非衍生化串联质谱法检测新生儿31种酰基肉碱参考区间的确立

目的 确立宣城市新生儿滤纸干血片中31种酰基肉碱的参考区间,为临床诊断脂肪酸和有机酸类遗传代谢病提供诊断依据.方法 选取2020年1-6月宣城地区6 093例新生儿滤纸干血片样本,采用非衍生化串联质谱法进行31种酰基肉碱水平测定,通过SPSS 22.0软件进行统计分析,采用单样本Kolmogorov-Smirnov检验判断数据正态性,应用百分位数法制定参考区间,选用第99.5百分位值与第0.5百分位值作为切值的上下限.结果 宣城地区31种酰基肉碱为非正态分布,参考区间P0.5～P99.5分别为(μmol/L):游离肉碱(9.11～48.60),乙酰基肉碱(4.01～37.12),丙酰基肉碱(0.54～4.30),丙二酰基肉碱(0.03～0.27),丁酰基肉碱(0.10～0.46),甲基丙二酰基肉碱(0.09～0.38),异戊酰基肉碱(0.05～0.36),甲基巴豆酰基肉碱(0.00～0.01),戊二酸基肉碱(0.05～0.19),已酰基肉碱(0.01～0.09),己二酰基肉碱(0.03～0.30),辛酰基肉碱(0.02～0.14),辛烯酰基肉碱(0.05～0.28),癸酰基肉碱(0.02～0.21),癸烯酰基肉碱(0.02～0.14),癸烯二酰基肉碱(0.00～0.03),十二烷酰基肉碱(0.02～0.23),十二烯酰基肉碱(0.01～0.17),十四烷酰基肉碱(0.06～0.34),十四烯酰基肉碱(0.03～0.21),十四二烯酰基肉碱(0.01～0.04),3-轻基十四烷酰基肉碱(0.00～0.03),十六烷酰基肉碱(0.71～6.14),十六烯酰基肉碱(0.03～0.36),3-轻基十六烯酰基肉碱(0.01～0.10),3-羟基十六烷酰基肉碱(0.01～0.04),十八烷酰基肉碱(0.28～1.62),十八烯酰基肉碱(0.49～2.45),3-羟基十八烯酰基肉碱(0.01～0.03),十八二烯酰基肉碱(0.06～0.53),3-羟基十八烷酰基肉碱(0.00～0.02).结论 通过非衍生化串联质谱法检测确立宣城市新生儿滤纸干血片中31种酰基肉碱的参考区间,可为该地区临床诊断脂肪酸和有机酸类遗传代谢病提供诊断参考依据,更有利于新生儿遗传代谢病的群体筛查.     

新生儿遗传代谢病筛查发展及诊治规范

本文阐述了中国新生儿遗传代谢病筛查的历史及发展;新生儿筛查的原则、筛查技术及筛查疾病谱的扩大;主要描写了高苯丙氨酸血症、先天性甲状腺功能减低症、先天性肾上腺皮质增生症、其他氨基酸代谢病(酪氨酸血症、枫糖尿病、瓜氨酸血症)、有机酸代谢病(甲基丙二酸血症、丙酸血症、异戊酸血症、戊二酸血症)及脂肪酸代谢病(原发性肉碱缺乏症、中链乙酰辅酶A脱氢酶缺乏症、极长链乙酰辅酶A脱氢酶缺乏症)的诊断、鉴别诊断及治疗规范。     

足月小于胎龄新生儿和足月适于胎龄新生儿血氨基酸和酰基肉碱的差异

目的 研究足月小于胎龄新生儿和足月适于胎龄新生儿血氨基酸和酰基肉碱的差异,为足月小于胎龄新生儿补充氨基酸提供参考依据。方法 选择河南省妇幼保健院2019年4月-2020年7月纳入的57例足月小于胎龄新生儿作为研究组,另选择2019年4月-2020年7月在本院出生的57例足月适于胎龄儿新生儿作为对照组,分别测定两组的血氨基酸和酰基肉碱的水平,分析其差异。结果 研究组和对照组在丁酰基肉碱、3-羟基异戊酰基肉碱、异戊烯酰基肉碱、葵酰基肉碱、亮氨酸、甲硫氨酸上相比差异无统计学意义(t=1.707、1.122、1.122、1.638、1.855、1.638,P>0.05),但研究组在丙酰基肉碱、游离肉碱、肉豆蔻二烯酰基肉碱、辛酰基肉碱、酪氨酸、缬氨酸上与对照组差异显著(t=5.524、3.392、4.530、4.716、4.530、3.547,P＜0.05)。结论 与足月适于胎龄新生儿相比,足月小于胎龄新生儿在血氨基酸和酰基肉碱上存在显著差异,受到临床重点关注,尽早为足月小于胎龄新生儿补充氨基酸,并鼓励早期通过动员中长链脂肪酸方式稳定能量代谢。     

