金标渗滤法快速检测血吸虫循环抗原的现场应用研究

将抗重组蛋白ＳＶＬＢＰ－ＩｇＧ用于ＤＩＧＦＡ检测２２２１例血清中血吸虫循环抗原,其中急性血吸虫病人血清７０份,慢性血吸虫病人血清３０７份,循环抗原检出率分别为１００％和６８．４％。非流行区健康人血清２００份,未见阳性反应。除肺吸虫外,与其它寄生虫或非寄生虫感染病人血清无明显交叉反应。用ＤＩＧＦＡ单盲法检测２批血清,结果显示对急性血吸虫病人的敏感性均为１００％;对慢性血吸虫病人的敏感性分别为６９．４     

双夹心DIGFA检测血吸虫循环抗原的应用研究

以日本血吸虫重组极低密度脂蛋白 ( SVL BP)制备的多抗为捕捉抗体 ,胶体金标记血吸虫虫卵多克隆抗体为覆盖抗体 ,采用双夹心金标免疫渗滤法 ( DIGFA)检测血吸虫病病人血清中循环抗原。结果 70份急性血吸虫病病人血清的阳性率为 10 0 % ,15 9份慢性血吸虫病病人血清的阳性检出率为 6 2 .3% ;12 0份流行区健康人群血清检测均阴性 ;10 0份非流行区健康人群血清 ,2份呈阳性反应 ,假阳性率为 2 %。与肺吸虫病病人血清的交叉反应率为4.0 % ( 1/ 2 5 ) ;与华支睾吸虫病病人血清未见交叉反应。提示该法具有较高的敏感性和特异性 ,判断结果比较客观 ,且简便、快速 ,适合于基层医院及现场应用     

双夹心DIGFA检测血吸虫循环抗原的应用研究

以日本血吸虫重组极低密度脂蛋白（ＳＶＬＢＰ）制备的多抗为捕捉抗体,胶体金标记血吸虫虫卵多克隆抗体为覆盖抗体,采用双夹心金标免疫渗滤法（ＤＩＧＦＡ）检测血吸虫病病人血清中循环抗原。结果７０份急性血吸虫病病人血清的阳性率为１００％,１５９份慢性血吸虫病病人血清的阳性检出率为６２．３％;１２０份流行区健康人群血清检测均阴性;１００份非流行区健康人群血清,２份呈阳性反应,假阳性率为２％。与肺吸虫病病人血清     

快速检测抗日本血吸虫抗体的金标免疫渗滤法的建立及应用

以血吸虫虫卵浸出液为抗原，金标记兔抗人ＩｇＧ为显示剂，建立了检测抗血吸虫抗体的金标免疫渗滤法（ＤＩＧＦＡ）。以该法检测血吸虫病患者血清８７份，阳性检出率为９８．９％；非流行区血清１００份，阴性符合率为１００％；１５例肺吸虫病患者血清，１例出现阳性反应，交叉反应率为６．７％；１０例华支睾吸虫病患者和２５例乙型肝炎患者，均无交叉反应。本法与ＥＬＩＳＡ比较，符合率达９６．７％。揭示ＤＩＧＦＡ的敏感性和特异性与ＥＬＩＳＡ相近，但方法简便、快速、试剂稳定，且无需特殊设备，适合于基层单位和现场应用     

金标免疫渗滤法在脑囊虫病诊断中的应用

为寻找简便可和的脑囊虫病诊断方法。将2株抗猪囊尾蚴囊液抗原McAb, 一个滴于硝酸纤维素膜上,另一与胶体金结合,建立了检测脑囊虫病患脑脊液（CSF）中循环抗原（CA）的金标免疫渗滤法（DIGFA）,本法中抗原=、抗体通过渗滤在膜上进行反应,10分钟内即可用肉眼观察结果,以该法检测48例脑囊虫病患CSF、26份健康人CSF及23例非囊虫病患CSF,对检测样本作了沸浴处理,处理前后的48例脑囊虫病患CSF阳性检出率分别是77.08%和93.75%,处理前后的对照CSF阴性符合率均未改变,26例健康人CSF,阴性符合率为96.15%;23例非囊虫病患CSF,1例出现阳性反应,交叉反应率为4.35%,该方法可检出最小抗原量为0.5ug/L沸浴处理可提高脑囊虫病人CSFR的CA阳性检出率,DIGFA敏感、特异重复性好,操作简便,无需特殊设备,可用于囊虫病的诊断。     

