显微镜下观察完整透明蚊体内的班氏丝虫和马来丝虫幼虫

收集有关媒介昆虫的资料是丝虫病监测和控制措施的一个组成部分。传统的方法有对媒介昆虫的群体解剖法和逐一解剖法,二者各有优缺点。本文介绍了一种既能处理大量昆虫又能获得与逐个解剖法相当的数据的新方法,后者包括媒介昆虫感染丝虫发育期幼虫的感染率和含传染期幼虫(L_3s)的感染率,它兼有前二者的优点。     

蚊传马来丝虫和彭亨丝虫发育的定量观察和它们在长爪沙鼠体内的分布

布鲁属丝虫接种长爪沙鼠试验的成功,为实验室研究淋巴系统丝虫病提供了一种合适的动物模型。本文作者针对流行病学上的一些问题进行了研究。实验选用的蚊媒为对两种丝虫都有高度敏感性的利物浦株埃及伊蚊。亚周期型马来丝虫来源于吉隆坡,彭亨丝虫来源于彭亨地区。实验所用的沙鼠均由该研究所饲养繁殖。用2～6日龄的埃及伊蚊叮咬带有马来     

聚合酶链反应检测蚊体内马来丝虫幼虫的实验

目的　建立一种特异、灵敏和简捷的聚合酶链反应 (PCR)检测蚊体内马来丝虫幼虫的方法。方法　在应用一种新的模板纯化处理技术 (Microcon 10 0 )基础上 ,采用适应于检测我国马来丝虫的两套DNA扩增引物(P1、P2与P3、P4) ,对实验感染马来丝虫的中华按蚊进行扩增检测。结果　两套引物均可检出蚊体内不同发育期幼丝虫 (L1、L2 和L3) ,其灵敏度达 1只蚊体内 1/ 6 4条L1和 2 0 0只群体蚊中含有 1只感染蚊 (体内有 1条L3)的水平 ,而对犬恶丝虫及未感染蚊却不能扩增出特异条带。结论　初步建立特异、灵敏和简捷的PCR检测蚊体内马来丝虫幼虫的方法。     

PCR及PCR-ELISA法检测蚊体内马来丝虫幼虫

目的：建立一种检测蚊体内马来丝虫幼虫的灵敏、快速、特异的方法。方法：选择应用PCR及PCR－ELISA法检测马来丝虫幼虫DNA的最佳反应条件，并在该条件下分别以马来丝虫Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期幼虫各1条作模板，测定检测的灵敏度及检测实验室人工感染中华按蚊体内的马来丝虫幼虫。结果：PCR及PCR－ELISA法均能检测出1条Ⅰ期幼虫（L1），而PCR的检测下限为1／10条L1，PCR－ELISA检测下限为1／100条L1；将分离的感染期幼虫加阴性蚊媒进行粗提、扩增及电泳，结果未见明显的扩增条带，扩增产物作ELISA检测，全部为阴 性；个体解剖人工感染的中华按蚊120只，分别收集113只阳性蚊体内的幼丝虫，用两种方法检测，结果均为阳性。结论：初步建立了PCR及PCR－ELISA法检测蚊体内马来丝虫幼虫的方法。     

班氏丝虫和马来丝虫感染期幼虫体外培养的进一步研究

在4种培养系统中,马来丝虫Ⅲ期幼虫在改良RPMI1640、20%小牛血清和人胚肾细胞系为饲养层的培养系统中生长发育良好,可以从Ⅲ期幼虫蜕皮2次发育到童虫,最长存活时间为54d。在单纯改良RPMI1640、TC199和20％小牛血清中培养,从Ⅲ期幼虫发育到童虫的最长存活时间为42d。班氏丝虫Ⅲ期幼虫在上述2种培养系统中,分别存活57和36d,从Ⅲ期幼虫蜕皮进入Ⅳ期幼虫和童虫。对马来丝虫幼虫体外培养蜕皮时间、虫体大小与沙鼠体内发育情况进行了比较。     

布鲁属马来丝虫、彭亨丝虫、树鼩丝虫及吴策属班氏丝虫的鉴别

本文作者从流行病学观点出发,对亚周期型马来布鲁丝虫(Brugia malayi)、周期型马来布鲁丝虫、彭亨布鲁丝虫(B.pahangi)、树鼩布鲁丝虫(B.tupaiae)及班氏吴策丝虫(Wuchereria bancrofti)的微丝蚴一些形态上的差别进行了观察。亚周期型和周期型马来布鲁微丝蚴分别取自泰国南部陶公府和春蓬地区的人血;彭亨布鲁微丝蚴取自保种的猫血;树鼩布鲁微丝蚴属于白天周期型,取自泰国西部北碧捕来的普通树鼩(Tupaia glis);周期型和亚周期型班氏吴策微丝蚴分别取自斯里兰卡和泰国北碧的人血。将取得的血液分别制成厚涂     

