胃癌患者外周血中CK20的表达及临床诊断意义

应用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测182例胃癌患者和40例健康志愿者的外周血中CK20 mRNA的表达。结果胃癌组外周血CK20 mRNA阳性表达率为48.9%,健康志愿者组均表达阴性,差异具有统计学意义（P〈0.01）。胃癌患者外周血CK20 mRNA的阳性表达率与胃癌分化状态、TNM分期相关（P〈0.05）。胃癌患者外周血中CK20 mRNA的阳性表达可作为胃癌微转移的判断指标。     

手术操作与胃癌微转移的关系

目的探讨手术操作与胃癌微转移的关系。方法采用巢式逆转录-聚合酶链式反应（RT—PCR）技术检测70例胃癌病人手术前、后外周血细胞角蛋白（CK20）mRNA及癌胚抗原（CEA）mRNA的表达情况，并以20例健康志愿者作为阴性对照组，以10例胃癌组织作为阳性对照组。结果CK20mRNA及CEAmRNA在术前阳性表达率分别为32．9％和51．4％，而术后二者的阳性表达率分别为62．9％和70．0％，术后阳性率明显高于术前（X^2=12．62、5．06，P〈0．05）。20例健康志愿者无1例阳性表达。结论手术操作可以促使胃癌发生微转移。     

大肠恶性肿瘤外周血微转移检测的意义

目的研究大肠癌患者外周血CK19mRNA的表达，并探讨其临床意义。方法采用RT-PCR方法检测41例大肠癌患者和8例肠道非恶性病变手术患者的外周血CK19mRNA的表达。结果8例胃肠道非恶性病变手术患者、8例健康志愿者的外周血CK19mRNA无阳性表达；41例大肠癌患者外周血CK19mRNA阳性表达率分别：单次外周血采样CK19mRNA阳性表达率为41．5％；两次采样总阳性率大肠癌患者为65．9％，外周血重复采样阳性率高于单次采样（P〈0．01）。DukeC、D期患者CK19mRNA阳性表达率高于Duke B期（P〈0．05）。结论大肠癌患者外周血CK19mRNA是一种敏感、特异的检测方法，可以作为检测大肠癌微转移的指标并指导其治疗和预后。     

RT-PCR检测结直肠癌患者外周血中细胞角蛋白20 mRNA的表达

目的：检测结直肠癌患者外周血中细胞角蛋白20（CK20）mRNA的表达．并探讨其临床价值。方法：应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应，检测59例结直肠癌患者、12例原发性肝癌患者和26例对照者外周血中CK20mRNA的表达。结果：对照者及原发性肝癌患者外周血中CK20mRNA均为阴性表达。结直肠癌患者外周血中CK20mRNA阳性表达率为5913％。结直肠癌患者外周血中CK20mRNA的阳性表达率在不同肿瘤病理分化程度中差异无显著性，而在不同Dukes分期和有无淋巴结转移及远处转移患者间差异有显著性（P〈0.05）。结论：检测结直肠癌患者外周血中CK20mRNA的表达可作为预测肿瘤微转移的评估指标，可监测患者病情变化，识别高危人群，并有助于结直肠癌微转移的判断及鉴别原发性肝细胞肝癌和结直肠癌肝转移。[著者文摘]     

细胞角蛋白19、20 mRNA定量在检测结肠癌患者外周血微转移中的应用

目的探讨细胞角蛋白19、20（CK19、20）mRNA表达在诊断结肠癌患者外周血微转移中的作用。方法随机选择和收集36例结肠癌患者、34例结肠良性疾病患者及32名健康献血员外周血,用荧光定量逆转录-聚合酶链反应（FQ—RT-PCR）测定CK19、20mRNA含量。结果CK19、20mRNA在结肠良性疾病组外周血均未见表达。在健康献血员组只有1例CK19表达阳性,CK20均为阴性。在结肠癌组,CK19检测阳性率为58．3％（21／36）;CK20阳性率为36．1％（13／36）;CK19、20联合检测阳性率为77．8％（28／36）。结肠癌组与结肠良性疾病组或献血员组之间比较,CK19、CK20在外周血表达差异均有显著性（P〈0．05）。结合临床资料分析,结肠癌患者外周血CK19、CK20mRNA阳性表达和淋巴结转移、Dukes分期关系密切（P〈0．05）,而与肿瘤类型及分化程度无关（P〉0．05）。结论CK19、20mRNA可作为检测结肠癌外周血微转移的标志物,两者联合检测可提高检出率。     

