血管内皮生长因子与血管形成

血管形成是一个极其复杂的过程,需要多种生长因子协同参与。血管内皮生长因子（Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF）是一种特异性作用于血管内皮细胞表面受体的生长因子,具有维持血管正常状态和完整性,增加血管通透性,诱导血管发生,并促进血管生成的作用。作为一种重要的促血管内皮生长因子,VEGF在机体的许多病理和生理状况下均起到重要作用,具有广泛的应用价值,为国内外学者所关注,现就相关的研究现状及进展综述如下。     

血管内皮生长因子与血管保护

血管内皮生长因子 (ＶＥＧＦ)开始被看作为一个增强血管渗透性的因子 (ＶＰＦ) ,1989年Ｆｅｒｒａｒａ等发现其还具有特异性促血管内皮细胞有丝分裂的作用 ,刺激内皮细胞增殖并促进血管的形成。有关ＶＥＧＦ的研究方兴未艾 ,国外已将其应用于临床治疗试验 ,并取得了可喜的成绩 ,由此引起了国内外学者的观注。而最近的研究表明ＶＥＧＦ还具有血管保护的功能 :增加血管活性介质的产生 ,增强溶栓和凝血途径中相关成分的表达 ,抑制新生内膜血管平滑肌细胞的过度生长 ,抑制血栓的形成和抗炎症 ,抑制内皮细胞的凋亡。而且这种功能是不依赖于其促血…     

血管抑素抑制角膜新生血管

血管抑素（angiostatin，AS）是迄今发现的强的内源性血管生成抑制因子之一，它能特异性抑制内皮细胞的增殖和迁移，诱导细胞凋亡，从而抑制新生血管的形成。其在肿瘤血管治疗方面已取得较好实验结论。由于角膜新生血管形成和肿瘤诱导的新生血管形成由相同的生长因子所驱动，正因为此可将其用于角膜新生血管的治疗。本文就血管抑素的分子结构、功能及其抑制角膜新生血管的机制进行综述。     

血管生成、治疗性血管生成和抗血管生成

血管生成 (Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ)是许多生理和病理过程 (如肿瘤、缺血性疾病、慢性炎症、糖尿病性视网膜病、牛皮癣、创伤愈合等 )的基本事件之一[1,2 ] 。血管生成的研究涉及到医学中的多个学科 ,研究疾病状态下的血管生成和消退规律及其机制 ,对认识血管生成在疾病发生、发展中的作用 ,针对血管生成进行有效的治疗 ,以及研究器官移植和含血管的组织工程 ,都具有十分重要的意义。1　血管生成　　血管生成是指从已存在的微血管床上芽生出新的以毛细血管为主的血管系统的过程。此概念有别于血管形成 (Ｖａｓｃｕ ｌｏｇｅｎｅｓｉｓ)。…     

血管医学:血管健康评价与血管疾病综合防治

血管性疾病是累及全身重要脏器的系统性病症,它与众多代谢异常的危险因素如高血压、高血脂、糖尿病和高尿酸及同型半胱氨酸升高相关,并导致进行性的血管损伤,最终引发血管事件,包括急性心肌梗死、脑卒中、晚期肾病、外周血管病等,具有很高的致死率和致残率[1-2].但上述疾病本身不是心脏或大脑等器官发生病变,而是供应上述脏器的血管发生了弥漫性硬化、粥样硬化和局部阻塞所致.     

血管外膜与血管成形术后再狭窄及血管重塑的关系

血管损伤后狭窄是许多心血管疾病发展到后期的共同病理改变,严重影响了心血管疾病的治疗和预后.研究发现血管外膜在此过程中发挥重要作用,本文对血管外膜在血管成形术后冉狭窄及血管重塑的关系进行了综述.     

