睫状神经营养因子对谷氨酸引起海马神经细胞内游离Ca~(2 )浓度和P53蛋白表达的作用

目的 :通过探讨睫状神经营养因子对谷氨酸引起海马神经细胞内游离 Ca2 浓度和 P53蛋白表达的作用 ,提供睫状神经营养因子存在非基因组快速作用途径 ,并对基因组信号转导产生影响的证据。方法 :用活细胞内荧光探针 Fura2 / AM实时检测睫状神经营养因子对谷氨酸引起海马神经细胞内游离 Ca2 浓度的影响 ,并用免疫组化方法观察睫状神经营养因子对谷氨酸引起海马神经细胞内 P53蛋白表达的作用。结果 :谷氨酸可引起海马神经细胞内游离 Ca2 浓度快速升高 ,并在 50 0μmol/ L-1范围内呈剂量依赖性。2 0 0μmol/ L-1的谷氨酸可上调 P53蛋白表达。睫状神经营养因子对静息条件下海马神经细胞内的游离 Ca2 浓度无显著改变。用睫状神经营养因子孵育 5min后 ,可快速压抑谷氨酸引起的胞内游离 Ca2 浓度升高 ,并下调 P53蛋白表达。结论 :睫状神经营养因子可能通过Ca2 信号的快捷途径 ,启动基因组的信号转导     

睫状神经营养因子对谷氨酸引起海马神经细胞内游离Ca^2＋浓度和P …

目的：通过探讨睫状神经营养因子对谷氨酸引起海马神经细胞内游离Ｃａ＾２＋浓度和Ｐ５３蛋白表达的作用,提供睫状神经营养因子存在非基因组快速作用途径,并对基因组信号转导产生影响的证据。方法：用活细胞内荧光探针Ｆｕｒａ２／ＡＭ实时检测睫状神经营养因子对谷氨酸引起海马神经细胞内游离Ｃａ＾２＋浓度的影响,并用免疫组化方法观察睫状神经营养因子对谷氨酸引起海马神经细胞内Ｐ５３蛋白表达的作用。结果：谷氨酸可引起海马     

睫状神经营养因子对大鼠去神经骨骼肌的营养作用

目的：通过测定SD大鼠坐骨神经离断后比目鱼肌（SOL）和趾长伸肌（EDL）肌纤维横截面积,观察持续给睫状神经营养因子（CNTF）对神经骨骼肌萎缩的影响。结果：SD大鼠坐骨神经离断后,持续给0．2mg/kg.d的CNTF20天后,损伤侧SOL和EDL肌纤维横截面积分别比实验对照组高27％（P＜0．01）和14％,SOL肌纤维横截面积比EDL增加的幅度大,而给予0．05mg/kg.d的CNTF20天后,动物肌纤维横截面积与实验对照组无明显差异。结论：CNTF可显著改善坐骨神经离断后SD大鼠骨骼肌的萎缩,并且CNTF效应的强弱与用药剂量和肌肉类型有关,0．2mg/kg.dCNTF作用明显强于0．05mg/kg.dCNTF,慢肌（SOL）比快肌（EDL）对CNTF更敏感。     

睫状神经营养因子对严重烫伤大鼠纹状体及海马 NOS 阳性神经元的影响

目的：观察大鼠严重烫伤后纹状体和海马ＮＯＳ阳性神经元数目和阳性反应面积的变化及睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）对其的影响。方法：应用ＮＡＤＰＨ－ｄ酶组织化学的方法。结果：大鼠体表烫伤后３天,纹状体ＮＯＳ阳性神经元数目明显增加,梁色呈强阳性,阳性反应面积增加。海马ＮＯＳ阳性神经元数变化不明显,仅见阳性反应面积增加,睫状神经营养因子可降低纹状体的ＮＯＳ阳性神经元数目、阳性反应面积,ＮＯＳ阳性神经元着色较淡     

睫状神经营养因子受体研究进展

本文综述了睫状神经营养因子(CNTF)受体各个亚基的分子和基因结构,对CNTF受体信号转导机理进行概括,并探讨了CNTF与造血生长因子在信号转导上的相似性,以阐明CNTF对于造血系统的可能作用。     

睫状神经营养在子研究进展

睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）分布于神经系统的非神经细胞，具有广泛的生物学活性，可以提高体内外各种类型外周神经元的存活。ＣＮＴＦ受体在神经系统和骨骼肌中广泛存在，在运动神经系统及与运动系统有关的部位大量表达。其对运动神经元的生理效应为临床应用于肌萎缩性脊髓侧索硬化及帕金森氏症开辟了前景。ＣＮＴＦ与造血生长因子在结构与功能上具有一定的相关性。     