子宫内膜癌患者外周血CK20 mRNA的表达及临床意义

目的：探讨子宫内膜癌患者外周血CK20 mRNA的表达对子宫内膜癌微转移诊断的价值。方法：采用RT-PCR方法对40例子宫内膜癌患者及20例子宫良性病变患者外周血CK20 mRNA的表达进行检测。并以子宫内膜癌组织和健康女性外周血为对照。结果：子宫良性病变患者及健康女性外周血中均无CK20 mRNA表达；子宫内膜癌组织均有CK20 mRNA表达。40例子宫内膜癌患者术前外周血中，11例检出CK20 mRNA阳性表达，阳性率27．5％。CK20 mRNA阳性检出与临床分期存在显著性相关（P〈0．05），随着临床分期的进展，CK20 mRNA阳性率明显增加。CK20mRNA阳性表达与病理分级无关（P〉0．05）。结论，子宫内膜癌早船可能已出现微量癌细胞的血行播散，CK20可作为子宫内膜癌血行转移的分子标志之一，检测子宫内膜癌患者外周血癌细胞可能成为改进分期、评估预后、提供治疗的参考指标。     

大肠恶性肿瘤外周血微转移的检测及其临床意义

目的　研究大肠癌患者外周血CK19mRNA的表达 ,并探讨其临床意义。方法　采用RT PCR方法检测 4 1例大肠癌患者和 8例胃肠道非恶性病变手术患者的外周血CK19mRNA的表达。结果　 8例胃肠道非恶性病变手术患者、8例健康志愿者的外周血CK19mRNA无阳性表达 ;4 1例大肠癌患者外周血CK19mRNA阳性表达率分别 :单次外周血采样CK19mRNA阳性表达率为 4 1 5 % ;两次采样总阳性率大肠癌患者为 6 5 9% ,外周血重复采样阳性率高于单次采样 (P <0 0 1)。DukeC、D期患者CK19mRNA阳性表达率高于DukeB期 (P <0 0 5 )。结论　大肠癌患者外周血CK 19mRNA是一种敏感、特异的检测方法 ,可以作为检测大肠癌微转移的指标并指导其治疗和预后。     

膀胱尿路上皮癌患者外周血CK20、CD105及CD146表达的临床意义

目的检测膀胱尿路上皮癌患者外周血中血清肿瘤标志物CK20、CD105和CD146的表达,探讨CK20、CD105和CD146作为膀胱尿路上皮癌微转移指标的应用价值。方法采用流式细胞仪检测50例膀胱尿路上皮癌患者、30例健康志愿者外周血中CK20及CD105/CD146的表达情况。分析膀胱尿路上皮癌患者外周血中CK20及CD105/CD146的阳性表达率及其与临床病理学指标的关系;CK20及CD105/CD146在膀胱尿路上皮癌患者外周血中表达的相关性及联合检测的意义。结果CK20和CD105/CD146在膀胱癌组中的阳性表达率分别为28.0%和48.0%,其表达与肿瘤分期、病理分级、有无远处转移、肿瘤直径、病灶数量等相关（P〈0.05）,而与患者性别、年龄无相关性（P〉0.05）。患者中有10例同时出现CK20及CD105/CD146阳性表达,两者的表达有相关性（χ2=4.276,r=0.281,P〈0.05）。联合检测与单独检测CK20相比,阳性率有所提高,差异有统计学意义（P=0.005）;联合检测与单独检测CD105/CD146相比,阳性率差异无统计学意义（P=0.423）,但阳性率仍有提高。结论CK20及CD105/CD146对于预测膀胱尿路上皮癌微转移具有较高的敏感性。联合检测CK20及CD105/CD146与单项检测相比,具有更高的敏感性。CK20及CD105/CD146可以作为膀胱尿路上皮癌微转移早期诊断、早期治疗和预后判断的生物学指标。     

NSCLC术后病人外周血MUC1 mRNA和CK19 mRNA表达及其意义

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）术后外周血微转移的基因诊断方法，并分析黏蛋白1（MUC1）mRNA、角蛋白19（CK19）mRNA作为肺癌微转移检测分子标志物的可行性。方法应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR），对60例NSCLC病人（肺癌组）的外周血MUC1 mRNA、CK19 mRNA表达情况进行检测；以10例肺良性病变病人及15例健康人的外周血标本作对照。结果肺癌组外周血MUC1 mRNA阳性表达21例（35%），CK19 mRNA阳性表达18例（30％）；对照组MUC1 mRNA和CK19 mRNA表达均为阴性，两组比较差异均有显著性（x^2=7．292、5．921，P〈0．01、0．05）。结论MUC1、CK19基因均可作为RT—PCR法检测NSCLC病人淋巴结微转移的分子标志物，两者联合检测可能有助于肺癌转移早期诊断。     

