陈发性睡眠性血红细胞尿患者测定CD55,CD59的意义

本文采用流式细胞技术测定６例陈发性睡眠性血红蛋白尿（ＰＮＨ）,１１例再障－ＰＮＨ综合征,１０例再生障碍性贫血（ＡＡ）患者外周血淋巴细胞膜ＣＤ５５和ＣＤ５９标记率。６例ＰＮＨ患者均表现出ＣＤ５５和ＣＤ５９下降（Ｐ〈０．０１）,１１例再障－ＰＮＨ综合征患者也表现出ＣＤ５５和ＣＤ５９下降（Ｐ〈０．０５）;１０例再生障碍性贫血患者中８例ＣＤ５５和ＣＤ５９标记率在９５％以上,２例标记率在８５％以上,与对照组     

CD55、CD59免疫表型对PNH相关疾病诊断的观察研究

目的探讨CD55、CD59免疫表型与PNH及相关疾病诊断及鉴别诊断价值。方法用流式细胞仪检测PNH及相关疾病CD55、CD59免疫表型。结果发现PNH患者血细胞膜表面与糖基磷脂酰肌醇（GPI）锚连蛋白有关抗原CD55、CD59表达减低或缺乏,再障-PNH综合症CD55、CD59也呈不同程度降低。其它贫血血细胞膜表面CD55、CD59抗原表达正常。结论CD55、CD59GPI锚连蛋白分子表达可做PNH以及再障-PNH综合症诊断和鉴别诊断的最敏感、最准确的检测指标。     

外周血细胞膜上CD55和CD59缺陷对鉴别诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿与贫血的意义

目的 探讨患者外周血细胞膜上CD55和CD59缺陷对鉴别诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿(parosysmal nocturnal hemoglobinuria,PNH)与贫血(anemia)的意义.方法 采用荧光素标记的CD55和CD59单克隆抗体,流式细胞术检测30例正常人、32例再生障碍性贫血(AA)、28例阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)或AA-PNH综合征、38例小细胞低色素性贫血(IDA)、24例巨幼细胞性贫血(MA)、12例自身免疫溶血性贫血(AIHA)患者外周血中红细胞及中性粒细胞CD55-和CD59-的百分率.结果 CD55-、CD59-正常人红细胞和中性粒细胞的百分率均＜5%;PNH或AA-PNH患者均＞20%;部分再障患者＞5%(均＜15%).约有40%的小细胞低色素贫血患者CD55-、CD59-红细胞＞5%(均＜20%);但中性粒细胞CD55-、CD59-百分率均＜5%.巨幼贫、自身免疫溶血性盆血患者的CD55-、CD59-红细胞和中性粒细胞均＜5%.结论 利用流式细胞术同时检测患者外周血中红细胞和中性粒细胞膜上CD55和CD59缺陷是临床鉴别诊断PNH、AA-PNH及再障、小细胞低色素性贫血、巨幼贫及自身免疫溶血性贫血可靠,较敏感的方法.     

各种贫血血细胞CD55、CD59免疫表型观察研究

目的观察各种贫血血细胞CD55、CD59免疫表型相互变化关系,探讨其临床意义。方法用流式细胞仪技术检测各种贫血患者骨髓、外周血细胞CD55、CD59免疫表型。结果发现PNH患者血细胞膜表面与糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚连蛋白有关抗原CD55、CD59免疫表达异常减低或缺乏,再障-PNH综合症CD55、CD59也呈不同程度降低。而且较传统常规溶血检测指标敏感。其它贫血血细胞膜表面CD55、CD59抗原表达正常。结论检测血细胞膜表面CD55、CD59GPI锚连蛋白分子表达可做PNH以及再障-PNH综合症确诊诊断和鉴别诊断的最敏感、最特异、最准确的检测指标,并对观察PNH发展、转化、治疗、愈后有重要指导价值。     