金标免疫渗滤法诊断试剂盒诊断血吸虫病的价值研究

目的　评价金标免疫渗滤法诊断试剂盒（DIGFA-kit）用于血吸虫病血清流行病学调查的价值。方法　采用DIGFA与ELISA单盲平行检测各期血吸虫病病人血清、非流行区人群血清、疫区人群血清和血吸虫病已控制地区人群血清共2304份。结果　DIGFA检测血吸虫抗体的敏感性为96.8%,对非流行区健康人群的特异性为100%;该法检测疫区居民血清508份,抗体阳性检出率为35.6%,在Kato法粪检阳性的81人中,其中抗体阳性79人,阳性符合率为97.5%;检测血吸虫病已控制地区人群血清,抗体阳性率为4.6%;根据DIGFA的敏感性和对非流行区人群的特异性,计算其Youdens指数为0.926。上述各项结果与ELISA比较,差异无显著性（P>0.05）。结论　DIGFA与ELISA有相似的敏感性和特异性,且方法简便、快速,胶体金标记物制备容易,试剂稳定,运送方便,在现场和临床诊断更具有优越性。     

肺吸虫抗体快速检测试剂盒(金标渗滤法)的研制和应用

目的开发研制简易、快速、经济、准确的肺吸虫病诊断试剂盒。方法以肺吸虫成虫可溶性蛋白为检测用抗原,以胶体金标记羊抗人IgG为探针,采用自行设计的渗滤装置,检测病人血清中肺吸虫特异性IgG抗体;用深圳康百得生物技术有限公司提供的肺吸虫抗体ELISA检测试剂盒作比较。结果用本试剂盒检测90人份肺吸虫病人血清和100人份健康人血清,其敏感性为98.9%(89/90),特异性为100%(100/100),Youden’s指数为0.989。用该试剂盒分别检测25人份血吸虫病和华支睾吸虫病患者血清,交叉反应率为24%(6/25)和4%(1/25);与姜片虫、囊虫、丝虫、肺结核病人血清均未见交叉反应。ELISA检测结果比较,符合率为93.5%,无显著性差异(χ2=0.7949,P>0.05)。结论肺吸虫抗体快速检测试剂盒(金标渗滤法)敏感性高、特异性强,可与ELISA相媲美,且操作更为简便、快速,结果判读容易,不需特殊仪器设备,非常适合临床检验和现场查病。     

金标渗滤法检测疟疾抗体的研究

目的建立一种适用于现场使用的疟疾抗体快速检测方法。方法以恶性疟原虫可溶性抗原作为包被抗原,胶体金标记羊抗人IgG为第二抗体,建立快速检测疟疾抗体的金标渗滤法(DIGFA)。采用双盲法,与间接荧光法(IFAT)平行检测23份恶性疟和45份间日疟患者血清以及101份健康对照者血清,比较敏感性、特异性、Youden指数以及其他试验条件,以评价检测效果。结果DIGFA对恶性疟和间日疟的检测敏感性分别为95.65%和71.11%,对健康对照者的特异性为97.03%,Youden指数分别为0.93和0.68;IFAT的敏感性分别为95.65%和84.44%,特异性为96.04%,Youden指数分别为0.92和0.80。两法总Youden指数分别为0.76和0.84,总符合率为90.48%。结论DIGFA操作简易,适用于现场疟疾抗体的检测和监测。     

微量快速检测血吸虫抗体的斑点免疫金渗滤法试剂盒研制

目的 研制一种适用于现场使用的血吸虫抗体快速检测试剂盒.方法 通过对原有的斑点免疫金渗滤法全面改进,建立新的快速检测血吸虫抗体试剂盒.采用双盲法,检测慢性血吸虫病人血清100人份,正常人、乙肝患者及其他寄生虫病感染血清140人份.以敏感性、特异性、Youden指数、Kappa值等指标评价试剂盒的检测效果.结果 试剂盒的敏感性为92%,特异性为95.08%,Youden指数为0.87,Kappa值为0.87,与华支睾吸虫感染者血清交叉反应率为5%.结论 斑点免疫金渗滤法试剂盒血清用量少,反应快,敏感性、特异性较高,适用于现场血吸虫抗体检测.     

