肾衰灵对5／6肾切除大鼠血浆TXB26-Keto-PGF1α的影响

目的：观察肾衰灵对慢性肾衰（CRF）大鼠血浆TXB2、6-Keto-PGF1α的影响。方法：采用5/6肾切除法建立慢性肾衰肾小球硬化大鼠模型,随机分为正常组、模型组、赖诺普利组、肾衰灵组,8周后测定各组大鼠血浆血栓素B2（TXB2）、6-酮前列腺素（6-Keto-PGF1α）及肾脏病理变化。结果：模型组大鼠血TXB2值和TXB2/6-Keto-PGF1α值升高,血6-Keto-PGF1α值降低,与正常组相比有统计学差异（P〈0.05）,肾衰灵、赖诺普利组与模型组相比有显著性差异（P〈0.05）,肾衰灵组与赖诺普利组有明显差异（P〈0.05）。结论：肾衰灵可显著降低TXB2水平和TXB2/6-Keto-PGF1α值,提高6-keto-PGF1α水平,抑制肾脏血管收缩,减轻血小板聚集,降低肾血管阻力,改善肾脏血液动力学,减轻肾脏病理变化,延缓肾小球硬化进展,进而达到治疗肾功能衰竭的目。     

肾衰冲剂抑制残余肾转化生长因子-β1与组织金属蛋白酶抑制剂-1 mRNA的表达

目的:研究肾衰冲剂对大鼠残余肾转化生长因子-β1(TGF-β1)、组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)mRNA过度表达的抑制作用.方法:制作大鼠5/6肾切除肾衰模型,分别予肾衰冲剂及党参、丹参、制大黄灌胃治疗1个月后取各组大鼠残余肾.用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法检测残余肾TGF-β1、TIMP-1 mRNA的表达.结果:大鼠慢性肾衰模型组表现为TGF-β1、TIMP-1 mRNA的过度表达;经肾衰冲剂治疗后TGF-β1、TIMP-1 mRNA的表达降低(P＜0.01).其组成单味药丹参、制大黄则有不同程度的作用,党参作用不明显.结论:肾衰冲剂减轻残余肾纤维化的病变与其抑制残余肾组织TGF-β1、TIMP-1 mRNA的过度表达有关.     

肾衰灵方作用于SHH信号通路对UUO大鼠肾间质纤维化的影响＊

目的 探讨当代名医国医大师郑新经验方——肾衰灵方对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾间质纤维化的抑制作用。方法 1. 50只雄性SD大鼠随机分为五组：假手术组、模型组、肾衰灵方低剂量组、肾衰灵方中剂量组、肾衰灵方高剂量组。除假手术组，其余各组结扎单侧输尿管建立肾间质纤维化动物模型，肾衰灵方低中高剂量组予肾衰灵方（10、20、30 mg·kg^-1）连续灌胃14天。检测各组大鼠血清肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）、谷丙转氨酶（ALT），谷草转氨酶（AST），碱性磷酸酶（ALP），乳酸脱氢酶（LDH）。采用real-time PCR检测结缔生长因子(connective tissue growth factor，CTGF)核酸水平，采用Masson染色方法检测肾组织观察肾小管和间质病理形态变化。2. 根据结果选择肾衰灵中剂量组为治疗组，再将30只雄性SD大鼠分为假手术组、模型组、肾衰灵方治疗组共3组。用Western blot方法检测音猬因子（Sonic hedgehog，SHH）、神经胶质瘤相关癌基因同源蛋白-1（Glioma related cancer gene homologous proteins 1，Gli1）、锌指转录因子（Snail Family Zinc Finger 1，Snail）蛋白的表达。结果 1.与模型组相比，模型组和肾衰灵各剂量组大鼠血清SCr和BUN的表达水平均明显下调，其中肾衰灵中剂量组疗效最佳（P < 0.05）；Masson染色发现相较模型组，肾衰灵方各剂量组肾间质纤维化明显减轻，其中肾衰灵中剂量组疗效最佳（P < 0.05）；real-time PCR结果发现肾衰灵各剂量组CTGF核酸水平均较模型组下调，其中肾衰灵中剂量组核酸水平最低（P < 0.05）。 2. 相较假手术组，模型组与肾衰灵方组SHH、Gli1、Snai1蛋白的表达均升高（P < 0.05）；与模型组相比，肾衰灵方组SHH、Gli1、Snai1蛋白水平明显降低（P < 0.05）。结论 单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型中，肾衰灵方可以通过抑制肾间质纤维化改善大鼠肾功能，其作用可能与其阻断SHH信号通路相关。     

