3种中药复方对脑缺血再灌注大鼠脑能量代谢相关酶影响的比较研究

目的比较3种中药复方对脑缺血再灌注大鼠脑能量代谢相关酶动态的影响。方法采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,随机分为假手术组、模型组、益气活血方组、镇肝熄风汤组和星蒌承气汤组,分别给予相应的药物灌胃。采用密度离心及差速离心法提取脑组织线粒体用于琥珀酸脱氢酶（SDH）活性测定,采用化学比色法测定脑组织匀浆Na^＋-K^- -ATPase、肌酸激酶脑型同工酶（CK—BB）活性。结果模型组再灌注各时间点脑组织SDH、Na^＋-K^＋-ATPase活性显著降低,CK—BB活性显著升高（均P〈0．01）;48h和72h时各药物组SDH、Na^-K^＋-ATPase活性显著升高,24h时仅镇肝熄风汤组Na^＋-K^＋-ATPase活性显著升高;各药物组CK—BB活性均显著降低（P〈0．05）;24h以镇肝熄风汤组为优,48h以星蒌承气汤组为优,72h以益气活血方组为优。结论3种中药复方可以通过升高SDH、Na’一K^＋-ATPase活性,降低CK—BB的活性抗脑缺血再灌注损伤,24h镇肝熄风汤作用效果最佳,48h星蒌承气汤作用效果最佳,72h益气活血方作用效果最佳。     

柔肝通络汤预处理对MCAO大鼠脑细胞凋亡及神经元形态的影响

目的:探讨柔肝通络汤对大脑中动脉阻断(MACO)所致脑缺血/再灌注损伤大鼠脑细胞凋亡及神经元形态的影响。方法:将实验大鼠分为柔肝通络汤高、中、低剂量组和空白对照组、假手术组、模型组。采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤模型,采用TUNEL法及Nissl染色法分别观察实验动物缺血再灌注后3、6、12、24、48h脑凋亡细胞及神经元形态。结果:柔肝通络汤能够显著降低模型动物的凋亡细胞数,增加活神经元数量。柔肝通络汤组的凋亡细胞数低于模型组(P0.05),活神经元数量高于模型组(P0.05)。结论:柔肝通络汤通过抗细胞凋亡发挥脑保护作用。     

3种中药复方对脑缺血再灌注大鼠脑组织MPO与ICAM-1表达影响的比较研究

目的 比较益气活血方、镇肝熄风汤与星蒌承气汤3种中药复方对脑缺血再灌注大鼠脑组织髓过氧化物酶(MPO)活性与细胞间黏附分子-1(ICAM-1)蛋白表达的动态影响.方法 采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,随机分为假手术组、模型组、益气活血方组、镇肝熄风汤组和星萎承气汤组,采用比色法测定MPO活性、免疫组织化学染色SABC法检测I-CAM-1表达.结果 模型组再灌注各时间点脑组织MPO活性显著增高,ICAM-1蛋白表达阳性细胞数显著增加(P＜0.05或P＜0.01);24h和48h时各治疗组MPO活性显著降低,72h时益气活血方与镇肝熄风汤MPO活性显著降低(P＜0.05或P＜0.01),且24h时星萎承气汤优于其它治疗组(P＜0.01);24h和72h时各治疗组ICAM-1蛋白表达阳性细胞数显著减少(P＜0.05或P＜0.01),48h时星蒌承气汤组显著减少(P＜0.01),且24h以镇肝熄风汤组优于其它治疗组,48h星蒌承气汤组优于其它治疗组(P＜0.05或P＜0.01).结论 3种中药复方可以通过降低MPO活性,抑制ICAM-1蛋白表达,抗脑缺血再灌注损伤,24h(MPO)、48h(ICAM-1)星萎承气汤作用效果最佳,24h(ICAM-1)镇肝熄风汤组作用效果最佳.     

