小鼠哮喘模型中白细胞介素5等对嗜酸细胞凋亡的调控作用

先前我们已证实在小鼠哮喘模型中白细胞介素 5 (ＩＬ 5 )和ＩＬ 10分别上行和下行调节气道炎症 ,二者的动态平衡是决定嗜酸细胞 (ＥＯＳ)浸润与消散的重要因素[1] 。我们的研究进一步动态观察哮喘动物模型气道炎症全过程的变化 ,旨在探讨炎症促进因子ＩＬ 5和炎症抑制因子ＩＬ 10对ＥＯＳ凋亡的调节作用。对象与方法　哮喘模型制作 :10周龄ＢＡＬＢ/ｃ小鼠 10只 ,雌雄不限 ,体重 (10± 2 )ｇ ,由华西医科大学动物中心提供。所有动物随机分配为对照组 (11只 )、致敏激发 (ＳＣ)组(77只 )。ＳＣ组小鼠腹腔注射 10 %卵白蛋白 (ＯＶＡ) 0 1ｍｌ…     

呼吸道合胞病毒与支气管哮喘

流行病学显示呼吸道合胞病毒（RSV）诱发或加重支气管哮喘（哮喘）。许多研究从免疫学、病理生理学角推测两者之间联系的机制。单纯RSV感染气道反应性轻度增高且呈一过性，嗜酸粒细胞肺浸润不明显，辅助性T细胞中TH1细胞克隆被激活，CD4^ 特别是CD8^ 亚群的IFN－γ增高。哮喘是以嗜酸粒细胞浸润为特征的慢性炎症，其气道反应性明显增高，T细胞中TH2被激活，IL－4、IL－5增高明显。本文主要从气道反应性、嗜酸粒细胞、T细胞亚群的改变来探讨RSV与哮喘的关系。     

抗白细胞介素5抗体和嗜酸粒细胞趋化因子对支气管哮喘小鼠嗜酸粒细胞迁移的影响

嗜酸粒细胞（EOS）是导致支气管哮喘（简称哮喘）特征性气道炎症的关键效应细胞，但应用白细胞介素5（IL-5）抗体以阻断IL-5的作用后能否完全阻止嗜酸粒细胞趋化因子（eotaxin）引起的EOS募集尚无定论。我们采用小鼠哮喘模型对此进行研究和探讨。     

白细胞介素—5在哮喘患者气道嗜酸细胞浸润中的作用

白细胞介素－５在哮喘患者气道嗜酸细胞浸润中的作用施焕中覃寿明肖常青许辉陈一强龙学明以嗜酸细胞（ＥＯＳ）浸润为主的慢性气道炎症是支气管哮喘的重要特征。本实验应用纤维支气管镜将人重组白细胞介素（ＩＬ）－５直接注入哮喘患者肺段支气管，然后观察其对ＥＯＳ浸润...     

呼吸道合胞病毒与支气管哮喘

流行病学显示呼吸道合胞病毒(RSV)诱发或加重支气管哮喘(哮喘)。许多研究从免疫学、病理生理学角度推测两者之间联系的机制。单纯RSV感染气道反应性轻度增高且呈一过性,嗜酸粒细胞肺浸润不明显,辅助性T细胞中TH1细胞克隆被激活,CD4+特别是CD8+亚群的IFN-γ增高。哮喘是以嗜酸粒细胞浸润为特征的慢性炎症,其气道反应性明显增高,T细胞中TH2被激活,IL-4、IL-5增高明显。本文主要从气道反应性、嗜酸粒细胞、T细胞亚群的改变来探付RSV与哮喘的关系。     

用呼吸道合胞病毒诱导致敏小鼠建立重度支气管哮喘动物模型

呼吸道病毒感染是导致支气管哮喘（简称哮喘）气道重塑及急性加重、致死的重要原因。我们采用呼吸道合胞病毒（RSV）诱导致敏小鼠复制重度哮喘模型，旨在为建立重度哮喘动物模型提供一种较理想的方法。     

