化学点燃癫痫大鼠在水迷宫中学习记忆能力与海马中GFAP表达的关系

有关化学点燃癫痫大鼠在水迷宫中学习记忆能力与脑中胶原性酸性蛋白 (ｇｌｉａｌｆｉｂｒｉｌｌａｒｙａｃｉｄｉｃｐｒｏ ｔｅｉｎ ,ＧＦＡＰ)表达的关系 ,国内外未见报道。本研究拟探讨ＰＴＸ化学点燃癫痫大鼠在水迷宫中学习记忆能力及其与发作频率及类型的关系 ,以及学习记忆能力与ＧＦＡＰ表达变化的关系 ,以期为研究癫痫患者的记忆损害及其治疗提供线索 ,以提高其生活质量。1　材料与方法1 1　动物及分组　 4 4只健康成年雄性Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗ ｌｅｙ大鼠随机分为点燃组 (ｎ =31)和对照组 (ｎ =13)。其中 ,点燃组又分为癫痫全面发作组 (Ａ组 ,ｎ=8) ,每日腹腔注射ＰＴＸ 1 5ｍｇ·     

化学点燃癫痫大鼠在水迷宫中学习记忆能力与海马中nNOS表达的关系

目的 :观察印防己毒 (Picrotoxin ,PTX)化学点燃癫痫大鼠在水迷宫中学习记忆能力及其与大鼠海马中nNOS表达变化的关系 ,为进一步研究癫痫患者的记忆损害的治疗提供线索。方法 :4 4只雄性SD大鼠随机分为点燃组和对照组 ,分别用PTX和生理盐水腹腔注射 ,根据点燃情况点燃组再分为全面发作 (A)、频繁发作 (B)和部分发作 (C)和迷宫对照 (D)组 ,对照组再分为迷宫训练组 (E)和对照组 (F)。然后进行水迷宫行为测试评价其学习记忆能力。用免疫组化测定各组大鼠海马中nNOS表达变化。结果 :癫痫大鼠在水迷宫测定中 ,除B组第 1天的成绩较对照组差外 ,其余各组及B组在第 2、3、4、5天中寻找平台的潜伏期时间与对照组相比没有显著性差异。点燃各组对平台空间位置的记忆的能力较对照组要差 ,差异有显著性。大鼠海马中 ,A、B、C、E组nNOS神经元表达增加 ,D组表达减少。结论 :PTX化学点燃癫痫大鼠在水迷宫中学习记忆能力下降 ,发作频繁者 ,学习记忆受损明显 ,与发作的严重程度无关。水迷宫训练可使化学点燃癫痫大鼠海马中nNOS表达增高 ,对记忆损害有保护作用。     

酒精中毒对小鼠海马星形胶质细胞表达GFAP及学习记忆的影响

目的:研究不同剂量酒精组小鼠海马胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达并探讨其意义。方法:用不同剂量的酒精(12.5%、25%和50%)灌喂8周龄雌性小鼠,用Morris水迷宫测试小鼠学习记忆功能,用免疫组织化学染色观察星形胶质细胞表达GFAP的状态。结果:高、中剂量组小鼠游泳轨迹为随机性,潜伏期延长;高、中剂量组海马GFAP表达增强,星形胶质细胞数目增多及面密度升高。结论:GFAP表达增强、胶质细胞增生可能与酒精中毒引起的学习记忆减退有关。     

幼年Wistar大鼠空间学习记忆与海马CA3区苔藓纤维分布

目的探讨空间学习记忆与海马CA3区苔藓纤维可塑性的关系.方法Morris水迷宫内对正常幼年Wistar大鼠进行定位航行试验后,用Timm显影染色方法,观察海马CA3区苔藓纤维分布的可塑性变化.结果大鼠在14天学习训练间,其逃避潜伏期逐日缩短,由平均(57.4±29.3)s下降到(7.9±3.5)s.苔藓纤维主要集中在门区和CA3透明层,但学习和对照两组大鼠海马CA3区始层都多少不等地存在苔藓纤维终扣分布,两组苔藓纤维分布面密度分别为0.03432±0.01516,0.03694±0.01657.经t检验,P＞0.05,差异无显著性.结论幼年Wistar大鼠Morris水迷宫14天空间学习记忆训练没能引起海马CA3区始层苔藓纤维分布的变化.     

