山楂叶总黄酮对糖尿病大鼠睾丸病变及其EGFR表达的影响

目的：探讨山楂总黄酮对雄性Wistar糖尿病（DM）大鼠睾丸组织的保护作用及其EGFR表达影响。方法：Wistar雄性大鼠40只,分为正常对照组（对照组）、糖尿病模型组（模型组）、胰岛素治疗组（胰岛素组）和山楂叶总黄酮治疗组（HLF组）,每组10只,尾静脉注射1%链尿佐菌素（STZ）溶液诱导糖尿病模型。HLF组给予山楂叶总黄酮200mg/（kg·d）定时灌胃给药。取一侧睾丸组织,制作免疫荧光及病理切片,光镜下观察。结果：2型糖尿病模型制备成功,模型组睾丸病理改变明显,曲细精管层次紊乱,精子数量减少或缺如,经HLF治疗后,生精细胞数量和形态明显恢复。HLF组EGFR表达量显著高于模型组（P〈0.01）,与胰岛素组相比差异无显著性。结论：山楂叶总黄酮能改善糖尿病大鼠睾丸病理损伤提升睾丸组织中EGFR的含量表达,对睾丸组织具有明显保护作用。     

灵芝孢子粉对2型糖尿病大鼠睾丸损伤活性氧机制的探讨

目的:探讨灵芝孢子粉对2型糖尿病大鼠睾丸损害的活性氧(RO S)机制。方法:W istar雄性大鼠40只,随机分组。模型组及灵芝组大鼠经尾静脉一次性按25 m g/kg注射2%链尿佐菌素(STZ),正常对照组尾静脉注射等量柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液。正常饮食喂养2周后,进行糖耐量试验,模型组和灵芝组以糖耐量异常者保留,余去除,并改喂高脂高糖饮食,灵芝组另加灵芝孢子粉250 m g/kg.d持续10周,实验结束前1d做糖耐量试验,取双侧睾丸检测组织中T水平、M DA含量和SOD、G SH-Px活性。结果:糖尿病组与正常对照组比较,T水平、SOD、G SH-Px活性降低,差异有显著性意义(P<0.01),M DA含量明显高于对照组(P<0.01)。而灵芝孢子组与糖尿病组比较,T水平、SOD、G SH-Px活性升高,差异有显著性意义(P<0.01),M DA含量明显低于糖尿病组(P<0.01)。结论:糖尿病RO S增多,抗氧化酶(SOD,G SH-Px)活性下降,可能是造成睾丸细胞损伤,导致睾丸功能紊乱,进而导致性与生殖功能障碍的原因。而灵芝孢子粉能有效降低M DA的含量对糖尿病大鼠生殖系统的毒性损害,增强SOD、G SH-Px活性,可能是其对糖尿病大鼠生殖系统的细胞凋亡有明显抑制,从而对睾丸细胞起保护作用的机制之一。灵芝孢子粉作为一种治疗糖尿病的辅助用药,在临床应用上具有广阔前景。     

灵芝孢子粉对癫痫大鼠脑海马区NCAM-1表达影响的研究

目的：通过检测灵芝孢子粉对戊四氮（PTZ）致癫痫大鼠脑海马神经细胞黏附分子1（NCAM-1）表达的影响,进一步探讨灵芝孢子粉对减轻癫痫症状的机制。方法：健康雄性Wistar大鼠30只．随机分为空白对照组、癫痫模型组和灵芝孢子粉用药组,每组10只。模型组和用药组复制癫痫模型。采用Western—blot方法检测大鼠脑海马区NCAM-1的表达。结果：模型组NCAM-1表达明显高于对照组（0．85±0．07vs0．36±0．08．P〈0.01）,用药组明显低于模型组（0．54±0．07vs0．85±0．07．P〈0．01）,高于对照组（0.54±0．07vs0．36±0．08,P〈0．05）。结论：灵芝孢子粉能有效降低癫痫大鼠NCAM-1的过度表达。从而降低NCAM-1对中枢神经系统的毒性损害。     