肾病I号方醋酸乙酯提取物对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

目的 探讨肾病I号方醋酸乙酯提取物（ethyl acetate extract of Shenbingyihao Decoction,EASD）对肾纤维化大鼠转化生长因子-β₁（TGF-β₁）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达的影响。方法 50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、洛丁新（洛丁新片1.67 mg/kg）组、肾病I号方（生药18.75 g/kg）组、EASD（EASD,300 mg/kg）组,除假手术组外,其他各组采用单侧输尿管结扎的方法制备单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型。各组ig给药14 d后处死大鼠,采集血清,检测尿素氮（BUN）和血肌酐（Scr）水平,取肾组织行HE和Masson染色评价肾小管间质纤维化损伤程度,采用免疫组织化学染色方法和实时荧光定量PCR（RT-PCR）法检测TGF-β₁、a-SMA蛋白及mRNA的表达情况。结果 与假手术组比较,模型组和3个给药组大鼠血清Scr、BUN升高（P<0.05）,间质纤维化程度加重（P<0.05）,肾组织TGF-β₁、a-SMA表达明显增多（P<0.05）。与模型组比较,3个给药组大鼠的血清Scr、BUN下降（P<0.05）,肾组织TGF-β₁、a-SMA表达下降（P<0.05）。结论 肾病I号方及EASD能够延缓肾纤维化的发生发展,其作用机制可能是通过下调TGF-β₁、a-SMA的表达,从而达到保护肾脏的作用。     

胡芦巴碱对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织TGF-β1 mRNA、ColⅠ、FN表达的影响

 目的 观察胡芦巴碱(trigonelline)对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织转化生长因子（TGF）-β1 mRNA、胶原蛋白Ⅰ（ColⅠ）、纤维粘连蛋白（FN）表达的影响。方法 采用单侧输尿管梗阻(UUO)诱导大鼠肾间质纤维化的动物模型,以依那普利为阳性对照药,将大鼠随机分为假手术组、模型组、依那普利组、胡芦巴碱高剂量组、中剂量组、低剂量组。术后第12天处死大鼠,收集血清测定肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）、总胆固醇（CHO）、甘油三酯(TG) 水平。采用原位杂交方法检测TGF-β1 mRNA,免疫组化方法检测大鼠肾间质组织细胞外基质（ECM）成分、ColⅠ、FN的表达。肾组织经HE、VG染色后,进行彩色病理图像分析,评定各组肾小管间质损害程度。结果 UUO大鼠肾小管间质损伤指数及肾组织TGF-β1 mRNA、ColⅠ、FN表达明显高于假手术组;胡芦巴碱与阳性对照药依那普利组比较,可使UUO大鼠肾小管间质损伤指数、肾组织中高表达的TGF-β1 mRNA、FN降低（P< 0.05）;并能降低UUO大鼠SCr、BUN、CHO、TG水平（P< 0.05）。结论 胡芦巴碱能下调TGF-β1 mRNA、ColⅠ、FN的表达,保护肾功能,减轻肾小管间质损伤、降低血脂、减少ECM合成,从而延缓了肾间质纤维化的形成。
     

肾衰灵对慢性肾衰大鼠血脂和肾功能的影响

目的：观察肾衰灵对慢性肾衰（CRF）大鼠肾功能、血脂的影响。方法：采用5/6肾切除法建立慢性肾衰肾小球硬化大鼠模型,随机分为正常组、模型组、赖诺普利组、肾衰灵组,8周后测定各组大鼠肾功能、血脂。结果：模型组大鼠24小时尿蛋白、血肌酐、血尿素氮及血脂水平与正常组相比均明显增加（P〈0.05）,肾衰灵、赖诺普利组各指标明显低于模型组（P〈0.05）,肾衰灵组明显低于赖诺普利组（P〈0.05）。结论：肾衰灵有降低尿蛋白,改善肾功能,调节脂质代谢紊乱的作用,能延缓肾小球硬化进展,进而达到治疗肾功能衰竭的目的。     