贫血患者外周血CD55+和CD59+细胞检测及临床意义

目的检测贫血患者外周血中红细胞和中性粒细胞膜糖基磷脂酰肌醇（GPI）连接的补体调节蛋白CD55和CD59表达情况，探讨其临床意义。方法用流式细胞仪，采用直接荧光素标记的CD55和CD59单克隆抗体，测定50例健康人、18例阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）、9例再生障碍性贫血-阵发性睡眠性血红蛋白尿综合症（AA-PNH综合征）、27例再生障碍性贫血（AA）、11例巨幼细胞性贫血、8例缺铁性贫血患者外周血中红细胞和中性粒细胞膜CD55^＋和CD59^＋表达的百分率。结果外周血中红细胞和中性粒细胞膜CD55^＋和CD59^＋的百分率健康人均〉95%，PNH患者在25％～94．8％之间。巨幼细胞性贫血、缺铁性贫血患者外周血中红细胞和中性粒细胞膜CD55^＋和CD59^＋可为正常或有程度不同的CD55^＋和CD59^＋细胞缺失。结论红细胞和中性粒细胞GPI锚相关蛋白CD55^＋和CD59^＋的缺陷与PNH密切相关，利用流式细胞术同时检测外周血中红细胞和中性粒细胞膜CD55^＋和CD59^＋是目前诊断PNH最可靠、最敏感的方法，是临床鉴别诊断PNH和其它贫血性疾病的较好方法。     

流式细胞术检测CD55、CD59对阵发性睡眠性血红蛋白尿诊断价值的探讨

目的探讨患者外周血细胞膜上CD55和CD59缺陷对阵发性睡眠性血红蛋白尿(paroxysmal nocturnalhemoglobinuria,PNH)的诊断价值。方法采用流式细胞术对CD55-PE及CD59-FITC标记的患者外周血中性粒细胞和红细胞进行检测。对2009年1月～2012年3月来我院就诊的13例PNH患者、13例再生障碍性贫血(aplasticanemia,AA)、21例骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes,MDS)患者、12例缺铁性贫血(irondeficient anemia,IDA)患者与同期80例健康体检者进行回顾性分析。结果 PNH患者中性粒细胞及红细胞膜表面CD55、CD59较AA、MDS、IDA及健康体检者均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论利用流式细胞术检测贫血患者外周血红细胞及中性粒细胞膜上CD55和CD59缺陷,是临床鉴别诊断PNH与AA、IDA、MDS可靠而敏感的指标。     

贫血患者外周血CD55^＋和CD59^＋细胞检测结果及其临床意义

目的检测贫血患者外周血中红细胞和中性粒细胞膜糖基磷脂酰肌醇（GPI）连接的补体调节蛋白CD55和CD59表达情况,探讨其临床意义。方法应用流式细胞仪测定40例健康人、6例阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）、20例再生障碍性贫血（AA）、35例缺铁性贫血、15例巨幼细胞性贫血、8例自身免疫溶血性贫血及8例造血系统肿瘤伴有贫血患者的外周血中红细胞和中性粒细胞膜CD55^＋和CD59^＋表达的百分率。结果健康人外周血中红细胞和中性粒细胞膜上CD55^＋和CD59^＋均大于95%;PNH患者在31.20%～72.34%;部分再障、溶贫患者小于95%,但均大于80%;其他均大于95%。结论利用流式细胞仪检测外周血中红细胞和中性粒细胞膜CD55＋和CD59＋是目前诊断PNH最可靠和最敏感的方法。     

CD55、CD59免疫表型对PNH相关疾病诊断的观察研究

目的 探讨CD55、CD59免疫表型与PNH及相关疾病诊断及鉴别诊断价值.方法 用流式细胞仪检测PNH及相关疾病CD55、CD59免疫表型.结果 发现PNH患者血细胞膜表面与糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚连蛋白有关抗原CD55、CD59表达减低或缺乏,再障-PNH综合症CD55、CD59也呈不同程度降低.其它贫血血细胞膜表面CD55、CD59.抗原表达正常.结论 CD55、CD59 GPI锚连蛋白分子表达可做PNH以及再障-PNH综合症诊断和鉴别诊断的最敏感、最准确的检测指标.     

流式细胞术检测CD55及CD59对诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿的意义

目的探讨流式细胞术检测免疫表型对诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿（PNH）的意义。方法采用流式细胞术测定60例正常人和9例阵发性睡眠性血红蛋白尿（PNH）患者外周血中性粒细胞和红细胞膜抗原的表达,用荧光标记分化群中的CD55、CD59单克隆抗体。结果 PNH患者中性粒细胞CD55、CD59,红细胞CD59表达率较正常人低,且与疾病的严重程度相关。结论用流式细胞术检测CD55、CD59表型是目前诊断PNH的较直接而又高特异、高敏感的方法。     

