血清蛋白质指纹谱对结直肠癌根治术后复发转移的诊断价值

目的应用血清蛋白质指纹谱筛选与结直肠癌根治术后复发转移相关的特异性蛋白标志物。方法收集结直肠癌根治术后经至少2年随访、明确有复发转移的141例患者手术前后的血清标本,以及无复发转移的109例患者手术前后的血清标本,应用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱仪(SELDI-TOF-MS)检测所有患者的血清蛋白质指纹谱,并采用化学发光法测定血清CEA含量。筛选出与术后复发转移相关的血清标志蛋白,应用ROC曲线评价其对结直肠癌根治术后复发转移的诊断效能并与CEA进行比较。结果分析显示,在根治术后出现复发转移的结直肠癌患者中,M/Z为7763的血清蛋白不仅在术前表达增高,在明确有复发转移时仍呈显著高表达。该蛋白预测复发转移的灵敏度为92.0%,特异度为83.9%,约登指数指数为0.759,而CEA预测复发转移的灵敏度为52.0%,特异度为82.3%,Youden指数0.343。结论M/Z为7763的血清蛋白可能是结直肠癌根治术后复发转移的特异性标志蛋白,有望用于术后复发转移的监测。     

血清蛋白质指纹谱对结直肠癌的鉴别诊断价值研究

目的探讨应用血清蛋白质指纹谱鉴别结直肠癌与其他常见恶性肿瘤的效能。方法应用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测58例结直肠癌、30例结直肠良性疾病、90例其他恶性肿瘤(乳腺癌、胃癌、食管癌、肝癌、肺癌及肾癌各15例)患者及57例正常人的血清蛋白质指纹谱,建立结直肠癌鉴别诊断最优分类树模型。再从同期住院或健康体检人群中随机抽取以上诸病种及正常人各10例组成测试组,对鉴别诊断模型进行盲法验证。结果成功建立了由16种不同M/Z蛋白组成的结直肠癌鉴别诊断模型,该模型在测试模式下对结直肠癌的鉴别诊断准确率为83.8%,敏感度和总特异度分别为86.2%、83.1%,盲法验证总准确率为74.4%。结论应用血清蛋白质指纹谱技术建立的结直肠癌鉴别诊断模型具有较高的敏感度与特异度。     

利用血清中蛋白质组构型鉴定Dukes A期结直肠癌

目的通过对血清蛋白质组的质谱分析,寻找用于Dukes A期结直肠癌鉴定的蛋白质组构型。方法随机取10例Dukes A期及68例Dukes B、C、D期结直肠癌患者的血清作为预备组,另取10例Dukes A期及68例Dukes B、C、D期结直肠癌患者的血清作为检测组。预备组血清与金属亲和表面(IMAC3)芯片结合后,用蛋白芯片仪读取数据,分析可得到用于区分Dukes A期和Dukes B、C、D期结直肠癌患者的树状分类规则,并用双盲法测试检测组以证实其准确性。结果预备组中两类血清蛋白质在质荷比为8320、8604、8867、15872Da等4处含量有显著差异,得到树状分类规则,其分类准确率为97．4％(76／78),灵敏度为100％(10／10),特异性为97．1％(66／68);对检测组进行双盲检测,结果显示准确率为94．9％(74／78),灵敏度和特异性分别为100％(10／10)、94．1％(64／68)。结论该方法可快速、准确检测Dukes A期结直肠癌,灵敏度、特异性高。     

宫颈浸润癌患者血清蛋白质组的特征研究

目的探讨宫颈浸润癌患者、宫颈良性病患者及健康女性血清蛋白质组的差异,以期发现诊断宫颈浸润癌的生物学指标。方法采用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱仪(SELDI-TOF-MS)检测宫颈浸润癌患者的血清蛋白质谱图,利用配套软件进行蛋白峰值鉴定、聚类并建立分类树模型。以43例宫颈浸润癌患者、32例宫颈良性病患者及71例健康女性作为训练组,其血清与IMAC-Cu芯片结合检测差异蛋白质,通过软件分析得到分类树模型,以年龄匹配的20例宫颈浸润癌患者、20例宫颈良性病患者及20例健康女性作为测试组进行独立双盲验证。结果共识别出46种差异蛋白,其中由质荷比为3888、7763、6631的3种蛋白构成的分类树模型的分类准确率为95.9%(140/146),敏感度为95.3%(41/43),特异度为98.1%(101/103),经双盲验证其诊断敏感度和特异度分别为90.0%(18/20)和87.5%(35/40)。结论比较蛋白质组学研究发现,3种蛋白质含量与宫颈癌密切相关,有可能成为宫颈癌诊断的生物标志物。     