睫状神经营养因子研究进展

睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）分布于神经系统的非神经细胞，具有广泛的生物学活性，可以提高体内外各种类型外周神经元的存活。ＣＮＴＦ受体在神经系统和骨骼肌中广泛存在，在运动神经系统及与运动系统有关的部位大量表达。其对运动神经元的生理效应为临床应用于肌萎缩性脊髓侧索硬化及帕金森氏症开辟了前景。ＣＮＴＦ与造血生长因子在结构与功能上具有一定的相关性。     

人睫状神经营养因子基因在大肠杆菌中的表达

目的克隆人睫状神经营养因子（ｈＣＮＴＦ）基因，并在大肠杆菌宿主系统中高效表达出具有生物活性的ｈＣＮＴＦ蛋白。方法从人外周神经组织总ＲＮＡ经逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增得到编码人ＣＮＴＦ的全长ｃＤＮＡ片段，此片段经回收和纯化后克隆进ＰＧＥＭ－５Ｚｆ（＋）质粒载体，并进行了ＤＮＡ序列分析，然后进一步亚克隆进Ｔ７启动子表达载体，用ＩＰＴＧ在大肠杆菌宿主中诱导ｈＣＮＴＦ蛋白表达，并以体外培养的鸡胚背根神经节（ＤＲＧ）神经元测定了重组ｈＣＮＴＦ蛋白的神经营养活性。结果成功克隆了人ＣＮＴＦ基因，含重组ＣＮＴＦ质粒的大肠杆菌经０．４ｍｍｏｌ／ＬＩＰＴＧ诱导３小时后，靶蛋白占细菌总蛋白的２５％以上。结论ｈＣＮＴＦ基因的克隆和高效表达为进一步研究其结构功能关系和临床应用打下了基础     

重组睫状神经营养因子对胶质瘤细胞形态和基因表达的影响

重组睫状神经营养因子对胶质瘤细胞形态和基因表达的影响张树辉詹洲陶霞田野苹何成作者单位：２２１００４解放军第九七医院病理科［张树辉（现在４０００３８第三军医大学病理学教研室）、陶霞］；第二军医大学病理学教研室（詹洲、田野苹、何成）研究表明，睫状神经...     

睫状神经营养因子的基因结构及受体

睫状神经营养因子最初由于能促进鸡胚胎睫状神经节副交感神经元存活而被发现,现已知道它对神经系统的细胞具有更广泛的作用。最近研究表明睫状神经营养因子与成血细胞因子的一个亚家族成员在结构上相似并共用受体成分。     

地塞米松对谷氨酸升高海马神经元胞内[Ca~(2+)]i作用的影响

为了研究谷氨酸致痫和人工合成的糖皮质激素地塞米松抑痫作用的细胞内机制,本文在ＥＰＣ ９ 光电联合检测系统上用Ｆｕｒａ ２ 阳离子检测法观察了地塞米松对谷氨酸引起的培养乳鼠海马神经细胞内［Ｃａ２＋ ］ｉ 的影响。结果：（１）谷氨酸引起海马神经元内［Ｃａ２＋ ］ｉ 显著升高,ＥＧＴＡ（５ ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ）耗竭细胞外钙后,谷氨酸升钙作用消失,给予氯化钙（１ ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ）后其升钙作用恢复：Ｖｅｒａｐａｍ ｉｌ（１０ μｍ ｏｌ／Ｌ）对谷氨酸升钙作用无明显的影响,ＭＫ ８０１（１０ μｍ ｏｌ／Ｌ,ＮＭ ＤＡ 受体特异性非竞争性阻断剂）可明显阻断谷氨酸的升钙作用。（２）地塞米松（１００ μｍ ｏｌ／Ｌ）作用２ ｈ 明显抑制了谷氨酸（２００ μｍ ｏｌ／Ｌ）的升钙作用,地塞米松（１００ μｍ ｏｌ／Ｌ）＋ 放线菌酮（１０ μｍ ｏｌ／Ｌ,蛋白合成抑制剂）共同作用２ ｈ,再加入谷氨酸,则地塞米松的抑制作用消失,地塞米松（１００ μｍ ｏｌ／Ｌ）作用２ ｍ ｉｎ 对谷氨酸（２００ μｍ ｏｌ／Ｌ）的升钙作用无明显影响。本实验结果提示,谷氨酸通过ＮＭ ＤＡ 受体介导的外钙内流升高了海马神经元胞内［Ｃａ２＋ ］ｉ,地塞米松可能通过基因组机制抑制了谷氨酸的这种升     