六类贫血患者外周血CD55^-和CD59^-细胞检测结果及其意义

目的检测贫血患者外周血中红细胞和中性粒细胞膜表面的糖化磷脂酰肌醇（GPI）连接的衰变加速因子（DAF，CD55）和膜反应性溶血抑制物（MIRL，CD59）的表达情况，探讨其临床意义。方法采用荧光标记的CD55和CD59单克隆抗体，流式细胞仪检测42例正常人、8例PNH、36例AA、22例MDS、10例AIHA、32例IDA、25例巨幼贫患者CD55^-和CD59^-的红细胞和中性粒细胞的百分率。结果正常人CD55^-和CD59^-红细胞和中性粒细胞的百分率均〈5％，PNH患者均〉25％，部分AA、MDS、AIHA患者〉5％（均〈20％），巨幼贫和IDA患者的红细胞和中性粒细胞CD55^-和CD59^-百分率均正常。采用流式细胞仪检测外周血CD55^-和CD59^-的红细胞和中性粒细胞是目前诊断PNH的最可靠、最敏感的方法。也是临床鉴别PNH和其他贫血的较好方法。     

CD55CD59CD34对PNH早期诊断研究应用

目的:探讨CD55、CD59、CD34抗原在阵发性睡眠性血红蛋白尿综合征(PNH)的早期诊断中的价值。方法:应用流式细胞仪测定PNH患者CD55、CD59、CD34抗原阳性表达变化,并与非PNH组以及正常对照组CD55、CD59、CD34抗原表达情况进行分析,同时做糖水试验、Ham试验、RC%、NAP积分检测。结果:PNH、AA-PNH患者CD55+、CD59+表达率较正常对照组及其它病组明显减少,差异有显著性(P<0.01);PNH患者CD34+表达率较正常对照组及其它病组明显增高(P<0.01),而AA患者CD34+表达率最低。结论:CD55、CD59、CD34抗原表达率可作为PNH综合征早期诊断最敏感指标,而基础检测对PNH的诊断及病情监控有重要意义,可达到早发现、早鉴别、早诊断、早治疗的目的。     

CD55,CD59抗原表达在PNH合并全血细胞减少症诊断中的应用

目的 探讨红细胞和粒细胞膜CD55与CD59抗原表达在阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)合并全血细胞减少症(PCP)诊断中的应用.方法采用流式细胞术结合直接免疫荧光法,检测PCP患者病因可疑为PNH的的外周血红细胞和粒细胞膜 CD55与CD59抗原的表达.结果 125例中,PNH32例,非PNH 93例(包括再生障碍性...     

CD55、CD59在诊断再生障碍性贫血-阵发性睡眠性血红蛋白尿综合征中的应用

目的研究CD55、CD59在再生障碍性贫血-阵发性睡眠性血红蛋白尿(AA-PNH)综合征中的诊断价值。方法用流式细胞仪对19例AA-PNH综合征进行CD55及CD59的检测,同时做酸化血清溶血试验(Ham试验),比较二者的阳性检测率。结果红细胞CD55异常者17例(89.4%),粒细胞CD55异常者19例(100%);红细胞CD59异常者18例(94.7%),粒细胞CD59异常者19例(100%)。Ham试验异常率为26.3%。红细胞和粒细胞CD55、CD59的异常率明显高于Ham试验(P<0.05)。结论CD55、CD59有助于提高AA-PNH综合征的诊断。     

贫血患者外周血中T淋巴细胞亚群和CD55＋、CD59＋检测的意义

目的：探讨T淋巴细胞亚群CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋／CD8＋比值和CD55＋、CD59＋水平在各种贫血患者外周血中的表达及意义。方法利用流式细胞术,测定100例贫血患者,其中巨幼细胞贫血（M A ）25例,缺铁性贫血（ID A ）40例,再生障碍性贫血（A A ）35例,30名健康对照组外周血T淋巴细胞亚群（CD3＋、CD4＋、CD8＋和CD4＋／CD8＋比值）和CD55＋、CD59＋水平的变化,比较与健康对照组间的差异。结果与健康对照组相比,3类贫血患者的CD3＋、CD4＋和CD4＋／CD8＋均低于健康对照组[（69．2±3．62）％、（38．7±3．56）％、（1．69±0．15）％],其中A A患者的CD4＋／CD8＋比值为0．94±0．59,与健康对照组相比明显下降（ P＜0．05）;CD8＋均高于健康对照组（22．9±2．35）％,其中A A患者的CD8＋为（34．5±2．44）％,明显高于健康对照组（P＜0．05）;MA患者CD55＋和CD59＋表达正常,大约40％的IDA和34％的AA患者CD55＋和CD59＋表达异常。结论3类贫血患者免疫功能均有不同程度异常,IDA患者可能是由缺铁引起。AA患者可能是由 T细胞功能亢进和CD55＋、CD59＋表达异常引起的。     