肺癌患者血清蛋白质组的特征研究

目的比较肺癌患者、肺良性病患者及正常人血清蛋白质组的差异,以期发现可用于肺癌诊断的生物学指标。方法采用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)蛋白芯片技术,检测89例肺癌患者、64例肺良性病患者及68例健康人血清,筛选出有分类意义的差异蛋白并建立分类树模型。再从同期住院或健康体检人群中随机抽取肺癌患者、肺良性病患者及健康人各30例组成测试组,对诊断分类树模型进行盲法验证。结果比较三组血清,共发现39种差异蛋白质(P<0.05),由其中质荷比(M/Z)为4485、5252、5807、5908、5969、6113、6625、8946、8998、9137、9183、9298、9498、13878、15128、15867、16081的17种蛋白建立的诊断分类树模型,对肺癌、肺良性病、健康人的分类准确率为98.2%(217/221),敏感度为98.9%(88/89),特异度为97.7%(129/132),双盲验证的敏感度和特异度分别为90.0%(27/30)和93.3%(56/60)。结论利用SELDI-TOF-MS技术建立的肺癌诊断分类树模型具有较高的敏感度和特异度,可用于肺癌的快速诊断。     

乳腺癌患者血清蛋白质组的特征研究

目的比较乳腺癌患者、乳腺良性病患者及健康女性血清蛋白质组的差异,以期发现可用于乳腺癌诊断的生物学指标。方法采用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)蛋白芯片技术,检测46例乳腺癌患者、40例乳腺良性病患者及40例健康女性血清,筛选出有分类意义的差异蛋白并建立分类树模型。再从同期住院或健康体检人群中随机抽取乳腺癌患者、乳腺良性病患者及健康女性各10例组成测试组,对诊断分类树模型进行独立双盲验证。结果比较三组血清,共发现22种差异蛋白质(P<0.05),由其中质荷比(M/Z)为3162、3960、4213、4526、5908、5386、11383、11735、13892、6007的10种蛋白建立的诊断分类树模型,对乳腺癌、乳腺良性病、健康女性的分类准确率为98.4%(124/126),灵敏度及特异度分别为100.0%(46/46)和97.5%(78/80),经独立双盲验证该模型诊断乳腺癌的准确率、灵敏度及特异度分别为83.3%(25/30)、80.0%(8/10)、85.0%(17/20)。结论利用SELDI-TOF-MS技术建立的乳腺癌诊断分类树模型具有较高的敏感度和特异度,可用于乳腺癌...     

应关注蛋白质组学研究在结直肠癌复发转移中的临床应用

结直肠癌是临床常见的恶性肿瘤,随着人们生活水平的提高和生活方式的改变,其发病率呈逐年上升趋势,且整体治疗水平仍不尽如人意.临床上30%～40%的患者在就诊时已属中晚期,实施根治性切除术后肿瘤的复发转移率仍高达40%～70%[1-2].     

SELDI-TOF-MS技术在胃癌早期诊断中的应用

胃癌是我国最常见的消化道肿瘤,占恶性肿瘤死亡率的第一位。早期发现、早期诊断、早期手术是改善胃癌预后的主要手段。目前对胃癌进行早期诊断的方法尚存在诸多弊端,如内窥镜检查会带来一定的痛苦,现已发现的胃癌相关标志物主要有癌胚抗原和糖链抗原19—9、125等,其敏感性、特异性均很低,尚不足于用来进行早期诊断。     

应用SELDI蛋白芯片技术对肝炎后肝硬化早期癌变的蛋白质组学研究

目的探讨肝炎后肝硬化早期癌变的血清蛋白质组学特点。方法应用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱仪(SELDI-TOF-MS)结合铜离子蛋白芯片检测62例肝炎后肝硬化与100例Ⅰ-Ⅱ期(T1-2N0M0)肝癌并肝硬化患者的血清蛋白质谱,采用Biomarker Wizard和Biomarker Patterns软件分析并建立分类树模型,并对分类树模型的诊断效能进行验证。结果对肝炎后肝硬化与肝癌并肝硬化患者的血清蛋白质谱进行分析,建立了由4种差异蛋白组成的分类树模型。采用该分类树模型在学习模式下对100例肝癌伴肝硬化、62例肝炎肝硬化患者进行分组,准确率为99.4%(161/162),诊断肝癌伴肝硬化的灵敏度和特异度分别为99.0%(99/100)、100.0%(62/62),在测试模式下对上述患者进行分组,其准确率为94.4%(153/162),诊断肝癌伴肝硬化的灵敏度和特异度分别为95.0%(95/100)、93.5%(58/62)。结论应用SELDI蛋白芯片技术筛选肝炎后肝硬化早期癌变具有方便、快捷、灵敏度高、特异性强的优点。     

