顺铂与热疗联合对胃癌细胞系体外增殖抑制作用的研究

目的研究顺铂与热疗联合对2株胃癌细胞系SGC-7 901和BGC-823细胞体外增殖的影响。方法使用MTT法测定细胞增殖,确定顺铂的工作浓度,并以该浓度进行化疗或与热疗联合,计算24 h和48 h时的细胞生存率,根据Veleriote法判断热化疗联合24 h或48 h的作用效果;24 h时流式细胞仪检测BGC-823细胞的凋亡情况。结果以24 h时IC40~IC50的药物浓度作为试验的工作浓度,确定CDDP对SGC-7 901和BGC-823细胞的工作浓度分别为5μg/mL和1μg/mL。单纯的43℃热疗60 min在24 h时对2个细胞系均有抑制作用(P<0.05),在48 h时没有显著抑制作用。CDDP 5μg/mL化疗或与热疗联合在24 h和48 h时对SGC-7 901细胞均有显著的抑制作用(P<0.01),CDDP 5μg/mL与热疗联合作用24 h时呈明显的协同作用,在48 h时呈次加作用。CDDP 1μg/mL化疗或与热疗联合在24 h和48 h时均对BGC-823细胞都有显著的抑制作用(P<0.01),CDDP 1μg/mL与热疗联合作用24 h和48 h均呈明显的协同作用;24 h时流式细胞仪检测BGC-823细胞的凋亡情况发现,CDDP化疗组和热化疗组细胞凋亡率均较对照组显著升高(P<0.01)。结论CDDP 5μg/mL与43℃热疗60 min联合在24 h时对SGC-7901细胞的增殖抑制具有明显的协同作用,在48 h时呈次加作用;CDDP 1μg/mL与43℃热疗60 min联合对BGC-823细胞的增殖抑制在24 h和48 h时均呈明显的协同作用,这可能与细胞凋亡的增多有关。     

顺铂与热疗联合对胃癌细胞系体外增殖抑制作用的研究

目的 研究顺铂与热疗联合对2株胃癌细胞系SGC-7901和BGC-823细胞体外增殖的影响。方法 使用MTT法测定细胞增殖，确定顺铂的工作浓度。并以该浓度进行化疗或与热疗联合，计算24h和48h时的细胞生存率，根据Veleriote法判断热化疗联合24h或48h的作用效果；24h时流式细胞仪检测BGC-823细胞的调亡情况。结果以24h时ICA0-IC50的药物浓度作为试验的工作浓度，确定CDDP对SGC-7901和BCK3-823细胞的工作浓度分别为5μg／mL和1μg／mL。单纯的43℃热疗60min在24h时对2个细胞系均有抑制作用（P〈0．05），在48h时没有显著抑制作用。CDDP5μg／mL化疗或与热疗联合在24h和48h时对SGC-7901细胞均有显著的抑制作用（P〈0．01），C73DP5μg／mL与热疗联合作用24h时呈叫显的协同作用，在48h时呈次加作用。CDDP1μg／mL化疗或与热疗联合在24h和48h时均对BGC-823细胞都有显著的抑制作用（P〈0．01），CDDPμg／mL与热疗联合作用24h和48h均呈明显的协同作用；24h时流式细胞仪检测BGC＋823细胞的凋亡情况发现，CDDP化疗组和热化疗组细胞凋亡率均较对照组显著升高（P〈0．01）。结论 CDDP5μg／InL与43℃热疗60min联合在24h时对SCiC-7901细胞的增殖抑制具有明显的协同作用，在48h时里次加作用；CDDPμg／mL与43℃热疗60min联合BGC-823细胞的增殖抑制在24h和48h时均呈明显的协同作用，这可能与细胞凋亡的增多有关。     

重组人血管内皮抑素联合顺铂体外干预人胃癌细胞生长的研究

目的研究重组人血管内皮抑制素（恩度）联合顺铂对人胃癌细胞株BGC823和SGC7901增殖及凋亡的影响,并探讨其抑制增殖及诱导凋亡的机制。方法采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测不同浓度顺铂单药（单药组）及其与恩度联合应用（联合组）对BGC823和SGC7901细胞的增殖抑制率;采用流式细胞术分析凋亡细胞比例;采用Westernblot法分析增殖相关蛋白Ki-67及凋亡相关蛋白Bcl-2表达的变化。结果联合组对BGC823和SGC7901细胞的抑制率明显高于单药组;流式细胞术结果表明,正常对照组、单药组和联合组细胞的早期凋亡率依次增加;与单药组比较,联合组Ki-67、Bcl-2基因（蛋白）表达率显著降低。结论与顺铂单独应用相比,恩度联合顺铂对BGC823和SGC7901细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡能力均明显增强。     