派特丝虫、彭亨丝虫和亚周期型马来丝虫间的杂交

布鲁属的派特、彭亨和马来丝虫在形态上颇为相似。为了了解它们是否属于生物学上的不同种,作者进行种间的杂交试验。实验所用的派特丝虫得自肯尼亚,彭亨丝虫得自利物浦热带医学院,亚周期型马来丝虫得自 Wellcome 热带医学研究室。3种丝虫均为纯系传代,将从实验媒介埃及伊蚊获得的感染期幼丝虫接种长爪沙鼠,当刚能区别出虫体的性别时即收集雌虫和雄虫,分别移种到未感染的沙鼠的腹腔。各异种交配     

实验啮齿动物体内移注班氏、彭亨和犬恶丝虫微丝蚴的寿命和行为

本文报告以人体周期型班氏丝虫微丝蚴、猫体彭亨丝虫微丝蚴和狗体犬恶丝虫微丝蚴,分别移注入4～8周龄长爪沙鼠、纳塔耳多乳头鼠或小鼠体内后,对其寿命和行为的实验观察结果。     

鲁南地区班氏丝虫与指状腹腔丝虫在蚊体内感染期幼虫形态的观察

为探讨动物丝虫与人体丝虫在蚊体内发育形态的鉴别方法,以便在基本消灭丝虫病地区,开展纵向监测。1982年以来,我们对班氏丝虫与牛指状腹腔丝虫(Setaria digitata)在蚊体内感染期幼虫的形态进行了观察。     

体外培养马来丝虫和彭亨丝虫感染期幼虫至第4和第5期

本文叙述用马来丝虫和彭亨丝虫感染期幼虫在体外培养至第4期和第5期获得了成功。作者所用的体外培养系统能使幼虫存活7周以上并被用作收集这些幼虫分泌、排泄和脱皮抗原的来源。由压碎东乡伊蚊所得的感染期幼虫用加有青霉素(100μ/ml)和链霉素(100μg/ml)的RPMI_(1640)。培养液洗涤3次,然后将其放入30ml容量的有螺旋帽的组织培养瓶中,添加10%灭活人AB血清和LLC-MK_2恒河猴肾细胞作为饲养层的RPMI-1640液进行培养。每瓶盛培养液5ml放入40至50条感染期幼虫并在“空气”中于37℃孵育。在无菌条件下隔天更换培养液一次,使LL-MK_2细胞系长满瓶底和瓶侧。在培养后期,培养液的pH     

班氏丝虫病的传播动力学:班氏丝虫感染性幼虫在致倦库蚊和冈比亚按蚊体内的分布及逸出

蚊单次叮咬,其体内的感染性幼虫(L3)并不能全部逸出,而逸出的L3也不能全部进入终宿主组织内。因此,用解剖捕获叮咬或即将叮咬的蚊所获得的L3数未能准确评估丝虫病的传播强度。尚未对媒介体内的L3数对L3逸出并进入终宿主组织内的影响及如何影响等作详细的研究。本研究旨在评估班氏丝虫L3在致倦库蚊和冈比亚按蚊体内的解剖分布及查明这些分布对L3在叮咬过程中逸出的影响。     

印度尼西亚南加里曼丹马来丝虫和彭亨丝虫的杂交

用含有布鲁属微丝蚴的猫血喂饲东乡伊蚊,并将由此获得的第3期幼丝虫接种长爪沙鼠腹腔,5～6周后从沙鼠腹腔内取出未成熟的雌虫和雄虫。再以马来丝虫雄虫×彭亨丝虫雌虫,彭亨丝虫雄虫×马来丝虫雌虫的不同组合分别接种沙鼠腹腔。待沙鼠腹腔液中出现微丝蚴后,用膜饲法人工感染东乡伊     

马来丝虫和彭亨丝虫杂交产生的微丝蚴的酸性磷酸酶活性

马来丝虫和彭亨丝虫并存于马来西亚西部、加里曼丹和印度尼西亚。这两种丝虫的微丝蚴和其他奋发育期在形态上相似,因而虫种鉴定主要是根据雄虫交合刺的结构。1975年Redington等曾发现有可能利用微丝蚴的酸性磷酸酶(ACP)活性分布类型进行虫种鉴别。Suswillow等曾发现彭亨丝虫雄虫与马来丝虫杂交后不育,但其它杂交能在     