针刺对自发性高血压大鼠肾脏形态结构及转化生长因子-β1mRNA表达的影响

目的:探讨针刺干预高血压大鼠肾间质纤维化的机制.方法:将24周龄雄性自发性高血压大鼠(SHR) 24只随机分为模型组、培哚普利组、针刺组,每组8只.针刺组:捆绑大鼠后电针刺激大鼠双侧“曲池”“足三里”穴,强度以针柄微颤为度,刺激20 min,1次/d;培哚普利组:培哚普利(0.4 mg/kg)悬液每天灌胃1次;模型组每日捆绑束缚20 min,不予治疗;同龄同种系正常血压的京都大鼠(WKY)8只为空白对照组.空白对照组自由饮食,不予处理.实验疗程为6周.测量大鼠尾动脉收缩压;HE染色观察肾脏组织形态结构;免疫组织化学染色法观察肾Ⅰ、Ⅲ型胶原在肾脏沉积光密度;RT-PCR法检测转化生长因子-β1mRNA (TGF-β1 mRNA)在各组大鼠肾脏表达情况.结果:与模型组比较,针刺组血压显著下降(P＜0.01);肾脏形态结构损害程度较轻;肾I、Ⅲ型胶原蛋白沉积阳性面积明显减少(均P＜0.05);肾TGF-β1mRNA的半定量分析表达下降(P＜0.05),其作用和西药培哚普利相似.结论:针刺“曲池”“足三里”穴可能通过减少肾脏Ⅰ、Ⅲ型胶原合成和抑制TGF-β1在肾脏表达而干预肾脏纤维化的进程.     

益肾止衰颗粒改善5/6肾切除肾衰模型大鼠肾功能的作用机制研究

目的:探讨益肾止衰颗粒改善5/6肾切除肾衰大鼠模型肾功能的作用机制。方法:选取SD大鼠,采用5/6肾切除制作肾衰模型,造模大鼠手术两周后眼球取血,根据血肌酐验证造模成功,随机分为A假手术组、B模型对照组、C益肾止衰颗粒组、D阳性对照组(氯沙坦钾组)。自分组后第3天开始,A、B组给予蒸馏水3ml/d,C、D组给予下述各药物3ml/d连续灌胃8周(56天)。分别在喂药56天后杀鼠,收集血清,试剂盒检测血清尿素氮、肌酐;RT-PCR检测残余肾脏组织TGF-β1、HGF、BMP-7、WT1mRNA的表达;取残余肾脏组织,HE染色后光镜下观察病理改变。结果:初步发现益肾止衰颗粒、氯沙坦钾片对5/6肾切除肾衰大鼠肾功能均有不同程度改善。与模型组相比,益肾止衰颗粒组残余肾脏组织中TGF-β1mRNA表达下降明显,HGF mRNA、BMP-7mRNA表达升高明显,氯沙坦钾组TGF-β1mRNA表达下降,HGF mRNA表达明显升高,BMP-7mRNA表达无统计意义,两组间有明显比较意义;WT-1mRNA表达均升高明显,组间无统计意义。通过HE染色,在光镜下观察到各治疗组均在不同程度上减轻肾脏病理损伤,益肾止衰颗粒作用更加明显。结论:益肾止衰颗粒具有改善5/6肾切除肾衰大鼠肾功能的作用,通过下调肾组织TGF-β1mRNA表达,上调HGF mRNA、BMP-7mRNA表达,肾组织中WT1mRNA表达升高,因此通过修复慢性肾功能衰竭中TGF-β1与HGF的平衡失调,TGF-β1与BMP-7间的平衡失调,调控肾组织重构与纤维化的平衡,达到改善5/6肾切除肾衰大鼠肾功能可能是其延缓慢性肾衰竭的作用机制之一。     