手术创伤对大鼠空间学习记忆能力及海马GFAP和S100蛋白表达的影响

目的探讨手术创伤对大鼠空间学习记忆能力及海马胶原纤维酸性蛋白(GFAP)、S100蛋白表达的影响。方法SD大鼠98只随机分为三组:对照组(A组,n=14)、麻醉组(B组,n=42)、手术组(C组,n=42),B、C组根据麻醉、手术后1d或3d或7d分为3个亚组B1、B3、B7组和C1、C3、C7组,每亚组14只。在相应的时间点用Y型电迷宫测试大鼠的空间学习记忆能力,同时用免疫组织化学方法检测海马GFAP和S100蛋白的表达。结果(1)学习记忆能力测试表明:C1组的刺激电压[(53±8)V]高于正常对照A组[(39±7)V](P<0.01)。C1、C3组大鼠Y型电迷宫测试达到学会标准时总共学习的次数分别为(67±26)次、(60±18)次,比其余各组明显增多(P<0.01)。C7组的学习次数[(41±11)次]与A组[(28±7)次]的差异无显著性(P>0.05)。(2)C1组GFAP、S100的表达增多。结论手术创伤可暂时影响大鼠的空间学习记忆能力,并引起海马GFAP、S100蛋白表达的增加,海马星形胶质细胞可能参与了学习记忆过程。     

戊四氮点燃癫痫大鼠学习记忆改变及海马神经颗粒素的表达变化

目的:探讨戊四氮慢性点燃癫痫对大鼠学习记忆能力的影响及海马神经颗粒素(neurogranin,Ng)的表达变化.方法:采用戊四氮(pentylenetetrazole,PTZ)腹腔注射慢性点燃癫痫(chronic epileptic,CEP)模型,用Morris水迷宫和Y迷宫对大鼠进行学习记忆能力检测,运用反转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法和Western Blot方法分别测定大鼠海马NgmRNA和蛋白的水平变化.结果:与对照组比较,慢性癫痫发作组大鼠在水迷宫中的逃避潜伏期[(7.7 ±1.3)s vs(4.5 ±1.1)s]延长(P<0.01),穿越平台次数[(5.7 ±2.1)vs(9.2±2.2)]减少(P<0.01),在Y迷宫中的错误反应次数[(12.8±2.5)vs(6.2±3.1)]增多(P<0.05),并伴有海马NgmRNA转录水平[(0.53±0.07)vs(0.74±0.04)]下降(P<0.01)和蛋白表达[(0.61±0.17)vs(0.91±0.23)]减少(P<0.05).结论:戊四氮慢性点燃癫痫大鼠学习记忆能力受损,海马Ng mRNA转录水平下降和蛋白表达减少可能参与了这一过程.     

长期服用贯叶金丝桃能改善大鼠在水迷宫中的空间学习和记忆能力

Wistar大鼠分为3组:第1组为对照组,给以2％的羧甲基纤维素溶液;第2和3组分别给以相当于4.3(HP4.3组)和13μg/kg(HP13组)金丝桃素的该植物片剂,相当于人日剂量0.3和0.9 mg。每日给药1次,连给9周。第9周连续5天进行Morris水迷宫试     

手术创伤对大鼠空间学习记忆能力及海马GFAP和S100蛋白表达的影响

目的探讨手术创伤对大鼠空间学习记忆能力及海马胶原纤维酸性蛋白(GFAP)、S100蛋白表达的影响.方法SD大鼠98只随机分为三组:对照组(A组,n=14)、麻醉组(B组,n=42)、手术组(C组,n=42),B、C组根据麻醉、手术后1d或3d或7d分为3个亚组B1、B3、B7组和C1、C3、C7组,每亚组14只.在相应的时间点用Y-型电迷宫测试大鼠的空间学习记忆能力,同时用免疫组织化学方法检测海马GFAP和S-100蛋白的表达.结果(1)学习记忆能力测试表明:C1组的刺激电压[(53±8)V]高于正常对照A组[(39±7)V](P＜0.01).C1、C3组大鼠Y-型电迷宫测试达到学会标准时总共学习的次数分别为(67±26)次、(60±18)次,比其余各组明显增多(P＜0.01).C7组的学习次数[(41±11)次]与A组[(28±7)次]的差异无显著性(P＞0.05).(2)C1组GFAP、S-100的表达增多.结论手术创伤可暂时影响大鼠的空间学习记忆能力,并引起海马GFAP、S100蛋白表达的增加,海马星形胶质细胞可能参与了学习记忆过程.     