细胞粘附肽(RGDS)抑制人胃癌细胞BGC823生长及诱导其凋亡

目的 研究细胞粘附肽(RGDS)对人胃癌细胞系BGC823(Human stomach cancer BGC823)生长增殖的影响,进而探讨RGDS诱导BGC823细胞凋亡的作用.方法 用不同浓度的RGDS处理BGC823细胞48 h后,MTT法检测RGDS对BGC823细胞生长增殖的抑制作用,通过HE染色、透射电子显微镜、免疫组织化学、流式细胞术和凋亡细胞的DNA片断等方法观察凋亡细胞的形态结构变化以及定性、定量检测细胞凋亡.结果 RGDS能抑制BGC823细胞的生长增殖,并呈浓度依赖性;RGDS诱导BGC823细胞凋亡的作用机制可能通过抑制凋亡抑制蛋白Survivin的表达引发这一途径.结论 RGDS能够通过诱导BGC823细胞凋亡,从而抑制肿瘤细胞的增殖.     

姜黄素对人胃癌SGC7901细胞的抑制作用及其作用机制探讨

目的 研究姜黄素对人胃癌SGC7901细胞的抑制作用及其可能作用机制.方法 采用MTT比色法检测24 h和48 h时不同浓度水平(0μmol/ml、10μmol/ml、20μmol/ml、40μmol/ml、80μmol/ml)姜黄素对人胃癌SGC7901细胞生长的抑制作用;20μmol/ml姜黄素处理人胃癌SGC79...     

伊立替康联合热疗抑制人大肠癌细胞LOVO体外增殖作用的研究

目的：探讨伊立替康联合热疗体外抑制人大肠癌细胞增殖的效果，以确定联合方案是否具有协同效应。方法：使用四甲基偶氮唑蓝（Mar）法测定单独或联合应用伊立替康与热疗对人大肠癌LOVO细胞体外增殖的抑制作用，使用流式细胞仪检测不同方案对LOVO细胞凋亡率的影响。根据Veleriote法判断热化疗联合的作用效果；透射电镜观察细胞形态。结果：与伊立替康化疗或单纯热疗作用相比．伊立替康与43℃热疗联合后对LOVO细胞增殖有显著的抑制作用（P〈0．01），24h时流式细胞仪检测LOVO细胞的凋亡情况发现，热疗组、化疗组和热化疗组细胞凋亡率均较对照组显著升高（P〈0．01）。结论：伊立替康与热疗联合对LOVO细胞的增殖抑制具有明显的协同作用，这可能与细胞凋亡的增多有关。     

热疗联合化疗对Raji细胞的体外抑制及Bcl-2表达的作用

目的：观察热疗联合阿霉素对人B细胞淋巴瘤细胞系Raji的体外增殖的抑制作用、凋亡及Bcl-2表达的影响。方法：MTT法确定阿霉素的工作浓度，以该浓度进行化疗或与热疗的联合，选择温度40℃、41℃及42℃，体外作用于Raji细胞。作用前及48h采用台盼蓝拒染法检测肿瘤细胞的存活率；MTr法检测肿瘤细胞增殖的抑制作用；流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡及Bcl-2表达。观察热疗联合阿霉素的抗肿瘤效果。结果：作用48h IC50的药物浓度作为实验的工作浓度。单纯40℃、41℃及42℃热疗60min对Raji细胞系有抑制作用（P〈0．01），热化疗组对Raji细胞有明显的抑制作用（P〈0．01），均随着温度的增高而增强。流式细胞仪检测细胞凋亡及Bcl-2的表达，热疗组、化疗组及热化疗组的细胞凋亡率均较对照组显著升高，各组之间差异均有非常显著性意义（P〈0．01）；Bcl-2蛋白的表达则下降，各组之间差异也有非常显著性意义（P〈0．01）。结论：热疗联合阿霉素能增强对Raji细胞的体外抑制作用：提高肿瘤细胞的凋亡率，下调Bcl-2蛋白的表达。     

