β-半乳糖苷酶快速鉴定与定量肠杆菌

[目的]检测大肠埃希菌和肠杆菌属的β-半乳糖苷酶(β-GAL)。[方法]应用对硝基酚-β-D半乳糖苷为底物，以酶的反应来快速检出样本中的肠杆菌，且定量此种酶，并定出菌量。[结果]经实验确定了本法的最佳底物浓度，最适反应时间和pH值，最底检出限达300CFU／ml。[结论]本法快速、简便、敏感，为临床细菌鉴定，食品卫生检验提供了一种新的方法。     

β-萘酚辛酸酯的合成及其临床应用

目的　制备 β 萘酚辛酸酯 ,用辛酸酯酶法快速检出沙门菌。 方法　采用辛酸与氯化亚砜作用生成辛酰氯 ,再与 β 萘酚反应制得 β 萘酚辛酸酯 ;将其制成酶底物纸片 ,对底物浓度、最适 pH、反应温度及时间进行了探讨 ,确定了实验的最佳条件。 结果　本法底物最佳浓度为 2 g/L ,最适 pH7.0 ,反应温度 35℃ ,1 0 g/L固蓝B显色 ,反应时间 5min。以此条件用自制底物与进口的比较 ,效果完全一致。鉴定了标准菌株 5株 ,临床分离菌株 1 4 2株。辛酸酯酶法鉴定沙门菌的敏感性为 1 0 0 % ,特异性为94 1 %。结论　本法可代替常规检验方法提前 2～ 3d报告结果 ,为沙门菌鉴定提供了一种快速、简便、准确的新方法     

淀粉酶亚乙基-对硝基酚-麦芽庚糖法动力学研究

目的观察影响α-淀粉酶对底物亚乙基-对硝基酚-麦芽庚糖催化的实验条件。方法观察不同温度、pH、底物浓度、酶量和无机离子对酶促反应速度的影响。结果选择25℃、37℃及56℃观察对酶活性的影响,以37℃为合适的反应温度;在pH 6.8,7.2,7.8和8.4反应条件下,pH 7.2时为酶的最适pH;反应速度与酶的浓度成正比例关系;N aC l,M gSO4为诱导剂,N aF为抑制剂;底物浓度对反应速度的影响,底物浓度低于0.625 mm ol/L的反应呈一级反应,高于5 mm ol/L的反应呈零级反应。以林氏方程图解:-1/Km=-3,换算成Km=0.33 mm ol/L;1/Vm=0.0065;换算成Vm=153.8IU/m inL。结论观察到温度、pH、底物浓度、酶量与无机离子等实验条件影响淀粉酶亚乙基-对硝基酚-麦芽庚糖法测定结果。     

氨基肽酶的测定及临床意义

目的测定氨基肽酶中的一种酶(亮氨酸氨基肽酶,LAP)作为临床肝胆疾病的诊断指标并探讨氨基肽酶的临床意义,以便于系统探讨此类酶的临床应用价值。方法以亮氨酰对硝基苯胺为底物,在405 nm下进行连续监测并对健康体检者及患者标本进行测定。结果线性范围至少为0-180 U.L-1,批内不精密度为2.9%,批间不精密度为5.6%;适用于各种自动生化分析仪。测定亮氨酰氨基肽酶的最适条件:选用浓度为125 mmol.L-1的Tris-Hcl缓冲液,最适pH为7.2,温度取37℃,得出在此实验条件下的米氏常数Km为0.15 mmol.L-1,亮氨酰对硝基苯胺浓度取6.0 mmol.L-1,取健康体检者血清157例(男81例,女76例),测得x—±s为35.7 U.L-1+8.2 U.L-1,建立了适合于临床应用及自动生化分析仪的方法和参考值。结论本法是检测肝胆疾病的可靠、稳定、快速的方法之一,对肝胆疾病的早期诊断和治疗起一定的作用;氨基肽酶可以作为多种疾病的临床诊断和监测指标。     

血清血管紧张肽-转换酶简易的酶法测定

本文作者介绍了一种简单的动力学酶法测定血管紧张肽-转换酶(ACE)活性的方法。首先,ACE与底物质马尿酰-甘氨酰-甘氨酸(Hip-Gly-Gly)反应释出Gly-Gly,接着在γ-谷胺酰转移酶(GGT)催化反应中,Gly-Gly作为受体底物从供体底物L-γ-谷胺酰-3-羧基-4-硝基替苯胺(GGCN)转移γ-谷胺酰基团。反应中释放的3-羧基-4-硝基替苯胺可于410nm测定。反应式如下:     