血管外科的进展和血管代用品

外科学的历史记载了大量外科技术操作的发展动态。动脉系统的控制和发展代表着外科学上一个最重要的成就。过去25年里,外科领域内有特殊意义的,就是今天的血管外科学已达到了前所不能想象的情况。血管     

血小板和血管内皮细胞与血管疾病

血小板和血管内皮细胞（endothelialcellEC;简称内皮细胞）在血栓性疾病,动脉粥样硬化（Atherosclerosis．AS）和其它疾病中起着重要作用。EC不仅是一层半透膜屏障,而且是一群具有复杂代谢与内分泌机能的细胞系统,调节血管平滑肌的运动和血小板的粘附。血小板是来源于巨核细胞的多功能血液有形成分,参与血栓形成、止血过程及炎症和免疫反应。近年来,随着对各种血细胞和EC研究的深入及对闭塞血管再通临床效果的认识,血小板血栓的形成和溶解及损伤血管修复的病理学特征已引起极大的关注。人们发现,血栓形成和损伤后血管反应的关键…     

颅内血管病变的血管内治疗

应用真丝微粒为栓塞材料经微导管超选择插管注入脑动静脉畸形病灶内,取得满意效果,本文系用该方法对脑动脉瘤、脑动静脉畸形与瘘的血管内治疗作报道。     

反义血管内皮细胞生长因子基因转染在调节人肺巨细胞癌血管生成及肿瘤生长和转移中的作用

目的　探讨反义血管内皮细胞生长因子 (VEGF)基因转染在减少肿瘤细胞内源性血管内皮细胞生长因子分泌 ,调节肿瘤血管生成和肿瘤生长转移中的作用。方法　利用脂质体法将反义基因转染到高转移性人肺癌细胞 (PG) ,以转基因肿瘤细胞培养上清刺激人脐静脉内皮细胞 ,进行噻唑蓝 (MTT)和3H胸腺嘧啶 (3HTdR)掺入实验 ;并将转基因肿瘤细胞接种于裸鼠体内 ,应用免疫组织化学法检测肿瘤内微血管密度 (MVD) ,探讨MVD与肿瘤生长转移的关系。结果　反义VEGF基因的转染 ,使肿瘤细胞VEGF分泌减少 ,其培养上清刺激人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)生长活性较空载体组减弱 ,HUVEC之DNA合成减少 ,裸鼠移植瘤内MVD为 41个± 9个 ,空载体组为 5 8个± 10个 ,两组比较t=2 715 ,P <0 .0 5。结论　反义VEGF基因的转染使肿瘤细胞分泌VEGF能力下降 ,肿瘤血管生成能力降低 ,这在肿瘤的生长和转移调节中有重要意义。     

血管内皮生长因子的基因克隆与表达

目的　构建编码正反义血管内皮生长因子 1 65(vascularendothelialgrowthfactor 1 65 ,VEGF1 6 5)的真核表达质粒 ,观察质粒转染体外培养的人脐静脉血管内皮细胞 (humanumbilicalveinendothelialcell,HUVEC)后 ,靶细胞VEGF的分泌及细胞生长速度是否发生改变。方法　RT PCR从人胚胎肾组织中获hVEGF1 6 5的cDNA片段 ,构建编码正反义hVEGF1 6 5真核表达质粒 (pCR3 .1 /anti VEGF1 6 5及 pCR3 .1 /VEGF1 6 5) ,通过脂质体介导将质粒转入HU VEC细胞 ,ELISA测定转染后细胞VEGF的分泌量 ,设空载体组及未转染的细胞为对照。筛选稳定表达外源基因的细胞克隆 ,在相差显微镜及透射电镜下观察转染后细胞形态是否发生变化 ,MTT方法检测细胞生长曲线是否有改变。结果　DNA测序结果 ,获得重组质粒pCR3 .1 /anti VEGF1 6 5与pCR3 .1 /VEGF1 6 5所携带的外源基因序列与文献报道的基本一致。质粒转染后靶细胞形态均无明显变化 ,仅在透射电镜下观察到与蛋白质合成相关的细胞器结构发生了相应的改变。反义VEGF转染明显降低靶细胞VEGF的分泌量 ,抑制率为 67.7% (P <0 .0 1 ) ,同时细胞生长速度明显减慢 (P <0 .0 5)。而转入正义基因的细胞VEGF的分泌量则能明显提高 ,与空白对照组比较增长率为984.8% (P <0 .0 1 ) ,细胞生长速     