灵芝孢子粉对急性肝衰竭模型大鼠血清TNF—α及HGF的影响

目的：通过观察灵芝孢子粉对急性肝衰竭模型大鼠肿瘤坏死因子（TNF—α）、肝细胞生长因子（HGF）、及肠道双歧杆菌的调整作用,从微生态学的角度来评价灵芝孢子粉对肝衰竭造成损伤的肝细胞再生过程中细胞因子的影响。方法：本实验采用D-氨基半乳糖（D—Gal）制备急性肝衰竭大鼠模型．分3组：健康对照组,自然恢复组,灵芝孢子粉组。实验第14天处死实验动物,检测肠道菌群、血清ALT、血清TNF—α、HGF的变化。结果：灵芝孢子粉能调整肠道菌群失调,降低THF—α含量．提高血清HGF含量。从而有效地改善肝功能。各项指标与对照组相比差异显著（P〈0．01）。结论：灵芝孢子粉具有扶植双歧杆菌及抑制肝大肠杆菌过度生长的作用,同时具有保护肝脏细胞的功能,促进HGF的分泌,降低THF—α、促进肝细胞再生。     

灵芝孢子粉对杏仁核点燃模型大鼠神经元的功能性保护作用及机制

目的观察灵芝孢子粉治疗后杏仁核点燃模型大鼠神经元IL-6和TNF-αmRNA表达水平的变化,探讨灵芝孢子粉对癫痫的作用及机制。方法雄性大鼠24只,制备杏仁核点燃模型后,分为灵芝孢子粉组、阴性对照组(生理盐水)、阳性对照组(苯巴比妥)。治疗2周后,检测海马组织IL-6和TNF-αmRNA表达情况。结果灵芝孢子粉组及阳性对照组TNF-α、IL-6的mRNA表达均较阴性对照组明显减低(P<0.05),灵芝孢子粉组与阳性对照组之间TNF-α、IL-6的mRNA表达无明显差异(P>0.05)。结论灵芝孢子粉能够影响癫痫发病过程中的细胞因子,并对神经系统具有镇静和保护功能。     

糖尿病大鼠阴茎组织中糖基化终产物、诱导型一氧化氮合酶的表达分析

目的：探讨糖尿病大鼠阴茎组织糖基化终产物（AGEs）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的表达变化及它们表达的相关性。方法64只雄性Wistar大鼠随机分为糖尿病模型组（DM组）和对照组（NC组）,各32只。在DM组大鼠模型制备成功后的4、8、12、20周,两组各杀检8只大鼠。使用免疫组织化学法观察阴茎组织中AGEs、iNOS的表达定位同时分析其含量变化,使用Real-time PCR检测阴茎组织中AGEs、iNOSmRNA的表达情况。结果大量AGEs和iNOS阳性细胞分别出现于4、8、12、20周DM模型大鼠阴茎组织内,其累计光密度（IOD）值高于对照组,并随病程进展而增高（P<0.05,P<0.01）。 Real-time PCR结果显示,NC组大鼠在造模后4、8、12、20周AGEs和iNOS的表达量差异无统计学意义（P>0.05）,DM模型大鼠阴茎组织AGEs和iNOS mRNA表达水平随着病程进展逐渐增加（P<0.01）,且高于相同时间点的NC组（P<0.01）,Pearson相关分析显示,DM大鼠阴茎组织AGEs与iN-OS的表达水平呈显著正相关（r=0.845,P<0.01）。结论高血糖状态下,阴茎组织内AGEs和iNOS的表达显著增加并呈正相关,可能共同参与了DM阴茎损害的发生。     

灵芝孢子粉对戊四氮致痫大鼠大脑皮质及海马区PCNA变化的影响

目的：探讨灵芝孢子粉对戊四氮（PTZ）致痫大鼠大脑皮质及海马区增殖细胞核抗原（PCNA）变化的影响,进一步研究癫痫的发病机制及灵芝孢子粉的干预机制。方法：免疫组织化学法（SABC法）检测皮质和海马区PCNA的免疫反应性;Western-blot检测海马区PCNA蛋白含量的变化。结果：癫痫模型组PCNA阳性细胞数目明显增多与对照组比较差异有显著性（P〈0.01）,灵芝孢子粉干预组与癫痫模型组比较PCNA阳性细胞数明显减少差异有显著性（P〈0.01）;PCNA在戊四氮致痫组的大脑海马区的蛋白含量与对照组比较差异有显著性（P〈0.01）,灵芝孢子粉干预组与癫痫模型组比较差异有显著性（P〈0.01）。结论：灵芝孢子粉可以通过调节PCNA含量抑制星形胶质细胞（AS）增生,从而影响戊四氮致痫大鼠癫痫发作的发生与发展。     

