糖尿病大鼠逼尿肌线粒体超微结构及基质的改变

目的观察2型糖尿病(T2DM)大鼠逼尿肌细胞线粒体超微结构的改变。方法建立T2DM大鼠动物模型,利用透射电镜观察其逼尿肌细胞内线粒体结构并应用BI2000序列图像分析软件检测线粒体密度。结果对照组的线粒体相对光密度为2.417±0.376,相对灰度为0.572±0.083;T2DM组逼尿肌细胞内线粒体相对光密度为1.549±0.871,相对灰度为0.836±0.279,线粒体基质密度较正常明显下降。结论糖尿病大鼠逼尿肌细胞内线粒体超微结构破坏,基质密度下降,提示逼尿肌细胞能量代谢障碍是糖尿病膀胱收缩力降低的原因。     

糖尿病大鼠逼尿肌细胞内游离钙离子浓度的变化

目的观察2型糖尿病(T2DM)大鼠的逼尿肌细胞内游离钙离子浓度变化,为阐明糖尿病膀胱病变的发病机制提供依据。方法制备T2DM大鼠模型,在成模后4周和20周,以正常大鼠为对照,分离单个逼尿肌细胞并应用Fura-2／AM荧光探针负载,进行细胞内钙离子浓度的测定。结果发病初期,T2DM大鼠逼尿肌细胞内静息钙离子荧光比值(289．24±33．80)与正常对照组(276．85±57．90)比较,差异无统计学意义。在发病20周时,T2DM组大鼠逼尿肌细胞内钙离子荧光比值(545．94±79．28)比正常对照组(275．66±108．94)明显增高。结论细胞内钙超载参与了逼尿肌功能的损害的病理过程,但是发生相对较晚,可能在糖尿病膀胱发病的进展期起重要作用。     

糖尿病膀胱尿动力学及逼尿肌功能改变的相关性研究

目的探讨糖尿病膀胱尿动力学变化与逼尿肌功能改变之间的相关性。方法回顾性分析70例糖尿病患者尿动力学检查结果,将患者分为早期组(病史<8年〉和进展期组(病史>12年),分别测定初尿意的膀胱容量、最大膀胱容量、最大自由尿流率、PQmax、剩余尿量。并结合2型糖尿病(T2DM)大鼠与正常大鼠的离体逼尿肌肌条实验,分析实验鼠发病6周和18周的逼尿肌兴奋性、最大收缩力和平均收缩力变化。结果临床资料显示29例(41%)表现为低顺应性膀胱,28例(40%)膀胱感觉减退,30例(43%)排尿期逼尿肌压力减退,22例(31%)剩余尿量超过150ml,10例(14%)逼尿肌不稳定,6例(9%)不能自行排尿。患者膀胱灌注过程中产生初尿意的灌注容量(203.25±107.53)ml(125~630ml),最大膀胱容量(428.09±227.89)ml(220~1350ml)。最大自由尿流率(10.70±3.27)ml/min,剩余尿量(100.57±108.08)ml,早期组患者产生初尿意的膀胱容量增加为(151.67±24.07)ml,进展期患者初尿意的膀胱容量增加为(268.16±13.90)ml,最大膀胱容量(592.97±252.51)ml,最大自由尿流率(8.61±2.04)ml/min,PQmax(33.16±19.81)cmH2O(1cmH2O=0.098kPa),剩余尿增加至(169.03±137.25)ml。动物实验发现T2DM大鼠逼尿肌的张力阈值为(0.72±0.33)g,显著高于对照组(0.32±0.18)g,F=59.63,P<0.0001;最大逼尿肌收缩力T2DM组(0.08±0.04)g,较对照组(0.11±0.05)g降低(F=7.47,P<0.01);平均收缩力T2DM组(0.06±0.02)g,较对照组(0.07±0.03)g明显降低(F=5.71,P<0.05)。随着实验动物发病时间延长,T2DM大鼠逼尿肌张力阈值呈现增高趋势,而逼尿肌最大及平均收缩力均降低。结论根据临床及动物实验结果推测,早期糖尿病患者膀胱感觉减退可能是逼尿肌兴奋性降低的缘故。进展期膀胱感觉进一步减退、最大膀胱容量显著增大、最大自由尿流率降低、排尿期最大尿流时的逼尿肌压力降低、剩余尿量显著增多等一系列尿动力学改变,可能是在逼尿肌兴奋性改变的基础上出现逼尿肌收缩力降低的结果。     