应用Cell-IQ筛选榄香烯诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡的初步研究

目的应用全自动活细胞观测分析系统(Cell-IQ)及流式细胞仪观察榄香烯诱导人胃癌细胞BGC-823凋亡的影响。方法应用不同浓度的榄香烯作用于人胃癌BGC-823细胞,使用Cell-IQ筛选抑制增殖的最佳浓度,并根据最佳作用浓度,应用流式细胞仪观察分析榄香烯对人胃癌BGC-823细胞凋亡的影响。结果榄香烯对人胃癌BGC-823细胞的抑制作用随其浓度增加而逐渐增强,以150μg/mL为最佳,之后榄香烯浓度再增高,其抑制肿瘤细胞增殖作用不再增强;150μg/mL的榄香烯作用于胃癌BGC-823细胞24 h后,主要表现为诱导早期凋亡为主,细胞凋亡率为(36.9±3.23)%,较对照组有明显差异(P<0.01)。结论 Cell-IQ能够进行细胞毒性、活性和增殖的检测和筛选;榄香烯对于人胃癌BGC-823细胞有明确抑制作用,最佳浓度为150μg/mL;榄香烯抑制人胃癌BGC-823细胞增殖作用的主要机制可能为诱导细胞凋亡,而非细胞毒作用。     

顺铂联合热疗抑制人肝癌细胞SMMC-7721体外增殖作用的研究

目的 在国内外现有的研究基础上，探讨顺铂联合热疗体外抑制人肝癌细胞增殖的效果，以确定联合方案是否具有协同效应。方法 使用MTT法测定单独或联合应用化疗药物顺铂与热疗对人肝癌SMMC-7721细胞的体外增殖的抑制作用，使用流式细胞仪检测不同方案对SMMC-7721细胞凋亡牢的影响。结果 联合应用热疗可以显著提高化疗药物顺铂引起的细胞增殖抑制及细胞凋亡。以亚毒性剂量浓度的顺铂为例，对照组、化疗组、热疗组、热化疗组的细胞增殖抑制率分别为0％、20．77％、32＋46％、62．76％；细胞倍增时问分别为40．54、50．30、106.85、166.07h；细胞凋亡率分别为2．19％、5．56％、10．16％、24．32％。结论 联合应用热疗与顺铂，对SMMC7721细胞体外增殖的抑制及诱导细胞凋亡具有撮著的协同作用。     

羟基喜树碱联合热疗抑制人肝癌细胞SMMC-7721体外增殖作用的研究

目的探讨羟基喜树碱联合热疗体外抑制人肝癌细胞增殖的效果,以确定联合方案是否具有协同效应。方法使用MTT法测定单独或联合应用羟基喜树碱与热疗对人肝癌SMMC7721细胞的体外增殖的抑制作用,使用流式细胞仪检测不同方案对SMMC7721细胞凋亡率的影响。结果联合应用热疗可以显著提高羟基喜树碱引起的细胞增殖抑制及细胞凋亡。以亚毒性剂量浓度的羟基喜树碱为例,对照组、化疗组、热疗组、热化疗组的细胞增殖抑制率分别为0%、13.65%、32.46%、71.89%;细胞倍增时间分别为40.54、86.35、106.85、187.90h;细胞凋亡率分别为2.19%、3.96%、10.16%、20.42%。结论联合应用热疗与羟基喜树碱,对SMMC-7721细胞体外增殖的抑制及诱导细胞凋亡具有显著的协同作用。     

薯蓣皂苷元对人胃癌SGC-7901细胞体外作用的研究

目的探讨薯蓣皂苷元对人胃癌SGC-7901细胞株的增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响。方法采用MTT比色法检测不同浓度薯蓣皂苷元对SGC-7901细胞的增殖抑制作用;采用流式细胞术检测薯蓣皂苷元对SGC-7901细胞凋亡的影响。结果 MTT结果显示,薯蓣皂苷元体外可抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖,并呈时间-剂量依赖性,作用244、8、72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为62.90、31.83和18.21μg.mL-1;流式细胞检测表明,8、163、2、64μg.mL-1的薯蓣皂苷元分别作用SGC-7901细胞122、43、6 h,对细胞周期没有明显影响,但能明显诱导SGC-7901细胞发生凋亡,同样具有显著的时间-剂量依赖性。结论薯蓣皂苷元具有抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖、诱导其凋亡的作用,但对SGC-7901细胞周期没有明显影响。     

四种人胃癌细胞体外增殖和侵袭能力比较

目的比较四种不同组织来源、不同分化程度的胃癌细胞MGC-803、HGC-27、BGC-823、SGC-7901的体外增殖和侵袭能力。方法分别培养四种细胞,用直接计数法绘制细胞生长曲线,计算其群体倍增时间;以细胞克隆形成率比较其增殖能力;体外划痕法和Transwells法比较四种细胞迁移、侵袭能力。结果与MGC-803和HGC-27相比,BGC-823和SGC-7901的生长速度依次减慢,群体倍增时间依次增加(P<0.05);平板克隆形成率从MGC-803、HGC-27、BGC-823到SGC-7901分别是42.7±2.2、38.6±1.6、28.9±1.7、21.3±1.9,差异有统计学意义(P<0.05)。体外划痕法和Transwells小室侵袭实验均表明MGC-803和HGC-27细胞的迁移侵袭能力较BGC-823和SGC-7901高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论四株胃癌细胞株,从MGC-803、HGC-27、BGC-823到SGC-7901其增殖和侵袭能力逐渐下降。     