基于PI3K-AKT-mTOR信号通路探讨灵芝孢子对2型糖尿病大鼠睾丸的保护作用

目的：观察2型糖尿病对大鼠睾丸的损伤作用及灵芝孢子通过PI3K-AKT-mTOR信号通路对其损伤的保护作用。方法：选取40只雄性SD大鼠随机分为正常组(NC)、高脂高糖饮食组(HF)、糖尿病模型组(DM)及灵芝孢子干预组(GLSP),每组10只。通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ30mg/kg)联合高脂高糖饮食制备糖尿病大鼠模型,模型制备成功后治疗组使用灵芝孢子300mg/(kg·d)灌胃,其余3组使用同体积生理盐水灌胃,连续12周,期间观测各组大鼠一般情况及状态,每周测定1次大鼠血糖及体质量变化。末次称量体质量及检测空腹血糖后处死大鼠,称量睾丸质量,取附睾尾制涂片染色观察精子形态,试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)水平;Western blotting检测PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR蛋白水平。结果：DM组大鼠较NC组大鼠血糖升高,精神萎靡,SOD水平降低,MDA水平升高,体质量及睾丸质量减轻(P<0.01),精子形态差。灵芝孢子可改善DM大鼠的精神状态及精子形态,降低DM大鼠血糖、MDA水平,升高DM大鼠体质量及睾丸质量(...     

2型糖尿病胰岛素抵抗引发心肌病发病机制的探讨

目的：建立2型糖尿病性心肌病大鼠模型,探讨糖尿病引起心肌损伤的相关因素。方法SD大鼠喂以高脂高糖饲料加小剂量链脲佐菌素,建立2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠模型,随机分为正常组、糖尿病组。检测了两组大鼠血清中相关指标含量以及心肌组织中晚期糖基化终末产物（AGEs）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）的含量,并观察心脏结构变化。结果糖尿病组相关指标均较正常组明显增高,差异有统计学意义（P＜0.01）,同时HE染色观察到糖尿病大鼠心肌细胞变性坏死,结构紊乱。结论糖尿病引起心肌病变的原因可能是细胞代谢紊乱引起心肌组织相关指标过度表达有关。     

灵芝孢子粉对镉致雄性大鼠睾丸生殖细胞DNA氧化损伤的拮抗作用

目的研究镉致雄性大鼠睾丸生殖细胞DNA损伤及灵芝孢子粉的影响。方法 48只SD雄鼠,随机均分为4组:对照组、Cd组、灵芝孢子粉低拮抗组(GLSL+Cd)和灵芝孢子粉高拮抗组(GLSH+Cd)。灵芝孢子粉高低拮抗组分别灌胃1和0.5 g/kg灵芝孢子粉,对照组与Cd组灌胃等量生理盐水,1次/d。Cd组、GLSL+Cd和GLSH+Cd组腹腔注射Cd Cl22 mg/kg,隔天1次。对照组腹腔注射等量生理盐水。60 d后分两批处死,间隔为30 d。硫代巴比妥酸(TBA)法和BCA法分别测定丙二醛(MDA)含量和蛋白浓度,WST-1法测定超氧化物歧化酶(SOD)活力,单细胞凝胶电泳检测睾丸细胞DNA损伤(测定慧尾长、慧尾DNA百分含量及Olive尾矩)。结果 (1)与对照组比较,Cd组、GLSL+Cd组体重、睾丸重均降低,差异均有统计学意义(P0.05)。(2)与Cd组比较,GLSL+Cd组、GLSH+Cd组睾丸组织MDA含量降低,SOD活力增加,DNA损伤程度均较低,差异均有统计学意义(P0.05)。但GLSH+Cd组DNA损伤程度高于GLSL+Cd组,差异有统计学意义(P0.05)。结论灵芝孢子粉对镉致雄性大鼠睾丸细胞DNA损伤有保护作用,但是发挥作用的最优剂量和时间还需要进一步探索。     