3种中药复方对脑缺血再灌注大鼠脑组织MPO与ICAM-1表达影响的比较研究

目的比较益气活血方、镇肝熄风汤与星蒌承气汤3种中药复方对脑缺血再灌注大鼠脑组织髓过氧化物酶（MPO）活性与细胞间黏附分子-1（ICAM-1）蛋白表达的动态影响。方法采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，随机分为假手术组、模型组、益气活血方组、镇肝熄风汤组和星蒌承气汤组，采用比色法测定MPO活性、免疫组织化学染色SABC法检测ICAM-1表达。结果模型组再灌注各时间点脑组织MPO活性显著增高，ICAM-1蛋白表达阳性细胞数显著增加（P〈0．05或P〈0．01）：24h和48h时各治疗组MPO活性显著降低，72h时益气活血方与镇肝熄风汤MPO活性显著降低（P〈0．05或P〈0．01），且24h时星萎承气汤优于其它治疗组（P〈0．01）；24h和72h时各治疗组ICAM-1蛋白表达阳性细胞数显著减少（P〈0．05或P〈0．01），48h时星萎承气汤组显著减少（P〈0．01），且24h以镇肝熄风汤组优于其它治疗组，48h星萎承气汤组优于其它治疗组（P〈0．05或P〈0．01）。结论3种中药复方可以通过降低MPO活性，抑制ICAM-1蛋白表达，抗脑缺血再灌注损伤，24h（MPO）、48h（ICAM-1）星蒌承气汤作用效果最佳，24h（ICAM-1）镇肝熄风汤组作用效果最佳。     

涤痰汤对急性脑出血大鼠神经行为学及脑水肿的影响

目的:探讨涤痰汤对急性脑出血大鼠神经行为学和脑水肿的影响。方法:利用SD大鼠复制急性脑出血模型,用涤痰汤治疗,观察脑出血急性期神经行为学评分和脑组织含水量状况,并与模型对照组比较。结果:涤痰汤组神经行为学评分在造模治疗后24 h、48 h、72 h均低于对照组(P<0.05);涤痰汤组脑组织含水量治疗后72 h均低于对照组(P<0.05)。结论:涤痰汤对SD大鼠急性脑出血后神经行为学有明显的改善作用,能够有效降低脑水肿的发生。     

镇肝熄风汤对自发性高血压大鼠血管重塑的影响

目的观察镇肝熄风汤对自发性高血压大鼠(SHR)血管组织形态学改变及血管平滑肌细胞增殖核抗原(PCNA)的表达,探讨镇肝熄风汤对血管重塑的影响。方法将24只14周龄的雄性SHR随机分为SHR组、镇肝熄风汤组、依那普利组,每组各8只,同时以同源雄性京都威斯特大鼠(WKY)8只作为对照组,镇肝熄风汤组灌服镇肝熄风汤15g/(kg.d),依那普利组灌服依那普利0.01g/(kg.d),SHR组及WKY组每日灌服等容积的0.9%氯化钠注射液,每日灌胃2次。灌胃给药8周后,采用苏木色精-伊红(HE)染色法观察胸主动脉病理改变,免疫组化法检测主动脉血管平滑肌细胞PCNA的表达。结果与WKY组相比,SHR组胸主动脉中膜增厚,PCNA表达增强,镇肝熄风汤组和依那普利组可有效抑制PCNA表达增强,改善动脉中膜厚度。结论镇肝熄风汤可能通过抑制血管平滑肌细胞增殖,改善血管重塑。     

镇肝熄风汤预处理对MCAO大鼠脑组织病理学变化和神经元凋亡的影响

目的:研究镇肝熄风汤对大脑中动脉梗死(MCAO)大鼠脑组织的病理学变化和神经元凋亡的影响.方法:MCAO术前给予高、低剂量镇肝熄风汤(15,30 g·kg-1)灌胃14 d,采用线栓法制备MCAO.术后6h称重法检测脑水肿程度,TTC染色观察脑梗死范围、HE染色观察缺血组织病理形态和海马神经元密度,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)及Western bolt检测凋亡效应蛋白半胱胺酸蛋白酶蛋白(Caspase 3)和聚ADP核糖聚合酶(PARP)表达情况.结果:与假手术组比较,模型组大鼠出现行为障碍,梗死面积及缺血侧脑组织含水量显著增加,海马CA1区神经元密度明显降低.与模型组比较,镇肝熄风汤高、低剂量均能有效改善大鼠行为学积分,可明显改善MCAO大鼠缺血侧脑组织含水量,减少梗死面积,改善局灶性脑缺血引起的海马CA1区神经元密度降低.镇肝熄风汤预处理后,明显减少MCAO大鼠缺血侧脑组织神经元细胞凋亡率,明显降低缺血侧脑组织活化Caspase-3和PARP蛋白表达量.结论:镇肝熄风汤可能通过影响神经细胞凋亡,发挥保护缺血大鼠脑组织的作用.     