替吉奥对人肺癌细胞A549及胃癌细胞SGC-7901的体外抑制作用

目的研究替吉奥对人肺癌细胞A549及胃癌细胞SGC-7901的体外抑制作用。方法采用四甲基偶氮唑盐（MTT）测定不同浓度的替吉奥对A549细胞及SGC-7901细胞的抑制作用,并选择5-氟尿嘧啶（5-Fu）作对比,计算半数抑制浓度（IC50）。运用流式细胞仪观察替吉奥对A549及SGC-7901细胞周期和凋亡的影响。结果替吉奥对2种细胞的抑制作用随浓度的增加而增加,呈明显浓度依赖性。替吉奥对3．549细胞及SGC-7901细胞的IC50分别为78．33μg／mL和63．40μg／mL,明显低于5-Fu的241．60μg／mL和201．68μg／mL。替吉奥能明显使2种细胞的细胞周期被阻滞于G0／G1及S期,且对A549细胞及SGC-7901细胞的凋亡率分别为（36．64±3．92）％和（38．69±3．02）％,明显高于空白组。结论替吉奥对人肺癌细胞A549及胃癌细胞SGC-7901的体外抑制作用明显,显著优于5-Fu。     

猫眼草提取物对胃癌细胞增殖的影响及其机制探讨

目的研究猫眼草提取物对不同胃癌细胞株AGS、SGC-7901、BCG-823增殖的影响并探讨其可能的机制。方法不同胃癌细胞株AGS、SGC-7901、BCG-823分别给予猫眼草提取物10．0、5．0、1.0、0．1mg／L培养48h,采用MTT法和台盼蓝染色法检测猫跟草提取物对不同胃癌细胞株增殖的影响。结果MTT法测定结果显示,猫眼草提取物各浓度组对AGS、SGC-7901、BCG-823细胞增殖均有明显抑制作用且具有良好的量效关系（P〈0．05）;台盼蓝法计数结果显示,给予猫眼草提取物后,活细胞数随培养时间的延长而减少,对胃癌细胞株AGS、SGC-7901、BGC-823增殖的抑制具有良好的时效关系（P〈0．05）。结论猫眼草提取物对胃癌细胞株AGS、SGC-7901、BCG-823增殖均具有明显的抑制作用,其抑制作用强度随给药浓度的增加和作用时间的延长而递增。     

三氧化二砷对低氧下人胃癌细胞SGC-7901生长活性及凋亡的影响

目的探讨三氧化二砷（As2O3）在低氧条件下对体外培养的人胃癌细胞SGC-7901生长的抑制及凋亡影响。方法用氯化钴（CoC l2）制作低氧模型,设常氧组、低氧组、低氧加药物组,分别取0.5、1.0、2.0、5.0、10.0μmol/L五个不同浓度的As2O3作用于胃癌细胞,用细胞活力测定（MTT）法检测药物作用后的细胞活力,HOECHST33258染色试剂盒测细胞凋亡。结果①低氧加药物组As2O3对SGC-7901细胞生长有抑制作用,与常氧对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）,并呈剂量-时间-效应关系。②低氧加药物组中,随着As2O3浓度的升高,胃癌细胞凋亡率也逐渐升高（P〈0.05）。结论低氧下As2O3对人胃癌细胞SGC-7901生长有抑制和诱导凋亡作用,这种作用可能是As2O3发挥抗肿瘤的生物学基础。     

Quinacrine Inhibits Cell Growth and Induces Apoptosis in Human Gastric Cancer Cell Line SGC-7901