灵芝孢子粉对癫痫大鼠皮质和海马区NMDAR1免疫反应影响的研究

目的:观察灵芝孢子粉对癫痫大鼠模型皮质和海马区NMDAR1含量及神经元形态学的影响,探索癫痫发病机制以及灵芝孢子粉对癫痫的干预作用.方法:采用戊四氮(PTZ)腹腔注射制作Wistar大鼠慢性点燃模型,并将其分为空白对照组、癫痫模型组和灵芝孢子粉干预组,点燃后断头取脑,行免疫组化染色观察NMDAR1含量的变化及神经元形态学的改变.结果:所有大鼠均达到癫痫模型点燃标准.使用灵芝孢子粉的中药干预组与癫痫模型组相比,脑内NMDAR1含量明显下降(P<0.05),同时神经元形态学改变明显好转.结论:灵芝孢子粉能够有效降低皮质和海马区兴奋性氨基酸受体NMDAR1的含量,使神经元兴奋性减弱,抑制癫痫的发作,从而减轻癫痫发作给神经系统带来的损伤, 以达到抗癫痫作用.所以灵芝孢子粉可能具有减轻痫性发作、保护神经元的作用.     

两个厂家灵芝孢子粉质量比较

目的对拟用于医院制剂研发的两个厂家的灵芝孢子粉进行质量比较,为购买优质灵芝孢子粉原料药提供依据。方法依据2010年版《中国药典(一部)》并参考相关文献中有关中药灵芝的检测方法,对北京A厂和山东B厂两厂家灵芝孢子粉的破壁率、水分、灰分、多糖进行比较。结果两厂家供试品的薄层色谱图在波长365 nm处均与灵芝对照药材相同位置有相同颜色的荧光斑点;北京A厂的灵芝孢子破壁率为90%,山东B厂的破壁率为97%,二者含水量、多糖均符合药典规定,但北京A厂灵芝孢子粉的总灰分含量为3.37%,超出药典规定的含量限度。结论山东B厂灵芝孢子粉的质量较优,可作为医院制剂灵芝孢子粉胶囊研制的原料药。     

粪便中灵芝孢子与肝吸虫卵形态学鉴别

目的 探讨粪便中灵芝抱子形态与肝吸虫卵形态的鉴别要点.方法 将口服灵芝保健品患者粪便用0.9%氯化钠溶液涂片,在显微镜下观察灵芝孢子形态与肝吸虫卵形态,并对两者进行比较.结果 粪便中灵芝抱子与肝吸虫卵形态上有很多相近之处,但两者还是有各自的特征.结论 在实际工作中,粪便检查查到大量肝吸虫卵样物质时,应掌握两者的形态学特征,询问病史,结合临床,可以通过显微镜下形态学特征鉴别粪便中灵芝孢子与肝吸虫卵.     

灵芝孢子粉对戊四氮致痫大鼠脑组织BDNF表达的影响

目的:观察使用灵芝孢子粉后,癫痫点燃大鼠模型皮质和海马区脑源性神经营养因子(BDNF)的含量及神经元形态学的改变,探索癫痫发病机制以及灵芝孢子粉对癫痫的干预作用.方法:采用戊四氮(PTZ)腹腔注射制作Wistar大鼠慢性点燃模型,并将其分为空白对照组、癫痫模型组和灵芝孢子粉组,点燃后断头取脑,免疫组化染色观察BDNF含量的变化及神经元形态学的改变.结果:所有大鼠均达到癫痫模型点燃标准.使用灵芝孢子粉的中药干预组与癫痫模型组相比,脑内BDNF含量明显升高,同时神经元形态学改变明显好转.结论:灵芝孢子粉能够增强脑源性神经营养因子的表达,从而减轻癫痫发作给神经系统带来的损伤,所以灵芝孢子粉可能具有减轻痫性发作、保护神经元的作用.     