镇肝熄风汤对帕金森病肝阳上亢证大鼠脑组织氧化应激的影响

目的探讨镇肝熄风汤抑制帕金森病肝阳上亢证大鼠脑组织氧化应激的可能机制。方法 105只雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、镇肝熄风汤高、中、低剂量组[32,16,8 g/(kg·d)]及司来吉兰[0.9 mg/(kg·d)]组,每组15只。以附子汤灌胃联合6-羟基多巴胺单侧损毁黑质制备帕金森病肝阳上亢模型。镇肝熄风汤组大鼠按体重剂量灌胃,每日1次,共4周。分光光度法检测大鼠中脑组织MDA含量,Western blot检测海马Nrf2和HO-1蛋白表达。结果与假手术组大鼠比较,模型组大鼠中脑组织MDA含量明显升高,HO-1蛋白表达代偿性上调。与模型组比较,镇肝熄风汤显著降低了PD肝阳上亢证大鼠中脑组织MDA含量,上调Nrf2和HO-1蛋白表达。结论镇肝熄风汤对帕金森病肝阳上亢证大鼠中脑组织氧化损伤具有保护作用,其机制可能与镇肝熄风汤活化脑组织Nrf2抗氧化防御体系有关。     

镇肝熄风汤含药血清对6-OHDA诱导PC12细胞损伤保护作用的抗氧化机制分析

目的:观察镇肝熄风汤含药血清对6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)诱导PC12细胞凋亡的影响,并探讨其是否通过抗氧化活性发挥神经保护作用。方法:将40只Wistar大鼠随机分为空白组、镇肝熄风汤低、中、高剂量组,每组10只。镇肝熄风汤按照8,16,32 g·kg~(-1)灌胃,空白组灌胃等体积生理盐水,采血制备含药和空白血清。常规培养PC12细胞,分为空白组、模型组、镇肝熄风汤低、中、高剂量组,空白组和模型组给予空白血清,其他3组给予10%含药血清,孵育1 h,再加100μmol·L~(-1)6-OHDA共孵育24 h后收集细胞。采用MTS法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡,分光光度法检测脂质过氧化物(lipid peroxidation,LPO)水平,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测醌氧化还原酶-1(NADPH quinine oxidoreductase 1,NQO-1)mRNA表达。结果:与空白组比较,模型组细胞活力明显降低,而细胞凋亡和LPO水平明显增加(P0.05)。与模型组比较,10%的镇肝熄风汤低、中、高剂量含药血清组细胞活力显著增加,而细胞凋亡和LPO水平明显减少(P0.05)。与模型组比较,10%的镇肝熄风汤低、中、高剂量含药血清组NQO-1 mRNA表达明显上调(P0.05),而空白组与模型组NQO-1mRNA表达无显著性差异。结论:镇肝熄风汤含药血清具有保护6-OHDA诱导PC12细胞损伤的作用,其机制可能与上调PC12细胞NQO-1 mRNA表达进了提高了细胞抗氧化能力有关。     