扶肾方对尿毒症大鼠腹膜间充质TGF-β1、E-cadherin和α-SMA表达的影响

[目的]探讨扶肾方对尿毒症大鼠腹膜间充质转化生长因子-β1（TGF-β1）、E-钙黏素（E-cadherin）和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达的影响。[方法]采用SD大鼠切除5/6肾脏+1.5%百特腹透液的方法复制大鼠腹膜纤维化模型。扶肾方干预6周后,检测血清学指标肌酐和尿素氮的含量;苏木精-伊红（HE）染色观察腹膜病理改变;逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测各组腹膜间皮标志物E-cadherin和α-SMA的表达;酶联免疫吸附（ELISA）法检测TGF-β1含量的变化。[结果]扶肾方干预后,各组血清肌酐及尿素氮均呈现下降趋势,尤其以高剂量组最为明显（P<0.05）;扶肾方组腹膜间皮细胞变性、脱落,炎症细胞浸润以及血管新生现象明显减少;RT-PCR检测结果显示,模型组E-cadherin较正常组表达下降,差异有统计学意义（P<0.05）,TGF-β1、α-SMA较正常组表达上调,差异有统计学意义（P<0.01）,与模型组相比,扶肾方干预后的各组E-cadherin表达均有所上调,且以高剂量组上调最为明显（P<0.01）;TGF-β1、α-SMA中、高剂量组有统计学差异（P<0.05或P<0.01）,其他组较正常组有下调趋势,低剂量组结果无统计学意义,中、高剂量组结果有统计学差异（P<0.05）。[结论]扶肾方很可能通过抑制TGF-β1,调节E-cadherin和α-SMA表达,从而抑制腹膜间皮细胞间质转化的发生。     

基于TGF-β/Smad7信号通路探讨针灸对大鼠溃疡性结肠炎的影响※

目的 研究针灸对大鼠溃疡性结肠炎（UC）的疗效及作用机制。方法 将40只SPF级SD雄性大鼠随机分成空白组、模型组、电针组、隔药灸组。空白组予生理盐水灌肠，其余三组均予TNBS-50%乙醇液灌肠，建立UC模型。造模成功后，电针组及隔药灸组均选取天枢穴（双侧）、气海穴，分别进行电针及隔药灸治疗，每日1次，空白组、模型组不干预。干预14 d后，进行大鼠疾病活动性指数（DAI）评分及结肠黏膜损伤指数（CMDI）评分，并检测血清转化生长因子-β（TGF-β）、信号转导分子7（Smad7）、白介素-10（IL-10）及结肠组织TGF-β mRNA、Smad7 mRNA、IL-10 mRNA表达量。结果 空白组大鼠DAI、CMDI评分显著低于其他三组（P<0.05），电针组、隔药灸组大鼠DAI、CMDI评分均明显低于模型组（P<0.05）；空白组大鼠结肠组织TGF-β mRNA、Smad7 mRNA、IL-10 mRNA及血清TGF-β、Smad7、IL-10表达量明显低于其他三组（P<0.05），电针组、隔药灸组低于模型组（P<0.05）。结论 电针、隔药灸能通过调节TGF-β-Smad7-IL-10信号通路而达到治疗UC的目的。     

抗纤灵方药物血清对骨髓来源成纤维细胞表型转化的影响

目的探讨抗纤灵方对肾间质纤维化(RIF)的作用机制。方法将抗纤灵方煎至含生药3.2g/ml、福辛普利0.33mg/ml给大鼠灌胃,正常组给予等量蒸馏水灌胃,分别制备抗纤灵方血清、福辛普利血清和正常血清。用DMEM培养基稀释血清,分为正常血清组、福辛普利组、抗纤灵组、转化生长因子-β1(TGF-β1)组、TGF-β1+福辛普利组和TGF-β1+抗纤灵组。体外培养大鼠肾组织骨髓来源的成纤维细胞(FBS),采用酶联免疫吸附法和双重荧光定量法检测骨髓来源的FBS表型转化标记物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)及其mRNA表达。结果 TGF-β1组α-SMA、CollagenⅠ及α-SMAmRNA、CollagenⅠmRNA表达水平较正常血清组明显增强(P<0.05或P<0.01),TGF-β1+福辛普利组和TGF-β1+抗纤灵组α-SMA、CollagenⅠ及α-SMAmRNA、CollagenⅠmRNA表达水平均低于TGF-β1组(P<0.05或P<0.01)。结论抗纤灵方药物血清可以通过抑制骨髓来源的FBS的表型转化拮抗RIF。     