肺癌患者外周血微转移检测的意义

目的研究肺癌患者外周血中CEAmRNA、CK19mRNA和CK20mRNA的表达及联合检测的临床意义。方法采用荧光定量PCR技术,检测48例肺癌患者、8例肺良性病变和30名健康志愿者外周血CEAmRNA、CK19mRNA和CK20mRNA水平。结果48例肺癌患者外周血CEAmRNA的水平为(16264±28765)copies/ml,其中26例阳性,阳性率为54.2%;CK19mRNA的水平为(14891±27244)copies/ml,其中27例阳性,阳性率为56.3%;CK20mRNA的水平为(10924±21678)copies/ml,其中20例阳性,阳性率为41.7%。8例肺良性病变中CK20mRNA阳性1例(12.5%),CEAmRNA和CK19mRNA均为阴性,健康志愿者30例未见表达。单项检测敏感度和准确性较低,联合其中二项检测敏感度和准确性较高,联合三项敏感度达77.1%、准确性可达87.2%。CEAmRNA、CK19mRNA和CK20mRNA水平和阳性率与肺癌类型和不同临床分期有关。结论CEAmRNA、CK19mRNA和CK20mRNA可作为标志物检测肺癌患者外周血微转移,联合二至三项指标有较高的检出率,定量检测有助于肺癌微转移的监测。     

外周血中CK18mRNA检测对食管癌微转移的诊断意义

目的探讨CK18mRNA套式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测对食管癌微转移的诊断意义。方法采用套式RT-PCR方法检测50例无远处转移、10例有远处转移的食管癌患者及10例食管良性病变对照和10例健康对照外周血中细胞角蛋白CK18mRNA基因的表达。结果食管良性病变对照组和健康对照组的外周血中均未检测出CK18mRNA阳性细胞。50例无远处转移食管癌患者外周血中CK18mRNA表达阳性率为38.0%(19/50)。10例有远处转移的食管癌患者外周血中CK18mRNA表达阳性率为90.0%(9/10)。食管癌Ⅳ期与Ⅱa、Ⅱb、Ⅲ期相比,其阳性率有显著性差异(P<0.05),而其他各期之间没有显著差异。不同病理分化程度之间没有显著差异。结论食管癌患者临床早期已有癌细胞发生微转移。应用套式RT-PCR方法检测外周血中CK18mRNA靶基因有助于食管癌微转移的早期诊断。     

CK20 mRNA和hTERT mRNA在大肠癌围手术期血行微转移中的转录特征

目的 探讨细胞角蛋白20(CK20)mRNA和人端粒酶催化亚单位(hTERT)mRNA作为大肠癌围手术期血行微转移标志物的价值.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测40例大肠癌患者术前、术中及术后外周血CK20 mRNA和hTERTmRNA的表达,并对不同分化程度、不同Dukes分期的大肠癌患者CK20 mRNA和hTERT mRNA的表达进行比较.结果 40例大肠癌患者外周血CK20 mRNA和hTERT mRNA的表达率,术前分别为47.5%(19/40)和45.0%(18/40),术中为70.0%(28/40)和70.0%(28/40),术后为10.0%(4/40)和32.5%(13/40).除术后hTERT mRNA阳性率与术前无显著差异(P＞0.05)外,术中外周血CK20 mRNA、hTERT mRNA阳性率和表达强度(与内参照β-actin比值)均显著高于术前(P＜0.01,P＜0.05),术后明显低于术前和术中(P＜0.01).hTERT mRNA在低分化肿瘤的表达明显高于高、中分化组(P＜0.05),而CK20mRNA在低分化肿瘤的表达强度低于高、中分化组(P＜0.01).大肠癌围手术期Dukes B期和C D期之间CK20 mRNA和hTERT mRNA均无显著性差异(P＞0.05).结论 大肠癌患者围手术期血行微转移的发生几率较高,病理分化程度低者更易发生,但与Dukes分期无明显相关,CK20 mRNA和hTERT mRNA联合检测对大肠癌血液微转移具有较高的敏感性和特异性,是判断围手术期血行微转移的良好标志物.     

巢式RT-PCR对肺癌外周血中微转移灶的检测和半定量测定

目的对肺癌外周血中微转移灶的检测和半定量测定。方法以CK-19为标记,采用巢式RT-PCR和半定量方法对肺癌患者外周血中微转移灶的检测,比较治疗前后外周血中癌细胞数的相对变化。结果60例肺癌中有29例CK-19阳性,18例健康人中,仅1例检测出CK-19阳性,7例肺良性疾病患者有2例为CK-19阳性。实验组CK-19阳性率48%(29/60)与对照组12%(3/25)相比有极显著差异(P<0.01)。2例肺癌患者化疗前相对癌细胞数分别为25和16个,经1周期化疗后,相对癌细胞数分别为5和1个。结论以CK-19为标记,采用巢式RT-PCR方法检测肺癌患者外周血中的癌细胞有较高敏感性和特异性,半定量RT-PCR法,能早期反映外周血中癌细胞数的相对变化情况,有助于对临床疗效及早做出评价。     