血管内皮生长因子真核表达质粒在心肌细胞和神经细胞中的表达

目的:探讨pcD2/h VEGF121真核表达质粒对心肌细胞和神经细胞的转染及表达.方法:pcD2/h VEGF121真核表达质粒的构建,Lipofectin瞬时转染大鼠原代培养心肌细胞和人神经母细胞瘤细胞SH-SY-5Y.采用RTPCR,ELISA等方法检测VEGF基因在心肌细胞和SH-SY-5Y细胞中的表达.MTT法检测转染后细胞上清中VEGF的生物学活性.结果:转染pcD2/h VEGF121真核表达质粒的心肌细胞和SH-SY-5Y细胞中VEGF mRNA水平明显升高,ELISA检测到VEGF蛋白表达水平也远高于转空载质粒和未转染对照组,并且转染的心肌细胞和神经细胞上清具有促进内皮细胞增殖的生物学活性.结论:pcD2/h VEGF121真核表达质粒能转染心肌细胞和神经组织来源的细胞系,并获得高水平的表达,而且表达出的VEGF蛋白具有生物学活性     

人反义VEGF_(121) cDNA表达质粒的构建及其对膀胱癌细胞增殖的影响

目的 构建人反义VEGF121 cDNA真核表达质粒,研究反义基因治疗对膀胱癌细胞增殖的影响。方法将VEGF121反向克隆入真核表达载体pcDNA3中,酶切鉴定。用此真核表达重组质粒转染人膀胱癌细胞株T24,G418筛选获得阳性克隆,RT-PCR法测定转染前后T24细胞中VEGF mRNA表达,ELISA法检测转染前后T24细胞中VEGF蛋白表达。利用MTT法、软琼脂克隆形成试验、流式细胞仪和电镜等检测转染前后T24细胞的生物学性状。结果 获得反义VEGF121 cDNA质粒表达重组质粒。VEGF121反义RNA部分阻断了T24细胞中VEGF表达,转染后肿瘤细胞VEGF mRNA和VEGF蛋白表达都明显减少;转染后单个细胞的克隆形成能力明显减弱;形态学超微结构显示细胞器扩张和肿胀,核染色质边集,凝集成块,可见明显的凋亡改变。结论成功构建了反义VEGF121 cDNA真核表达质粒,转染该质粒可明显抑制膀胱癌细胞增殖,为膀胱癌的基因治疗提供了一定的实验依据。     

VEGF逆转录病毒载体构建及在小鼠骨髓中的表达(英文)

Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓｐｌａｙｓａｎｅｓｓｅｎｔｉａｌｒｏｌｅｉｎｂｏｎｅｆｏｒｍａｔｉｏｎ ,ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇａｎｄｈｅａｌｉｎｇ Ａｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｃａｕｓｅｏｆｂｏｎｅｎｅｃｒｏｓｉｓ,ｉｓｃｈｅｍｉｃｂｏｎｅｄｉｓｅａｓｅｈａｓａｐｏｏｒｐｒｏｇｎｏｓｉｓｗｉｔｈｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌｔｈｅｒａｐｉｅｓ Ｔｏｉｍｐｒｏｖｅｔｈｅｃｕｒａｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｉｎａｖａｓｃｕｌａｒｂｏｎｅｄｉｓｅａｓｅ ,ｎｏｖｅｌｔｒｅａｔｍｅｎｔｓｔｒａｔｅｇｉｅｓａｒｅｄｅｓｐｅｒａｔｅｌｙｎ…     