加味升降散通过介导RIP1/RIP3/MLKL通路抑制坏死性凋亡减轻糖尿病肾病大鼠肾脏纤维化

目的 探讨加味升降散基于刺激受体相互作用蛋白（RIP）1/RIP3/混合谱系激酶结构域样假激酶（MLKL）通路对糖尿病肾病大鼠坏死性凋亡及肾纤维化的干预机制。方法 75只SD大鼠分为正常组、模型组、加味升降散低、中、高剂量组（4.365、8.73、17.46 g·kg^-1）和厄贝沙坦组（0.013 5 g·kg^-1），灌胃给药干预4周后，检测各组大鼠24 h尿蛋白定量（UTP），血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）水平，肾脏病理变化程度；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）法和免疫组化分别检测大鼠肾组织中IL-1β、TNF-α、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、转化生长因子-β₁（TGF-β₁）、核转录因子-κB（NF-κB）mRNA和蛋白表达水平；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测RIP1/RIP3/MLKL信号通路关键蛋白的表达水平。结果 与正常组比较，模型组大鼠肾脏间质纤维化明显，24 h UTP、IL-1β、TNF-α水平明显升高（P<0.05），肾组织中IL-1β、TNF-α、MCP-1、TGF-β₁、NF-κB mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.05），RIP1、RIP3、磷酸化（p）-MLKL、MLKL蛋白表达量明显增多（P<0.05）；与模型组比较，加味升降散各剂量组及厄贝沙坦组大鼠肾脏间质纤维化水平均有不同程度改善，24 h UTP水平均有不同程度降低（P<0.05），血清中IL-1β、TNF-α含量明显降低（P<0.05），肾组织中IL-1β，TNF-α，MCP-1，TGF-β₁，NF-κB mRNA和蛋白表达水平明显下调（P<0.05），RIP1、RIP3、p-MLKL、MLKL蛋白表达量明显下调（P<0.05）。结论 加味升降散可以改善糖尿病肾病大鼠肾损伤，其机制可能与下调RIP1/RIP3/MLKL信号通路，阻止肾组织坏死性凋亡，抑制肾纤维化有关。     

健脾清化方对慢性肾衰大鼠肾组织TGF-β1mRNA及CTGFmRNA表达的影响

目的:探讨健脾清化方对慢性肾衰大鼠肾纤维化的影响。方法:采用5/6肾切除大鼠模型(Platt法),观察健脾清化方对模型大鼠24小时尿蛋白定量、血清尿素氮、肌酐的影响,RT-PCR检测肾组织TGF-β1mRNA、CTGFmRNA表达,观察肾脏病理变化。结果:健脾清化方能降低Platt模型大鼠24小时尿蛋白、血清尿素氮水平,显著降低血清肌酐水平,减少肾组织TGF-β1mRNA、CTGFmRNA表达。结论:健脾清化方对Platt模型大鼠有肾保护作用,减少TGF-β1、CTGFmRNA表达是其作用机制之一。     

基于TGFβ/Smads信号通路探讨补肾促排卵汤治疗PCOS大鼠卵巢纤维化的分子机制

[目的] 探讨补肾促排卵汤对多囊卵巢综合征（PCOS）模型大鼠的治疗效果,并研究其调节卵巢纤维化TGF-β/Smads信号通路的分子机制。[方法] 将40只SD雌性大鼠随机分为空白组8只及脱氢表雄酮（DHEA）给药组32只,DHEA给药组每日颈部皮下注射DHEA（60 mg/kg）,连续给药35 d;将造模成功的大鼠随机分为模型组、补肾促排卵汤低、中、高剂量组（5.58、11.16、22.32 g/kg）。补肾促排卵汤分别用生理盐水配成适当浓度,连续灌胃给药4周,每日1次;同时空白组与模型组大鼠予等量生理盐水进行灌胃。阴道涂片观察大鼠动情周期,HE法观察补肾促排卵汤对各组大鼠卵巢中卵泡发育的影响,天狼猩红染色法观察大鼠卵巢纤维化情况,酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测大鼠血清雌二醇（E2）、睾丸酮（T）、黄体生成素（LH）、促卵泡激素（FSH）含量,实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）法检测转化生长因子-β1（TGF-β1）、Smad3、Smad7 mRNA的表达,蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测大鼠TGF-β1、p-Smad3、Smad7的蛋白表达。[结果] 与空白组比较,模型组大鼠丧失规律的动情周期,大鼠卵巢中囊状扩张卵泡增多,卵巢纤维化阳性面积明显增多,血清T、LH水平显著升高,同时TGF-β1、p-Smad3蛋白及mRNA表达显著增多,Smad7蛋白及mRNA表达显著减少（P<0.01）。与模型组比较,补肾促排卵汤中、高剂量组可明显改善大鼠的动情周期,减少囊状扩张卵泡的形成,降低卵巢纤维化阳性面积（P<0.01）,下调卵巢TGF-β1蛋白及mRNA的表达（P<0.05,P<0.01）,显著下调p-Smad3蛋白及mRNA的表达（P<0.01）,上调Smad7蛋白及mRNA表达（P<0.05,P<0.01）。[结论] 补肾促排卵汤能有效治疗PCOS模型大鼠,可能是通过调节纤维化TGF-β/Smads信号通路上重要分子TGF-β1、p-Smad3、Smad7的表达从而发挥作用。     