幼年Wistar大鼠空间学习记忆与海马CA3区苔藓纤维分布

目的探讨空间学习记忆与海马CA3区苔藓纤维可塑性的关系.方法 Morris水迷宫内对正常幼年Wistar大鼠进行定位航行试验后,用Timm显影染色方法,观察海马CA3区苔藓纤维分布的可塑性变化.结果大鼠在14天学习训练间,其逃避潜伏期逐日缩短,由平均(57.4±29.3)s下降到(7.9±3.5)s.苔藓纤维主要集中在门区和CA3透明层,但学习和对照两组大鼠海马CA3区始层都多少不等地存在苔藓纤维终扣分布,两组苔藓纤维分布面密度分别为0.03432±0.01516,0.03694±0.01657.经t检验,P＞0.05,差异无显著性.结论幼年Wistar大鼠Morris水迷宫14天空间学习记忆训练没能引起海马CA3区始层苔藓纤维分布的变化.     

颞叶癫痫大鼠海马病理变化对学习记忆障碍影响的研究进展

癫痫（ spontaneous recurrent seizure ，SRS）是常见的中枢神经系统变性疾病之一，反复自发发作是其主要症状。长期反复发作可对患者认知功能，包括语言、记忆、计算等造成严重损害，加重患者精神心理负担，45％的癫痫患者有记忆障碍等行为异常，10％～20％的癫痫儿童需要特殊教育［1］。癫痫所造成的危害不仅在于癫痫发作本身，还在于反复发作的慢性癫痫所致的智能障碍。因此，研究癫痫造成学习记忆障碍的机制和筛选寻找治疗这种学习记忆障碍的药物较为迫切。而颞叶癫痫在成人的各种类型癫痫中预后最差，约有60％～70％患者发展为难治性癫痫，且颞叶癫痫并发精神障碍比其他类型癫痫高4～12倍，多为痴呆或精神分裂症样特征，尤其是引起视觉空间损伤，但机制却不清楚［2］。颞叶癫痫发作大多由颞叶、海马等病变引起，而内侧颞叶、海马与学习记忆的形成密切相关，细胞凋亡、神经胶质细胞增生和神经肽Y分泌减少等机制亦越来越受到重视［3］。     

大鼠纹状体边缘区与海马学习记忆功能的行为学比较研究

目的 探讨MrD与海马这两个不同脑区在大脑学习记忆功能上的区别和作用地位。方法 在Y迷宫训练大鼠后即刻或24h后化学损毁大鼠双侧MrD或切断双侧穹窿海马伞(fornix/fimbria，FF)，训练后6d再观察化学损毁双侧MrD组、MrD对照组、切断双侧FF组和FF对照组大鼠在Y迷宫中学习记忆的行为表现；或在化学损毁大鼠双侧MrD或切断双侧FF下后7d，在Morris水迷宫中检测上述各组的学习记忆能力。结果 在Y迷宫测试的正确反应次数方面，训练后即刻或24h后损毁双侧MrD组与MrD对照组比较均明显减少；训练后即刻切断双侧FF组与FF对照组比较也明显减少，但训练24h后切断双侧FF组与FF对照组比较则无显著意义的差别。在Morris水迷宫试验中，损毁双侧MrD组和切断双侧FF组与各自的对照组比较，平均逃避潜伏期延长，穿环次数减少，但两者之间则无显著意义的差别。结论 MrD与海马均与大鼠的空间学习记忆功能有密切关系；但在Y迷宫逃避性学习方面，海马仅参与陈述性记忆的早期阶段，而MrD则与早、晚两个阶段均有关。提示MrD和海马在学习记忆功能方面可能不同，MrD可能涉及更复杂的记忆过程。     

PTZ点燃癫痫大鼠海马NSE和BMP4的表达

目的 观察神经元特异性烯醇酶(neuron-specific enolase, NSE)和骨形成蛋白4(bone morphogenic protein 4, BMP4)基因在戊四氮(pentylenetetrazol, PTZ)点燃癫痫大鼠海马中的表达,并探讨两者与癫痫发病机制和脑损伤的关系.方法 将50只成年雄性SD大鼠分为对照组和实验组.实验组采用PTZ点燃癫痫大鼠,按点燃进程,又随机分为Ⅰ级组、Ⅲ级组、Ⅳ级组和Ⅴ级组.用免疫组化技术、地高辛标记特异性寡核苷酸探针原位杂交组织化学技术和图像分析技术,观察海马NSE和 BMP4表达的变化.结果 发现应用PTZ点燃后,随发作级别的增高,大鼠海马各区NSE和BMP4的表达亦增加.在Ⅲ和Ⅳ级大鼠海马CA3及DG的NSE和BMP4表达明显高于对照组(P＜0.01);Ⅴ级大鼠在发作后海马CA3及DG的NSE和BMP4表达呈逐渐下降.结论 PTZ点燃可诱导癫痫海马内神经元损伤和神经发生增加,这可能是癫痫海马内神经元丢失、神经元可塑性的病理基础;NSE其表达水平与神经元损伤程度和预后密切相关;BMP4可能在PTZ癫痫形成过程中起重要作用.     