马桑内酯致痫大鼠海马内c－fos原癌基因表达及谷氨酸免疫反应的变化

用免疫细胞化学双重染色法对马桑内酯致痫大鼠齿状回及海马回ＣＡ３区内原癌基因表达、谷氨酸免疫反应的变化及其相互关系进行了研究。一侧侧脑室内注射马桑内酯诱发癫痫后，在双重免疫细胞化学染色的切片上，齿状回及海马回ＣＡ３区内均有３种不同类型的细胞：谷氨酸（Ｇｌｕ）单标细胞、Ｆｏｓ单标细胞和Ｆｏｓ／Ｇｌｕ双标细胞。癫痫发作后１ｈ，注射侧齿状回有大量Ｆｏｓ／Ｇｌｕ双标细胞，而海马回ＣＡ３区仅有散在的双标细胞；癫痫发作后１．５ｈ，海马回ＣＡ３区双标细胞数明显增多。Ｆｏｓ单标细胞数及谷氨酸免疫反应性与双标细胞数是平行的。根据以上结果，本文对马桑内酯致痫的机制进行了讨论。     

硒对氧化偶氮甲烷所致结肠癌模型大鼠睾丸精原细胞P16蛋白表达的影响

目的观察硒对氧化偶氮甲烷（AOM）所致结肠癌大鼠睾丸精原细胞P16蛋白表达的影响.方法随机将20只3周龄断乳雄性SD大鼠分为：正常对照组、实验对照组、AOM致癌前喂食亚硒酸钠水组、AOM致癌后喂食亚硒酸钠水组.每周腹腔注射AOM 15 mg/kg,持续2周,造成大鼠结肠癌模型.用4 mg/L Na2SeO3水溶液分别在AOM致癌前、后开始进行干预,并持续至实验结果.各组均于34周后取两侧睾丸,用免疫组织化学方法,观察大鼠睾丸精原细胞内P16蛋白的表达,并进行图像分析.结果正常组大鼠的睾丸内未见精原细胞表达P16蛋白,而实验对照组、硒干预AOM致癌组（AOM致癌前、后喂食亚硒酸钠水）的精原细胞P16均呈阳性表达,阳性产物呈深棕色,定位于细胞核中,细胞质内仅有少量表达.实验对照组、AOM致癌前、后喂食亚硒酸钠水组阳性表达逐渐增强,组间具有显著性差异（P〈0.05）.结论硒可增强AOM所致结肠癌大鼠精原细胞P16蛋白的表达.     

皮质酮对原代培养的海马神经元及其Ca~(2+)/CaMKII的影响

在培养液中加入 10 7、10 6和 10 5浓度(mol/L)的皮质酮,采用MTT染色测定、Fura 2 /AM的荧光标记以及Western印迹的方法,观察了不同浓度的皮质酮作用下海马神经元形态学和细胞存活率的变化以及胞浆内游离钙离子浓度 [Ca2+ ]i和CaMKII表达的变化规律, 探讨其对原代培养的大鼠海马神经元及其Ca2+ /CaMKII的影响和可能的机制。结果发现: 10 6、10 5浓度的皮质酮对海马神经元的形态学影响较大,与对照组比较,细胞存活率明显降低; [Ca2+ ]i分别为 113. 1022±16. 9716、155.3794±20. 7727;CaMKII的表达也明显减少;三者的变化均显著 (P<0. 01 ),而 10 7浓度的皮质酮对上述指标影响不大 (P>0.05)。此外,相关性分析表明: [Ca2+ ]i和CaMKII的表达呈现负相关(P<0. 05)。以上结果提示,皮质酮对大鼠海马神经元的作用存在浓度依赖效应,浓度越高,对大鼠海马神经元的损伤越大,同时也验证了皮质酮是啮齿类动物的主要的应激激素。     

海人酸对家兔海马和尾核神经元的作用

本文比较了成年兔和幼年兔神经元对海人酸的敏感性,并观察了海人酸对家兔海马和尾核神经元的作用。主要结果为: 1.成年兔侧脑室内注射不同剂量的海人酸后,海马不同部位的神经元有不同程度的损伤。注射剂量为0.8μg时,CA_3和CA_4区的大部分锥体细胞有明显的溃变,细胞皱缩,着色深,并有胶质细胞增生;同时尾核神经元也有严重损伤,胶质细胞大量增生。剂量为0.5μg或0.3μg时,CA_3和CA_4的锥体细胞约有1/2被破坏。剂量增至1μg时,锥体细胞损伤范围扩大,溃变更严重。 2.幼兔侧脑室内注射0.1μg或0.2μg海人酸后,海马的锥体细胞有一定的损伤,但仪限于CA_3a区。 3.向成年兔海马CA_2区注射0.3μg海人酸后,海马神经元即有明显的损伤,但只局限于注射的部位。成年兔尾核头部注射0.3μ海人酸后,可在注射部位观察到损伤的神经元和数在的胶质细胞。成年家兔海马锥体细胞对海人酸的敏感性较幼兔为强。海人酸对家兔海马锥体细胞的作用比较强,同时尾核神经元对海人酸也有一定的敏感性。     

