猪胰抑肽酶的分离和鉴定

<正> 猪胰脏除分泌多种用以消化食物蛋白质的蛋白水解酶外,还分泌与蛋白酶共存的酶抑制剂,它们相互制约处于动态平衡,发挥重要的生物调节作用。近年来报道,一些外源性蛋白酶抑制剂能抑制癌细胞蛋白酶的分泌,遏阻恶性肿瘤的生长,还可用于外科手术,减少手术的输血量等。本文介绍采用纤维素离子交换层析从猪胰脏分离出胰蛋白酶抑制剂(商品名为抑肽酶)的方法。一、材料与方法1.材料:新鲜猪胰脏购于市场。CM-纤维素和DEAE-纤维素为上海试剂四厂产品。胰蛋白酶,Difco进口分装。N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐(BAEE)上海东风试剂厂生     

猪胰抑肽酶的部分性质研究

<正> 作者曾报道过从新鲜猪胰脏中经磷酸-乙醇抽提、硫酸铵盐析、CM-Cellulose和DEAE-Cellulose离子交换层析分离出两种组份的抑肽酶。在此基础上对该两组份猪胰抑肽酶的部分性质进行了分析测定。结果表明它们为热稳定性很高,pH稳定范围较广,分子量较小,氨基酸组成基本相同,分子大小略有差异,对胰蛋白酶具有较强抑制作用的活性蛋白质。     

猪胰激肽释放酶的纯化

<正> 激肽释放酶[Kallikein,EC 3,4,4,21]是一种糖蛋白,以下简称 K。K 在人体和哺乳类动物体内起着十分重要的生理作用,它能使毛细血管和小动脉管舒张及通透性增加。使冠状血管动脉、脑、视网膜处的血流供应量增加。适用于高血压,冠状血管及动脉血管硬化等症。对心绞痛,血管痉挛,肢端感觉异常,闭塞性血     

猪胰激肽释放酶的纯化

激肽释放酶(Kallikrein)是一种糖蛋白,以下简称K。K在人体和哺乳类动物体内起着十分重要的生理作用,它能使毛细血管和小动脉管舒张及通透性增加。使冠状血管动脉、脑、视网膜处的血流供应量增加。适用于高血压、冠状血管及动脉血管硬化等症。对心绞痛、血管痉挛、肢端感觉异常、闭塞性血栓性脉管炎、冻疮及创伤等症也有作用。 K广泛存在于人和哺乳动物的血浆和组织中。人们常用新鲜胰脏、胰酶、脱脂胰粉、颌下腺及男人尿等作为原料来制备K。。 K的分离方法有有机溶剂分级沉淀法,吸附法,离子交换法,DEAE-纤维素层析法,制备     

高纯度猪胰激肽释放酶的制备

本文介绍了高纯度猪胰激肽释放酶(以下简称K)的分离、纯化方法。按此工艺得到的激肽释放酶Ⅰ(以下简称K_I)和激肽释放酶Ⅱ(以下简称K_(II))纯度分别为1220Ku/mg和1720Ku/mg,K的总收率在45％左右。观察了K对离体豚鼠回肠的收缩效应,该工艺程序简单,适用于较大规模的制备。此外比较了牛肺胰蛋白酶抑制剂和慈菇蛋白酶抑制剂对K的抑制作用。1925年,Frey发现狗尿中有一降血压物质,后被Werle证实此物质为激肽释放酶。由于该酶具有非常重要的生理功能,而受到广泛重视。为了深入研究该酶特性,有必要制备高纯度的酶制剂。Kutzbach,Zuber;Fiedler和Kira等各自制备的酶制剂纯度在1200Ku～2300Ku/mg之间。我们在过去猪胰激肽释放酶纯化的基础上(纯度400Ku/mg)进一步采用DEAE-Sepharose-Cl-6B层析分离出K_I和K_(II),纯度分别为1220Ku/mg和1720Ku/mg,总收率在45％左右。经离体豚鼠回肠收缩效应测定,结果与日本K参照品相仿。     

高纯度猪胰弹性蛋白酶的简易制备法

<正> 弹性蛋白酶(以下简称弹性酶)可从猪、牛等哺乳动物胰脏提取,也可从胰酶或1:300胰蛋白酶制备。1949年Balo和Davis首先从猪胰中分离出弹性酶,以后Banga和Lewis     