两种水迷宫在测试拟阿尔茨海默病小鼠学习记忆能力中的比较

目的采用两种水迷宫对拟阿尔茨海默病小鼠学习记忆功能进行比较。方法将小鼠分为正常对照组、模型组及给药组。用Morris水迷宫和MS-2水迷宫自动控制仪分别测试各组小鼠的学习记忆能力。结果在Morris水迷宫测试中,模型组与对照组,给药组与模型组比较,逃避潜伏期均有显著性差异（P〈0.01）,在MS-2水迷宫自动控制仪测试中,模型组与对照组比较有明显差异（P〈0.05）,而给药组与模型组比较,游出水迷路的时间均有所减少,但没有显著性差异（P〉0.05）。结论Morris水迷宫和MS-2水迷宫自动控制仪测试方法均能反映动物学习和记忆功能,而前者能更敏感地反映出动物的学习记忆能力。因此,Morris水迷宫应为实验首选,当然在实验需要时,两种水迷宫最好结合使用,以得到客观的结果。     

柴胡总皂甙对对戊四氮慢性点燃大鼠海马 GFAP表达的影响

目的 研究柴胡总皂甙对戊四氮（PTZ）慢性点燃癫痫模型大鼠海马区星形胶质细胞的胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达的影响。方法48只健康SD大鼠被随机均分为6组,即空白组（A组）、生理盐水组（B组）、丙戊酸钠（VPA）组（C组）和柴胡总皂甙高、中、低3种剂量组（D组、E组、F组）,除A组不做处理外,其他各组采用腹腔注射盯z慢性点燃造模,造模同时给予VPA、柴胡总皂甙等不同处理因素,连续4周后取脑组织切片进行免疫组化染色,从阳性细胞数、截面积、灰度值分析结果。结果B组海马各区的阳性细胞数、阳性细胞截面积高于其他各组（P〈0．01）。B组海马各区阳性细胞灰度值低于其他各组,经统计分析CAI区与A组、C组、D组差异显著（P〈01）,CA2区与A组、C组、D组、E组差异显著（P〈．05）,而在DG区与F组差异有统计学意义（P〈0．05）,与A组、C组、D组、E组有显著性差异（P〈0．01）。结论柴胡总皂甙可以抑制PTZ点燃大鼠海马GFAP的过度表达．柴胡总皂甙存在抑制点燃大鼠海马星形胶质细胞的异常激活的作用。     

托吡酯对发育期癫痫大鼠学习记忆能力及海马组织GAP-43表达的影响

目的研究托吡酯（TPM）对戊四氮（PTZ）致癫痫的发育期大鼠学习记忆能力及海马组织神经生长相关蛋白（GAP-43）表达的影响。方法从80只6周龄健康雄性SD大鼠中随机抽取16只作为正常对照组；余64只以PTZ腹腔注射，制作癫痫持续状态（SE）模型，再随机分为模型对照组、TPM低剂量组、TPM中剂量组和TPM高剂量组，每组16只。TPM低、中、高剂量组分别给予TPM 20、40和80 mg&#183;kg^-1灌胃。2周后应用Morris水迷宫、Y迷宫评价大鼠的学习记忆能力，应用RT-PCR方法检测大鼠海马组织GAP-43 mRNA表达变化。结果发育期癫痫大鼠的学习记忆能力较正常大鼠明显下降（P〈0.05），海马组织GAP-43 mRNA相对吸光度值降低（P〈0.05）。癫痫大鼠学习记忆能力经低、中剂量TPM干预后未发生明显变化，海马组织GAP4-3 mRNA相对吸光度值也无明显变化；经高剂量TPM干预后学习记忆能力则明显下降（P〈0.05），海马组织GAP-43 mRNA相对吸光度值降低（P〈0.05）。结论SE后发育期大鼠的学习记忆能力受损，大剂量应用TPM可加重这一损害，该损害可能与调节海马GAP-43表达有关。     

大鼠杏仁核电点燃癫痫模型的建立及海马病理变化的研究

目的:探讨建立大鼠杏仁核电点燃癫痫模型的方法及海马的病理学变化.方法:利用立体定向手术,向Wistar大鼠杏仁核(前囟后2.2 mm、旁开4.8mm、颅骨平面下深8.5mm)植入微电极.术后7 d予以电刺激(50Hz、0.8mA),观察点燃过程中大鼠行为学表现及脑电表现.HE染色、GFAP免疫组化染色,分析大鼠海马及杏仁核区的病理学改变.结果:点燃率为88.6%.大鼠在0.8mA刺激电流强度下,(19.89±3.64)d可以达到点燃要求.海马的病理改变为:海马区锥体细胞神经元缺失及神经胶质细胞的增生.结论:杏仁核靶点参数进行立体定向手术植入电极是可靠的,单侧杏仁核在频率50Hz、0.8mA细电流刺激下,可以达到点燃要求.点燃模型的大鼠行为学表现、脑电表现及海马病理学改变与人类颞叶内侧型癫痫相似.     

