尾悬吊模拟失重大鼠肺组织细胞凋亡调控基因的研究

为研究尾悬吊模拟失重大鼠肺组织细胞凋亡调控基因的变化，采用尾悬吊模拟失重，分为悬吊7天和21天及相应对照4组，每组10只健康雄性SD，并采用原位杂交技术检测肺组织bcl-2/bax的表达情况。发现7天尾悬吊模拟失重大鼠肺组织bcl-2 mRNA水平明显低于对照组，两者之间差异有显著性意义（P＜0．05），但21天bcl-2 mRNA水平与对照组相比无显著性差异（P＜0．05）；7天尾悬吊模拟失重大鼠肺组织bax mRNA水平明显高于对照组，两者之间差异有显著性意义（P＜0．05），但21天bax mRNA水平与对照组相比亦无显著性差异（P＞0．05）。提示尾悬吊7天模拟失重大鼠肺组织细胞凋亡调控基因存在变化。     

地塞米松对尾悬吊大鼠肺组织诱导型一氧化氮合酶的影响

目的　研究地塞米松对模拟失重大鼠肺组织诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)表达的影响。方法　采用尾悬吊模拟失重大鼠模型 ,将健康雄性SD大鼠分为尾悬吊 7天组和地塞米松干预组 ,每组各 10只 ,并采用免疫印迹和免疫组化两种方法检测肺组织iNOS的表达。结果　同尾悬吊 7天组相比 ,地塞米松干预组大鼠肺组织iNOS表达明显减低 ,差异有统计学意义 (P <0 0 5 )。结论　地塞米松通过抑制iNOS表达对模拟失重所致大鼠肺组织损伤起保护作用。     

尾悬吊模拟失重对大鼠肺脏的影响

为观察模拟失重对大鼠肺脏的影响，实验选用Ｗｉｓｔａｒ大鼠，采用尾悬吊模拟失重模型。实验大鼠３６只被分为三组；对照组、悬吊５．５天组及悬吊６．５天组。实验观察了悬吊５．５天和６．５天大鼠肺脏的形态学变化，测定了肺泡灌洗液中棕榈酸磷酸酰胆硷的含量及其表面张力，以及血清中血管紧张素转化酶的活性等。     

尾悬吊模拟失重大鼠肺组织VEGF mRNA的研究

为研究尾悬吊模拟失重大鼠肺组织血管内皮生长因子（VEGF）mRNA的变化，采用尾悬吊模拟失重，分为悬吊7天和21天及相应同步对照共4组，每组10只健康雄性SD大鼠，并采用原位杂交技术检测肺组织的VEGF mRNA表达情况。发现同正常对照组相比，7天尾悬吊模拟失重大鼠肺组织VEGF mRNA的表达水平明显增高（P＜0．05），且21天悬吊组模拟失重大鼠肺组织VEGF mRNA的表达水平仍较高（P＜0．05），但同7天悬吊组相比增高程度已明显降低。提示在模拟失重条件下肺组织VEGF的表达水平增高。     

尾悬吊模拟失重大鼠肺组织一氧化氮合酶mRNA的研究

为探讨尾悬吊模拟失重大鼠肺组织诱导型一氧化氮合酶mRNA(iNOS mRNA)的变化，采用尾悬吊模拟失重法，将大鼠分为悬吊7天和21天及相应对照组4组，并采用原位杂交技术检测肺组织iNOS mRNA的表达情况，发现同正常对照组相比，7天尾悬吊模拟失重大鼠肺组织iNOSmRNA的表达水平明显增高（P＜0．01），21天悬吊组模拟失重大鼠肺组织iNOSmRNA的表达水平仍显著增高（P＜0．01），提示NO参与了在模拟失重条件下的肺组织损伤的过程。     

尾部悬吊对小鼠胸腺细胞凋亡的影响

目的：探讨1d和2d尾吊对小鼠胸腺细胞凋亡的影响。方法：采用尾部悬吊小鼠模型模拟失重,碘化丙啶（PI）染色法检测凋亡细胞染色体断裂,Annexin-V分析法检测凋亡的细胞膜的变化。结果：尾吊小鼠未出现明显的染色体断裂,悬吊1d,总凋亡细胞数和早期凋亡细胞数呈加趋势;悬吊2d早期地亡细胞数明显升高,总凋亡细胞数极显著增加,结论：尾吊可能增强的胸腺细胞凋亡。     