镇肝熄风汤对急性脑出血大鼠模型抗脑水肿作用研究

目的:研究镇肝熄风汤对急性脑出血大鼠的抗脑水肿作用。方法:注射胶原酶于大鼠大脑苍白球,建立急性脑出血模型,观察镇肝熄风汤对脑出血大鼠神经缺损症状、脑指数、脑组织含水量、脑组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性、血浆及脑组织内皮素(NT)含量的影响。结果:镇肝熄风汤和脑血康均可显著降低脑出血大鼠的神经缺损症状积分、脑含水量和脑指数,镇肝熄风汤显著降低大鼠脑组织中MDA含量,提高SOD活性,脑血康对脑组织中MDA含量无显著影响,镇肝熄风汤和脑血康均可显著降低大鼠血浆和脑组织中ET含量。结论:镇肝熄风汤可缓解急性脑出血大鼠的脑水肿症状,作用机制可能与提高机体抗氧自由基及缓解脑血管痉挛有关。     

骨碎补对重型颅脑损伤大鼠脑细胞凋亡IL-2含量及Casepace-3表达的影响

目的:探讨重型颅脑损伤大鼠脑细胞凋亡、Casepase-3表达和血清IL-2含量变化的规律及骨碎补对其干预作用。方法:72只大鼠随机分为正常对照组、模型组、给药组,参照Feeney自由落体冲击造模法复制动物模型,正常对照组只给予切开头皮。于伤后4 h给药组灌食骨碎补水提取物,其余两组灌食等量生理盐水。每日1次,连续7 d。灌胃后24 h、72 h、168 h分别通过TUNEL法、免疫组化法及ELISA法检测脑细胞凋亡、Casepase-3表达和血清IL-2含量。结果:重型颅脑损伤大鼠受伤后脑细胞随即出现显著凋亡并一直持续至168 h,凋亡程度于伤后24 h达到高峰,此后逐步下降。血清IL-2含量于伤后24 h明显降低,此后逐步回升。Casepase-3表达于伤后24 h明显升高,并一直持续至168 h,三个时段没有明显变化。服用骨碎补后重型颅脑损伤大鼠在伤后24 h血清IL-2含量下降明显改善,细胞凋亡明显减轻,而Casepase-3表达未受影响。结论:骨碎补具有抑制重型颅脑损伤大鼠受伤早期细胞凋亡的作用,此作用可能与其能对抗血清IL-2含量下降有关。     

三种中药复方对脑缺血再灌注大鼠脑组织ICAM-1和 NF-κB表达的动态影响

目的比较三种中药复方(益气活血汤、镇肝息风汤、星蒌承气汤)对脑缺血再灌注大鼠脑组织I-CAM-1和NF-κB蛋白表达的动态影响,探讨其抗脑缺血再灌注炎性损伤的机制。方法采用线栓法大脑中动脉制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,脑缺血2h,分别再灌注24、48和72h。大鼠随机分为假手术组、模型组、益气活血汤组、镇肝息风汤组和星蒌承气汤组。采用免疫组化SABC染色法分别检测缺血半暗带ICAM-1和NF-κB蛋白表达。结果脑缺血2h再灌注各时间点与假手术组比较,ICAM-1和NF-κB蛋白表达阳性细胞数显著增加;再灌注24h各治疗组与模型组比较,ICAM-1蛋白表达阳性细胞数显著减少;再灌注48h各治疗组NF-κB蛋白表达阳性细胞数显著降低,ICAM-1仅星蒌承气汤组显著降低;再灌注72hICAM-1和NF-κB蛋白表达阳性细胞数均显著减少;组间比较24h镇肝息风汤组优于其他组,48h星蒌承气汤组优于其他组,48h益气活血汤组优于其他组。结论上述三种中药复方可以通过降低ICAM-1和NF-κB蛋白表达抗脑缺血再灌注炎性损伤。     