新生儿中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症筛查和基因突变分析

目的 了解青岛地区新生儿中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症(MCADD)的患病率、临床特征及基因突变特点。方法 2015年1月-2018年8月利用串联质谱技术检测278 180例在青岛地区出生的新生儿干血滤纸片中酰基肉碱水平,对筛查出的疑似MCADD患儿通过尿有机酸检测,中链酰基辅酶A脱氢酶编码基因(ACADM)基因突变检测进行确诊。结果 共确诊4例中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症患儿,患病率0.001 4%(1/69 545)。患儿临床表现无明显异常,串联质谱检测均有中链酰基肉碱(C6~C10)升高。4例患儿共检测到7种ACADM基因突变,其中1例患儿为纯合突变,为c.1 040G>T(p.G347V)/ c.1 040G>T(p.G347V),其它3例为复合杂合突变,分别为:c.157C>T(p.R53C)/ c.709-1G>A;c.1 085G>A(p.G362E)/ c.461T>G(p.L154W);c.587G>A(p.G196E)/ c.387+1delG。尿有机酸检测1例患儿4-羟基-苯乙酸和4-羟基苯丙酮酸指标升高,肝功能异常。对患儿进行饮食指导,随访均未出现临床症状,体格及智力发育正常。结论 串联质谱新生儿筛查配合基因检测可以对MCADD早诊断,对预防疾病发作和提高患儿生活质量有重要意义。     

串联质谱技术在发育迟缓患儿早期诊断中的应用价值

目的探讨串联质谱的定量检测在发育迟缓患儿早期诊断中的应用价值。方法应用串联质谱方法对155例发育迟缓患儿进行血氨基酸和酰基肉碱的定量检测,并分析检出结果与临床症状及治疗转归情况。结果155例患儿中确诊10例氨基酸及肉碱缺乏疾病。其中4例确诊为甲基丙二酸血症,1例丙酸血症,1例中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症,1例鸟氨酸氨甲酰转移酶缺乏症,3例苯丙酮尿症。临床表现主要为运动及智力发育迟缓。经过治疗,大部分好转。结论对氨基酸及肉碱的检测,有利于运动及发育迟缓患儿的病因诊断及疗效判断。     

串联质谱分析在遗传代谢病高危儿童中的意义

目的研究末梢血串联质谱分析对于遗传代谢病高危儿童的诊断价值。方法本研究自2010年1月-2013年12月收集临床疑似遗传代谢病的病例617例,对末梢血进行氨基酸、酰基肉碱串联-质谱筛查,对筛查阳性的病例进行了尿代谢筛查或基因检测,得到了确诊。并总结分析了相关临床数据。结果 617例病例共诊断出遗传代谢病10种,共24例,总阳性率3.9%,其中氨基酸代谢病4例(16.7%),以瓜氨酸血症多见(3例,12.5%),有机酸代谢病14例(58.3%),以甲基丙二酸血症多见(8例,33.3%);脂肪酸氧化障碍6例(25%),以中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症、线粒体脑肌病多见(各2例,8.3%)。结论儿科医生应重视对遗传代谢病高危儿童进行末梢血氨基酸、酰基肉碱串联质谱分析以达到早诊断,早干预的目的。     