金樱子对IgA肾病大鼠肾脏组织TGF-β基因表达的影响

目的:探索金樱子水醇萃取液对实验性IgA肾炎大鼠肾组织TGF-βmRNA表达的影响。方法:用金樱子水醇萃取液对实验性IgA肾炎大鼠进行灌胃治疗,采用RT-PCR检测肾脏组织炎症保护因子TGF-βmRNA的基因表达。结果:TGF-βmRNA在3个实验组中的相对表达量分别为:0.5416±0.1847、1.5022±0.7343、0.6440±0.0518,与模型组相比,金樱子治疗组能有效抑制TGF-βmRNA在肾组织的表达(P<0.05)。结论:金樱子能下调TGF-βmRNA在肾脏的表达,减少局部炎症反应,减轻肾脏损害。     

槲皮素对1型糖尿病肾病肾小管上皮细胞间质转分化的作用

[目的] 研究槲皮素在1型糖尿病肾病（T1DN）肾小管上皮细胞间质转分化中的作用。[方法] 30只雄性SD大鼠随机分为3组：对照组、T1DN组和槲皮素组,每组10只。除对照组以外,其他大鼠空腹注射100 mg/kg链脲佐菌素,构建T1DN模型。槲皮素组大鼠灌胃100 mg/kg槲皮素,对照组和T1DN组大鼠灌胃同剂量的生理盐水,每日1次,持续8周。通过Masson和天狼星染色检测肾组织病理学变化;采用实时荧光定量聚合酶链反应（Real-time PCR）和蛋白质免疫印记法（Western blot）检测肾皮质中转化生长因子-β（TGF-β）/Smad信号通路、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Snail和E-钙黏蛋白（E-cadherin）和基因的表达。[结果] 天狼星染色结果显示,对照组的肾组织结构完整,肾间质未见胶原纤维沉积,T1DN组肾组织结构破坏,间质胶原纤维沉积明显增加,槲皮素改善肾组织损伤,间质胶原纤维减少。Real-time PCR和Western blot结果显示,与对照组比较,T1DN组的TGF-β、Smad2/3、α-SMA、Snail蛋白和mRNA表达显著增加（P<0.05）,E-cadherin的表达显著减少（P<0.05）。与T1DN组比较,槲皮素组的TGF-β、Smad2/3、α-SMA、Snail蛋白和mRNA表达显著降低（P<0.05）,E-cadherin的表达显著增加（P<0.05）。[结论] 槲皮素可能通过降低TGF-β、Smad2/3、α-SMA、Snail的表达,促进E-cadherin的表达,从而抑制肾小管上皮细胞间质转分化和肾间质纤维化的发生发展。     