犬恶丝虫感染期幼虫的体外培养

本文比较了犬恶丝虫在3种培养液中的发育情况。犬恶丝虫的感染期幼虫来自阳性埃及伊蚊,处理后接种于下列3种培养液中:(A)含10%人AB型血清,采用HEPES进行缓冲的RPMI 1640。(B)含有机酸(100ml内含失水苹果酸67mg、琥珀酸6mg和α-酮戊二酸37mg、糖(100ml内含葡萄糖70mg和蔗糖2668mg)和10%胎牛血清的TC-199培养液(C)含10%胎牛血清的Grace昆虫培养液。血清在加热灭活后加入培养液。培养液中加入苄青霉素和链霉素并调节pH值为7.2～7.4。以10～12条感染期幼虫培养于盛     

影响班氏丝虫在按蚊体内传播的因素

蚊虫摄入班氏丝虫微丝蚴的能力和微丝蚴被摄入后的发育情况是此种丝虫得以传播的决定因素。为此,本文不仅研究了冈比亚按蚊(An.gambiae)、阿拉伯按蚊(An.arabiensis)、密勒按蚊(An.merus)和催命按蚊(An.funestus)对班氏丝虫微丝蚴的摄入量及损伤,还描述了丝虫幼虫在蚊体内的存活发育情况。实验在坦桑尼亚的坦噶完成。所用4种按蚊均是捕自野外的雌蚊子代。叮咬带有微丝蚴的志愿者,饱血蚊立即     

5-氟尿嘧啶和5-氟胞嘧啶对彭亨丝虫和犬恶丝虫的效果

本实验用的彭亨丝虫亚周期株的微丝蚴系用盛有肝素的注射器抽取微丝蚴阳性猫的静脉血取得的,以未感染的犬或猫血稀释至每40ml血含有300～350条微丝蚴,然后将其置于装置饲血膜的容器中,待血温平衡后给埃及伊蚊饲血。将吸血的蚊虫饲养于温度为26±1℃,相对温度为75～85%的蚊笼中。感染后9～12天将蚊虫压碎收集感染期幼虫经腹腔注射感染蒙古沙鼠。犬恶丝虫感染埃及伊蚊的方法同上。结果:5-氟尿嘧啶30mg/kg/天×4天腹腔注射沙鼠体内彭亨丝虫成虫无作用,在第     

中华按蚊体内马来丝虫幼虫的放射性标记

通过膜饲吸血法,使中华按蚊同时吸入马来丝虫微丝蚴和标记物(~(35)S-蛋氨酸、~3H-尿嘧啶核苷和~(32)P-磷酸二氢钠)。待微丝蚴发育至第三期幼虫后分离并测定其放射性。结果表明幼虫都成功地获得了标记,但幼虫获得标记物的量并不相同,成蚊和幼虫获得的~(35)S-蛋氨酸标记量均较~(32)P-磷酸二氢钠为高。提示成蚊和幼虫对不同营养物具有选择性。本文为研究马来丝虫幼虫的生物学特性提供了一个接近自然条件的体内标记方法。     

非放射性探针扩增测定蚊体内班氏丝虫DNA

本文用酶标记DNA探针鉴定蚊媒体内班氏丝虫幼虫。通过聚合酶链反应(PCR)扩增法克服了非放射性检测方法的低敏感性。 PCR采用耐热的DNA聚合酶,所有实验中总反应量为100μd含30pmol/L的引物和2mmol/L dNTPs。标记探针用[~(32)p]dATP或生物素11-dUTP,通过缺口转移标记DNA探针。DNA印渍(Southern Blot)和斑点印渍在硝酸纤维滤纸或尼龙膜上进行。用[~(32)P]标记DNA探针在5×SSC、5×Denhardt's、     

班氏丝虫和马来丝虫微丝蚴的周期性

作者在印度喀拉拉邦对当地60例马来丝虫和27例班氏丝虫感染者作了微丝蚴周期性的观察和分析。在24小时内,每2小时取血1次,制作涂片3张,每张涂片血量为20立方毫米,染色后作微丝蚴计数。根据不同时间微丝蚴计数的结果,马来丝虫微丝蚴的高峰在22时至2时之间,有时出现两个高峰,前1个高峰较后1个高峰为低。班氏丝虫微丝蚴只有1个高峰,2时左右开始上升,于4时达高峰,以后很快下降。两种丝虫微丝蚴都是夜间周期型。     

马来丝虫和班氏丝虫成虫形态的扫描电镜观察

对马来丝虫扫描电镜观察已有报道~[1-4],Franz等(1980)曾对班氏丝虫幼虫及微丝蚴作了扫描电镜观察~[5],但迄今未见有关班氏丝虫成虫扫描电镜观察的报道。1984年,我们对贵州地区马来丝虫及海南地区班氏丝虫成虫形态进行了扫描电镜观察。