外周血B细胞上糖肌醇磷脂连接蛋白的表达在阵发性睡眠性血红蛋白尿症诊断中的应用

目的评价外周血B细胞上糖肌醇磷脂(glycosylphosphatidylinositol,GPI)连接蛋白之一CD59的表达能否作为诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症(paroxysmalnocturnalhemoglobinuria,PNH)的指标。方法采用流式细胞术双色免疫荧光分析法,结合B细胞特异性抗体CD20,分析92例外周血标本B细胞和中性粒细胞上CD59的表达,并通过临床指标评价方法,分析该指标临床应用的可行性。结果健康人B细胞上CD59均为完全阳性表达,表达率的参考范围为(96.3±1.2)%;PNH患者B细胞上CD59的表达率降低,均出现阴性或部分阳性病态细胞,病态细胞表达率为10.5%～92.3%;92.9%(26/28)非PNH贫血患者B细胞上CD59的表达均在正常参考范围内。该方法精密度的变异系数(coefficientvariation,CV)值小于4.4%,标本染色后无固定剂情况下可稳定保存24h,与常规检测CD59的方法(即中性粒细胞上CD59检测法)比较,PNH阳性和阴性检出符合率均高达100%。结论采用流式细胞术检测B细胞上CD59的表达具有简单、准确、重复性好的特点,可以成为诊断PNH的新指标。     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者CD34+CD59-与CD34+CD59+细胞膜EPO、TPO受体后STAT5磷酸化水平的关系

目的 观察阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者骨髓CD34+CD59+和CD34+CD59-细胞膜促红细胞生成素(EPO)受体(EPOR)、血小板生成素(TPO)受体(TPOR)后信号转导通路中信号转导和转录激活因子(STAT)5磷酸化水平.方法 应用流式细胞术分别检测2010年4月至2011年2月天津医科大学总医院血液肿瘤科PNH患者23例及11名健康对照骨髓单个核细胞(BMMNC)经和不经10 U/ml EPO、50 U/ml TPO刺激后CD34+CD59-和CD34+CD59+细胞磷酸化STAT5(P-STAT5)的平均荧光强度(MFI).结果 (1)未加入细胞因子时,PNH患者CD34+CD59-细胞P-STAT5的MFI为31±15,明显低于 CD34+CD59+细胞(74±47,P<0.01)及健康对照组CD34+CD59+细胞(59±23,P<0.05);PNH患者CD34+CD59+细胞P-STAT5的MFI与健康对照组CD34+CD59+细胞比较差异无统计学意义(P>0.05).(2) EPO、TPO刺激后,PNH患者CD34+CD59-细胞P-STAT5的MFI分别为49±24、51±41,明显低于CD34+CD59+细胞(120±82、124±87,均P<0.01)及健康对照组CD34+CD59+细胞(79±47、98±53,均P<0.05),PNH患者CD34+CD59+细胞P-STAT5的MFI与健康对照组CD34+CD59+细胞比较差异无统计学意义,经EPO、TPO刺激后PNH患者CD34+CD59+细胞P-STAT5的增高值分别为49±11、54±43,明显高于CD34+CD59-细胞(17±4、16±6,均P<0.01).结论 体外予EPO、TPO刺激,PNH患者正常克隆造血干细胞(CD34+CD59+)EPO、TPO受体后信号转导通路中STAT5磷酸化水平明显优于异常克隆造血干细胞(CD34+CD59-).