桂枝茯苓丸抗大鼠肝纤维化作用及其机制研究

目的:观察桂枝茯苓丸对大鼠肝纤维化的拮抗作用,并探讨可能的作用机制。方法:按照随机数字表将60只Wistar大鼠分为正常组8只(A组)和造模组52只,正常组sc予生理盐水3 mL.kg-1,造模组采用等量40%四氯化碳(carbontetrachloride,CCl4)复制肝纤维化模型,共6周。再随机将造模组大鼠分为模型组(B组)、桂枝茯苓丸低、中、高剂量组(C,D,E组)每组7只大鼠。A组与B组大鼠均予生理盐水9.0 mL.kg-1ig,C,D,E组分别给予桂枝茯苓丸0.45,0.9,1.8 g.kg-1.d-1 ig治疗,共4周,并在治疗期间继续使用CCl4维持。采用免疫组化(immunohistochemistry,IH)法及实时定量PCR(real-timequantitative PCR,Real-time PCR)法检测各组大鼠肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、转化生长因子β1(transforming growing factorβ1,TGF-β1)、结缔组织生长因子(connective tissue grower factor,CTGF)、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ,C-Ⅰ)及Ⅲ型胶原(CollagenⅢ,C-Ⅲ)的蛋白及基因表达量。结果:模型组大鼠肝组织α-SMA,TGF-β1,CTGF,C-Ⅰ,C-Ⅲ蛋白和mRNA的表达较正常组显著增多(P<0.01),治疗组均能下调大鼠肝组织α-SMA,TGF-β1,CTGF,C-Ⅰ以及C-Ⅲ蛋白和mRNA的表达,其中以D组,E组减少α-SMA,C-Ⅰ,C-Ⅲ蛋白的表达明显(P<0.05或P<0.01),以E组降低TGF-β1,CTGF蛋白表达最为显著(P<0.05),以D组,E组降低α-SMA,TGF-β1,CTGF mRNA的表达显著(P<0.01),以E组减少C-Ⅰ,C-ⅢmRNA的表达最明显(P<0.01)。结论:桂枝茯苓丸混悬液可有效减少肝组织α-SMA,TGF-β1,CTGF,C-Ⅰ,C-Ⅲ蛋白和mRNA表达量,有良好的抗肝纤维化作用。     

肾衰胶囊对慢性肾衰竭大鼠肾组织TGF-β1表达的影响

目的探讨肾衰胶囊对慢性肾衰竭(CRF)大鼠肾脏转化生长因子(TGF-β1)表达的影响。方法大鼠灌胃腺嘌呤制成 CRF 模型,并分为5组肾衰胶囊高、低剂量治疗组及尿毒清治疗组分别以肾衰胶囊4.4g·kg~(-1)·d~(-1)、1.47 g·kg~(-1)·d~(-1)及尿毒清2.0 g·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,正常及模型对照组予等体积生理盐水共治疗31天,检测肾功能指标,用免疫组化法检测肾脏 TCF-β_1 表达水平。结果肾衰胶囊高剂量组改善 BUN 、SCr 方面与尿毒清组比较,差异均有显著性(P<0.05)。肾衰胶囊高、低剂量组对 CRF 大鼠肾小管上皮细胞 TGF-β_1表达有明显抑制作用(P<0.01,P<0.05)。结论肾衰胶囊能明显抑制 CRF 大鼠肾组织 TGF-β_1 表达,这可能是其延缓肾衰竭进展的作用机理之一。     