维生素K对尾悬吊大鼠骨代谢的影响

目的 探讨维生素K对模拟失重大鼠骨质的影响,为失重骨丢失的防护提供实验依据。方法 将SD雄性大鼠分为3组,自由对照组（FAC）,悬吊对照组（SC）,维生素K悬吊组（SVK）（50mg/kg weight/d),每组9只。每天灌胃给药,实验期为21d。观察维生素K对尾悬吊大鼠血清骨钙素（BGP）、骨生物力学、矿盐含量、一氧化氮（NO）含量及碱性碱酸酶（ALP）活性含量的影响。结果 与SC比较,SVK血清总BGP和结合型BGP,股骨和胫骨矿盐含量,股骨生物力学,胫骨ALP活性含量均显著增加;股骨干NO含量明显减少。结论 维生素K可改善尾悬吊大鼠的骨代谢和骨结构,减少骨丢失,提高骨生物力学性能,降低骨折危险度。     

尾吊对大鼠海马组织学习记忆及凋亡相关蛋白表达的影响

目的研究尾吊模拟失重效应对大鼠海马神经元形态数目和学习记忆相关分子NMDAR2A,BDNF及促凋亡相关分子Bax,Caspase-3表达的影响,探讨模拟失重所致大鼠学习记忆能力下降的机制。方法24只8周龄SD大鼠随机分为对照组及模拟失重组,每组12只,采用30°尾吊方法模拟失重效应。采用HE及尼氏染色观察模拟失重效应对海马神经元数目形态的影响;采用Western blot检测模拟微重力效应对NMDAR2A,BDNF,Bax,Caspase-3蛋白表达的影响。结果 HE染色及尼氏染色结果发现,尾吊大鼠海马组织神经元数目显著低于对照组,同时其形态也发生了一定的改变。Western blot实验结果显示,与对照组相比,尾吊大鼠海马组织NMDAR2A、BDNF蛋白表达水平显著降低,Bax,Caspase-3蛋白表达水平显著提高。结论尾吊模拟失重效应可影响大鼠海马神经元形态与数目,下调学习记忆相关分子表达,上调促凋亡相关分子表达。     

模拟失重大鼠肺组织一氧化碳表达的变化

目的　研究在模拟失重大鼠肺组织中一氧化碳表达的变化 ,探讨其在失重时肺组织损伤中的作用。　方法　采用尾部悬吊模拟失重 ,分为悬吊 7d和 2 1d及相应对照 4组 ,每组 10只健康雄性 SD大鼠 ,共 4 0只大鼠。并采用原位杂交技术检测肺组织诱导型血红素氧合酶 (HO- 1) m RNA表达情况。　结果　同正常对照组相比 ,7d尾悬吊模拟失重大鼠肺组织 HO- 1m RNA表达水平明显增高 ,且具有统计学意义 (P<0 .0 1) ,2 1d悬吊组模拟失重大鼠肺组织 HO- 1m RNA表达水平仍显著增高 (P<0 .0 1)。　结论　在模拟失重条件下肺组织一氧化碳的表达水平增高。     

尾悬吊大鼠牙体、牙髓、牙周组织的变化

目的 探讨模拟失重务件下钙、磷的代谢变化及转化生长因子β1(TGF-β1)、c-fos及Ⅰ、Ⅳ型胶原蛋白在牙髓、牙周组织中的功能效应。方法 采用扫描电镜及能谱分析系统对模拟失重组、失重对抗组、正常对照组大鼠牙体、牙髓、牙周组织的Ca、P相对百分含量进行检测，同时用免疫组织化学方法对3组大鼠牙髓、牙周组织中的TGF-β1、c-fos及Ⅰ、Ⅳ型胶原蛋白的表达特征进行观察。结果 模拟失重大鼠的牙体组织Ca的相对百分含量明显下降，P稍升高；牙槽骨Ca、P的含量无显著差异。牙髓组织中TGF-β1、c-fos和胶原Ⅰ的表达均减少，胶原Ⅳ在毛细血管内的表达量增多；牙周组织中它们的含量变化不大。采用人工对抗措施后可部分恢复它们的表达量。结论 失重可能引起牙本质矿化不良，1．5G对抗措施可改善其对牙体组织矿物质代谢带来的不利影响。TGF-β1、c-fos、胶原Ⅰ分泌减少是导致矿化不良的一个重要原因。     

模拟失重对大鼠肺动脉eNOS表达的影响

目的通过研究模拟失重对大鼠肺动脉血管内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达的影响,探讨肺动脉反应性改变的发生机制。方法采用尾悬吊大鼠模拟失重,分为模拟失重组(尾悬吊14天)和对照组,每组8只健康雄性Wistar大鼠,用蛋白免疫印迹分析模拟失重组和对照组大鼠肺动脉组织eNOS表达,硝酸还原酶法测定肺动脉组织一氧化氮(NO)含量。结果同对照组相比,模拟失重组大鼠肺动脉组织eNOS表达增强,胶片图像扫描后的相对光密度值为247±2·60,对照组的相对光密度值为141±1·72,两组间有显著性差异(P<0·01)。模拟失重组肺动脉组织NO含量亦增加,其浓度为15·7±4·1μmol/L,对照组为7·6±3·2μmol/L,两组间有显著性差异(P<0·05)。结论模拟失重条件下肺动脉eNOS表达增加可能促进了立位耐力不良的发生。     