从猪胰制备甘油三酯测定用脂肪酶

从猪胰制取测定甘油三酯(TG)的脂肪酶,其活性大于2.7×10~4u/mg;比活为5.5×10~4u/mg 蛋白;酶作用的最佳 pH、最适反应时间及最适温度分别为7.5～10.0、15min 及37～50℃。聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳测得分子量为34700及20900;以橄榄油为底物的米氏常数为0.77%。     

猪胰羧肽酶A和B的分离与纯化

<正> 哺乳动物的胰脏富含羧肽酶原,经胰蛋白酶激活后形成活性酶,羧肽酶是一类专一性水解多肽或蛋白质C-端的重要蛋白水解酶。羧肽酶A主要水解由芳香族氨基酸为游离C-端的肽键;羧肽酶B主要水解由碱性氨基酸为游离C-端的肽键。至今羧肽酶A的研究已较为深入,其氨基酸组成、一级结构与空间构象均已基本搞清。Anson在1937年已结晶了羧肽酶A。最近本文作者在猪胰蛋白水解酶综合利用的过程中分离、纯化了羧肽酶A和B,并使之固相化。本文对此工作作一报道。     

猪胰激肽释放酶的酶学性质

<正> 激肽释放酶为内切性蛋白水解酶,具有重要的生理、药理作用,因此该酶在性质和应用研究的进展极受关注。本文仅对猪胰激肽释放酶的酶学性质作一简要概述,供参考。哺乳动物的组织激肽释放酶主要分布在动物的胰脏、颌下腺、唾液、尿之中。而以胰脏     

猪胰“三酶”联产工艺的研究

本文报道一种综合利用猪胰脏提取“三酶”(弹性蛋白酶、激肽释放酶和胰酶)的新方法。猪胰经提取、盐析、透析及DEAE纤维素柱层析即可将“三酶”分离。其酶的产率和酶活力均达到或超过国内现有单产工艺的指标,产品可作原料药使用。此法简单易行,分离效果好,不需昂贵仪器设备及进口试剂,为综合利用有限的猪胰资源提供了一条良好的途径。     

大鼠胸腺内猪胰岛异种移植的实验研究

目的:观察胸腺内和肾包膜下胰岛移植对移植物存活时间的影响。方法:我们应用胰管内注射胶原酶的方法分离出猪胰岛为供体,以W istar糖尿病大鼠为受体,通过移植物的存活期来观察大鼠胸腺内及肾包膜下猪胰岛异种移植的效果。结果:单纯胸腺内移植的存活期(6.0±3.6)d,长于单纯肾包膜下组的(5.3±1.8)d。移植的同时加用抗大鼠胸腺淋巴血清(ATS),胸腺内移植+ATS的存活期为(21.7±9.1)d,明显长于肾包膜下移植+ATS组的(13.7±3.2)d。结论:胸腺可能为胰岛移植的理想部位,而且在诱导免疫耐受中具有重要作用。     

猪胰酶、胰岛素与胰蛋白酶抑制剂的联产

目的 以猪胰浆为原料,联产胰酶、胰岛素(INS)与胰蛋白酶抑制剂(TI).方法 猪胰浆用中性醇处理,得到胰渣和上清液(Ⅰ);胰渣经过聚乙二醇-6000沉淀得到胰酶;Ⅰ用酸沉淀去掉杂质后再沉淀得到INS粗品和上清液(Ⅱ);INS粗品经DE-AE-Sepharose FF层析纯化;Ⅱ经Trypsin一壳聚糖多孔珠亲和吸附得到TI.结果 胰酶的回收率为15.1%4±0.6%,主要成分胰蛋白酶、胰脂肪酶和胰淀粉酶的含量分别为(5.13±0.17)×103、(38.47±1.16)×103、(58.27±2.49)×103U·g-1;INS的回收率为73.7±9.0 mg·kg-1(n=3),效价为27.25±0.34U·mg-1,并具有完整的生物学活性;TI比活为102.59 U·mg,-1,产率为33.86 U·g-1.结论 胰酶、INS与TI的联产极大地提高了胰脏的利用率.     