流体切应力对中性粒细胞内Ca2+的影响

流体切应力是中性粒细胞的重要功能环境 ,但以往的研究很少涉及力学作用对中性粒细胞的影响。我们利用旋转粘度仪提供的流体切应力作用于分离的中性粒细胞 ,采用Fura 2 /AM与细胞内游离Ca2 结合 ,检测其荧光强度 ,研究不同力学条件下细胞内游离Ca2 浓度的变化情况 ;另外 ,分别以f MLP和TNF两种刺激因子作用中性粒细胞 ,使之激活 ,与此同时考察流体力学作用对中性粒细胞激活程度的影响。结果显示 :定常剪切流 ,切变率由低变高时 ,中性粒细胞内的游离Ca2 水平先是显著下降 ,切变率达到一定程度后 ,[Ca2 ]i逐渐回升 ,并且会超过静止时的水平 ;两种刺激因子在静态下激活中性粒细胞均可使游离Ca2 大幅度上升 ,同时给予定常流作用 ,在较低切变率作用下 ,这一上升被明显抑制 ,当切变率升高到一定程度后 ,[Ca2 ]i回复到静态激活水平甚至更高。正弦振荡剪切作用于中性粒细胞 ,[Ca2 ]i随最大切变率增大而升高 ,当激活剂和剪切流同时作用时 ,[Ca2 ]i随最大切变率升高而下降 ,逐渐接近最大切变率相同时的单纯振荡切应力作用的水平。由此我们认为 :体内不同血流环境将影响中性粒细胞的 [Ca2 ]i,在不同循环部位的血管血流中 ,流体切应力对中性粒细胞的 [Ca2 ]i有着不同的调节作用。     

P16,P53蛋白及PCNA在癫痫患者海马硬化灶的表达

为了解癫痫病灶胶质增生的机理，对２０例海马硬化灶及１０例对照进行了Ｐ１６、Ｐ５３蛋白及ＰＣＮＡ表达的免疫组化检测。结果：Ｐ１６蛋白在癫痫病灶胶质增生区较对照组表达率降低，差别有统计学意义；Ｐ５３蛋白在癫痫组及对照组均呈阴性反应；ＰＣＮＡ在癫痫灶胶质增生区较对照组胶质细胞表达增强（Ｐ＜０．０１）。上述结果提示，癫痫海马硬化灶胶质增生可能与Ｐ１６蛋白表达减少有关；Ｐ５３蛋白表达在病变区及正常区无明显变化；ＰＣＮＡ参予了胶质细胞增生的调节。     

UV-C诱导的体外凋亡SMC内Bcl-2蛋白表达的研究

目的 观察经ＵＶ－Ｃ照射后的凋亡ＳＭＣ内Ｂｃｌ－２蛋白表达的情况。方法 应用组织贴块法进行体外ＳＭＣ培养，ＳＰ免疫组织化学技术和图像分析技术检测经ＵＶ－Ｃ照射后的ＳＭＣ内Ｂｃｌ－２蛋白的表达。结果 ＵＶ－Ｃ照射体外ＳＭＣ后，细胞出现典型的凋亡形态学和生化指标的改变；凋亡ＳＭＣ胞浆内Ｂｃｌ－２表达下降和出现胞浆内Ｂｃｌ－２的迁移和再分布入核。结论 ＵＶ－Ｃ照射可引起体外ＳＭＣ凋亡，且Ｂｃｌ－２可能参     

马桑内酯所致慢性癫痫大鼠海马星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白的表达

用免疫组织化学方法研究了系统应用马桑内酯所致的慢性癫痫大鼠海马中星形胶质细胞的胶质纤维酸性蛋白的表达。结果证明,整个海马的胶质纤维酸性蛋白免疫反应明显增强,并可见阳性细胞增生、胞体肥大,尤以齿状回门区和海马分子腔隙层及始层为甚。此外,本实验还发现海马胶质纤维酸性蛋白的阳性反应强度随发作后不同时间间隔（２ ｈ～９ ｄ）而不同,且直至发作后９ ｄ,胶质纤维酸性蛋白阳性反应程度仍高于对照组。此结果表明,马桑内酯所致癫痫反复发作可使海马星形胶质细胞内胶质纤维酸性蛋白的表达长期保持在较高水平。