乳腺癌、胃癌及大肠癌患者外周血CK20的检测与其临床病理分期相关性研究

目的 :检测乳腺癌、胃癌及大肠癌患者外周血中细胞角蛋白 2 0 (cytokeratin2 0 ,CK2 0 )并分析其临床病理联系。方法 :应用逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)检测乳腺癌、胃癌及大肠癌患者外周血CK2 0mRNA ,并以 6 0例健康者作为对照。结果 :6 0例健康对照组外周血CK2 0mRNA均为阴性。实验组 138例CK2 0mRNA表达阳性为 5 3/ 138,其中CK2 0mRNA表达阳性分别为乳腺癌 16 / 4 4 ,胃癌 2 2 / 5 7及大肠癌 15 / 37。CK2 0mRNA表达阳性在TNM及Dukes(大肠癌 )分期中分别为 :I期 (乳腺癌 1/ 6 ;胃癌 2 /11) ,II期 (乳腺癌 2 / 12 ;胃癌 4 / 19) ,III期 (乳腺癌 10 / 18;胃癌 12 / 2 1)及IV期 (乳腺癌 3/ 8;胃癌 4 / 6 ) ,(P <0 .0 5 ,I,IIvsIII,IV) ;大肠癌A期 (1/ 7) ,B期 (4 / 16 ) ,C期 (7/ 10 )及D期 (3/ 4 ) ,(P <0 .0 5 ,A、B及C、D期间 )。胃癌及大肠癌病理改变在低未分化及中高分化癌间经 χ2 检验有显著差异。结论 :RT -PCR方法检测乳腺癌、胃癌及大肠癌患者外周血中CK2 0mRNA表达与其临床及病理分期相关     

结直肠癌MMP-2的表达与血液微转移的关系

目的从肿瘤的临床病理学和分子病理学角度对结直肠癌组织中MMP-2的表达与肿瘤外周血微转移的关系进行探讨。方法收集了2003年6～12月行根治手术的结直肠癌患者中的30例，行MMP-2免疫组化染色并应用RT-PCR方法检测外周血的转移肿瘤细胞，比较不同MMP-2表达量与血液微转移的关系。结果76．67％结直肠癌患者的肿瘤细胞表达MMP-2（23／30），定位于胞浆，其中弱阳性13例，阳性4例，强阳性6例；MMP-2的表达与肿瘤分期、淋巴转移相关（P〈0．05）。外周血CK20 mRNA表达率为36．7％，外周血CK20 mRNA与结直肠癌分期相关（P=0．004），与肿瘤部位，大体类型，恶性程度无关。结直肠癌组织中MMP-2的表达与结直肠癌患者外周血CK20 mRNA密切相关，随着MMP-2表达的增强外周血CK20 mRNA的阳性率也增加（P=0．002）。结论结直肠癌组织中MMP-2表达的程度不仅能够反映肿瘤的分期，而且能够反映肿瘤血液中微转移的情况。     

乳腺癌患者外周血中SBEM mRNA的表达及意义

目的 探讨乳腺癌患者外周血SBEM mRNA表达情况及其与临床病理因素的相关性.方法 运用巢式逆转录-聚合酶链反应(nRT-PCR)检测56例乳腺癌患者外周血SBEM mRNA表达情况,以乳腺良性肿瘤患者及健康者各20例作为对照.结果 乳腺癌患者外周血SBEM mRNA表达阳性率为46.4%(26/56),乳腺良性肿瘤患者及健康者表达阳性率均为0.0%(0/20,P<0.05);乳腺癌患者外周血SBEM mRNA表达阳性率与患者有无淋巴结转移及TNM分期相关(P<0.05),但与年龄、肿瘤大小无关(P>0.05).结论 乳腺癌患者外周血SBEM mRNA可作为乳腺癌微转移的判断指标,对乳腺癌临床分期、预后判断和治疗起重要作用.     

非小细胞肺癌患者外周血癌胚抗原和细胞角蛋白19表达与患者预后的关系

目的 探讨外周血中癌胚抗原(CEA)mRNA和细胞角蛋白19(CK19)mRNA表达与非小细胞肺癌(NSCLC)患者预后的关系.方法 应用逆转录-聚合酶链反应技术检测了84例NSCLC患者外周血细胞中CEAmRNA和CK19 mRNA的表达.结果 NSCLC患者外周血中CEAmRNA与CK19mRNA的阳性表达率分别为70.23%(59/84)和67.9%(57/84);NSCLC患者外周血中CEA与CK19的阳性表达率呈正相关(c=0.333).CEA与CK19呈阴性表达的NSCLC患者,其生存例数显著性多于阳性组(P＜0.01～0.05).接受化疗者CEA与CK19表达阳性者生存时间明显低于阴性表达者(P＜0.05).结论 NSCLC患者外周血中CEA与CK19的表达呈正相关,检测血液中CEA和CK19表达有助于客观评估NSCLC预后.