糖尿病对膀胱逼尿肌兴奋性、收缩性及顺应性影响的实验研究

目的:探讨糖尿病(DM)对膀胱逼尿肌兴奋性、收缩性、顺应性的影响及糖尿病神经源性膀胱尿道功能障碍(NVUDD)的发病机制.方法:建立SD大鼠DM动物模型,于10周后行充盈性膀胱测压及离体逼尿肌条机械牵拉、电及胆碱类药物刺激试验.结果:DM动物模型10周后不稳定膀胱(DI)的发生率为64.7%,逼尿肌顺应性升高;DI组、DM后稳定组与正常对照组相比,牵拉逼尿肌致其出现收缩时的张力明显降低,电刺激产生的收缩力明显减弱;DI组逼尿肌胆碱类药物产生的收缩力明显减弱.结论:DM后NVUDD的发生率较高,其逼尿肌的收缩功能受损较重,DNBUD的发生与逼尿肌自身的神经源及肌源性改变密切相关.     

糖尿病大鼠膀胱收缩功能改变与M3受体关系的实验研究

目的探讨糖尿病性膀胱发病机制中逼尿肌M3受体的改变情况。方法以链脲佐菌素诱导2型糖尿病大鼠成模。应用尿动力仪检测逼尿肌收缩功能；Westernblot、RT—PCR方法检测膀胱M3受体含量。结果病程2周时糖尿病组大鼠膀胱逼尿肌收缩力增加伴M3受体表达增强；病程4周时糖尿病组大鼠膀胱逼尿肌收缩力低于正常对照组，但尚无统计学意义；病程12周时糖尿病组大鼠膀胱逼尿肌收缩力降低伴M，受体表达减少。结论膀胱收缩功能和M3受体蛋白含量及M3受体mRNA的含量三者呈同向变化关系。在糖尿病大鼠发病早期三者均升高，但是随着病程进展却都降低了。这可能是早期糖尿病性膀胱病变的发病机制之一。     

糖尿病大鼠膀胱重构中M3受体改变的实验研究

目的:研究病程24周的2型糖尿病大鼠膀胱重构时,逼尿肌收缩功能的改变和M3受体含量及其基因转录水平的改变情况,并探讨二者之间的相关性。方法:2d龄雌性Wistar大鼠随机分成实验组和正常对照组,应用链脲佐菌素腹腔注射并结合高糖高脂饮食进行2型糖尿病大鼠动物模型制备。于糖尿病病程24周时进行下列实验:应用离体膀胱灌注方法观察逼尿肌收缩功能的变化;应用RT-PCR和Western blotting方法观察逼尿肌M3受体mRNA和蛋白表达的变化。结果:2型糖尿病组大鼠逼尿肌收缩功能低于正常对照组,为(16.52±2.97)cmH2O/100mgVS(25.66±3.56)cmH2O/100mg;2型糖尿病组大鼠逼尿肌M3受体mRNA和蛋白的表达均高于正常对照组,分别为(65.27±4.61)%VS(37.53±4.02)%和(45.19±2.37)%VS(23.67±2.85)%。结论:本研究证实了2型糖尿病大鼠在病程24周时膀胱逼尿肌的收缩力降低,但M3受体的生物合成却上调,这种不平行现象可能是病变进展的表现,为深入研究糖尿病膀胱病的发病机制提供了有价值     

糖尿病膀胱顺应性及逼尿肌舒缩功能的实验研究

目的　为进一步阐明糖尿病膀胱病变的发病机理提供实验依据。　方法　以糖尿病大鼠为模型 ,蔗糖利尿鼠及正常大鼠为对照 ,作离体膀胱灌注测压观察膀胱顺应性改变 ;分别采用全膀胱及逼尿肌条对比研究膀胱舒缩功能变化。　结果　糖尿病组大鼠膀胱逼尿肌收缩力明显低于蔗糖利尿组及对照组 [分别为 (2 0 80± 6 38)、(31 6 6± 6 17)、(4 0 10± 7 2 1)g/ 10 0mgT];膀胱舒张功能显著下降 ,膀胱顺应性升高。　结论　糖尿病大鼠模型 12周时膀胱收缩、舒张功能明显受损 ,同时 ,膀胱顺应性异常也是致病机理之一 ;利尿 (多尿 )不是糖尿病膀胱病变的主要因素。     