BackgroundQuinacrine (QC), an antimalarial drug, has been shown to possess anticancer effect both in vitro (cancer cell lines) and in vivo (mouse models). In the cancer cells, QC can simultaneously suppress nuclear factor-κB and activate p53 signaling, which results in the induction of the apoptosis in these cells. However, the experimental results come from a few limited cancer cell lines, and the detailed mechanisms remain unknown.ObjectiveThis study investigated the tumor-killing effects of QC on gastric cancer cells as well as underlying molecular pathways.MethodsSGC-7901 cells were treated with or without QC at different concentrations for 24 hours. The effect of QC on the inhibition of SGC-7901 cell proliferation was assessed by Cell Counting Kit-8 assay. Apoptosis was detected by examining nuclear morphology and quantifying phosphatidylserine externalization. Alterations in cellular morphology were analyzed by laser scanning confocal microscopy for fluorescent analysis. Cell cycle analysis was performed by propidium iodide (PI) staining and flow cytometry. The enzyme activity changes of caspase-3 were detected by colorimetry expression method. Western blot analysis was used to detect the changes in the protein level of Bax, Bc1-2, p53, and cytochrome c in cytosol of SGC-7901 cells.ResultsOur results showed that QC could significantly inhibit the growth of SGC-7901 cells in a dose-dependent manner, with the IC₅₀ mean (SD) value of 16.18 (0.64) μM, compared with nontreated controls. QC treatment (15 μM) could also induce apoptosis in SGC-7901 cells (26.30% [5.31%], compared with control group of 3.37% [0.81%]; P < 0.01), and the increasing phosphatidylserine level and the accumulation of chromatin nucleation in QC-treated cells provided further evidence. In addition, cell cycle analysis with PI staining showed that a significant S enriches, increasing from 12.00% (1.24%) (control) to 20.94% (2.40%) (QC treatment) (P < 0.01). Furthermore, increased activities of caspase-3 (increasing from 0.108 [0.019] to 0.628 [0.068]; P < 0.01) were observed in SGC-7901 cells treated with 15 μM QC. Western blot analysis showed that QC treatment significantly increased the levels of proapoptotic proteins, including cytochrome c, Bax, and p53, and decreased the levels of antiapoptotic protein Bcl-2, thus shifting the ratio of Bax/Bcl-2 in favor of apoptosis.ConclusionsOur findings suggest that QC can significantly inhibit cell growth and induce apoptosis in SGC-7901 cells, which involves p53 upregulation and caspase-3 activation pathway.     

尼美舒利不依赖环氧合酶-2途径抑制胃癌生长的机制研究

目的探讨选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂尼美舒利不依赖COX-2途径抑制胃癌细胞移植瘤的可能机制。方法应用W estern-b lotting方法从人胃癌细胞株MKN45、AGS、MKN28、SGC-7901以及BGC-823中筛选出COX-2极低表达的细胞株MKN28,将其收集后皮下注射在BALB/C裸鼠的右侧前肢腋下。24只裸鼠分为模型组和干预组,干预组给予300 mg/L的尼美舒利灌胃,每日1次。每10天测定瘤体的大小,第40天终止实验,处置动物,留取移植瘤组织,免疫组化检测核因子-κB(NF-κB)和p21WAF1的表达;提取瘤组织总RNA进行RT-PCR,测定模型组和干预组过氧化物酶体增殖蛋白激活受体-γ(PPAR-γ)mRNA的表达水平。结果干预组移植瘤体积显著小于模型组(P<0.05),提示选择性COX-2抑制剂对MKN28胃癌细胞株裸鼠移植瘤模型具有良好的抑瘤作用。干预组NF-κB的表达显著低于模型组(P<0.05),p21WAF1的表达则显著高于模型组(P<0,05);RT-PCR发现干预组PPAR-γmRNA的表达较模型组增强。结论选择性COX-2抑制剂尼美舒利对COX-2表达水平极低的胃癌细胞株裸鼠移植瘤模型具有抑瘤作用。其机制可能是通过影响细胞凋亡相关蛋白p21WAF1的表达以及NF-κB和PPAR-γ转录因子等不依赖COX-2途径的作用得以实现。     

倍半萜类化合物Chabranol对胃癌细胞BGC-823细胞活性的影响

目的 探讨倍半萜化合物Chabranol影响人低分化胃癌细胞BGC-823的增殖、细胞周期、凋亡和自噬的可能机制,为Chabranol用于临床抗肿瘤治疗提供实验依据.方法 采用四甲基偶氮唑盐（MTT）方法检测Chabranol对BGC-823的增殖抑制作用;流式细胞仪检测BGC-823的细胞周期;透射电子显微镜（TEM）观察其亚细胞结构;凋亡细胞电泳检测细胞凋亡.结果 Chabranol对BGC-823增殖有明显抑制作用,并且表现为时间和剂量依赖性;Chabranol干预后,BGC-823细胞发生G1-S期阻滞、凋亡和自噬.结论 倍半萜化合物Chabranol对BGC-823具有潜在的抗肿瘤活性,有可能成为治疗低分化胃癌的新药物.