新生儿原发性肉碱缺乏症诊治与基因突变分析

目的 分析青岛地区新生儿原发性肉碱缺乏症患儿的SLC22A5基因突变特点,探讨原发性肉碱缺乏症的诊断和治疗。方法 2015年1月-2018年8月对278 180例新生儿利用串联质谱技术检测游离肉碱及酰基肉碱,并且利用肉碱转运蛋白基因突变检测对游离肉碱降低的患儿进行确诊。结果 共确诊5例原发性肉碱缺乏症患儿,发病率0.001 8%(1/55 636)。对确诊患儿给予左旋肉碱治疗,100~300 mg/(kg·d),分3次口服,随访治疗1个月后,血游离肉碱均升至正常。5例患儿均检测到基因突变。其中1例患儿为纯合突变,为c.1400C>G(p.S467C)/ c.1400C>G(p.S467C),其它4例为复合杂合突变,分别为:c.1400C>G(p.S467C)/c.1433C>T(p.P478L);c.1400C>G(p.S467C)/c.760C>T(p.R254X);c.1400C>G(p.S467C)/c.428C>T(p.P143L);c.1400C>G(p.S467C)/c.393+1G>A(错误剪接)。结论 c.1 400C>G(p.S467C)为青岛地区新生儿原发性肉碱缺乏症患儿SLC22A5基因主要突变(60%)类型,基因检测分析有助于原发性肉碱缺乏症的诊断。左旋肉碱治疗效果好,预后良好。     

质谱技术检测羊水代谢物对丙酸血症进行产前诊断北大核心CSCD

目的探讨串联质谱及气相色谱质谱技术检测羊水中的酰基肉碱及有机酸用于丙酸血症(propionic acidemia,PA)产前诊断的诊断价值。方法收集2010年—2016年40例于上海交通大学医学院附属新华医院进行产前诊断且生育过PA患儿的孕妇作为PA母亲组。从同期进行常规产前诊断孕妇中随机选取40例作为对照组。2组孕妇均于妊娠16~20周进行羊膜腔穿刺术抽取羊水。采用串联质谱检测羊水丙酰肉碱(propionylcarnitine,C3)、乙酰肉碱(acetylcarnitine,C2)水平,采用气相色谱质谱检测羊水甲基枸橼酸、3-羟基丙酸水平,部分羊水细胞进行基因检测。结果 PA母亲组4例孕妇羊水C3[9.53(6.06~11.45)μmol/L]、C3/C2[1.03(0.62~1.43)]、甲基枸橼酸[3.15(2.05~4.58)mmol/mol肌酐]水平均高于对照组[1.14(0.52~3.40)μmol/L,0.11(0.05~0.22),0.00(0.00~0.34)mmol/mol肌酐],提示胎儿为PA阳性患儿,检出率为10%;其中3例进行了基因突变检测均检测到突变位点。3-羟基丙酸在对照组与阳性组之间差异无统计学意义。结论 PA孕妇再生PA患儿的几率为10%左右,可利用串联质谱及气相色谱质谱技术检测羊水中的C3、甲基枸橼酸水平,对先证者为PA的孕妇进行产前诊断。     

海南省某医院337例NICU患儿串联质谱结果分析

目的探讨串联质谱法对NICU酸碱失衡住院患儿的检测价值,为NICU酸碱失衡患儿遗传代谢病的诊治提供依据。方法采用串联质谱技术,使用PE公司生产的非衍生化多种氨基酸、肉碱和琥珀酰丙酮测定试剂盒(串联质谱法)对海南省妇幼保健院新生儿科337例住院患儿展开氨基酸谱与肉碱谱分析,血串联质谱异常者送血样本至北京迈基诺基因公司做基因诊断,送尿样本至广州金域检验做尿气相质谱验证。结果337例住院患儿中血串联质谱检测到指标异常44例,其中疑似氨基酸血症12例,疑似有机酸血症18例,疑似脂肪酸血症14例,初筛IEM的患病率为13.1%(44/337)。目前已确诊1例同型半胱氨酸血症、2例苯丙酮尿症、1例高苯丙氨酸血症、1例甲基丙二酸血症、1例戊二酸血症I型、1例全羟化酶合成酶缺乏症、2例原发肉碱缺乏症。结论用串联质谱技术可以分析患儿的氨基酸谱与肉碱谱,为NICU酸碱失衡患儿遗传代谢病的诊治提供了依据。     