糖尿病膀胱逼尿肌损伤的研究进展

糖尿病膀胱(diabetic cystopathy,DCP)是糖尿病引起的泌尿系统常见并发症,也称为糖尿病神经源性膀胱尿道功能障碍(neuropathic vesicourethal dysfunction of diabetic,NVUDD).因影响患者的生活质量,DCP正日益受到泌尿科、内分泌科、神经科医生的共同关注.其具体发病机制尚未完全清楚,目前认为主要有神经源性损伤和逼尿肌肌源性病变两大方面.其中膀胱逼尿肌的损伤越来越受到重视.     

糖尿病大鼠膀胱肾上腺素能β3受体的改变

目的 观察糖尿病大鼠膀胱中肾上腺素能β3受体(β3-AR)的表达在糖尿病膀胱病变发生发展中的作用.方法 将80只大鼠按随机化原则分为糖尿病模型组(n=40)及正常对照组(n=40).应用链脲佐菌素60 mg/kg腹腔注射,诱导形成Ⅰ型糖尿病大鼠模型,分别在发病第2、4、6、8、10周时处死取全膀胱,称重,取材制作光镜病理标本及提取蛋白,采用蛋白印迹法检测各组大鼠膀胱逼尿肌细胞肾上腺素能β3受体蛋白的表达.结果 糖尿病模型组大鼠体质量组增长缓慢,膀胱湿重增加(P＜0.05).糖尿病组膀胱逼尿肌细胞肥大,变性,排列紊乱松散,胶原及纤维组织明显增生,出现空泡;晚期逼尿肌细胞萎缩,仅见大量的胶原及弹性纤维成分.糖尿病大鼠膀胱逼尿肌细胞肾上腺素能β3受体蛋白表达高于正常对照组(P＜0.05);2周:(0.73±0.09)比(0.35±0.04),4周:(0.81±0.13)比(0.32±0.06),6周:(0.72±0.05)比(0.33±0.04),8周:(0.55±0.07)比(0.33 ±0.06),10周:(0.52±0.07)比(0.33±0.05)(P＜0.05).结论 各时间段的糖尿病组膀胱逼尿肌均出现损害,各时间段的糖尿病组膀胱逼尿肌细胞中肾上腺素能β3受体含量均增加,肾上腺素能β3受体在糖尿病膀胱病变的发生发展中发挥重要作用.     

糖尿病膀胱诊治现状

糖尿病膀胱（diabetic cystopathy，DCP）是糖尿病引起的泌尿系统高发并发症，也称为糖尿病神经源性膀胱尿道功能障碍（neuropathic vesicourethral dysfunction of diabetic，NVUDD）。因严重影响患者的生活质量，DCP正日益受到泌尿科、内分泌科、神经科医生的关注。DCP的具体发病机制尚未完全清楚，目前认为主要有神经源性损伤和逼尿肌肌源性病变两大方面。DCP的诊断和治疗也是现在研究的热点之一。     

非胰岛素依赖型糖尿病大鼠膀胱兴奋性自律性以及舒缩功能的改变

目的研究非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)大鼠的逼尿肌功能变化情况，为进一步阐明糖尿病膀胱病变的发病机理提供实验依据。方法制造NIDDM大鼠模型，以正常大鼠为对照，分别进行残余尿测定，在体膀胱灌注测压观察膀胱最大容量、膀胱顺应性改变和最大逼尿肌收缩强度(即瓦特因子)以及采用离体逼尿肌条研究膀胱兴奋性、自律性及收缩力变化。结果糖尿病组大鼠膀胱逼尿肌兴奋性明显低于对照组，自律性呈现先高后低趋势，最大收缩力和平均收缩力较对照组降低；膀胱顺应性升高，残余尿增多、膀胱容量增大以及膀胱湿重增加。结论膀胱逼尿肌兴奋性降低是NVUDD的改变最早且最明显的指标。在糖尿病早期就存在逼尿肌自主节律性的变化。最初频率增加的原因可能是于逼尿肌兴奋性降低的代偿所致，其后表现为频率降低则是失代偿的结果。糖尿病对于膀胱收缩、舒张功能均有损害作用，从而导致膀胱顺应性改变。     