基于AngⅡ/AT1R/NOX4信号通路探讨加味真武汤延缓慢性肾功能衰竭肾间质纤维化机制

目的 通过观察加味真武汤对腺嘌呤诱导慢性肾功能衰竭（CRF）大鼠血清及肾组织中血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1R）、还原型辅酶Ⅱ（NADPH）氧化酶4（NOX4）、转化生长因子-β₁（TGF-β₁）、Ⅰ型胶原蛋白（COL1A1）、Ⅲ型胶原蛋白（COL3A1）表达的影响,探讨加味真武汤延缓CRF肾间质纤维化的可能作用机制。方法 将50只SPF级雄性SD大鼠按照随机数字表法分为正常组10只、造模组40只,将大鼠适应性饲养1周后采用腺嘌呤150 mg·kg^-1·d^-1灌胃的方法建立实验性CRF大鼠模型。造模完成后随机选取正常组和造模组大鼠各3只取材,检测造模是否成功。造模成功后,将造模组大鼠按照随机数字表法分成模型组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、盐酸贝那普利组各6只,进行药物灌胃,每日1次,治疗4周。于实验第1周末、第13周末、第17周末检测24 h尿蛋白定量（24 h-UTP）,第17周各组大鼠麻醉后取材,腹主动脉取血后离心取上清检测血清总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清AngⅡ表达水平;苏木素-伊红（HE）、马松（Masson）染色法观察肾组织病理改变;免疫组织化学（IHC）法观察AT1R、NOX4、TGF-β₁、COL1A1、COL3A1表达情况;实时荧光定量聚合酶链式反应法（Real-time PCR）观察AT1R、NOX4、TGF-β mRNA表达水平;蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测AT1R、NOX4、TGF-β₁表达水平。结果 ①与正常组比较,模型组实验大鼠24 h-UTP显著增高（P<0.01）;模型组实验大鼠Cr、BUN含量水平显著升高（P<0.01）,TP、ALB含量水平显著降低（P<0.01）;模型组实验大鼠血清AngⅡ含量显著升高（P<0.01）;模型组实验大鼠肾小球球囊间隙明显增宽,可见坏死肾小球,肾间质明显增宽伴有大量炎细胞浸润,大量肾小管管腔有褐色沉淀物阻塞,无规整肾小管,肾间质有大量胶原纤维沉积,肾脏血管周围、肾小囊壁层囊壁外、肾小球基底膜和肾小管基底膜胶原纤维明显增多;模型组实验大鼠AT1R、NOX4在肾小球、肾小管表达明显增强,TGF-β₁在肾小管表达明显增强,COL1A1、COL3A1在肾间质表达明显增强;模型组实验大鼠AT1R、TGF-β₁ mRNA表达显著增强（P<0.01）,NOX4 mRNA表达显著减弱（P<0.01）;AT1R、NOX4、TGF-β₁蛋白表达显著增强（P<0.01）。②与模型组比较,加味真武汤干预后,24 h-UTP显著降低（P<0.01）;Cr、BUN含量水平显著降低（P<0.01）,TP、ALB含量水平显著升高（P<0.01）;AngⅡ含量显著下降（P<0.01）;肾脏病理损害减轻;AT1R、NOX4、TGF-β₁、COL1A1、COL3A1在肾小球、肾小管、肾间质达减弱;AT1R、TGF-β₁ mRNA表达显著下降（P<0.01）,NOX4 mRNA表达显著升高（P<0.01）;AT1R、NOX4、TGF-β₁蛋白表达显著减弱（P<0.01）;中药组表现出明显的量效趋势。结论 加味真武汤可能通过降低CRF大鼠血清及肾组织中AngⅡ、AT1R、NOX4、TGF-β₁表达,延缓肾间质纤维化进展,从而减轻肾脏病理损害,减少蛋白尿,保护肾功能,达到延缓CRF进展的目的,且中药组具有量效趋势。     

益肾活血软坚泄浊法对UUO大鼠肾脏TGF-β1和HGF蛋白的影响

目的：观察益肾活血软坚泄浊法组方对肾间质纤维化大鼠成纤维细胞转化生长因子（TGF-β1）和肝细胞生长因子（HGF）表达的影响,为肾间质纤维化的防治提供依据.方法：将大鼠随机分为4组,假手术组、模型组、贝那普利对照组、内服组,采用手术结扎单侧（左侧）输尿管大鼠模型（UUO大鼠）,治疗后取肾脏组织,在光镜下观察肾脏组织病理改变,应用免疫组化技术检测大鼠肾组织TGF-β1和HGF的表达情况.结果：（1）假手术组大鼠体重增长明显,精神状况良好;模型组大鼠体重减轻,活动减少;内服组大鼠较模型组症状相对较轻.（2）肾脏病理改变.肉眼观：假手术组大鼠肾脏呈红褐色,为正常组织;模型组肾脏体积较正常明显增大,表面皮质变薄,水肿明显;内服组和贝那普利对照组较模型组减轻.镜下观：假手术组大鼠肾组织结构正常,无局灶性纤维化,无肾小管扩张;模型组大鼠肾小管扩张,1肾间质可见棕褐色颜色改变;内服组肾组织肾间质纤维化.（3）与模型组比较,内服组、贝那普利组大鼠肾组织中TGF-β1明显降低（P＜0.01）、HGF的表达明显升高（P＜0.01）.结论：益肾活血软坚泄浊法可降低TGF-β1在肾纤维化大鼠肾组织中的表达,升高HGF在肾纤维化大鼠肾组织中的表达,从而减轻肾脏纤维化的损伤,达到保护肾功能的目的.