串联质谱技术在高危儿原发性肉碱缺乏症的价值

目的 通过运用串联质谱技术检测2 493例高危儿患者的肉碱谱代谢水平,了解本区域高危儿原发性肉碱缺乏群体的发生情况,及其基因突变表达方式以及串联质谱技术的应用价值。方法 选取2013年1月-2016年4月本院住院及门诊疑似遗传代谢疾病高危患儿共2 493例,运用串联质谱技术筛查酰基肉碱谱水平,经基因测序确诊,初步了解本地区高危儿肉碱缺乏症发病情况,并进行随访治疗。结果 在2 493例高危儿的检测结果中,肉碱代谢障碍初筛阳性为55例,占2.21%;原发性肉碱缺乏症确诊例数为10例为0.4%。致病突变位点存在五种类型。结论 本区域高危儿群体原发性肉碱缺乏症所占遗传代谢疾病比率较高,基因突变类型与其他地区存在差别。在诊疗该疾病过程中,运用串联质谱技术对该群体进行早期筛查可以为临床提供有力依据和方向。     

Nec-1对铝作用下神经细胞活力及凋亡、自吞噬基因的影响

[目的]研究坏死性抑制剂Necrostatin-1（Nec-1）对铝（Al）作用下的神经细胞活力及凋亡、自吞噬基因的影响。[方法]体外原代培养小鼠神经细胞,通过2mmol／LAl3＋作用于神经细胞制造铝损伤模型,加入不同剂量的Nec-1,用细胞活力检测（CCK-8）和逆转录．聚合酶链反应（RT．PCR）的方法观察Nec-1对染铝神经细胞的作用。[结果]细胞活力检测：以2mmol／LAl3＋染毒组作为对照,30μmol／LNec-1组的细胞活力与对照组比较,差别有统计学意义（P〈0．05）,60、90μmol／LNec-1组与对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0．01）.RT-PCR结果：2mmol／LAl3＋染毒组caspase-3基因的表达为0．98±0．120,而Nec-160μmol／L组和Nec-190μmol／L组caspase-3的表达分别为0．50±0．077和0．44±0．050,同对照组相比,两组caspase-3的表达均下降（P〈0．01）。2mmol/LAl3＋染毒组的LC3-Ⅱ基因的表达为1,82±0．047,而60μmol／LNec-1组和90μmol／LNec-1组的LC3．口表达分别为1．00±0．022和0．97±0．035,同对照组相比,两组LC3-Ⅱ的表达均呈下降（P〈0．01）。[结论]Nec-1可使铝作用下的神经细胞活力上升,并使神经细胞的自吞噬和凋亡基因表达下降。     

反复呼吸道感染患儿血微量元素的Meta分析

目的评价反复呼吸道感染患儿血微量元素的含量。方法通过中国生物医学光盘数据库、中国期刊全文数据库、重庆维普数据库和美国MEDLINE数据库检索以及文献追溯等途径收集文献。采用Stata9.0软件编程对文献进行Meta分析。结果反复呼吸道感染患儿较正常对照组,锌下降1.67(95%CI:0.97～2.37)μmol/L,铁下降2.30(95%CI:0.90～3.71)μmol/L,钙下降1.71(95%CI:0.41～3.02)μmol/L,镁下降0.44(95%CI:0.05～0.84)μmol/L,铜下降0.22(95%CI:0.14～0.58)μmol/L,而有害元素铅则上升0.65(95%CI:0.10～1.20)μmol/L。结论反复呼吸道感染患儿的锌、铁、钙、镁、铜均下降,有害元素铅升高。     

中链脂肪酸复合物和亚油酸对卵巢癌多细胞球体化疗效果的影响

目的观察中链脂肪酸复合物（MCFA）和亚油酸（LA）对卵巢癌多细胞球体（MCS）化疗效果的影响。方法分别用含有MCFA和LA的培养液培养卵巢癌MCS，观察在化疗药物顺铂（DDP）作用下，MCS细胞抑制率和细胞周期各时相细胞数量的变化情况。结果当DDP浓度为10μmol/L时，MCFA组（51．60％）和LA组（42．97％）的细胞抑制率均明显高于对照组（30．27％）（P〈0．01），其中MCFA组抑制率也明显高于LA组（P〈0．05）。当两种脂肪酸分别与DDP（10μmol/L）合用时，MCFA＋DDP组和LA＋DDP组处于GO／GI期的细胞数量均明显高于其他组（P〈0．05），且MCFA＋DDP组也明显高于LA＋DDP组[（70．2±5．3）％伪．（68．3±4．5）％，P〈0．05]。结论MCFA和LA都可增强DDP的化疗效果，其中MCFA的作用更强。MCFA和LA的协同作用可能与其阻滞卵巢癌MCS细胞的增殖和抑制癌细胞生长有关。     