糖尿病膀胱的尿动力学及病理学改变(附动物实验与临床观察)

目的:观察糖尿病膀胱(DCP)的尿动力学及病理学改变,探讨发病机制及病理演绎过程.方法:建立DCP wistar大鼠模型(30只),正常wistar大鼠作对照(30只),进行膀胱储尿期压、最大容量、最大膀胱压等测定,进行膀胱湿重、膀胱壁厚度及光镜、电镜的病理学观察.早期DCP患者(32例),晚期DCP(28例)及非DM人群(22例)进行尿流率、压力-流率尿道分布压及括约肌肌电图等测定,作相关统计学处理.结果:①60天后,DCP鼠组与对照组:膀胱储尿期压(0.45±0.08)kPa,(0.60±0.03)kPa(P＜0.05);最大膀胱容量(3.49±0.40)ml,(1.82±0.12)ml(P＜0.01);最大膀胱压(3.09±0.10)kPa,(4.91±0.30)kPa(P＜0.01);膀胱顺应性(1.39±0.11)ml·kPa-1,(0.68±0.07)ml·kPa-1(P ＜0.01);湿重增加(P ＜0.01);逼尿肌细胞连接纤维化,成纤维细胞变性及胶原纤维排列紊乱.②相对于对照组,早期DCP患者最大尿流率偏低,为(15.97±5.71)ml·s(P ＜0.05),逼尿肌活动亢进(占59%),逼尿肌/括约肌协同失调(占37.5%);而晚期DCP患者最大尿流率明显下降,为(8.75±4.20)ml·s-1(P ＜0.01),膀胱容量增加,为(472.5±32.9)ml(P ＜0.01),剩余尿量增多,为(62.59±19.87)ml(P ＜0.01),逼尿肌收缩功能减弱.结论:DCP早期就有膀胱的动力学及病理学改变,以逼尿肌活动功能亢进,逼尿肌/括约肌协同失调较常见,晚期以逼尿肌收缩功能减弱为主,建议对DCP患者早期就应给予干预,控制病情的进一步恶化.     

女性糖尿病患者膀胱功能障碍的尿动力学研究

目的：探讨尿动力学检查在糖尿病患者膀胱功能障碍诊断中的意义。方法：回顾性分析32例女性糖尿病膀胱病变患者的临床资料和尿动力学检查结果,明确尿动力学的特征性改变。结果：早期组最大尿流率、膀胱容量下降,逼尿肌压力增加,初始尿意、剩余尿量正常;晚期组最大尿流率、逼尿肌压力下降明显,初始尿意、剩余尿、膀胱容量显著增加。结论：女性伴有下尿路症状（LUTS）的糖尿病患者膀胱功能异常的发生率高,随着病程延长,膀胱功能改变明显。尿动力学检查可以明确膀胱功能,对合并糖尿病的LUTS患者的正确诊断和治疗具有重要的指导意义。     

Inhibition of TNF-α improves the bladder dysfunction that is associated with type 2 diabetes

Diabetic bladder dysfunction (DBD) is common and affects 80% of diabetic patients. However, the molecular mechanisms underlying DBD remain elusive because of a lack of appropriate animal models. We demonstrate DBD in a mouse model that harbors hepatic-specific insulin receptor substrate 1 and 2 deletions (double knockout [DKO]), which develops type 2 diabetes. Bladders of DKO animals exhibited detrusor overactivity at an early stage: increased frequency of nonvoiding contractions during bladder filling, decreased voided volume, and dispersed urine spot patterns. In contrast, older animals with diabetes exhibited detrusor hypoactivity, findings consistent with clinical features of diabetes in humans. The tumor necrosis factor (TNF) superfamily genes were upregulated in DKO bladders. In particular, TNF-α was upregulated in serum and in bladder smooth muscle tissue. TNF-α augmented the contraction of primary cultured bladder smooth muscle cells through upregulating Rho kinase activity and phosphorylating myosin light chain. Systemic treatment of DKO animals with soluble TNF receptor 1 (TNFRI) prevented upregulation of Rho A signaling and reversed the bladder dysfunction, without affecting hyperglycemia. TNFRI combined with the antidiabetic agent, metformin, improved DBD beyond that achieved with metformin alone, suggesting that therapies targeting TNF-α may have utility in reversing the secondary urologic complications of type 2 diabetes.     

