人卵巢组织冷冻保存及应用研究进展

卵巢组织冷冻保存可保留年轻的恶性肿瘤和卵巢早衰患者的生殖内分泌功能.目前常用的冷冻方案包括程序化慢速冷冻和玻璃化冷冻.程序化慢速冷冻技术较成熟,已在多领域广泛应用;玻璃化冷冻是近十多年新发展起来的冷冻技术,有研究报道,其冷冻效果优于前者.冻融后卵巢组织主要用于移植和体外培养.卵巢组织自体移植已用于临床,并有成功分娩的报道;体外培养技术尚不成熟,仍处于研究阶段.文献人卵巢组织冷冻保存及其应用的研究进展.     

人卵巢组织冷冻保存的研究进展及应用前景

有效的放疗及化疗大大提高了女性癌症患者的生存率,但是这些治疗措施却能直接导致卵巢功能早衰,对女性生育能力产生严重影响.随着人们对保留生育能力的逐步深入认识,多种技术方法 为年轻癌症患者保存生育功能带来了希望,如药物治疗、卵子冷冻、胚胎冷冻、卵巢组织冷冻保存等.近年来卵巢组织冷冻保存是将放化疗前冻存的卵巢组织复苏后自体移植,使患者恢复生殖内分泌功能,从而保存女性生育能力,因此卵巢组织冷冻保存有广阔的应用前景.然而,卵巢组织冷冻在实施过程中的一些关键性问题还没有完全解决.该文综合近年来卵巢组织冷冻的研究进展,对目前存在的问题及其研究前景作以综述,以探讨如何建立最佳的卵巢组织冷冻方案.     

冻融卵巢自体移植和体外培养的研究进展

卵巢组织冻融后移植或进行体外培养，在一定程度上可恢复卵巢内分泌功能和生育能力。冻融卵巢皮质切片自体原位和异位移植的研究有一定的进展，并开始应用于临床。移植前对冻融卵巢活力须进行评估，以保证移植的卵巢有一定数量的存活卵泡。对于带蒂卵巢移植来说，关键是改进血管灌注冷冻、复苏的方法。冻融卵巢自体移植如何尽快建立血供，减少缺血、缺氧对卵巢组织的损伤，提高卵泡存活率，以及冻融卵巢组织体外培养获得可供受精的卵母细胞的方法有待进一步研究。     

冻融卵巢自体移植和体外培养的研究进展

卵巢组织冻融后移植或进行体外培养,在一定程度上可恢复卵巢内分泌功能和生育能力.冻融卵巢皮质切片自体原位和异位移植的研究有一定的进展,并开始应用于临床.移植前对冻融卵巢活力须进行评估,以保证移植的卵巢有一定数量的存活卵泡.对于带蒂卵巢移植来说,关键是改进血管灌注冷冻、复苏的方法.冻融卵巢自体移植如何尽快建立血供,减少缺血、缺氧对卵巢组织的损伤,提高卵泡存活率,以及冻融卵巢组织体外培养获得可供受精的卵母细胞的方法有待进一步研究.     

成人卵巢组织玻璃化冷冻保存的实验研究

目的探讨玻璃化法冷冻保存对成人卵巢组织的影响。方法采集21例成人卵巢组织,随机分成三组:新鲜对照组、玻璃化冷冻组、程序冷冻组。新鲜的和冻融后的卵巢皮质分别进行光学显微镜观察和原位末端转移酶标记(TUNEL)实验。结果二个冷冻组的异常始基卵泡及初级卵泡比率差别无统计学意义(P>0.05),但均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。冷冻组与对照组的卵泡凋亡率差别无统计学意义(P>0.05)。结论玻璃化冷冻是人类卵巢组织较适宜的冷冻保存方法。     

人类卵巢冷冻保存及移植的发展前景

尽管多种动物应用冷冻保存的卵巢组织进行移植后成功地恢复了生殖能力，但冷冻保存的卵巢组织对人体的作用尚不明确。自体卵巢移植被认为是最可行的，但也存在着患肿瘤的女性发生肿瘤细胞转移的可能。异体移植的始基卵泡的成熟发育令人振奋，但其有效性和安全性尚需进一步观察，此外宿主体内卵母细胞成熟的质量也未可知。卵巢移植技术在充分应用于临床之前还有许多问题亟待解决，其中最主要的是优化冷冻程序和找到保护移植组织免受再灌注时缺血损伤的方法。相信在不久的将来，卵巢移植将会对卵巢早衰妇女发挥重要的临床作用。     

冷冻卵巢组织应用的研究进展

癌症治疗过程中放、化疗所造成的医源性月经不规律、卵巢早衰及相关不孕等日益影响到年轻但治愈率高的女性癌症患者的生活质量。卵巢组织的冷冻和移植作为一种新的恢复女性生殖和内分泌功能的手段．越来越受到重视。目前卵巢组织的冷冻方法主要有慢速冷冻法、快速冷冻法和玻璃化冷冻；冻融后卵巢组织的应用途径主要为自体移植、异体移植及未成熟人卵母细胞的体外培养。就卵巢组织的各种冷冻方法和应用途径进行综述，对其目前的研究进展和优缺点进行分析，提出存在的问题。     