Expression of human VEGF121 cDNA in mouse bone marrow stromal cells

目的构建人VEGF121逆转录病毒表达载体,探讨应用血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因治疗骨科缺血性疾患的可行性.方法采用分子克隆技术从pCDⅠ/VEGF121质粒获得hVEGF121cDNA, 并克隆到pLXSN逆转录病毒质粒.经酶切及测序鉴定正确后,包装成为pLXSN/VEGF121重组逆转录病毒, 并进行滴度测定.培养小鼠骨髓基质细胞,用重组病毒感染小鼠骨髓基质细胞.经筛选后,用PCR及RT-PCR方法测hVEGF121cDNA在基质细胞中的整合及转录;用免疫印迹及免疫组化检测VEGF121蛋白的表达;用MTT检测转基因细胞培养上清中VEGF的促人内皮细胞增殖活性.结果经酶切鉴定及基因测序证实重组逆转录病毒质粒正确,包装的病毒滴度为6×105.PCR证实基因组DNA有hVEGF121cDNA的整合;RT-PCR证实有hVEGF121mRNA的转录;Western blot及免疫组化检测有VEGF121蛋白的表达;MTT试验显示转基因细胞培养上清中VEGF121能促进人内皮细胞增殖.结论我们成功地构建了pLXSN/VEGF121重组逆转录病毒载体,该载体不仅能够有效地表达VEGF121蛋白,且表达的蛋白具有促进人内皮细胞增殖的生物学活性,这些均为进一步应用该载体研究VEGF基因治疗骨科缺血性疾患打下了基础.     

骨髓单个核细胞培养上清促进内皮细胞增殖作用

目的：探讨体外培养骨髓细胞分泌促血管生长因子的能力及培养上清对内皮细胞增殖的影响。方法：采用密度梯度离心法分离出大鼠骨髓单个核细胞进行体外培养,并连续收集4周培养上清。酶联免疫吸附实验（ELISA）法测定上清中血管内皮细胞生长因子（VEGF）;以含有不同浓度上清的培养液培养人脐静脉内皮细胞,分析单个核细胞培养上清对内皮细胞增殖的影响。结果：加入单个核细胞培养上清各组MTT比色光密度值较对照组明显增加（P<0.05）。第1,2,3,4周骨髓单个核细胞体外培养上清中VEGF分别为（24.40±7.99,89.28±5.13,115.24±10.08,157.00±15.64）pg/ml。结论： 骨髓单个核细胞培养上清可促进体外培养的人脐静脉内皮细胞增殖,体外培养的骨髓单个核细胞可持续分泌VEGF。     

Treatment of hemangioma by transfection of antisense VEGF gene

The effect of transfection of antisense vascular endothelial growth factor （VEGF） gene on the growth of hemangioma was studied. A total of 49 cases of capillary hemangiomas of the skin were collected. Immunohistochemical method was used to detect the expression of PCNA in hemangioma tissues. According to the finding, 49 cases of hemangiomas fell into proliferating phase （27 cases） and involuting phase （22 cases） respectively. Another 5 cases of normal skin tissues adjacent to the tumor tissues served as control. Immunohistochemical staining was performed to detect the expression of VEGF in the tumor tissues and the normal tissues. The average absorbance （A） values and the average positive area rate of VEGF were measured by image analysis system （HPIAS-2000）. Endothelial cells from the tumor tissues in proliferating phase were cultured. Eukaryotic expression vector was constructed by sub-cloning, and transfected into human hemangioma endothelial cells by using cation liposome as vector. The expression of VEGF mRNA and protein was detected by RT-PCR and indirect immunofluorescence assay （IFA）, respectively, and the biological characteristics of the transfected endothelial cells were examined by MTT assay and flow cytometry （FCM） after transfection. Immunohistochemical results showed that the expression of VEGF in proliferating endothelial cells was remarkably higher than those in involuting endothelial cells and normal endothelial cells （P〈0.01）, but there was no significant difference in the expression of VEGF between involuting endothelial cells and normal ones （P〉0.01）. Electrophoresis and sequencing indicated that the eukaryotic expression vector containing antisense VEGF gene, i.e. pcDNA3.1-VEGF, was success- fully constructed. After VEGF antisense RNA recombinant was transfected into hemangioma endothelial cells, RT-PCR revealed that the expression of VEGF mRNA in pcDNA-VEGF （V） group and blank group was obviously higher than that in pcDNA-VEGF （A） group, and that the expression of endogenous VEGF mRNA in pcDNA-VEGF （A） group was significantly inhibited. Immunohistochemical result demonstrated that, compared with blank group, there was statistically significant difference between pcDNA-VEGF （A） and pcDNA-VEGF （V） groups （P〈0.01）, but there was no significant difference between pcDNA-VEGF （V） group and blank group （P〉0.05）. The activity of endothelial cell proliferation was reduced significantly after transfection, and obvious apoptosis occurred in hemangioma endothelial cells after transfection of antisense VEGF. It was suggested that VEGF plays an important role in the pathological change of hemangiomas by promoting endothelial cell proliferation and angiogenesis. Antisense VEGF gene transfection could effectively inhibit the growth of hemanioma endothelial cells.     