α-淀粉酶连续监测法的建立

[目的]建立以亚乙基封闭的4-硝基酚-1，4-α-D-麦芽七糖苷（EPS-G7）为底物的一种新的α-淀粉酶的测定方法。[方法]在SPS-100全自动分析仪上，研究连续监测法，建立实验参数。[结果]本法测定α-Amy的Km=0．179mmol／L；4-硝基酚（4-NP）在405nm时的摩尔吸光系数1200．9mol／L选取HEPES缓冲液为缓冲体系；延迟时间2min，测量时间2min；线性反应期11min，线性范围0-1400U／L；最适温度37℃；最适pH7．15；精密度实验，批内CVs为1．4％～2．6％，批间CVs为1．9％-2．8％；平均回收率为96．3％；与Boehringer方法比较，相关系数为0．994；血红蛋白、胆红素、葡萄糖、蛋白质对测定结果无影响；本法参考值范围血33．9-96．2U／L，尿65．4～187．6U／L。[结论]此方法重复性好，线性范围广，准确度好，灵敏度高，干扰因素少，适用于常规自动化分析。     

PYR斑点法快速鉴定细菌的初步应用

在临床细菌检验中，以色原为底物或以荧光为底物进行酶检测可以快速、简便地鉴定细菌。Mul-czyk和Szewczwk[1]提出检测PYR酶的活性来鉴定细菌的实验方法。本文应用斑点法快速检测PYR并了其临床应用，现报告如下。1材料1.1菌种：公安医院细菌室保存的标准菌株和自临床标本中分离的菌株。均经Vitek自动微生物分析仪鉴定。1.2纸片：Whatman1号滤纸用打孔器打成直径6mm的圆形纸片。2方法2.1.1L-吡咯烷酮-β-萘胺（Sigma）2.1.2pH7.2、0.15mol／l磷酸盐缓冲液2.1.3对二甲氨基肉桂醛（Sigma）2.2方法2.2.1配0.2％L一毗咯烷酮一p一家胺溶于95…     

用国产Glucana测定GGT活性的中止比色法

本文介绍用国产γ-L-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺(Glucana)作底物测定GGT 活性的中止比色法.以国外文献推荐的连续监测常规法为基础,但改为37℃反应10分钟用1mol/L 盐酸中止反应,410nm 比色,以3-羧基-4-硝基苯胺(Cana)为标准,按U/L 计算结果.Glucana 的Km=0.64mmol/L,最适pH=7.9,10分钟内成零级反应,300U/L 内成线性,批内CV0.26%,天间CV1.9%,平均回收率98.5%,参考范围10～36U/L。用国产底物和进口试剂,用本法和动力学法进行对比试验。实验结果证明:国产Glucana 性能良好;本法快速、简便、精密度及准确度符合临床要求,可在无自动生化分析仪或基层实验室推广。     

MPT-NAG测定N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的应用价值

目的 应用新型底物6-甲基-2-硫代吡啶-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(MPT-NAG)建立检测N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力的紫外动力学新方法,用于尿液中NAG活性测定.方法 基于NAG催化水解对硝基苯-N-乙酶-β-D-氨基葡萄糖苷生成有色的对硝基酚这一反应,对缓冲液离子强度、pH值、底物浓度等最佳反应条件及各种实验参数进行研究.用该法测定了多种病尿样中NAG活活性.结果 该法最低检出限为1.5 U/L,线性范围可达250 U/L(r=0.998 9),批内CV为＜3%,批间CV＜5%,回收率为101.3%.结论 本法灵敏度高,线性、精密度好,结果准确,且操作简便快速,适用于全自动生物化学分析仪操作.     