人类卵巢组织冷冻及其应用的研究进展

随着冷冻技术的不断发展,卵巢组织冷冻作为一种保存女性生殖力最长远的选择,已成为该领域的研究热点之一。该文就近几年来国内外有关人类卵巢组织冷冻保存的现状、方案及其移植应用等研究状况作以综述。     

人类卵巢组织冷冻及其应用的研究进展

随着冷冻技术的不断发展，卵巢组织冷冻作为一种保存女性生殖力最长远的选择，已成为该领域的研究热点之一。该文就近几年来国内外有关人类卵巢组织冷冻保存的现状、方案及其移植应用等研究状况作以综述。     

人卵巢组织冷冻及体外培养的进展

人卵巢组织冷冻对于生育力的保存有重要的作用,可以将多个原始卵泡保存起来,解冻后卵巢组织体外培养对生命科学的研究具有重要意义.建立完善的长期冻融人卵巢组织体外培养体系,仍然需要进一步的研究.该文对于卵巢组织冷冻的方法、影响冷冻的因素、冷冻后卵巢组织活力评估及卵巢组织体外培养方法、培养液的组成及国内外研究现状进行综述.     

玻璃化冷冻卵母细胞及卵巢组织研究进展

玻璃化冷冻技术近年已广泛应用于生殖领域,尤其是在女性生育力的储备方面展示其特有的优势。目前胚胎玻璃化冷冻已较成熟,并应用于临床。首次卵母细胞玻璃化冷冻的成功以及实验动物卵巢组织成功移植并获得分娩给研究带来无限希望,但目前仍处于实验阶段,研究者企图从不同角度解决难题。卵母细胞冷冻后,细胞结构的易损伤性造成的低复苏率,以及对卵巢组织玻璃化冷冻的可行性探索,对生殖领域提出新挑战。由于卵巢组织冻存与卵母细胞的冻存有着密不可分的联系,就两者国内外新进展做综述。     

冷冻卵巢移植研究进展

哺乳动物的卵巢内有数量众多的卵细胞，是雌性生殖细胞的一个资源库。冷冻保存健康的卵巢组织，快速复苏后再原位移植到盆腔或异位移植至皮下及肾被膜等部位，有望恢复母体的生育力和维持正常激素水平。卵巢组织移植的成功与否取决于移植物的大小、局部缺血持续时间、外源性抗氧化剂和血管生成因子等因素。目前，已有少数关于人类卵巢冷冻移植并成功获得活产儿的报道，也有较多动物实验得到证实。现就冷冻卵巢移植的研究进展进行综述。     

卵巢组织冻存方案的优化研究进展

随着肿瘤治疗技术的提高,保护女性生育力逐渐引起了人们的关注。胚胎冷冻技术在各大生殖中心的运用使女性患者一定程度获益,但胚胎冷冻应用的局限性使卵巢组织冷冻成为研究的热点,而冷冻方法的研究成为第一难题。目前针对卵巢组织块的冷冻方法主要包括慢速程序化冷冻和玻璃化冷冻。相比卵巢组织块的冷冻方法,定向冷冻的应用在整个卵巢冷冻中更有优势。定向冷冻能使整个卵巢的冷却速度保持一致,从而降低整个卵巢在冷冻过程中的损伤。不同的冷冻方法对卵巢组织冷冻和(或)解冻移植后功能恢复的影响程度不同,因此寻找合适的冷冻方法对保证最佳冻存效率有着重要的意义。综述近期优化的卵巢组织冻存方案,为临床应用提供参考。     

女性肿瘤患者卵母细胞冻存的研究进展

随着医学发展,女性肿瘤患者生存期限延长,这部分人的生育问题成为医务人员关注的热点。对于肿瘤的治疗如放疗、化疗会显著影响卵巢功能甚至导致卵巢功能衰竭。卵母细胞冻存因其所用时间短、花费低,不受月经周期限制,对患者身体各方面影响小及相对安全等优势,受到临床工作者的关注。综述卵母细胞及卵泡获取前的预处理、卵母细胞及卵泡的具体获取方式、未成熟卵母细胞体外培养成熟（in-vitro maturation,IVM）的培养系统及培养液成分、卵母细胞冷冻等内容,为此项技术的临床应用提供参考。     

人类卵巢组织冷冻保存及其评价的研究进展

恶性肿瘤及其治疗过程可能导致女性患者的卵巢功能衰竭,而卵巢组织冷冻保存使这些患者的生育储备以及生殖、内分泌功能的保存成为可能,具有重要的现实意义和广阔的应用前景.目前,卵巢组织冷冻保存技术包括慢速冷冻法、快速冷冻法和玻璃化冷冻法.卵巢组织冻融后主要通过组织学光镜观察卵母细胞和颗粒细胞形态;电镜下观察卵母细胞和间质细胞的线粒体、内质网、核膜和核染色质等超微结构改变评价冻融的影响;冻融组织培养后主要通过观察各卵泡,包括卵泡的直径大小、颗粒细胞的形态和层数、以及卵泡腔和透明带的形成和培养液中激素的含量等评价组织生长发育潜能;通过组织移植技术,检测移植宿主内分泌功能或生殖和内分泌功能的恢复是评价冻存复苏成败的重要指标和目标.     