Newborn screening for MCAD deficiency: experience of the first three years in British Columbia, Canada

BACKGROUND: Medium Chain Acyl-CoA Dehydrogenase (MCAD) Deficiency is an autosomal recessive disorder of fatty acid oxidation, with potential fatal outcome. MCAD deficiency is diagnosed by acylcarnitine analysis on newborn screening blood spot cards by tandem mass spectrometry. Early diagnosis of MCAD and presymptomatic treatment can potentially reduce morbidity and mortality. OBJECTIVES: To evaluate incidence, clinical outcome, biochemical and molecular phenotype of MCAD cases detected in the first three years of newborn screening in British Columbia (BC). METHODS AND RESULTS: Medium chain length acylcarnitines, octanoylcarnitine (C8) and decanoylcarnitine (C10), were measured on newborn screening blood spot cards. Out of 121,000 live births, 17 newborns had C8 values above the screening cut-off of 0.38 umol/L. Ten newborns had elevated C8 on repeat cards and were investigated further. Both C8 and C8/C10 ratios remained abnormal in all confirmed MCAD cases. Positive predictive value of screening was 58% with no false negative results. Seven patients were homozygous for the common c.985A > G MCAD mutation and three others were compound heterozygous for the c.985A > G and a second mutation. Two novel mutations were identified (c.260T > C and c.382T > A). The estimated incidence of MCAD was approximately 1:12,000 live births. Upon frequent feeding and carnitine supplementation, none of the patients had metabolic crises or adverse outcomes. CONCLUSION: Frequency of MCAD in BC is comparable to reports from other newborn screening programs. Persistence of elevated C8 levels and C8/C10 ratios in confirmed MCAD cases suggest that these are sensitive markers for newborn screening. Early detection and treatment have successfully prevented adverse health outcomes in patients with MCAD.     

抑郁症自杀未遂患者血浆非酶类抗氧化物水平分析

目的 探讨抑郁症自杀未遂患者的血浆非酶类抗氧化物水平及其影响因素,进一步研究氧化应激在抑郁症患者发生自杀未遂的病理机制中的作用.方法 以抑郁症自杀未遂患者56例、无自杀患者85例以及健康对照者42例为研究对象,测定其血浆白蛋白、总胆红素及尿酸水平,并进行汉密尔顿抑郁量表(HAMD)-24测评.结果 自杀未遂组的血浆白蛋白[(43.35±3.38) g/L]、总胆红素[(9.30±3.97)μmol/L]及尿酸[(275.83±87.62) μmol/L]水平均明显低于对照组[分别为(45.82±3.41) g/L,(14.32±5.28) μmol/L,(317.13±89.01) μmol/L],差异均有统计学意义(P＜0.05);无自杀组的血浆白蛋白[(43.38±3.18) g/L]、总胆红素[(9.56±4.26) μmol/L]及尿酸[(283.94±80.95) μmol/L]水平亦明显低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05);而自杀未遂组与无自杀组间差异无统计学意义(P＞0.05).抑郁症自杀未遂患者血浆白蛋白水平、尿酸水平均与年龄呈负相关(r值分别为-0.263和-0.171,P＜0.05).血浆白蛋白、总胆红素及尿酸水平与病程、HAMD评分均无相关性(P＞0.05).结论 抑郁症自杀未遂患者的血浆非酶类抗氧化物水平降低,与年龄有关,病程和抑郁程度并未加重氧化应激损伤.     