安脑平冲汤对脑出血大鼠胃泌素、生长抑素表达的影响

目的:通过观察安脑平冲汤对大鼠脑出血后血清中胃泌素(gastrin)和生长抑素(Somatostatin)表达的影响,探讨安脑平冲汤对脑出血后引发急性胃粘膜病变的防治作用。方法:将120只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、安脑平冲汤组、雷尼替丁组。模型组、安脑平冲汤组、雷尼替丁组组内又分为24h、48h、3天、5天、7天共5个时间点,在脑立体定位仪下采用Ⅳ型胶原酶制备大鼠脑出血模型,观察大鼠脑出血后胃粘膜的病理变化,Elisa法检测血清中GAS、SS的表达。结果:与模型组比较,安脑平冲汤组和雷尼替丁组胃粘膜损伤程度降低(P<0.05);安脑平冲汤组、雷尼替丁组胃泌素水平较模型组均有明显下降(P<0.05);安脑平冲汤组生长抑素水平较模型组和雷尼替丁组均有明显升高(P<0.05)。结论:安脑平冲汤可能通过抑制胃泌素的表达,促进生长抑素的表达而发挥减轻脑出血后急性胃粘膜损伤的作用。     

镇肝熄风汤对自发性高血压大鼠Bcl-2mRNA和蛋白表达的影响

目的:研究不同剂量的镇肝熄风汤对自发性高血压大鼠(SHR)血脂的影响,以及对心血管细胞中Bcl-2蛋白和Bcl-2 mRNA表达的影响。方法:24周龄自发性高血压大鼠(SHR),雄性,50只,模型组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、复方罗布麻组,每组10只,同源雄性WKY大鼠10只作为对照组,灌胃给药5周后,测量大鼠血脂含量,Western Blot测定心血管Bcl-2蛋白,用Real-Time RT-PCR(Real-Time Quantitative RT-PCR)方法测定大鼠Bcl-2 mRNA基因表达。结果:各组与模型组比较,血脂有显著降低(P<0.01);模型组与镇肝熄风汤中药中剂量比较,Bcl-2蛋白表达和Bcl-2 mRNA表达明显降低(P<0.01);结论:镇肝熄风汤有明显降血脂作用,镇肝熄风汤中剂量组、高剂量组中的Bcl-2蛋白表达和Bcl-2 mRNA表达明显升高,抑制细胞凋亡。     

镇肝熄风汤对绝经综合征动物模型一氧化氮的影响

目的:观察镇肝熄风汤对动物模型的性激素水平(FSH、LH、E2)、血清一氧化氮(Nitric oxide,NO)的影响。方法:建立动物模型,设置对照组、模型组、雌激素组、镇肝熄风汤组,治疗4周后,对各组的FSH、LH、E2、NO等指标进行检测。结果:①去势后模型组较对照组血清E2含量下降(P<0.05),用药4周后镇肝熄风汤组较模型组血清E2含量上升(P<0.05);②大鼠血清FSH、LH含量过低,FSH<0.05 IU/L,LH<0.07 IU/L,无法比较。③模型组与对照组相比,NO下降,用药4周后镇肝熄风汤与雌激素组均能升高NO水平(P<0.05)。结论:镇肝熄风汤可提高去势大鼠E2水平,具有调节生殖内分泌的功能。同时可以提高血清NO浓度,对本方治疗绝经综合征的基础上,抗动脉粥样硬化、预防心血管病变的发生具有一定的意义。     

镇肝熄风汤对自发性高血压大鼠主动脉弓血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的:研究不同剂量镇肝熄风汤对自发性高血压大鼠(SHR)主动脉弓血管平滑肌细胞凋亡的影响。方法:20周龄自发性高血压大鼠(SHR),雄性,12只,模型组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、复方罗布麻组,每组12只,同源雄性京都威斯特大(WKY)12只作为对照组。灌胃给药45 d后,采用TUNEL标本制备,检测法测定大鼠主动脉弓血管平滑肌细胞凋亡。结果:模型组中出现大量血管平滑肌细胞凋亡,中药中剂量组、中药高剂量组、复方罗布麻组血管平滑肌细胞凋亡明显减少(P0.01)。结论:镇肝熄风汤可以有效减少高血压对血管平滑肌细胞凋亡的影响,有效的抑制血管平滑肌细胞凋亡,起到良好的降低血压和保护血管平滑肌细胞的作用,减轻主动脉弓血管重构。     

抵当汤对实验性脑出血大鼠脑细胞凋亡的影响

目的:对抵当汤治疗脑出血的机制加以探讨。方法:采用改良Nath法,用TUNEL法测大鼠脑细胞凋亡。结果:抵当汤组脑细胞凋亡数显著低于模型组(P<0.01)。结论:抵当汤对脑出血后脑细胞的保护作用,可能与抑制脑细胞凋亡有关。     