人类卵子冷冻技术的进展

人类卵子冷冻作为生育力保存的一种方式,在辅助生殖技术（ART）中起着关键的作用。由于伦理及研究条件的限制,卵子冷冻技术一直发展缓慢。近年,随着冻融技术及胞浆内单精子注射技术（ICSI）的发展,卵子冷冻已广泛应用于临床。玻璃化冷冻因其简单、细胞损伤小、复苏存活率高正在逐步取代慢速冷冻法,被大多数生殖医学中心所采纳。但卵子冷冻保存过程中仍存在交叉感染的风险及卵子冷冻损伤,液氮紫外线消毒、蒸气氮存储系统或封闭载杆可以防止交叉感染,相对于慢速冷冻法,玻璃化冷冻在减少卵子冷冻损伤方面更有优势。     

人卵巢组织玻璃化冷冻与移植的研究进展

人卵巢组织冷冻对于保存生育力有重要作用.现常用冷冻方法包括玻璃化冷冻和程序化冷冻.大量研究表明,前者冷冻效果优于后者.迄今为止,玻璃化冷冻仍缺少标准化的程序.作为恢复癌症患者生殖内分泌功能的重要手段,卵巢组织移植近年得到发展,但仍存在许多问题有待进一步研究.综述玻璃化冷冻效果的影响因素、减少缺血再灌注损伤方法、移植后卵...     

两种冷冻方法对人卵巢组织冻存效果的分析

目的：比较程序化冷冻与玻璃化冷冻人卵巢组织的冻存效果。方法：收集19例人卵巢组织标本，每例分成2份，1份应用程序化方法冷冻，另1份应用玻璃化方法冷冻，复苏后分别移植到去卵巢的雌性裸鼠颈部皮下。38只重症联合免疫缺陷（SCID）裸鼠（移植宿主）随机分为2组：A组19只，移植程序化冷冻复苏的人卵巢组织；B组19只，移植玻璃化冷冻复苏的人卵巢组织。以去除移植宿主双侧卵巢日为D0，移植人卵巢组织日为D21，整个实验过程中，每日通过阴道脱落细胞学检查观察移植宿主动情周期变化，分别于D0、D21、D42、D63取裸鼠静脉血，酶联免疫吸附测定（ELISA）方法检测血清AMH浓度。结果：切除卵巢后移植宿主动情周期消失，D63共有14只裸鼠恢复动情周期，2组间差异无统计学意义（A组8只，B组6只，P＞0.05），但A组恢复时间显著少于B组[（16.38±1.60）d vs.（18.33±1.21）d，P＜0.05]。2组间AMH水平在D0、D21、D42、D63差异均无统计学意义（P＞0.05），但A组、B组D21 AMH水平均显著低于D0，差异有统计学意义（P＜0.05）。恢复动情周期移植宿主的AMH水平在D42和D63逐渐回升但未恢复至D0水平，未恢复动情周期移植宿主的AMH水平在D42和D63均未回升但仍低于D0。结论：程序化冷冻和玻璃化冷冻均能有效保存卵巢组织。在冷冻的卵巢组织经解冻-移植后宿主恢复动情周期方面，程序化冷冻要优先于玻璃化冷冻，但仍需进一步研究。     

人卵巢组织冷冻对印迹基因IGF-2/H19甲基化程度及表达的影响

目的：探讨程序化冷冻和固相表面玻璃化冷冻对人卵巢组织中印迹基因胰岛素样生长因子2（IGF-2）/H１９（一种非可读框架RNＡ）差异性甲基化区（DMR）CpG岛甲基化程度及两基因表达的影响。方法：15例因其他疾病而手术的患者,将病理检查剩余的卵巢组织切割成皮质小条后随机分配到新鲜组（F组）、程序化冷冻组 （SF组）和固相表面玻璃化组（SSV组）。通过甲基化聚合酶链反应（MS-PCR）检测各组卵巢组织中IGF-2/H19 CpG岛甲基化程度,并分别采用免疫组化法和原位杂交方法检测各组卵泡中IGF-2蛋白和H19 RNA的表达情况。结果：F组、SF组和SSV组卵巢组织甲基化程度分别为26.46%,41.02%和33.09%,虽然SF组和SSV组的甲基化程度略高于F组,但差异无统计学意义。在新鲜和冻融后的卵巢组织中,各级别卵泡的卵母细胞和颗粒细胞胞质中均有IGF-2蛋白阳性表达,3组之间原始和初级卵泡IGF-2的表达差异无统计学意义（P＞0.05）。原始卵泡的颗粒细胞和卵母细胞均可见到H19 RNA阳性表达,3组之间原始卵泡H19 RNA的表达差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：未检测到慢速程序化冷冻和快速固相表面玻璃化冷冻对印迹基因IGF-2/H19 CpG岛甲基化程度的影响,亦未发现2种冷冻方法对原始和初级卵泡中IGF-2蛋白和H19 RNA表达的影响。