Abstract：

Objective To study the STAT5 phosphorylation levels of erythropoietin receptor (EPOR) and thrombopoietin receptor (TPOR) in CD34+CD59- and CD34+CD59+ bone marrow cells of the patients with paroxysmal nocturnal hemoglobinuria (PNH).Methods The bone marrow mononuclear cells (BMMNC) were extracted from 23 PNH patients treated at our department from April 2010 to February 2011 and 11 normal controls. The mean fluorescence intensity (MFI) of phosphorylated STAT5 (P-STAT5) in CD34+CD59+cells and CD34+CD59-cells with or without the stimulation of 10 U/ml EPO and 50 U/ml TPO were examined by flow cytometry.Results (1)Without stimulation, the P-STAT5 MFI in CD34+CD59- cells of PNH patients was significantly lower than that of CD34+CD59+cells (31±15 vs 74±47, P<0.01). And it was 59±23 in normal control CD34+CD59+cells (P<0.05). No statistic difference existed between the CD34+CD59+cells of PNH patients and the normal control CD34+CD59+cells. (2)Under the stimulations of EPO and TPO, the P-STAT5 MFI was significantly lower in CD34+CD59-cells of PNH patients than that of CD34+CD59+cells (49±24 and 51±41 vs 120±82 and 124±87, both P<0.01). For the normal control CD34+CD59+cells, they were 79±47 and 98±53 respectively (P<0.05).No statistic difference existed between the CD34+CD59+cells of PNH patients and the normal control CD34+CD59+cells. P-STAT5 MFI was elevated after the stimulations of EPO and TPO. The increments of CD34+CD59+cells in PNH patients were significantly higher than those of CD34+CD59-cells (49±11 and 54±43 vs 17±4 and 16±6, both P<0.01).Conclusion Under the in vitro stimulations of EPO and TPO, the STAT5 phosphorylation levels of EPO and TPO receptors in normally cloned hematopoietic stem cells in PNH patients are obviously superior to those in abnormally cloned counterparts.     

CD16在阵发性睡眠性血红蛋白尿症中的特异性表达

目的:检测中性粒细胞表面分化抗原CD16在阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)中表达,评价其在PNH诊断中的意义。方法:运用流式细胞术检测40名健康体检者及36例初治PNH患者外周血中性粒细胞表面分化抗原CD16,并与CD55、CD59及与传统Ham's试验结果进行比较研究。结果:PNH患者外周血细胞的CD16、CD55及CD59均有不同程度的缺乏,与健康对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);与传统Ham's试验比较其灵敏度高,特异度高。结论:细胞膜上糖基化磷脂酰肌醇锚的锚定蛋白CD16的缺陷与PNH有密切关系,流式细胞术检测PNH患者外周血中性粒细胞CD16可作为诊断PNH的有效辅助检查方法,具有一定临床意义。     

急性白血病红细胞CD55+、CD59+分子的检测及意义

目的:探讨急性白血病(AL)红细胞CD55 、CD59 表达及其临床意义。方法:AL患者42例,正常对照组42例,采用免疫荧光流式细胞仪检测红细胞膜表面CD55 、CD59 分子数量,采用全自动蛋白分析仪检测体液免疫相关指标。对AL患者,按化疗前后骨髓中原始细胞的百分数,将其分为缓解组和未缓解组,并对2组患者的红细胞膜表面CD55 、CD59 分子检测结果进行比较。结果:AL患者红细胞膜表面CD55 、CD59 分子数量较正常对照组下降,差别有统计学意义(P均<0.05);CD55 分子与IgA呈正相关(P<0.05);CD59 分子与补体C3、C4呈负相关(P<0.05);CD55 分子数量在AL患者未缓解组较缓解组下降,差别有统计学意义(P<0.05)。结论:AL患者红细胞天然免疫功能下降;红细胞膜表面CD55、CD59分子参与体液免疫反应调控,但CD55 分子的数量能否作为判断AL患者免疫状态及预后的指标之一,有待进一步探索和研究。     

GPI锚定蛋白检测诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症的临床价值

目的：探讨阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）患者不同外周血细胞GPI锚定蛋白的表达情况,为PNH的诊断和鉴别诊断提供依据。方法：采用流式细胞术检测32例PNH患者外周血各类细胞膜上CD55、CD59、 CD16及CD14的表达百分率。结果： PNH患者外周血红细胞、粒细胞膜上CD55、CD59表达均明显减少,与正常对照组比较差异有显著性（P<0.001）,且粒细胞上CD55、CD59表达率低于红细胞（P<0.05）;血小板CD55、CD59表达率也较对照组减少（P<0.05）;有27例PNH患者的淋巴细胞CD55、CD59表达降低,其缺失率达30%,低于粒细胞和红细胞;CD16在粒细胞上表达量差异很大（34%～83%）,与对照组比较差异有显著性（P<0.001）;在单核细胞上可见CD14表达缺失的PNH克隆,CD14表达比例明显低于正常对照组（P<0.001）。结论： 检测外周各系血细胞CD55和CD59可以使典型PNH的诊断更加可靠,使部分缺乏典型临床表现的PNH明确诊断。检测CD16和CD14对排除PNH具有重要意义。