Fas抗体介导的嗜酸细胞凋亡及其清除机制

目的探讨Fas单抗对嗜酸细胞(EOS)凋亡的诱导作用及凋亡EOS的清除机制。方法分离正常人外周血EOS,加入白细胞介素(IL)5与不同浓度(1～1000ng/ml)Fas单抗培养,台盼蓝拒染法和末端标记法分别检测细胞存活和凋亡变化,观察凋亡EOS能否被巨噬细胞(MΦ)吞噬。结果Fas单抗对IL-5介导的EOS存活呈浓度和时间依赖性抑制作用。高浓度的IL-5(106U/L)不能抑制Fas单抗的作用。Fas单抗(100ng/ml)处理24h后EOS即有明显的凋亡［（35±6）%］,72h后增至(96±3)%,前后比较差异有显著性（P<0.01）。Fas单抗(100ng/ml)处理24、48和72h的EOS与MΦ培养,吞噬凋亡EOS的阳性MΦ百分率分别为(20±5)%、(38±6)%和(45±6)%,MΦ吞噬新分离的EOS阳性百分率为（1±2）%,与前者比较差异均有显著性（P<0.01）。结论Fas抗体能有效诱导EOS凋亡,凋亡EOS能被MΦ所吞噬清除。     

夏枯草体外对呼吸道合胞病毒的抑制作用

目的探究夏枯草在细胞水平对呼吸道合胞病毒(RSV)的抑制作用及机制。方法采用细胞培养技术,以利巴韦林为对照,通过观察细胞病变效应(CPE),测定细胞半数中毒浓度(TC50)、药物半数抑制浓度(IC_(50))和抗病毒指数(TI),评判夏枯草抗RSV效果。结果夏枯草对RSV有抑制作用,浓度在0.4~51.2 mg/ml呈量效关系,TC_(50)=3.39 mg/ml、IC_(50)=0.379 mg/ml、TI=8.94。利巴韦林TC_(50)=0.33 mg/ml、IC_(50)=0.041 mg/ml、TI=8.05。夏枯草对细胞的毒性比利巴韦林小,TI比利巴韦林大,安全范围大。结论夏枯草在Hep-2细胞中对RSV有明显的抑制作用,既能抑制RSV的吸附和生物合成,又能直接杀死病毒,抗RSV作用与利巴韦林相当。     

嗜酸细胞趋化因子在哮喘、嗜酸细胞性支气管炎患者诱导痰中的表达及其与气道炎症的关系

目的探讨嗜酸细胞趋化因子（eotaxin）在支气管哮喘、嗜酸细胞性支气管炎患者气道炎症发生中的作用以及在两者间的区别。方法分别收集支气管哮喘（A组）、嗜酸细胞性支气管炎（EB组）、单纯慢性支气管炎（CB组）缓解期/稳定期患者13例、11例、12例和健康对照者（C组）9例。诱导痰并经处理后进行分类细胞记数,并用夹心法酶联免疫吸附测定（ELISA）其诱导痰上清液中eotaxin浓度。结果诱导痰嗜酸细胞占白细胞百分比（Eos/Leu%）、eotaxin浓度A组[（19.2±9.7）%;（0.251±0.118）g/L]、EB组[（11.4±6.1）%;（0.146±0.079）g/L]分别与CB组[（0.9±0.6）%;（0.043±0.036）g/L]、C组[（0.8±0.4）%;（0.031±0.013）g/L]比较,差异有显著性（P均〈0.05）;A组Eos/Leu%、eotaxin浓度与EB组比较,差异也有显著性（P均〈0.05）。结论 eotaxin可能通过对Eos的选择性趋化作用参与了支气管哮喘和嗜酸细胞性支气管炎患者气道炎症的发生机制,这种作用机制对于支气管哮喘和嗜酸细胞性支气管炎在程度上可能是不同的。     

糖皮质激素对哮喘患者白细胞介素—5mRNA表达与嗜酸性粒细胞激活作…

为了观察糖皮质激素对哮喘患者白细胞介素（ＩＬ）－５ｍＲＮＡ表达与嗜酸性粒细胞激活作用的影响，本研究用逆转录（ＲＴ）－聚合酶链反应（ＰＣＲ）法半定量分析了哮喘患者用糖皮质激素治疗前后外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中ＩＬ－５ｍＲＮＡ表达水平的变化，检测了血清嗜酸细胞阳离子蛋白（ＥＣＰ）浓度、一秒钟用力呼气容积（ＥＦＶ１）下降２０％时的乙酰甲胆碱（ＭＣＨ）激发浓度（ＭＣＨ－ＰＣ２０值）和基础ＦＥＶ１占用力     