血清γ—GT速率测定法的实验条件探讨

本文以γ-谷氨酰对硝基苯胺为底物终浓度为5.0mmol/L。用Tris-甘氨酰甘氨酸(双甘肽)缓冲液(pH8.2),其中双甘肽作γ-谷氨酰基的受体,终浓度为100mmol/L,生成的对硝基苯胺为黄色,在410nm波长处     

1，5-脱水山梨醇的性质及其临床应用

1，5-脱水山梨醇（1，5-anhydro-D-glncitol；1，5-AC）是一种存在于人类血液中的正常化合物，由于其代谢稳定，在血液中波动范围小，可反映血糖短期的变化．具有空腹血糖、果糖胺和糖化血红蛋白所不具有的优点，在糖尿病诊断与治疗中具有很高的价值和意义。     

亚低温对心肺复苏大鼠大脑海马神经元内N-甲基-D-天门冬氨酸受体1表达的影响

目的探讨亚低温对心肺复苏模型大鼠大脑海马神经元内N甲基D天门冬氨酸受体1(NMDAR1)表达的影响。方法24只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、常温组和亚低温组,每组8只。常温组和亚低温组大鼠用水封瓶密闭法制备心肺复苏后脑水肿动物模型,常温组制模后置于室温环境,亚低温组制模后立即给予亚低温治疗。应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT PCR)方法检测各组大鼠大脑海马神经元内NMDAR1表达。结果亚低温组大鼠脑组织水肿明显减轻,大脑海马神经元内NMDAR1mRNA和蛋白表达明显降低,与常温组比较差异有显著性(NMDAR1mRNA:80.48±0.03比80.64±0.18,P<0.05)。结论亚低温能够减轻心肺复苏后脑水肿,其机制可能为:亚低温通过减少NMDAR1在mRNA和蛋白水平的表达,降低阳离子通道通透性的作用,而减轻脑水肿的形成,起到治疗心肺复苏后脑水肿的作用。     

社区非特异性下腰痛患者健康教育方法与效果

目的探讨非特异性下腰痛患者健康教育的传播形式及效果。方法将206例非特异性下腰痛患者分为观察组和对照组各103例,观察组采用手机短信的形式进行健康教育,对照组采用常规健康教育。干预前后分别采用知识评估问卷、遵医行为评估问卷、Zung氏焦虑自评量表、抑郁自评量表进行问卷调查。结果干预后,观察组焦虑评分、抑郁评分、复发率均低于对照组(P<0.01或P<0.05);知识知晓率、遵医率高于对照组(P<0.01)。结论实施手机短信形式的健康教育对社区非特异性下腰痛患者健康教育效果明显优于传统健康教育。     

EB病毒立早蛋白BILF1上调ICAM-1分子表达及其调控机制的研究

目的探讨EB病毒立早蛋白BILF1对体外培养B淋巴细胞细胞间粘附分子ICAM-1表达水平的影响。方法应用Western blot实验分析EB病毒立早蛋白BILF1对ICAM-1表达水平的影响。结果BILFI在蛋白水平上调ICAM-1分子表达；BILF1通过激活NF—KB及AP-1信号通路在转录水平上调ICAM-1分子表达。结论EB病毒立早蛋白BILF1可上调体外培养B淋巴细胞细胞间粘附分子ICAM-1表达水平。     

首发精神分裂症偏执型患者血浆IL—2、IL—6变化的研究

目的 研究首发精神分裂症偏执型患血浆中白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介索-6(IL-6)的变化。方法 病例组为住院的符合中国精神疾病诊断标准及分类方案第三版首发精神分裂症偏执型诊断标淮的病人30例，PANSS量表评分≥60分；选取正常对照组20例对照。采用酶联免疫吸附法测定对照组和精神分裂症组治疗前及治疗后6wIL-2、IL-6的血浆浓度，并进行组间比较。结果 精神分裂症组治疗前血浆IL-2、IL-6的水平显增高，与对照组比较差异有显性(P＜0．05)；精神分裂症组治疗6w症状基本缓解后，血浆IL-2水平与对照组比较差异无显性(P＞0．05)，IL-6水平与对照组比较显增高(P＜0．05)；症状基本缓解后血浆IL-2水平较治疗前有显下降(P＜0．05)，IL-6水平较治疗前有增高趋势，但无显差异(P＞0．05)。结论 精神分裂症患存在免疫功能紊乱，治疗后IL-2水平下降也许可以作为抗精神病药物影响免疫变化的一个指标。     