VEGF165反义RNA表达对人胃癌细胞恶性生物学行为的影响

目的利用本室构建的反义VEGF165（血管内皮生长因子,vascular endothelial growth factor）真核表达载体,研究VEGF反义RNA表达对人胃癌细胞生物学表型的影响. 方法用阳性脂质体介导的基因转染技术,将VEGF反义RNA重组体转入人胃癌细胞系,观察转染细胞的细胞周期、增殖能力及致瘤生长情况等生物学表现. 结果 VEGF反义RNA重组体转染胃癌细胞后,斑点杂交、间接免疫荧光等分析显示,反义RNA基因转染技术可使VEGF的表达明显减弱;与未转染的细胞相比,G2/M期细胞增加(0.39),而S期细胞减少(0.54);克隆形成率(2.2%)低于未转染细胞(4.0%);肿瘤细胞接种裸鼠后33 d时,VEGF反义RNA表达人胃癌细胞所致的移植瘤体积（345±136) mm3明显小于未转染细胞所致的移植瘤体积（1534±363) mm3. 结论 VEGF反义RNA可以通过抑制肿瘤组织血管生成而防治肿瘤的生长,另外VEGF的表达可能与细胞增殖能力有关.     

人脐带间充质干细胞培养上清液对甲状腺乳头状癌细胞诱导人脐静脉内皮细胞血管形成的影响

目的: 探讨人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs）对甲状腺乳头状癌细胞TPC-1诱导人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells, HUVEC）血管形成的作用。方法: 使用不同浓度的hUCMSCs培养上清液（hUCMSC-CM）刺激甲状腺乳头状癌细胞系TPC-1;采用基质胶小管形成实验检测经hUCMSC-CM作用后的TPC-1细胞对HUVEC血管形成的影响;CCK-8法检测hUCMSC-CM对TPC-1细胞增殖能力的影响;实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法、酶联免疫吸附实验（ELISA）分别检测经hUCMSC-CM作用后的TPC-1细胞中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）的mRNA和蛋白表达及其培养上清液中VEGF的含量。结果： 与对照组相比,hUCMSC-CM可显著抑制TPC-1细胞的增殖（P<0.05和P<0.01）;经hUCMSC-CM刺激后的TPC-1细胞诱导HUVEC血管形成能力显著下调（P<0.001）,且TPC-1细胞中VEGF的mRNA和蛋白表达水平均显著降低（P<0.001）,其培养上清液中VEGF含量显著降低（P<0.05）。结论： hUCMSC-CM可显著下调TPC-1细胞中VEGF的表达及分泌,抑制TPC-1细胞诱导HUVEC血管形成的能力。