地塞米松对哮喘豚鼠嗜酸细胞中白细胞介素3、5及粒-巨噬细胞集落刺激因子受体表达的影响

目的观察地塞米松(DM)对嗜酸细胞(EOS)上白细胞介素5受体α(IL-5Rα)、白细胞介素3受体α(IL-3Rα)、粒-巨噬细胞集落刺激因子受体α(GM-CSFRα)及共同β链(βcR)mRNA表达的影响,探讨糖皮质激素促进哮喘EOS凋亡的机制.方法18只健康豚鼠随机分为正常组、哮喘组、地塞米松组,每组6只,以卵蛋白致敏激发制作哮喘豚鼠模型,密度梯度分离法分离支气管肺泡灌洗液(BALF)中的低密度EOS(HEOS)及正常密度EOS(NEOS),以末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)法检测细胞凋亡,原位杂交检测各受体mRNA表达,逆转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)法检测EOSIL-5Rα、IL-3Rα相对含量.结果HEOS及NEOS凋亡,哮喘组(4.0±2.0、3.0±2.0)与正常组(8.0±2.0、7.0±2.0)比较差异有显著性(P＜0.01),而细胞数哮喘组(75.2±12.6、50.7±11.2)与正常组(4.8±1.5、9.5±2.6)比较差异也有显著性(P＜0.01).用DM2h后不同密度EOS数量(14.8±8.3、20.0±7.0)与哮喘组比较差异有显著性(P＜0.01),DM组以HEOS下降为明显(P＜0.05),BALF中EOS以NE0S为主,EOS凋亡DM组(24.0±5.0、22.0±4.0)与哮喘组比较差异有显著性(P＜0.01);EOS表达IL-5、IL-3及GM-CSFα受体mRNA,哮喘组与正常组比较差异有显著性(P＜0.01,0.05),DM组与哮喘组比较差异有显著性(P＜0.05或0.01);而βcR表达哮喘组(41±6、39±7)与正常组(28±5、26±5)比较差异有显著性(P＜0.01);DM组(32±8、30±5)与哮喘组比较差异有显著性(P＜0.05).HEOS表达各受体与NEOS比较差异无显著性(P＞0.05);RT-PCR检测显示,DM组IL-5Rα、IL-3RαmRNA与哮喘组比较差异均有显著性(P＜0.01,0.05).结论DM可促进哮喘豚鼠肺内EOS凋亡,减少肺内EOS浸润,DM可通过促进IL-5、IL-3、GM-CSF受体各自α链表达,抑制这三种受体的共同β链表达,减少其生物学功能,促进EOS凋亡.     

瑞舒伐他汀钙对老年支气管哮喘急性期患者炎症因子及嗜酸粒细胞的影响

目的探讨瑞舒伐他汀钙对老年支气管哮喘急性发作期患者嗜酸粒细胞及炎性因子的影响。方法 68例中度哮喘住院患者,随机分成一般治疗组(A组)34例和瑞舒伐他汀组(B组)34例,另选取同期健康体检患者(C组)34例,A组患者给予吸入舒喘灵气雾剂,其用量和用法参照哮喘阶梯治疗方案;B组患者在上述基础上加用瑞舒伐他汀10 mg/晚,口服治疗2 w;C组不给予任何治疗;所有组患者治疗前及治疗2 w后用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测白介素(IL)-12、IL-18浓度,用Counter JT-IR计数仪计数外周血嗜酸性粒细胞(EOS)。结果治疗前,A组、B组IL-12、IL-18、EOS指标均明显高于C组,A组、B组之间差异无显著性;治疗后,A组、B组上述指标较C组有显著下降(P0.05)。结论瑞舒伐他汀钙可进一步降低老年支气管哮喘急性期患者炎症因子及嗜酸粒细胞,可用于老年支气管哮喘急性发作期的辅助治疗。     

白细胞介素18与病毒性肝炎

白细胞介素18（IL-18）是近年发现的一种新的炎性细胞因子，它在免疫调节、抗感染及抗肿瘤中已显示出十分重要的作用。目前IL-18在病毒性肝炎发病中的抗病毒作用和介导肝损伤的研究也越来越受到重视，现就此作一综述。     

