FHIT基因在胃癌中的异常甲基化及其表达

目的:检测FHIT基因在胃癌中的异常甲基化及表达,探讨其在胃癌发生中的作用.方法:收集胃癌新鲜组织标本共88例,采用甲基化特异性PCR和免疫组织化学方法检测FHIT基因的异常甲基化和蛋白表达.结果:88例胃癌组织中,有35例发生了FHIT基因甲基化,阳性率为40%.55例表达FHIT蛋白,阳性率为63%.不同组织学分级的胃癌组织中甲基化率FHIT蛋白表达程度均有显著差异;淋巴结转移组织甲基化率、FHIT蛋白表达程度显著高于无转移者(P＜0.05).FHIT基因的异常甲基化和蛋白表达呈负相关(P＜0.01).结论:FHIT基因的异常甲基化和蛋白失表达是胃癌发生、发展过程中的频发事件,FHIT基因的异常甲基化可能是引起FHIT基因失活并导致胃癌发生的重要机制.     

FHIT基因的MSI、LOH及甲基化修饰与胃癌关系的研究

目的检测胃癌脆性组氨酸三联体(FHIT)基因的微卫星不稳定(MSI)、杂合性缺失(LOH)以及甲基化状态,探讨FHIT基因在胃癌发生、发展中的作用。方法采用D3S1300作为微卫星标记,应用聚合酶链反应(PCR)以及非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)检测胃癌组织和正常胃黏膜FHIT基因MSI和LOH;应用甲基化特异性PCR(MSP)检测胃癌组织和正常胃黏膜FHIT基因的甲基化状态。结果胃癌组织中FHIT基因D3S1300位点MSI和LOH发生率分别为23.7%和28.8%,MSI和LOH存在明显正相关(P<0.05,r=0.76);胃癌组织中FHIT基因甲基化阳性率为51.4%,FHIT基因MSI、LOH与甲基化均与胃癌患者的年龄、性别、Lauren分型、Borrmann分型、淋巴结转移以及TNM分期无关(P>0.05),但LOH与浸润程度有关(P<0.05),胃癌FHIT基因甲基化与MSI和LOH均不存在明显正相关(P>0.05,r=0.12和0.13)。结论 FHIT基因MSI、LOH及甲基化修饰在胃癌发生、发展中均起重要作用。     

FHIT在胃癌中的甲基化表达及其与幽门螺杆菌的关系

目的检测胃癌（GC）组织中FHIT基因的甲基化表达及其与幽门螺杆菌（H.pylori）感染的关系。方法应用甲基化特异性PCR（MSP）检测74例GC组织中脆性组氨酸三联体（FHIT）基因的甲基化状态,并采用PCR检测上述标本中H.pylori感染情况。结果 GC组织中FHIT基因甲基化阳性率为51.4%,且甲基化与GC患者的年龄、性别、Lauren分型、Borrmann分型、淋巴结转移、浸润程度以及TNM分期无关（P〉0.05）;GC组织中H.pylori阳性率为52.7%,H.pylori感染与FHIT基因甲基化存在明显正相关（P〈0.05,r=0.85）。结论 FHIT基因甲基化修饰在GC发生发展中起重要作用,且可能参与H.pylori感染致癌的病理途径。     

胃癌中FHIT基因异常甲基化及其与临床病理学的关系

目的 检测FHIT基因在胃癌中的异常甲基化及其表达，探讨其与胃癌临床病理学的关系。方法 收集胃癌新鲜组织标本共88例，采用免疫组织化学的方法检测FHIT蛋白表达。结果 88例胃癌组织中，有35例发生了甲基化，阳性率为40％。FHIT基因的甲基化和胃癌的组织学分级呈负相关（P〈0．05），和淋巴结转移状况呈正相关（P〈0．05）。55例表达FHIT蛋白，阳性率为63％。FHIT基因的蛋白表达和组织学分级呈正相关（P〈0．01），和淋巴结转移呈负相关（P〈0．05）。FHIT基因的异常甲基化和蛋白表达呈负相关（P〈0．01）。结论 FHIT基因甲基化厦表达缺失参与胃癌的发生发展，且与其临床病理有一定关系，可能是影响胃癌预后的重要因素。     

