．0％、14．3％、30．5％、10．1％。而葛根、三七、甘草、枳棋子、芦荟的水提物和醇提物、白豆蔻醇提物、盐酸雷尼替丁对乙醇脱氢酶的活性有抑制作用。结论：其中，有些药物可以通过提高乙醇脱氢酶活性来降低乙醇浓度，这可能是解酒药的作用机制之一。而其它药物的解酒机制不能单纯从酶学方面解释。     

柴葛解肌汤加减治疗亚急性甲状腺炎热毒炽盛证临床研究

目的:观察柴葛解肌汤加减治疗早期亚急性甲状腺炎的临床疗效。方法:将60例亚急性甲状腺炎热毒炽盛证患者随机分为对照组和治疗组各30例,对照组给予甲泼尼龙片治疗,治疗组给予柴葛解肌汤加减治疗,两组治疗前后分别测血沉、甲状腺功能、全身症状及体征的变化情况等相关指标。结果:治疗组在改善患者全身症状、体征、甲状腺激素水平方面优于对照组(P0.05);两组在降低血沉水平方面比较无明显差异(P0.05);两组在治疗过程中均未发生不良反应事件。结论:柴葛解肌汤加减治疗亚急性甲状腺炎热毒炽盛证安全可靠,疗效显著。     

Using vaginal cytology to assess the estrogenic activity of phytoestrogen-rich herb

To assess the estrogenic activities of synthetic estrogen, synthetic phytoestrogen, Pueraria lobata and three distinct cultivars of Pueraria mirifica, a phytoestrogen-rich herb, a vaginal cytology assay in ovariectomized rats were used. Rats were ovariectomized and treated with DW, estradiol valerate (1 mg/kg BW), genistein (0.25-2.5 mg/kg BW), Pueraria lobata and Pueraria mirifica (10-1,000 mg/kg BW) for 14 days. The vaginal cytology was checked daily and the uteri were dissected and weighed at the end of treatment or post-treatment periods. The treatments of DW, genistein and Pueraria lobata did not influence the vaginal epithelium, but the injection of estradiol valerate induced a vaginal cornification from day-3 of treatment to day-14 of post-treatment period. The occurrence of vaginal cornification after treatment and the recovery after the cessation was dependent on dosages and cultivars of Pueraria mirifica. The increments of uterus weight in all rats agreed with the cornification of vaginal epithelium. Although both uterotropic and vaginal cytology assays can be used to assess the estrogenic activity of phytoestrogen-rich herb, however, using vaginal cytology assay has two advantages: (1) we do not need to kill the animals and (2) we can follow up the recovery after the cessation of treatment.     

响应面分析法优化葛根中异黄酮提取工艺

目的:优选葛根中异黄酮的提取工艺.方法:以葛根异黄酮为评价指标,通过响应面分析法优化葛根异黄酮的提取工艺,并对最佳提取工艺进行工艺验证.结果:葛根异黄酮的最佳提取工艺为65％乙醇,超声提取28 min,料液比1∶29,异黄酮的提取率可达4.87％.结论:采用响应面分析法优化对葛根异黄酮提取条件进行优化合理可行.     

山西产葛根总黄酮及3种异黄酮含量的测定

目的:测定山西产葛根总黄酮及3种异黄酮的含量。方法:紫外分光光度法测定葛根总黄酮的含量,检测波长250nm。高效液相色谱法测定葛根3种异黄酮的含量,色谱柱为Uvis-201(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇(A)-水(B)梯度洗脱,流速为1.0mL/min,柱温为室温;检测波长250nm。结果:葛根总黄酮在4.32-21.60μg/mL范围内线性关系良好,平均回收率为99.20%,RSD为1.57%;葛根素、大豆苷、大豆苷元的进样量分别在0.2124-4.2480μg、0.1207-2.4140μg、0.0883-1.7660μg范围内呈良好的线性关系,平均回收率分别为99.96%、99.02%、99.12%,RSD分别为1.68%、2.50%、2.19%。结论:本方法简单准确,重复性好,适用于葛根总黄酮及3种异黄酮的含量测定。     

葛根及同属植物微量元素的聚类分析

本文报道了不同产地野葛及同属8种植物的微量元素,并作了聚类分析,为葛根资源利用及分类提供依据。     

A comparative study on aqueous root extracts of Pueraria thomsonii and Pueraria lobata by antioxidant assay and HPLC fingerprint analysis

The roots of Pueraria thomsonii and Pueraria lobata are officially recorded in Chinese Pharmacopoeia under the same name Radix Puerariae. However, the aqueous root extract of Pueraria lobata showed more potent antioxidant activity than that of Pueraria thomsonii. A qualitative HPLC method was developed to compare the chemical profiles of Pueraria thomsonii and Pueraria lobata, which revealed four major common peaks (daidzein 1, daidzin 2, puerarin 3 and 5-hydroxypuerarin 4) and two major different peaks (3-hydroxypuerarin 5 and 3'-methoxypuerarin 6) in their chromatograms. Semi-quantitative analysis showed that the contents of 1-3 in Pueraria lobata are about three, three, and five times higher than those of Pueraria thomsonii, respectively. The higher contents of isoflavonoids in Pueraria lobata were inferred to be responsible for its more potent antioxidant activity as compared with that of Pueraria thomsonii. The HPLC method developed in this study and chemical markers 1-6 can be used for the rapid identification and evaluation of Radix Puerariae herbs and their aqueous supplements, and the results of this investigation support the use of Pueraria lobata and Pueraria thomsonii in the clinic application and as dietary supplement, respectively.     