涤痰汤对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的神经保护作用

目的 :探讨涤痰汤对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的神经保护作用及对TNF α表达的影响。方法 :将实验大鼠随机分成假手术组、模型组、涤痰汤组 ,采用改良线栓法制成局灶性脑缺血再灌注损伤模型。假手术组、模型组予生理盐水灌胃 ,涤痰汤组予涤痰汤灌胃。术后 72h ,对各组大鼠行神经功能缺损程度评分、脑组织含水量检测、病理学检查和免疫组化检测。结果 :与模型组比较 ,涤痰汤组神经功能缺损程度显著改善 (P <0 0 5 )。病理学检查表明 ,涤痰汤组缺血区范围明显缩小 ,受损程度明显减轻。结论 :涤痰汤可改善脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能缺损程度 ,减少脑组织含水量 ,减轻脑组织受损程度 ,可能通过降低脑组织TNF α表达发挥神经保护作用。     

丹葛解酲汤对酒精性肝损害大鼠肝细胞中Bcl-2和NF-kB表达的影响

目的 通过观察肝组织病理形态学改变,来探讨丹葛解酲汤对酒精性肝损害大鼠肝细胞中Bcl-2和NF-κB表达的影响.方法 将90只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、丹葛解酲汤组,采用白酒灌胃的方法建立大鼠酒精性肝损伤模型,12周后,采用TUNEL法检测肝细胞凋亡指数并观察肝脏的病理学形态;用免疫组化法测定Bcl-2和NF-κB在肝细胞中的表达.结果 丹葛解酲汤组就细胞凋亡指数低于模型组,差别有统计学意义(P＜0.01);肝组织病理结果提示丹葛解酲汤对酒精性肝损伤大鼠具有保护作用.模型组Bcl-2和NF-kB表达强度均明显高于正常对照组(P＜0.01),丹葛解酲汤组Bcl-2表达强度高于模型组(P＜0.05),丹葛解酲汤组NF-κB表达强度低于模型组(P＜0.01).结论 丹葛解酲汤对酒精性肝损伤大鼠肝细胞具有保护作用;通过影响大鼠肝组织中Bcl-2和NF-κB表达,推测丹葛解酲汤有减少肝细胞凋亡而起到保护肝细胞作用的可能机制.     

镇肝熄风汤对自发性高血压大鼠视网膜细胞保护作用机制的研究

目的:探索镇肝熄风汤对自发性高血压大鼠视网膜细胞的保护作用机制。方法:将48只SHR随机分为4组:模型组(B)、贝那普利对照组(C)、镇肝熄风汤低剂量观察组(D)、镇肝熄风汤高剂量观察组(E);每组各12只。正常空白组WKY(A)12只。镇肝熄风汤低剂量组灌服镇肝熄风汤15g·kg~(-1)·d~(-1)(药物浓度1.5g/m L);镇肝熄风汤高剂量组灌服镇肝熄风汤30g·kg~(-1)·d~(-1)(药物浓度3.0g/m L);贝那普利组灌服贝那普利0.90mg·kg~(-1)·d~(-1)。模型组(B)及WKY组每日灌服同体积的蒸馏水。共8周。检测干预前后大鼠血压,免疫组织化学法检测Bcl-2、Bax的表达。结果:干预前与空白组(WKY大鼠)比较,其他各组(SHR大鼠)收缩压、舒张压和平均血压明显高于同周龄的WKY大鼠(P0.05);各组大鼠干预8周后再次进行血压测定,与模型组比较,各治疗组收缩压、舒张压和平均血压显著降低(P0.05);镇肝熄风汤减轻了SHR的Bax表达(P0.01),增加了Bcl-2的表达,其中中药高剂量组达到WKY水平(P0.05)。结论:镇肝熄风汤不仅有明显的降压作用,而且在高血压病程中可抑制视网膜毛细血管的细胞凋亡。