不同阶段2型糖尿病诱发骨质疏松症的致病机制研究进展

大量临床研究表明,2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者的骨折风险明显增加。因此,T2DM诱发的骨质疏松症(osteoporosis,OP)被认为是最严重的糖尿病并发症之一。骨脆性增加是糖尿病性骨质疏松症(diabetic osteoporosis,DOP)的典型特征,其发病机制是多因素引起的,包括肥胖、高胰岛素血症、高血糖(hyperglycemia,HG)、晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)积聚和氧化产物积累以及微血管病变的存在等。这些因素在T2DM不同时期是相互平衡或相互促进的,而肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)、白细胞介素-1(interleukin 1,IL-1)、白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)等炎症因子的异常活化打破了骨形成和骨吸收的代谢平衡,导致骨脆性增加。骨强度和骨折风险的变化取决于疾病进展的阶段。因此,糖尿病骨病的病理生理变化可以通过分别考虑糖尿病早期和晚期骨骼相关因素来广泛讨论,其中早期阶段以胰岛素抵抗和高胰岛素血症为特征,这些因素会导致糖尿病发病和初始阶段的骨密度(bone mineral density,BMD)增加。而晚期阶段的特征是β细胞衰竭,AGEs和氧化产物的堆积,加速衰老和血管并发症的发展。为此,本文希望对T2DM的不同阶段与骨代谢的关系进行综述,以便更好的认识T2DM的进展加速骨脆性风险的病理过程和致病机制,为治疗T2DM和T2DM诱发的OP、降低T2DM患者骨折发生的风险发挥积极的作用。     

Endothelial dysfunction as a predictor of cardiovascular disease in type 1 diabetes

Macro and microvascular disease are the main cause of morbi-mortality in type 1 diabetes(T1DM).Although there is a clear association between endothelial dysfunction and atherosclerosis in type 2 diabetes,a cause-effect relationship is less clear in T1 DM.Although endothelial dysfunction(ED) precedes atherosclerosis,it is not clear weather,in recent onset T1 DM,it may progress to clinical macrovascular disease.Moreover,endothelial dysfunction may either be reversed spontaneously or in response to intensive glycemic control,long-term exercise training and use of statins.Acute,long-term and post-prandial hyperglycemia as well as duration of diabetes and microalbuminuria are all conditions associated with ED in T1 DM.The pathogenesis of endothelial dysfunction is closely related to oxidative-stress.NAD(P)H oxidase over activity induces excessive superoxide production inside the mitochondrial oxidative chain of endothelial cells,thus reducing nitric oxide bioavailability and resulting in peroxynitrite formation,a potent oxidant agent.Moreover,oxidative stress also uncouples endothelial nitric oxide synthase,which becomes dysfunctional,inducing formation of superoxide.Other important mechanisms are the activation of both the polyol and protein kinase C pathways as well as the presence of advanced glycation end-products.Future studies are needed to evaluate the potential clinical applicability of endothelial dysfunction as a marker for early vascular complications in T1 DM.     

胰岛素对糖尿病大鼠阴茎内nNOS神经纤维的影响

目的探讨糖尿病性阴茎勃起功能障碍（ED）的发病机制及胰岛素的治疗作用。方法注射链脲佐菌素建立糖尿病（DM）大鼠模型，胰岛素治疗组于成模后注射胰岛素。7周和12周后注射阿扑吗啡（APO）进行大鼠阴茎勃起功能实验，取大鼠阴茎和血浆，用ABC免疫组织化学法观察nNOS神经纤维的变化。测定血浆NOS活性。结果（1）与对照组相比，DM组大鼠阴茎勃起次数明显减少;胰岛素治疗后症状缓解;（2）与对照组相比，DM组血浆NOS活性明显增高;DM组血浆NOS活性与病程延长呈负相关;与DM组比较，胰岛素治疗组血浆NOS活性明显降低;（3）与对照组相比，DM组阴茎内nNOS阳性神经纤维明显减少;与DM组比较，胰岛素治疗组nNOS阳性神经纤维表达增加。结论糖尿病性ED阴茎内nNOS阳性纤维的数量及光密度随DM病程的延长而下降;早期给予胰岛素治疗可预防糖尿病大鼠ED的出现及阴茎内nNOS含量的下降。     