优选超临界CO2萃取灵芝孢子粉中总三萜化合物的最佳工艺

目的：建立超临界CO2萃取法提取和纯化灵芝孢子粉中总三萜化合物的最佳工艺条件。方法：采用超临界CO2萃取技术,以正交试验考察提取压力、温度和时间对提取效果的影响。结果：最佳工艺条件为萃取压力22 MPa,萃取温度50℃,萃取时间2 h。总三萜化合物的回收率为17.6%,在灵芝孢子粉中含量为160 mg/g。结论：优选出的工艺稳定可靠,简便易行。     

终末糖基化终产物对糖尿病大鼠甲状腺组织的影响

目的：探讨终末糖基化终产物（AGEs）对甲状腺组织的影响及其机制。方法：链脲佐菌素制备糖尿病（DM）大鼠模型（DM组），并设对照组，每组25只，应用免疫组织化学和Westem Blotting方法检测大鼠甲状腺组织中AGEs和甲状腺球蛋白（TG）、甲状腺过氧化物酶（11PO）的生成情况。结果：HE染色示DM组较对照组甲状腺滤泡上皮细胞变扁平，胶质中吸收空泡减少；免疫组织化学染色示对照组和DM组甲状腺组织中AGEs和TG、TPO均为阳性，AGEs阳性部位主要在间质，TG、TPO阳性部位主要在胶质和胞浆；Western Blotting示DM组较对照组甲状腺组织AGEs生成明显增多，TG和TPO的含量降低，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论：甲状腺组织是高血糖攻击的靶器官之一，高血糖对甲状腺组织的损害表现为功能减低。     

三种灵芝不同部位的活性成分含量差异性分析

目的比较三种灵芝（霍芝I号、韩芝、日芝）不同药用部位的总多糖、总三萜、灵芝酸A及灵芝酸B的含量差异,为全面评价灵芝药材及孢子粉的质量及其药用成分的合理利用提供依据。方法采用苯酚一硫酸法测定总多糖含量;香草醛一冰乙酸一高氯酸显色法测定总三萜的含量;HPLC法测定灵芝酸A、B的含量。结果每种灵芝不同药用部位的总多糖含量由高到低依次为：孢子粉〉菌盖〉菌柄;每种灵芝不同药用部位的总三萜含量由高到低依次为：菌盖〉菌柄〉孢子粉;每种灵芝不同药用部位的灵芝酸A和灵芝酸B含量由高到低依次为：菌盖〉菌柄〉孢子粉,且灵芝酸A的含量均明显高于灵芝酸B。结论该研究为全面评价灵芝子实体及孢子粉的质量及其药用成分的合理利用提供依据。,     

灵芝孢子油的研究进展

灵芝孢子油是通过超临界二氧化碳流体萃取技术从破壁的灵芝孢子中提取的油状脂质物,具有抗肿瘤、增强免疫及保肝护肝等多种生物活性.本文综述近年来灵芝孢子油在提取工艺、化学成分及药理活性方面的研究状况,以期为下一步灵芝孢子油的研究工作提供线索.     

氨基胍对糖尿病大鼠非酶糖化和细胞凋亡的影响

目的观察氨基胍对2型糖尿病大鼠肾脏晚期糖基化终末产物（AGEs）和细胞凋亡的影响。方法利用高糖高脂饮食及注射小剂量的链脲佐菌素（STZ）建立2型糖尿病大鼠模型,随机分为糖尿病组、氨基胍组,并设对照组,分别于16周观察大鼠肾脏形态结构、肾脏凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达和肾皮质AGEs含量。结果电镜下见糖尿病组肾脏小管上皮细胞呈典型的凋亡改变,氨基胍组细胞凋亡明显减轻。免疫组化显示,糖尿病组肾小管上皮细胞中Bcl-2、Bax表达较对照组增多,氨基胍组Bcl-2蛋白表达较糖尿病组增多,Bax蛋白表达减少。氨基胍组大鼠肾皮质AGEs含量较糖尿病组明显减少。结论氨基胍可通过降低糖尿病肾皮质AGEs含量调节凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达,抑制肾脏细胞凋亡。     

大鼠灌胃灵芝总三萜后血浆中灵芝酸类成分的检测

研究灵芝中总三萜在大鼠体内的吸收情况。大鼠灌胃给予灵芝总三萜后,利用HPLC-DAD和LC-MS方法鉴定大鼠血浆中的灵芝酸类成分。在大鼠血浆中检测到5种灵芝酸类成分,即灵芝酸C2、灵芝酸C6、灵芝酸G、灵芝酸B和灵芝酸A。大鼠口服灵芝总三萜后灵芝中的灵芝酸类成分能被大鼠吸收。