氧化应激对蛋氨酸负载后大鼠肝细胞同型半胱氨酸代谢的影响

目的 研究氧化应激对蛋氨酸负载后BRL大鼠肝细胞同型半胱氨酸及相关氨基酸代谢的影响.方法 体外培养BRL大鼠肝细胞,将大鼠肝细胞分为对照组、氧化应激组(100 μmol/L H2O2作用2 h)、蛋氨酸组(50 mmol/L蛋氨酸作用1h)、氧化应激±蛋氨酸组(100 μmol/L H2O2作用2h+50 mmol/L蛋氨酸作用1h),实验结束收集各组培养液上清.采用高效液相法测定同型半胱氨酸、半胱氨酸和谷胱甘肽的含量,采用全自动氨基酸分析仪测定相关氨基酸的含量.结果 与对照组比较,蛋氨酸组同型半胱氨酸[(3.76±0.22)比(1.54±0.05)μmol/L,P=0.000]、半胱氨酸[(199.80±8.75)比(99.11 ±2.47)μmol/L,P=0.000]的含量显著增加,氧化应激+蛋氨酸组同型半胱氨酸[(3.84±0.34)比(1.54±0.05)μmol/L,P=0.000]、半胱氨酸[(200.66±8.60)比(99.11±2.47)μmoL/L,P=0.000]的含量显著增加.与氧化应激组比较,蛋氨酸组同型半胱氨酸[(3.76±0.22)比(1.67±0.13)μmol/L,P=0.000]、半胱氨酸[(199.80±8.75)比(82.64±15.88)μmol/L,P=0.000]、谷胱甘肽[(1.50±0.14)比(1.00±0.11)μmol/L,P=0.011]含量均显著增加,H2 O2+蛋氨酸组的同型半胱氨酸[(3.84±0.34)比(1.67±0.13)μmol/L,P=0.000]、半胱氨酸[(200.66±8.60)比(82.64±15.88)μmol/L,P=0.000]、谷胱甘肽[(1.40±0.30)比(1.00±0.11)μmoL/L,P =0.028)]含量均显著增加.氧化应激+蛋氨酸组Hcy含量较蛋氨酸组有增加的趋势,但差异无统计学意义(P =0.628).与对照组比较,氧化应激组丝氨酸[(12.41±1.51)比(24.00±2.54)mg/L,P =0.000]、谷氨酸[(33.31±0.17)比(43.10±0.52)mg/L,P=0.000]和甘氨酸[(6.23±0.18)比(24.66±10.87)mg/L,P=0.003]的含量均显著降低,而牛磺酸的含量显著增加[(7.99±0.16)比(6.17±0.15)mg/L,P=0.000];与氧化应激组比较,蛋氨酸组丝氨酸[(16.98±0.39)比(12.41±1.51)mg/L,P=0.006]和谷氨酸[(35.44±0.82)比(33.31±0.17)mg/L,P=0.002]含量显著增加,而牛磺酸含量[(3.77±0.16)比(7.99±0.16)mg/L,P=0.000]显著减少;与蛋氨酸组比较,氧化应激+蛋氨酸组丝氨酸[(12.59±0.66)比(16.98±0.39)mg/L,P=0.008]、谷氨酸[(30.87±0.60)比(35.44±0.82)mg/L,P=0.000]的含量均显著降低,而牛磺酸的含量[(4.37±0.12)比(3.77±0.16)mg/L,P=0.001]显著增加.结论 氧化应激对蛋氨酸负载后BRL大鼠肝细胞的同型半胱氨酸代谢可能具有一定的促进作用,不过主要体现的是蛋氨酸负载的影响.     

冠心病患者血清尿酸、C反应蛋白及尿微量清蛋白的相关性分析

目的探讨冠心病（CHD）患者血清尿酸、C反应蛋白及尿微量清蛋白的关系。方法测定94例CHD患者及102例健康体检者血清UA、CRP、mAlb与血脂并进行相关性分析。结果 CHD两组血清UA：AMI组（471.7±67.3）μmol/L,非AMI组（416.2±40.8）μmol/L,均显著高于健康对照组（249.6±46.5）μmol/L（P〈0.001）;CHD两组血清CRP：AMI组（58.3±13.4）mg/L,非AMI组（21.7±9.8）mg/L,均显著高于健康对照组（3.9±1.2）mg/L（P〈0.001）;CHD两组血清mAlb：AMI组（83.18±12.46）mg/L,非AMI组（47.17±10.73）mg/L,均显著高于健康对照组（6.64±3.56）（P〈0.001）;而HDL-C：AMI组（0.97±0.33）mmol/L,非AMI组（1.03±0.22）mmol/L均显著低于健康对照组（1.55±0.40）mmol/L（P〈0.05）。结论 CHD患者血清UA、CRP和mAlb水平明显增高,而且呈一定相关性。     