Dot—ELISA同时检测血吸虫循环抗原及其免疫复合…

本文系探讨ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ是否单一检测循环抗原。结果显示，正常人血清及正常兔血清的各分离部分均呈阴性反应，血吸虫病患者血清及感染兔血清及感染兔血清经三氯醋酸处理的上清液，及经聚乙二醇处理的沉淀物均出现阳性反应。表明ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ不仅检测循环抗原，而且同时检测免疫复合物。     

单克隆抗体检测血吸虫病人血清特异性循环免疫复合物的初步探讨

本文系探讨用ⅢD_(10)McAb识别18例慢性血吸虫病患者血清CIC,并与经聚乙二醇(PEG)沉淀的CIC对照,二者结果相似.该McAb-ELISA方法检测血吸虫病慢性患者67例,46例呈阳性反应,21例呈阴性反应而对肺吸虫病患者59例、健康人23例全部呈阴性反应.初步结果表明,该方法检测血清CIC具有较高的特异性.     

日本血吸虫病患者尿液中循环抗原和抗体联合检测的诊断价值

[目的 ]探讨尿液中血吸虫循环抗原和抗体检测对日本血吸虫病的诊断价值。 [方法 ]用单克隆抗体夹心 ELISA法检测日本血吸虫病患者尿液中循环抗原 ,间接ELISA检测尿液中特异性抗体。 [结果 ]10例急性血吸虫病和 6 1例慢性血吸虫病患者尿液中循环抗原的阳性率分别为 6 0 %和 40 % ,特异性抗体的阳性率分别为 80 %和 6 1 7%。两者联合检测的总阳性率分别为 10 0 %和 71 7%。 10 0例健康对照者尿液中仅 3%出现假阳性。 [结论 ]检测尿液中日本血吸虫循环抗原和特异性抗体简便、实用 ,为一种非损伤性的血吸虫病诊断方法。     

血吸虫病患者血清中循环25kD表膜抗原的检测

采用细胞杂交瘤技术获得一株血吸虫成虫抗原的单克隆抗体SM 38-3。其靶抗原为成虫表膜,免疫球蛋白型为1gG 2a,能识别血吸虫分子量为25k D的表膜蛋白抗原表位。该单克隆抗体纯化后标记过氧化物酶,用于Dot-ELISA测定慢性血吸虫病人血清115份,阳性反应103份,阳性率为89.6％;测定急性病人血清89份,阳性反应85份,阳性率为95.5％;测定141份正常人血清,阳性反应2份,假阳性率为1.4％。与血吸虫肠相关抗原的检测比较,结果阳性率与抗原滴度均无明显差别。     

日本血吸虫病循环抗原检测的合作研究

１９９３年５月，在湖南省寄生虫病防治研究所（湖南岳阳）举行了一次有关日本血吸虫循环抗原检测的联合测试研讨会，来自全国流行省（市）的８个单位派员及携带自己在过去几年中研制的检测系列（包括试剂和技术方法）参加了此项研究，在同一时间和地点，对同一批５７０份血清样本（包括正常人、现症病人、治后不同时期及其他常见寄生虫病人血清）进行了双盲法检测。结果表明：假阳性率除检测系统Ｂ为２％以外，其余７个系统的假阳性率在１４％—４６％之间；敏感性在急性病例为９５％—１００％，慢性病例的检出率在检测系统Ａ及Ｆ分别为７３．３％及７２．７％，其余在７０％以下；各系统测试治后１年内血清的转阴率未超过１／３，２年内转阴率除系统Ｅ为６０％以外，其余未超过５０％（系统Ｈ因敏感性太低除外）。以上说明，参加合作研究的８个测试系统尚需从提高特异性和／或敏感性两个方面进行改进。至于疗效考核不满意的原因，除与试验的特异性不高和治疗效果差有关外，需作进一步分析。     