吗啡成瘾及癫痫造模对ICR小鼠学习记忆能力的相关性研究

目的:观察吗啡成瘾及癫痫对ICR小鼠的空间学习记忆能力的影响是否具有相关性。方法:将40只小鼠随机分成吗啡成瘾继发癫痫组、吗啡成瘾组、癫痫组和空白对照组,每组10只。用连续注射吗啡建立吗啡成瘾模型,用匹罗卡品(Pilo-carpine,PLO)建立癫痫模型。用水迷宫实验检测各组小鼠的记忆能力。结果:吗啡成瘾继发癫痫小鼠与癫痫小鼠水迷宫逃避潜伏期时间相对比明显延长(P<0.05)。结论:吗啡成瘾与癫痫对ICR小鼠的学习记忆能力损害具有协同作用。     

戊四氮点燃大鼠海马水通道蛋白4 和水通道蛋白9的表达

目的:观察戊四氮点燃癫(癎)大鼠海马中水通道蛋白4 (AQP4)和水通道蛋白9 (AQP9)表达的变化,探讨它们在癫(癎)发生发展中的作用.方法:SD大鼠35只,随机分为对照组5只、生理盐水组5只及实验组25只.实验组大鼠腹腔注射戊四氮,制备戊四氮点燃癫(癎)大鼠模型;生理盐水组腹腔注射相应剂量生理盐水;对照组未做处理.实验组大鼠分别于癫(癎)持续发作后3 h、6 h、12 h、24 h和3 d,各取5只大鼠脑组织,免疫组织化学SP法进行AQP4、AQP9检测.结果:实验组大鼠AQP4和AQP9蛋白主要分布于海马CA1、CA3区的锥体细胞层、齿状回颗粒细胞层和多形细胞层;癫(癎)持续状态3 h时,实验组大鼠海马AQP4和AQP9蛋白表达降低,6 h时增大至正常水平,而后逐渐增强,至24 h达高峰,再逐渐降低,至3 d时恢复至正常水平.结论:AQP4和AQP9与癫(癎)的发生发展关系密切.     

BDNF、TrkB在岛叶慢性电点燃大鼠海马中的表达及与学习记忆的关系

目的研究岛叶慢性电点燃癫痫模型大鼠的学习记忆功能,检测脑源性神经营养因子（brain-derivedneurotrophic factor,BDNF）、酪氨酸蛋白激酶受体B（Tyrosine receptor kinase B,TrkB）在海马组织中表达,探讨BDNF、TRKB与岛叶点燃大鼠学习记忆的关系。方法成年SD大鼠随机分为模型组、假手术组、空白对照组,建立大鼠岛叶慢性电点燃模型。用避暗试验方法检测岛叶慢性电点燃模型大鼠学习记忆功能,采用免疫组化和western blot方法分别检测BDNF、TrkB蛋白在海马组织中表达水平,用RT-PCR检测两因子基因表达水平。结果岛叶慢性电刺激点燃成功后第1天（即0周）,学习记忆能力点燃组与空白对照组、假手术组差异无统计学意义（P〉0.05）。点燃2周点燃组避暗试验结果的LT为（48.87±3.42 s）、EN为（2.75±0.99次）;点燃3周点燃组避暗试验结果的LT为（48.71±2.77 s）、EN为（2.75±1.15次）,与点燃当天（即点燃0周）相比学习记忆功能增强（P〈0.05）,点燃4周后与对照组比学习记忆功能明显下降（P〈0.05）。BDNF、TrkB表达均在24h达到高峰（P〈0.05）,空白对照组、假手术组无明显变化。组间比较、峰值及增幅均出现在2～3周内（P〈0.01）,4周后较前几周组明显下降（P〈0.05）。结论岛叶电点燃大鼠学习记忆功能与BD-NF、TrkB在海马中表达总变化趋势一致。BDNF、TrkB与岛叶点燃大鼠学习记忆功能密切相关。