模拟失重对雌性大鼠背根神经节的影响

 目的 观察模拟失重对雌性大鼠背根神经节(dorsal rootganglion, DRG)的影响。方法 选取健康雌性大鼠80只,随机分为尾部悬吊实验组(n=40)和正常对照组(n=40)。实验组按照Morey-Holton教授提出的方法保持-30°头低位及后肢自由悬垂不负重的状态,各组大鼠按标准条件进行饲养。4周后取右侧L₅ DRG,HE染色观测DRG细胞形态,免疫组化观测髓鞘情况,电镜观测DRG髓鞘及线粒体超微结构。结果 HE染色结果显示,与对照组相比,实验组DRG细胞间隙轻度增宽,部分节细胞与卫星细胞分离。免疫组化结果显示,对照组免疫组化染色及IOD值(0.573±0.007)较实验组IOD值(0.802±0.009)降低(P<0.05),电镜下可见实验组髓鞘结构紊乱、松散,线粒体肿大、变形。结论 模拟失重可引起雌性大鼠DRG髓鞘及线粒体发生损伤性变化,推测模拟失重下可导致雌性大鼠DRG损伤。     

间断性水平位站立对模拟失重大鼠股骨力学特性的影响

目的　研究不同时段间断性水平站立对尾吊大鼠股骨的影响。　方法　 SD雄性大鼠35只 ,按体重配对后随机分为 5组 :对照组 ( C)、悬吊组 ( S)及站立对抗组 (包括 L1、L2和 L4组 ) ,每组各 7只。在尾吊大鼠模拟失重的基础上 ,对抗组大鼠每日分别给予 1h、2 h和 4h水平站立作用。利用物理测量和三点弯曲等实验 ,观察了 3周间断性站立措施对尾吊大鼠股骨生长、生物力学特性的影响。　结果　和 S组相比 ,各对抗组在直径和密度改善方面有显著性意义 ( P<0 .0 1) ;在股骨重量(鲜、干 )和灰分方面增加趋势明显 ,部分指标改善有显著性意义。各对抗组弹性载荷和最大载荷提高有显著性意义 ( P<0 .0 5或 P<0 .0 1) ;韧性系数降低有显著性意义 ( P<0 .0 1) ;刚性系数增加趋势明显。各对抗组之间所有指标差异无显著性意义。　结论　间断性水平位站立显著改善了尾吊大鼠承重骨的生物力学特性及生长代谢 ;延长作用时间 ,对抗效果无显著提高。     

氟伐他汀联合地塞米松治疗大鼠肺纤维化

目的：观察氟伐他汀联合地塞米松对氟伐他汀（BU①引起的大鼠肺纤维化的治疗作用，探讨肺纤维化治疗的新方法。方法：SD大鼠随饥分为5组：C组（生理盐水对照组）、阻M组（肺纤维化组）、F1u组（HM＋氟伐他汀），Dex组（BLM＋地塞米松）及联合治疗组（HM＋氟伐他汀＋地塞米松）。各组动物于气管内灌注BLM后第1、3、7、14、28d分别随饥处死5只。取肺组织，HE染色，作病理学观察；肺组织匀浆检测羟脯氨酸（㈣变化；支气管肺泡灌液（BALF）测定巨噬细胞、中性粒细胞及淋巴细胞在总细胞中的百分比；上清液中ELISA法检测转化生长因子-β（TCF-β）及单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）变化。结果：氟伐他汀及地塞米松均可有效减轻啼组织炎症及纤维增生，减轻肺组织HYP含量，减少BALF中细胞总数及中性粒细胞、淋巴细胞百分比，降低其中TGF-β及MCP-1的含量。二者联合应用则降低肺组织HYP、BALF中TGF-β、MCP-1更早／或更显著。结论：氟伐他汀及地塞米松对大鼠实验性肺纤维化均有一定治疗作用，而二者联合应用更为有效。     

模拟失重时肺动脉反应性变化的内皮机制研究

目的 研究血管内皮在模拟失重时肺动脉反应性变化中的作用.方法 32只雄性Wistar大鼠随机分为尾悬吊组和对照组,采用尾悬吊模拟失重大鼠模型模拟微重力效应,制备离体肺动脉环测定其对几种血管活性物质的反应性变化,经去内皮处理后再测定其对血管活性物质的反应性变化,并进行分析比较.结果 与对照组相比,14天尾悬吊模拟失重大鼠肺动脉环对KCl(68mmol/L)和苯肾上腺素(10-7～10-5mmol/L)的收缩反应性明显下降,对乙酰胆碱(10-8～10-6mmol/L)的舒张反应性明显增强.而去内皮处理后,肺动脉环对苯肾上腺素的收缩反应性恢复,对硝普钠的舒张反应性无明显变化.结论 模拟失重引起肺动脉血管内皮结构或功能改变,是导致其血管发生反应性变化的重要原因.     