Longitudinal studies of time‐dependent changes in both bladder and erectile function after streptozotocin‐induced diabetes in Fischer 344 male rats

OBJECTIVES

To provide sensitive physiological endpoints for the onset and long‐term progression of deficits induced by diabetes mellitus (DM) in bladder and erectile function in male rats, and to evaluate parallel changes in urogenital and nerve function induced by hyperglycaemia over a protracted period as a model for chronic deficits in patients with diabetes.

MATERIALS AND METHODS

The study comprised in 877 male, 3‐month‐old, Fischer 344 rats; 666 were injected intraperitoneally with 35 mg/kg streptozotocin (STZ) and divided into insulin‐treated and untreated diabetic groups. The rats were studied over 8 months and measurements made of both erectile and bladder function, as well as nerve conduction studies over the duration of the study.

RESULTS

There was an early (first month) abnormality of both erectile and bladder function that persisted through the 8 months of the study. The erectile dysfunction was manifest as reduced intracavernous pressure/blood pressure ratio, and the bladder dysfunction as a persistent increase in detrusor overactivity with no detrusor decompensation. Insulin treatment prevented or modified the abnormality in each organ. Hyperglycaemia caused a progressive decrease in caudal nerve conduction velocity. The mean digital sensory and tibial motor nerve conduction velocity did not deteriorate over time. Correlation measurements of nerve and organ function were not consistent.

CONCLUSIONS

The results of this extensive long‐term study show early and profound effects of hyperglycaemia on the smooth muscle of the penis and bladder, that were persistent and stable in surviving rats over the 8 months. The physiological changes did not correlate well with neurological measurements of those organs. Significantly, diverse smooth‐muscle cellular and subcellular events antedated the measured neurological manifestations of the hyperglycaemia by several months. Although autonomic diabetic neuropathy is a primary life‐threatening complication of long‐term diabetes in humans, this rat model of STZ‐induced diabetes showed that the rapid onset of physiological manifestations was based on many molecular changes in the smooth muscle cells in this model of type 1 DM.     

中老年2型糖尿病女性患者病程与膀胱功能障碍的相关性研究

目的 研究中老年2型糖尿病女性患者的病程与膀胱功能障碍的相关性。方法 选取本院2017年1月至2018年9月门诊年龄≥40岁的女性2型糖尿病患者217例作为研究对象，根据病程分为<10年和≥10年两组，其中<10年组126例，≥10年组91例。患者均行尿动力学检查，比较两组患者初感尿意量异常、逼尿肌收缩力异常、残余尿量增加、逼尿肌无抑制性收缩、逼尿肌与括约肌收缩不协调发生率；采用膀胱过度活动症症状评分(OABSS)量表调查两组患者膀胱过度活动症状及严重程度。再以病程为自变量，膀胱过度活动症状严重程度及差异有统计学意义的尿动力学检查指标为因变量，采用多因素非条件logistic回归分析与病程的相关性。结果 病程≥10年组患者尿动力检查初感尿意量异常、逼尿肌收缩力异常、逼尿肌无抑制性收缩发生率明显高于<10年组，差异有统计学意义（P<0.05）。两组残余尿量增加、逼尿肌与括约肌收缩不协调发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。病程≥10年组有膀胱过度活动症状者占51.65%，明显高于<10年组的2302%，且病程≥10年组中、重度患者的构成比例明显高于<10年组，差异有统计学意义（P<0.05）。多因素logistic回归分析显示，病程与膀胱过度活动症状、初感尿意量异常、逼尿肌收缩力异常相关。结论 老年2型糖尿病女性患者的病程与膀胱过度活动症状及严重程度、尿动力学检查异常率密切相关，提示临床对于病程长的患者应重视对膀胱功能障碍的诊断。