谷胱甘肽-S-转移酶多克隆抗体免疫金测定法检测日本血吸虫循环抗原的研究

目的探讨谷胱甘肽－Ｓ－转移酶（ｒＳｊ２６ＧＳＴ）多克隆抗体诊断日本血吸虫病的应用价值。方法以抗ｒＳｊ２６ＧＳＴ多克隆抗体力捕获并检测抗体，建立双抗体夹心斑点免疫金测定技术，用于检测日本血吸虫循环抗原，并以斑点免疫金测定法和ＥＬＩＳＡ检测抗体作对照。结果３种方法检测急性血吸虫病的敏感性均为１００％；对慢性血吸虫病的敏感性分别为７６．４％、９８．１％和９６．２％；特异性分别为９５．０％、９８．０％和９６．０％。结论ｒＳｊ２６ＧＳＴ抗原对日本血吸虫病具有诊断价值，可望有较好的应用前景。     

单克隆抗体74D_(11)、SJA_(111)检测慢性日本血吸虫病循环抗原的研究

本研究用双抗夹心ＥＬＩＳＡ法检测慢性日本血吸虫病人血清循环抗原，观察血吸虫感染家兔血清循环抗原的动态变化。该方法采用兔抗ＡＷＡ－ＩｇＧ作包被抗体，抗日本血吸虫成虫和虫卵单抗ＳＪＡ１１１和７４Ｄ１１组合作Ⅱ抗，１７２例经粪孵毛蚴确诊的血吸虫病人中，１３６例循环抗原阳性（７９．１％），其中轻度（毛蚴数＜５只／２０克粪）、中度（６－２０）、重度（大于２０）感染者循环抗原阳性率分别为７３．４％、８７．７％、９２．８％，检测６５例健康献血员，２０例肺吸虫病人，１２例华支睾吸虫病人，１０倒包虫病人，交叉反应率依次为１．５％、５％、０％、０％，４２例经吡喹酮治疗后的血吸虫病人用该方法复查，治后３月和６月随访粪孵毛蚴阴转者中，循环抗原阴转率分别为７８．０％和９２．１％，考核疗效明显优于检测循环抗体。用单抗ＳＪＡ１１１检测感染家兔循环抗原动态变化，循环抗原于感染后３—４周可检出，７周达高峰，以后逐渐消退，而循环抗体（ＩｇＧ）推迟１周出现，８－９周达高峰。实验结果表明，血吸虫病血清ＣＡｇ阳性率与感染度有关，可在早期检出，检测方法具有较高敏感性和特异性，可用于早期诊断和疗效考核。     

基本消灭日本血吸虫病地区人群循环抗原的检测

探讨在基本消灭日本血吸虫病地区检测循环抗原的应用价值。用夹心ＥＬＩＳＡ和ＥＬＩＳＡ检测抗原，用ＩＨＡ检测抗体，抗原阳性者进一步测ＣＯＰＴ。结果：在１１００份样本中，夹心ＥＬＩＳＡ的阳性率为５．１％，斑点ＥＬＩＳＡ的阳性率为６．５％，两者均阳性者４６例，两者阴性者１０１９例，两者符合率为９６．８％。ＩＨＡ检测抗体的阳性率为２５．３％，有治疗史人群中抗体的阳性率明显高于无治疗史者。结论：抗体的阳性率显     

双抗体夹心酶联免疫吸附试验(S-ELISA)检测血吸虫病人循环抗原的研究

应用从重感染兔血清中提取的γ-球蛋白为捕捉抗体、以酶标单克隆抗体为结合物进行双抗体夹心酶联免疫吸附试验(S-ELISA),检测日本血吸虫病人循环抗原.结果:69例急性血吸虫病人血清的阳性率为80.6%一90.9%;110例慢性血吸虫病人血清的阳性率为88.2%;40例华支睾吸虫病人血清有1例出现阳性,交叉反应率为2.5%,50例健康人血清亦有1例出现阳性反应,假阳性率为2%.提示该法具有较高的敏感性、特异性,判断结果较客观,可应用于现场.     

多克隆与单克隆抗体夹心ELISA法检测日本血吸虫病患者血清循环抗原

[目的 ]检测血吸虫病患者的循环抗原。 [方法 ]用多抗与单抗夹心 EL ISA法检测日本血吸虫病患者血清循环抗原。 [结果 ]用于检测 15 0例血吸虫病患者的循环抗原 ,其敏感性平均为 84.7% (72 .0 %～ 91.0 % ) ,40例正常人未出现假阳性反应 ,74例其他寄生虫感染者中 ,有 2例并殖吸虫病患者阳性 ,其余均未出现交叉反应。 [结论 ]多抗与单抗夹心 EL ISA法是一种较为理想的循环抗原检测方法。