嗜酸细胞阳离子蛋白与支气管哮喘

本综述了嗜酸细胞阳离子蛋白与嗜酸细胞、通气功能、气道反应性及哮喘气道炎症之间的关系。并讨论了它在哮喘发病机制中的作用和临床应用的意义。     

白细胞介素5和嗜酸粒细胞趋化因子在支气管哮喘大鼠肺和骨髓信号传导中的作用

目的探讨支气管哮喘(简称哮喘)大鼠模型中白细胞介素5(IL-5)和嗜酸粒细胞趋化因子(eotaxin)是否参与肺和骨髓间信号传导,观察不同干预措施的影响。方法清洁级雄性Wistar大鼠40只,按随机数字表法分为正常对照组和哮喘组,每组20只。用卵白蛋白(OVA)致敏和激发制作哮喘模型,于激发后30 min及6、12、24、48 h处死大鼠,分别取外周血涂片、骨髓细胞涂片。肺组织以10％甲醛固定做石蜡切片。将血涂片、骨髓涂片、肺组织切片行苏木精-伊红(HE)染色,观察细胞总数和嗜酸粒细胞(EOS)比例。取不同时间点肺组织匀浆,用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定肺组织匀浆IL-5和eotaxin浓度。将不同时间点的肺组织匀浆与正常对照组和哮喘组大鼠骨髓细胞共同孵育,并分别加入地塞米松(DXM)、半乳凝素3(Galectin-3)、孟鲁司特钠、抗IL-5抗体进行干预,采用抗IL-5、抗IL-SRα、抗eotaxin、抗CD34和抗CC趋化因子受体3(CCR3)多克隆抗体进行免疫组化染色,检测两组骨髓细胞中EOS计数和IL-5+细胞、IL-5Rα+细胞、CCR3+细胞、eotaxin+细胞、CD34+细胞的百分比。结果哮喘大鼠外周血、骨髓、肺组织中EOS数分别为0．020 0±0．002 0、0．023±0．003、0．025 0±0．009 0,正常对照组分别为0．010 0±0．003 0、0．009±0．003、0．009 0±0．002 0,两组比较差异有统计学意义(t值分别为2．547、2．718、2．718,P均<0．05);哮喘大鼠肺组织匀浆于激发6 h的IL-5为(89．3±2．4)pg/ml,12 h的eotaxin水平为(4．9±0．5)pg／ml,48 h均回到基线[(1．45±0．23) pg／ml]水平;除30 min外,各时间点哮喘大鼠肺组织匀浆均能诱导正常对照组或哮喘组大鼠骨髓细胞中CD34+、EOS、IL-5+、IL-SRα+、CCR3+、eotaxin+细胞表达增加,Galectin-3干预哮喘大鼠骨髓细胞后,骨髓EOS、IL-5+、IL-5Rα+、CCR3+、eotaxin+和CD34+细胞表达减少(分别为0．021±0．005、0．074±0．007、0．138±0．014、0．067±0．010、0．040±0．005、0．087±0．012)。结论IL-5 mRNA转录选择性抑制物(Galectin-3)能抑制EOS炎症,有可能成为一种特异性的抗哮喘药物。     

呼吸道合胞病毒对致敏小鼠T辅助细胞相关细胞因子表达的作用

目的　探讨经卵白蛋白 (OVA)雾化致敏的小鼠受呼吸道合胞病毒 (RSV)感染后肺内炎症发展的特点及与T辅助细胞有关的细胞因子的反应。方法　 40只小鼠随机分成 4组 ,每组 1 0只。对照组 :磷酸盐缓冲液 (PBS)雾化 1 0天 ,HEP 2细胞液滴鼻 ;RSV组 :PBS液雾化 ,RSV滴鼻 ;OVA组 :OVA致敏 ,HEP 2细胞液滴鼻 ;OVA +RSV组 :OVA致敏 ,RSV滴鼻。第 1 6天 ,每组各 6只小鼠支气管肺泡灌洗作细胞计数及分类 ,酶链免疫吸附试验 (ELISA)测定白细胞介素 4(IL 4)、γ干扰素 (IFN γ)的含量 ;余 4只取肺组织用于病理分析和提取总RNA ,经逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)测IL 4、IL 5、IFN γ的mRNA表达量。结果　 (1 )支气管肺泡灌洗液 (BALF)中细胞总数 :单纯RSV组为 (1 4 5±5 4)× 1 0 6 /ml、OVA +RSV组为 (1 6 8± 4 9)× 1 0 6 /ml,与对照组 [(7 7± 2 4)× 1 0 6 /ml]比较差异有显著性 (P <0 0 5) ;淋巴细胞RSV组为 0 63± 0 0 5、OVA +RSV组为 0 77± 0 0 9,与OVA组 (0 36± 0 0 3)、对照组 (0 2 8± 0 0 5)比较差异有显著性 (P <0 0 5) ;嗜酸细胞 :OVA +RSV组 (0 0 690± 0 0 1 0 0 )与其它三组 (0 0 0 30± 0 0 0 1 0、0 0 0 90± 0 0 0 50、0 0 1 0 0± 0 0 0 4 0 )比较差异也有显著性 (P均 <0     