两种微囊化成猪胰岛的体外培养比较

通过体外培养比较两种不同微囊化成猪胰岛的功能。方法将分离的成猪胰岛分成三组;对照组、琼脂糖微囊组和海藻酸钠微囊组,并置于ＣＯ２培养箱中培养６天。结果三组胰岛细胞培养液中胰岛素水平在培养第２天和第４天时没有显著差异,第６天时间对照组与两组微囊化组比较有显著差异,而后两组无明显差异。     

小型猪胰肾联合移植术麻醉管理的实验研究

目的:研究小型猪胰肾联合移植术合适的麻醉管理方法,了解术中受体血流动力学变化情况.方法:20头小型猪分别作为供、受体配对进行胰肾联合移植,氯胺酮基础麻醉后行气管插管全身麻醉,监测动脉压、中心静脉压、心率.术中根据血流动力学情况调节输液速度,吻合血管开放后加快补液,并输入采自供体的血液.结果:受体在髂总静脉阻断后动脉压和中心静脉压明显降低、心率增快:髂总静脉开放后动脉压和中心静脉压增高,心率减慢;髂总动脉阻断后动脉压和中心静脉雎增高,而开放后动脉压和血流动力学中心静脉压明显降低、心率增快;吻合血管开放后动脉压和中心静脉压明显降低,心率增快.结论:加强受体循环系统的监测和管理是保障胰肾联合移植手术成功的关键.     

去除蛋白水解酶的猪胰激肽释放酶的制备

<正> 激肽释放酶(即血管舒缓素)能从激肽原中释放激肽,激肽具有扩张周围血管、降低血压的生理功能,因此该酶被广泛地应用于高血压、冠状血管及动脉硬化等症的预防和治疗。所以对该酶性质和应用的研究也受到有关方面的重视。猪胰激肽释放酶(以下简称胰K)多数是从猪胰自溶物或丙酮粉中提取,也可从胰酶中提取。提取、纯化方法甚多,如重金属或硫酸铵沉淀;硅胶或离子交换树脂吸附;有机溶剂分级;离子交换树脂层析;亲和层析法等等。工业水平的提取、纯化一般胰K纯度在100ku/mg以上。     

从猪胰中直接提取分离糜蛋白酶和胰蛋白酶

从猪胰中提取糜蛋白酶和胰蛋白酶的制备方法,在实验室中曾有报道,但还未用于生产。1981年,我们试用CM纤维素从猪胰中直接提取分离出糜蛋白酶和胰蛋白酶,收率和活力都较满意。收率均在0.05％以上,不低于牛胰中提取的糜、胰蛋白酶收率。猪糜蛋白酶水解NTH(烟酰-L-酪氨酰肼)的活力高于牛糜蛋白酶2～3倍,猪胰蛋白酶水解BANA(N-苯甲酰-L-精氨酸-β-萘胺)的活力与牛胰蛋白酶相近。猪糜、胰蛋白酶水解酪蛋白的活力符合     

试论早期教育的可能性

儿童是祖国的未来 ,民族的希望。儿童能否在德、智、体、美各方面获得良好的发展 ,与其早期教育有着密切的关系。一、何为早期教育　所谓早期教育 ,是指入小学之前所施行的教育。儿童智力的发展是在素质、环境、儿童保健、健康教育统一作用中实现的。生理素质是智力发展的前提 ,要提高智力水平 ,要培养出健全发展的2 1世纪的一代新人 ,就得具有良好的素质条件。根据大量科学研究成果表明 ,生理素质的培养是从母亲妊娠开始的。因此 ,早期教育应从整个胎儿期开始。二、早期教育的可能性　幽居在母亲子宫内的胎儿并不是闭目塞听的混沌一团。其…     

从提取胰岛素后的猪胰残渣生产核酸氨基酸糖衣片

核酸氨基酸糖衣片是以提取胰岛素后的猪胰脏为原料,用酶解法获得的核酸降解物和氨基酸为主要成份,加上其他原料配制而成的,为治疗慢性气管炎、神经衰弱、过敏性鼻炎等疾病的一种生化新药。临床试用疗效良好,副作用少。经天津市卫生局批准,于1977年初由天津第二生化制药厂(即天津第二食品加工厂制药车间)投产。本文着重介绍由提取胰岛素后的猪胰脏制备核酸氨基酸糖衣片的生产工艺及成份分析,并扼要介绍初步药理实验结果和临床试验情况。     

六种因子对猪胰弹性蛋白酶激活水平的影响

<正> 弹性蛋白酶(Elastase、EC3.4.4.7)简称弹性酶,是由哺乳动物胰脏合成和分泌的一种肽链内切酶。它具有阻止主动脉和冠状动脉斑块形成,提高血中cAMP含量等作用。临床上可用于预防和治疗高血脂症、动脉粥样硬化,治疗老年性慢性支气管炎、脂肪肝和高血压等症。随着其疗效的进一步肯定,卫生部已颁发部颁标准。由于弹性酶是以酶原形式存在于胰脏的腺泡组织中,经胰蛋白酶或肠激酶激活后才成为活性酶,所以在弹性酶的制备工艺中,对酶原