食管癌相关血清小分子蛋白谱的初步研究

目的 分析食管鳞癌血浆蛋白表达谱改变,筛选恰当的蛋白分类芯片用于建立食管鳞癌血清标志诊断模型.方法 血浆蛋白经离子交换,按不同pH值范围预分离为6个组份,各组份分别在弱阳离子交换型和铜离子螯和型等两类蛋白芯片上分选与富集,经表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱技术分析食管鳞癌差异表达蛋白.分析5例食管鳞癌和2例性别、年龄匹配的对照血清,初步获得弱阳离子交换型和铜离子螯和型蛋白芯片表达图谱.结果 血浆蛋白经不同离子交换柱预分离和不同蛋白分类捕获芯片富集,在相对分子质量0～50 000范围内,弱阳离子交换型和铜离子螯和型蛋白芯片上检测到近百种差异蛋白峰,其中部分差异峰具有统计学意义(P＜0.05).结论 血浆蛋白经不同pH区段预分离和分类捕获后可降低高丰度蛋白干扰,提高负载疾病信息的低丰度蛋白/肽段显示度.弱阳离子交换型和铜离子螯和型蛋白芯片结合蛋白可呈现食管癌术前与术后,以及食管癌和健康对照者的差异表达谱.初步研究提示,食管癌外周血浆存在肿瘤候选标志分子(谱).     

卵巢癌患者血清比较蛋白质组学研究

目的探讨应用蛋白质质谱分析鉴定卵巢癌生物标志物的可行性。方法应用美国CipherCen公司金属亲和表面(IMAC3)芯片和蛋白芯片仪检测24例卵巢癌患者、56例正常人血清中的蛋白质相对含量。结果24例卵巢癌患者与56例正常人血清蛋白质在质荷比为4kb-10kb间有6种蛋白质含量有显著差异。用4472Da的血清蛋白质作为生物标志物可将正常人与卵巢癌患者准确地分组。在学习模式下24例卵巢癌患者被正确诊断，56例正常人均被正确识别；在检测模式下24例卵巢癌患者中有23例患者被正确诊断，56例正常人均被正确识别，准确率为98．8％(79／80)，灵敏度和特异性分别为95．8％(23／24)、100％(56／56)。结论该方法可快速、准确检测卵巢癌，灵敏度和特异性高。     

应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱研究细菌性血流感染的血清多肽指纹图谱

目的 应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱系统(MALDI-TOF MS)分析金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌引起的血流感染血清多肽指纹图谱,寻找差异多肽峰并建立相应的诊断模型.方法 建立ICR小鼠金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌血流感染模型,收集血清标本,经弱阳离子交换磁珠纯化,MALDI-TOF MS检测及BioExplorer生物软件分析研究金葡菌感染组与正常对照组、大肠埃希菌感染组与正常对照组间血清多肽指纹图谱.结果 比较金葡菌感染组与正常对照组发现,表达上调的多肽有6个,表达下调的多肽有7个,表达呈先上调后下调的多肽有8个.比较大肠埃希感染组与正常对照组发现,表达下调的多肽有5个,表达呈先下调后上调的多肽有4个,表达呈先上调后下调的多肽有8个.结论 利用MALDI-TOF MS技术和BioExplorer软件研究大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌血流感染的血清多肽,可以发现感染组与正常对照组间的差异多肽并有效地建立这两种细菌感染的诊断模型,对于细菌性血流感染的诊断具有一定的价值.     

结直肠癌患者血清与LoVo细胞、HT29细胞培养液比较蛋白质组学研究

目的对LoVo细胞、HT29细胞培养液与结直肠癌患者血清中特异蛋白质组进行对比研究。方法应用美国CipherGen公司金属亲和表N(IMAC3)芯片和蛋白质芯片仪检测LoVo细胞培养液、HT29细胞培养液与结直肠癌患者血清。结果结直肠癌患者血清与LoVo细胞培养液中都含有质荷比为11731Da的蛋白质。HT29细胞培养液与结直肠癌患者血清中无相同的蛋白质。结论LoVo细胞培养液与结直肠癌患者血清中有相同的蛋白质。