2010～2011年重症手足口病呼吸机相关性肺炎的病原学调查及耐药性分析

目的:分析重症手足口病并发呼吸机相关性肺炎(VAP)的病原菌构成及其耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供科学依据。方法:回顾性分析2010年1月～2011年12月我院重症病房收治的重症手足口病发生VAP 31例患儿的痰培养分离病原菌及药敏结果。结果:VAP感染率为31.31%,分离出的54株病原菌均为革兰氏阴性菌,31例患儿VAP感染前三位的菌是铜绿假单胞菌、非发酵革兰氏阴性杆菌、鲍曼不动杆菌。结论:重症手足口病合并VAP致病以革兰氏阴性杆菌为主,可将第3代头孢菌素、磺胺类作为临床治疗手足口病并发VAP铜绿假单胞菌感染的首选药物;单环β-内酰胺类、磺胺类、第三代头孢菌素可作为非发酵革兰氏阴性杆菌感染的首选药物;单环β-内酰胺类、第三代头孢菌素可作为鲍曼不动杆菌感染的首选药物。     

脱氧氟尿苷在食管癌化疗中的高选择性抗肿瘤作用研究

目的:(1)了解脱氧氟尿苷(5-deoxy-5-fluorouridine,5-DFUR)在食管癌组织中转化为5-FU的情况及其高选择性抗肿瘤作用。方法:(1)选择拟行手术治疗的17例食管癌患者,术前5～7天口服5～DFUR1200mg/人/天后再行手术;(2)用柱切换反相高效液相色谱法检测食管癌组织、转移淋巴结、远癌正常食管组织及肝脏组织的5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)浓度。结果:(1)在同一时点食管癌患者各组织的5-FU浓度分别是:癌组织214.18±92.53ng/g、转移淋巴结147.50±71.86ng/g、远癌食管组织50.67±20.24ng/g、肝脏组织17.80±9.09ng/g,P值<0.05。(2)不同分化程度的癌组织中5-FU浓度分别为:高分化鳞癌184.27±92.18ng/g、中分化鳞癌214.53±82.43ng/g、低分化鳞癌412.18±192.53ng/g,P值=0.024。(3)不同分期食管癌组织中的5-FU浓度为:Ⅱ期212.38±92.63ng/g,Ⅲ期247.50±91.99ng/g,P值=0.098。结论:5-DFUR能够高选择地在食管癌组织中转化为5-FU。不同分化程度的食管癌组织对5-DFUR的转化能力不同,分化能力愈低,转化为5-FU的能力愈强。     

急性淋巴细胞白血病患者血清IL—3、IL—6、IL—8水平的测定及其临床意义

目的 探讨IL－3、IL－6、IL－8在急性淋巴细胞白血病（AIL）中的意义。方法 采用酶联免疫法（ELISA）测定45例急性淋巴细胞白血病患者血清IL－3、IL－6、IL－8水平。结果 AIL初诊患者血清IL－3水平明显低于正常对照组（P＜0．05）,血清IL－6、IL－8水平明显高于正常对照组（P＜0．05、P＜0．001）,经治疗AIL CR期患者IL－3、IL－6、IL－8水平恢复正常;AIL NR组与初诊组相比无显著性差异（P＞0．05）。结论 检测IL－3、IL－6、IL－8水平的变化有助于判断AIL患者病情的变化,并可作为监测治疗反应的辅助指标。     

超敏C反应蛋白与颅脑损伤的相关性研究

[目的]研究超敏C反应蛋白与颅脑损伤的相关性。[方法]运用免疫增强比浊法测定颅脑损伤后不Ⅲ时期的超敏C反应蛋白，总结并分析颅脑损伤后超敏C反应蛋白的变化，得出C反应蛋白与颅脑损伤的相关性。[结果]颅脑损伤后超敏C反应蛋白和入院时GCS评分呈明显直线负相关；病情越重超敏C反应蛋白的含量越高；检测值的高低与预后呈明显的负相关。[结论]超敏C反应蛋白可为颅脑损伤患者提供简便、快捷和科学进行伤情分级及预后判断的参考依据，可作为全程观察患者病情的客观指标。     

延长应用低分子肝素治疗急性冠脉综合征

目的本文应用法安明（低分子肝素）治疗急性冠脉综合征病人,观察应用5—7d和14d的疗效及副作用。方法急性冠脉综合征病人120例,应用法安明14d,皮下注射,每Et2次（实验组）;对照组120例,应用法安明5—7d,其他治疗均同,观察半年内两组发生心血管事件的次数及出血、血小板减少等不良事件的发生率。结果实验组心血管事件发牛率为16．67％,对照组发生率为24．17％,两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。不良事件发生率两者比较差异无统计’学意义（P〉0．05）。结论低分子肝素延长应用至14d,较应用5—7d,能更好的减少心血管事件,同时副作用不增加,尤其为择期手术病人创造了机会。