白细胞介素1诱导哮喘豚鼠细胞粘附分子的研究

ＣＤ11ａ分子即淋巴细胞功能相关抗原 1(ＬＦＡ 1) ,系 β2 整合素的主要成员之一 ,可介导广泛粘附依赖性反应。抗ＬＦＡ 1单抗可抑制Ｔ细胞粘附的各种免疫反应。我们以基因重组白细胞介素 1(ｒＩＬ 1)对哮喘豚鼠腹腔注射 ,观察其对ＣＤ11ａ分子表达的影响 ,探讨ＩＬ 1及细胞粘附分子 (ＣＡＭｓ)在哮喘发病中的作用。材料与方法　卵蛋白 (ＯＶＡ)与抗ＣＤ11ａ单克隆抗体为美国Ｓｉｇｍａ公司产品 ,ｒＩＬ 1由北京军事医学科学院邦定公司生产。 30 0～ 35 0ｇ豚鼠 2 8只 ,雌雄不拘 ,由山东医科大学动物实验中心提供。哮喘豚鼠模型的建立及分…     

白细胞介素18对白细胞介素1的胰岛损伤效应无调节作用

目的：观察白细胞介素18（IL－18）对胰岛功能的效应,IL－18对IL－1β的胰岛损伤效应的影响,方法：新生Wistar大鼠离体胰岛与细胞因子孵育后,观测胰岛素秋和亚硝酸盐的变化,并用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）观察IL－18受体信号链（IL－18Rβ）mRNA的表达水平。结果：（1）0．625－10nmol/L基因重组小鼠（rm)IL-18孵育胰岛24h后,对累积的和葡萄糖刺激的胰岛素释放以及亚硝酸盐生成均无显著效应;（2）15pg/ml基因重组人（rh)IL-1β明显促进亚硝酸盐生成和抑制胰岛素释放,而0．625－10nmol/L rmIL-18则不影响IL－1β的上述效应;（3）rm IL-12预培养24h不能促使胰岛对10nmol/L rm或基因重组大鼠（rr)IL-18的反应性出现,也未使IL－18呈现加强IL－1β的上述效应;（4）离体胰岛即使与IL－12孵育48h后,仍不见IL－18RβmRNA的表达,结论：与IL－1β不同,IL－18在胰岛β细胞损伤中不发挥直接作用。     

重组白细胞介素12抑制哮喘小鼠肺部炎症的机制

目的观察重组小鼠白细胞介素-12(rmIL-12)对哮喘小鼠肺部炎症的防治作用以及对相关细胞因子的影响。方法 45只C57BL/6小鼠随机分为rmIL-12组20只、哮喘组20只和对照组5只,前两组又各自分为末次激发后1,2,4和8 d时间组,每组5只。以卵白蛋白(OVA)致敏和激发制哮喘模型,rmIL-12组在每次激发前30 min同时给予rmIL-12腹腔注射进行防治。随后处死小鼠,ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)和血浆中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-10、一氧化氮(NO)和IgE浓度。BALF沉淀行细胞总数和嗜酸性粒细胞(EOS)分类计数。HE染色观察肺组织炎症变化。结果与对照组相比,哮喘组小鼠HE染色可见明显的气道炎症反应;rmIL-12组小鼠各个时间段的肺部炎症反应较哮喘组明显减轻。哮喘2 d组的细胞总数及EOS百分比较对照组明显增加(P<0.05);rmIL-12组的上述指标较同时段的哮喘组降低,在1、2和4 d差异均具有统计学意义(P<0.05)。哮喘2 d组TNF-α、NO、IgE水平较对照组升高,IL-10较对照组降低(P<0.05);rmIL-12组的上述指标较同时段的哮喘组相比,TNF-α、NO、IgE水平降低,IL-10水平升高,其中TNF-α和NO水平在1、2、4和8 d差异均具有统计学意义(P<0.05),IL-10在1、4和8 d具有统计学意义(P<0.05),IgE在2 d和4 d具有统计学意义(P<0.05)。结论 IL-12通过调整炎症相关因子,预防和控制哮喘小鼠的气道炎症。