山东栽培瓜蒌果皮超微形态的初步研究

目的:为山东11种类型栽培瓜蒌的分类提供果皮表面超微形态的依据。方法:采用扫描电子显微镜进行观察和比较。结果与结论:山东不同类型的栽培瓜蒌果皮的表面特征具有统一性和多样性,可作为栽培瓜蒌鉴别和分类的参考依据。     

Hairy root induction and in vitro cultivation of Pueraria lobata willa. ohwi]

OBJECTIVE: To study the hairy root induction and hormone-free in vitro liquid cultivation of Pueraria lobata (Willd) Ohwi. METHOD: Co-cultivation of super-virulent Agrobacterium rhizogenes R1601 with P. lobata leaves in vitro. RESULTS: Hairy roots of rapid growth, high branches and plagiotropism developed vigorously on the surface of leaves, exhibiting rapid growth and resistance to kanamycin in hormone-free medium in vitro. CONCLUSION: A method of hairy root induction with A. rhizogenes as well as a system hairy root liquid cultivation in vitro for P. lobata have been established.     

黄芪葛根配伍对糖尿病大鼠脂肪组织AMPK信号通路的影响

目的探讨黄芪与葛根配伍对糖尿病脂肪中腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路的作用,明确其调控血糖血脂机制。方法将86只SPF级SD雄性大鼠按照随机数字表分成6组:正常组、模型组、金芪降糖组、黄芪组、葛根组、黄芪葛根配伍组,正常组11只,其余各组15只大鼠。一次性腹腔注射2%STZ(46 mg/kg)造模,同日各组分别予金芪降糖混悬液1.47 g/kg、黄芪2.7 g/kg、葛根1.35 g/kg、黄芪葛根汤4.05 g/kg灌胃,给药30 d。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测脂联素(APN)、葡萄糖转运体4(GLUT-4),实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)检测脂联素受体1(AdipoR1)、脂联素受体2(AdipoR2)、AMPK、GLUT-4、过氧化物酶增殖体激活受体-α(PPARα)、PPARγmRNA。结果与正常组比较,模型组大鼠APN、GLUT-4水平降低,AdipoR1、AdipoR2、AMPK、GLUT-4、PPARα、PPARγmRNA表达减少(P<0.05)。黄芪、黄芪与葛根配伍能升高模型大鼠APN、GLUT-4水平(P<0.05);黄芪、葛根及两药配伍能增加AdipoR1(葛根、黄芪与葛根配伍除外)、AdipoR2、AMPK、PPARα(葛根除外)、PPARγ、GLUT-4mRNA表达(P<0.05),黄芪促进AdipoR2、PPARαmRNA表达的作用优于两药合用,黄芪与葛根配伍调节AMPK、PPARγ、GLUT-4mRNA表达的作用优于单一用药(P<0.05)。结论黄芪、葛根及其配伍调节血糖血脂与调控糖尿病大鼠脂肪组织AMPK信号通路有关,黄芪葛根配伍调控血糖、血脂作用优于单一用药,可能与其促进APN、AMPK、GLUT-4、PPARγmRNA表达有关。     

广西鸡屎藤属6种药用植物的生药学研究

目的：为准确区分广西的鸡屎藤属类生药。方法：按常规生药鉴定。结果：叶的质地、有无毛茸、毛茸的性质和花序的形态;有无非腺毛和石细胞以及它们的大小、形状和表面特征,叶表皮的角质纹理、细胞外壁突起情况,次生木质部的发育情况,含晶细胞和木纤维的形状及分隔等显微特征均有明显区别。结论：以上特征可作为种间区别。     

安徽贝母属植物的叶表皮形态研究

目的：为安徽省贝母属植物的系统分类提供叶表皮形态依据。方法：利用光学显微镜和扫描电镜。结果：除铜陵黄花贝母的下表皮细胞类似平行四边形外,其他种叶表皮细胞表面观均为长方形或长条形,垂周壁平直、浅波状、波状或深波状。气孔器为Allium型,仅分布于下表皮,椭圆形,单个随机分布,部分种保卫细胞两极有T形加厚,除祁门贝母的气孔器内腔不明显外,其他种均具有明显的内腔,气孔器外拱盖内缘波状、浅波状或近平滑。角质层纹饰鳞片状、片状、颗粒状或突起呈疣状,其中皖江贝母角质层具条状隆起。表皮细胞的垂周壁呈凸缘状或凹陷沟状,部分种的平周壁凹陷或凸起。结论：叶表皮细胞的垂周壁式样、气孔器外缘、角质层、叶表皮细胞壁等叶表皮特征在种间均有一定的差异,可以为贝母属植物的生药鉴定、属内种间的划分和系统演化关系的探讨提供实验依据。