长期模拟失重大鼠心肌收缩性能的改变

应用在体及离体实验对一批悬吊90d大鼠的心肌收缩性能进行了观察。在体实验结果表明：悬吊组大鼠左室舒张本压及主动脉血压与对照组无显著性差别（P＞0．05）；但悬吊组大鼠左心室内压峰值较对照组降低16％（P＜0．01），左心室内压最大上升速率与最大下降速率也分别较对照组减慢28％（P＜0．05）与21％（P＜0．05）。对同一批大鼠的离体乳头肌，又用等长收缩灌流技术观察了力学特性变化。结果是：反映心肌收缩强度的指标，如最大发展张力（DT），在两组间无显著差别；反映心肌收缩速度的指标，如最大张力发展速率对DT的校正值，悬吊组较对照组降低了17．2％（P＜0．05）；反映收缩时程的指标，如悬吊组的至峰张力收缩时间与至峰张力发展速率收缩时间分别较对照组延长了12．7％（P＜0．01）和22．2％（P＜0．05）；反映心肌舒张的时程指标，如张力下降一半时间与至峰张力下降速率舒张时间分别较对照组延长183％（P＜0．01）与20．3％（P＜0．01）。以上结果表明，长期模拟失重大鼠心肌收缩性能明显降低，并主要表现为心肌收缩速率减慢和收缩与舒张时程延长。     

大鼠胸部受到20Gyγ线照射后肺组织的形态计量学改变

作者通过形态计量学的方法，测量肺局部经２０Ｇｙγ线照射后，早期不同时间肺各项主要参数的变化。结果表明：照射７天后肺微动脉、微静脉管壁增厚，管腔通透性指数（管腔面积／血管全面积）减小（Ｐ＜０．０５）。对管壁厚度与管腔通透性指数的回归分析发现，两者呈直线负相关（Ｙ＝１．３８－０．１９８Ｘ＋０．０１Ｘ２，Ｒ＝－０．９１９），表明管腔的缩小是由于管壁的增厚所致；受照１５天后大鼠肺组织的肺泡壁厚度增厚；肺泡腔面积减小；肺间质面积增大（Ｐ＜０．０ｌ）；电镜结果显示：微血管周围渗出严重；肺Ⅱ型细胞排空明显；肺组织中细胞种类、数量增多。     

模拟失重雌雄大鼠骨密度、骨代谢指标与骨折风险的相关性

 目的 分析模拟失重雌、雄性大鼠模型骨密度及骨代谢生化指标和生物力学之间的相关性,与骨折风险建立联系,探讨航天医疗基础工作。方法 3个月龄雌、雄性SD大鼠各20只,按照性别及是否失重分为4组。采用尾部悬吊模拟失重方法,实验4周后处死SD大鼠,双能X线吸收法(dual-energy X-ray absorption, DEXA)测定L₄椎体、股骨髁部骨密度,骨组织切片染色,ELISA法检测骨代谢生化标志物:骨碱性磷酸酶(bone alkaline phosphatase,BALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP),生物力学测试骨强度。结果 悬吊组大鼠较对照组大鼠BMD均显著下降,雌性悬吊组较雄性组下降明显;组织切片悬吊组较对照组骨组织及骨细胞间隙明显增宽,细胞肿胀;BALP、TRAP雄性悬吊组分别较对照组升高3.09和1.72倍,雌性悬吊组分别较对照组升高3.43和2.14倍;悬吊组椎体的最大压缩载荷(N)、最大压缩压力(MPa)、股骨最大抗弯曲载荷(N)悬吊组较对照组显著下降。骨密度(bone mineral density,BMD)、BALP、TRAP与椎体最大力学强度Fmax相关性系数r值,雄性组分别为0.985、-0.949、-0.970,雌性组分别为0.908、-0.858、-0.921。结论 失重4周后大鼠出现明显的骨质疏松、骨小梁结构破坏、力学强度显著下降。雌性大鼠骨质疏松较雄性组明显加重。最大力学强度Fmax与骨密度成正相关,与BALP、TRAP成负相关,未来精准、便捷的骨代谢指标可能成为航天医学预测骨折风险的手段之一。