肝细胞生长因子对铅致人肾小球系膜细胞损伤的保护效应的机制

目的初步探讨肝细胞生长因子（HGF）防护铅处理致人肾小球系膜细胞（HMC）损伤的作用机制。方法将HMC分为对照组（C组）、Pb10μmol／L组和HGF＋Pb10μmol／L组,在6、12、24、48h分别通过噻唑蓝（MTY）法检测细胞存活率和用流式细胞仪检测凋亡率;实时荧光定量一PCR检测各组细胞中Caspase-3的表达水平。结果MTr检测结果显示。Pb10pμmol／L组HMC在6、12、24、48h细胞生长存活率均显著低于HGF＋Pb10μmol／L组（P〈0．01）;流式凋亡检测结果显示,HMC在10μmol／L醋酸铅染毒6、12、24和48h后,HGF＋Pb10μmol／L组在各个时间点细胞凋亡率显著低于Pb10μmol／L组（P〈0．01）。实时荧光定量-PCR检测结果显示,在HMC铅染毒48h后,HGF＋Pb10μmol／L组Caspase-3的表达量显著低于Pb10μmol／L组（P〈0．01）。结论铅促进HMC细胞的凋亡,而HGF通过降低Caspase．3的表达抑制HMC的凋亡,从而发挥对铅致HMC细胞损伤的保护作用。     

一氧化氮合酶抑制剂干预前后软骨藻酸对PC12细胞存活率及NO的影响

[目的]研究一氧化氮合酶（NOS）抑制剂干预前后软骨藻酸（DA）对PC12细胞存活率及其产生一氧化氮（NO）的影响。[方法]MTT法检测PC12细胞的存活率;Greiss法测定PC12细胞培养基上清中的NO含量。L-NAME干预前,MTT实验分为对照组及0．0001、0．001、0．01、0．1、1．0μmol／LDA处理组;NO含量测定时分为对照组及0．01、0．1、1．0μmol／LDA处理组。L-NAME干预时,MTT实验及NO含量测定均分为对照组,单纯1．0μmol／LDA处理组,250、1000、2500μmol／L L-NAME＋1μmol／LDA处理组。[结果]随着DA染毒剂量的升高,PC12细胞的存活率逐渐下降;0．01、0．1、1．0μmol／LDA作用PC12细胞24h后,细胞培养基上清NO水平均升高,差异有统计学意义,P〈0．05;L-NAME浓度为1000、2500μmol／L干预时,PC12细胞存活率增加,NO生成减少。[结论]DA对PC12细胞具有毒性作用,可以降低细胞的存活率,诱导细胞NO生成增加;NOS抑制剂具有一定保护作用,可明显抑制DA诱导PC12细胞NO生成增加。     

叶酸对非洲爪蟾卵母细胞体外成熟的影响及作用机制

目的 探讨叶酸( folic acid,FA)对非洲爪蟾卵母细胞体外成熟的影响及作用机制.方法 将健康卵母细胞移入含不同浓度FA(分别为125 μmol/L、250 μmol/L、500 μmol/L和1 000 μmol/L)的ND96培养液中体外培养,同时设立阴性对照组和孕酮阳性对照组.加FA后每隔1h观察1次细胞生发泡破裂(germinal vesicle breakdown,GVBD),记录发生GVBD的卵母细胞数量,计算GVBD率,同时用10％三氯乙酸溶液固定后,切开进行确认.观察6h后收集各组卵母细胞,采用蛋白免疫印迹实验(Western Blotting)检测CyclinB2,Mos,p-ERK1/ERK1蛋白的表达.结果 除FA 125 μmol/L、250 μmol/L、500 μmol/L、1 000 μmol/L组2h时与空白对照组GVBD率之间差异无统计学意义,其余各记录点的GVBD率与空白对照组间差异均有统计学意义(均有P＜0.05);Western Blotting分析显示,FA和孕酮处理后卵母细胞的p-ERK1,CyclinB2,Mos蛋白表达水平明显升高.结论 FA可促进爪蟾卵母细胞体外成熟过程中GVBD发生,提示FA对爪蟾卵母细胞的成熟具有促进作用,其作用机制可能与干扰成熟促进因子和丝裂原活化蛋白激酶有关.