子宫内膜癌组织中FHIT基因启动子区域CpG岛甲基化状况的研究

目的 :检测子宫内膜癌组织中FHIT基因启动子区域CpG岛的甲基化状况 ,分析其与临床病理特征之间的关系 ,探讨FHIT基因启动子区域CpG岛的甲基化在子宫内膜癌发生发展中的作用。方法 :采用甲基化特异的PCR方法对亚硫酸氢盐修饰过的 35例子宫内膜癌组织、癌旁组织及患者自身外周血白细胞DNA和 2 0例非癌患者子宫内膜组织DNA的FHIT基因启动子区域CpG岛的甲基化状况进行分析。结果 :癌组织中FHIT基因启动子区域CpG岛的甲基化率为 2 5 .71 % ,癌旁组织和外周血中也存在相似的甲基化率。非癌患者的子宫内膜组织中FHIT基因的CpG岛无甲基化。癌组织与非癌患者子宫内膜组织的甲基化率之间的差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。DNA甲基化与临床病理特征之间无相关性。FHIT基因启动子区域CpG岛的甲基化为子宫内膜癌发生中的早期事件。结论 :子宫内膜癌组织中存在FHIT基因启动子区域CpG岛的甲基化 ,CpG岛的甲基化与临床病理特征之间无相关性。DNA甲基化为子宫内膜癌发生中的早期事件。癌旁组织和外周血可用于癌相关基因启动子区域CpG岛甲基化的检测     

胃癌中p16基因甲基化及其与胃癌临床病理特征的关系

目的：检测胃癌(GC)p16基因的启动子CpG岛甲基化状态,探讨p16基因甲基化在胃癌发生发展中的作用及其与胃癌临床病理特征的关系。方法：应用甲基化特异性PCR(MSP)检测胃癌组织和正常胃粘膜组织p16基因的启动子CpG岛的甲基化状态。并对胃癌中p16基因的甲基化与临床病理特征之间的关系进行分析。结果：胃癌组织中p1...     

MSP法检测胃癌的PTEN基因甲基化改变

目的:检测胃癌中抑癌基因PTEN启动子区域甲基化状况,并探讨其甲基化改变的特点与临床病理特征的关系。方法:采用甲基化特异的PCR法(MSP)检测胃癌组织及相应癌旁组织(各35例)中PTEN启动子区域甲基化状态。结果:35例癌旁正常胃组织未发现有PTEN基因启动子的甲基化,16/35例胃癌组织检测到PTEN基因启动子的甲基化,癌组织PTEN基因启动子甲基化率显著增高(P<0.05)。有淋巴结转移的19例胃癌组织中,有12例PTEN基因启动子甲基化,有淋巴结转移的PTEN基因启动子甲基化显著高于无淋巴结转移组(P<0.05)。结论:PTEN基因启动子的甲基化与胃癌的发生、转移相关。甲基化特异的PCR法(MSP)是检测胃癌抑癌基因PTEN启动子区域甲基化状况的一种较新且特异的实验方法,可用于胃癌的辅助诊断和预后判断。     

分化型甲状腺癌组织中脆性组氨酸三联体基因启动子甲基化及与其蛋白表达的相关性

目的:探讨分化型甲状腺癌(DTC)组织中脆性组氨酸三联体(FHIT)基因启动子甲基化状态及其与蛋白表达的关系.方法:采用PCR-based酶切甲基化及免疫组织化学SP技术,检测65例DTC及其相对应的甲状腺切缘非癌组织中FHIT基因启动子甲基化状态及其蛋白表达.结果:在非癌组织中,无一例出现FHIT基因启动子甲基化,而在DTC组织中有24.6%(16/65)出现甲基化,且甲基化状态与DTC的TNM分期、病理分级及淋巴结转移有关(P<0.05);非癌组织和DTC组织中FHIT蛋白阳性表达率分别为100%(65/65)和41.5%(27/65)(P<0.05).病理分级为Ⅰ和Ⅱ级的DTC组织中FHIT蛋白阳性表达率分别为53.5%和18.2%,淋巴结转移阳性和阴性组分别为15.4%和59.0%,以上2组比较差异均有统计学意义(P<0.05);FHIT基因启动子甲基化与蛋白表达有关(P<0.05).结论:FHIT基因启动子甲基化是其基因失活的重要机制之一,其在DTC的发生、发展中起重要作用.     

胃癌FHIT基因表达与肿瘤细胞增殖关系的研究

目的探讨人胃癌组织中脆性组氨酸三联体(FHIT)基因的表达及与肿瘤细胞增殖的关系.方法采用免疫组化法检测60例胃癌组织及其癌旁正常组织中FHIT基因、Ki-67蛋白、p21wafl蛋白的表达.结果(1)胃癌组织中FHIT基因表达水平显著低于癌旁正常组织(P＜0.01).(2)胃癌组织中FHIT基因表达水平与胃癌细胞增殖活性呈显著负相关(P＜0.01).(3)胃癌组织中FHIT基因表达水平降低与p21wafl蛋白的丢失存在显著正相关(P＜0.01).结论FHIT基因作为一种抑癌基因,其表达在胃癌组织中明显下降,与肿瘤细胞增殖过度有关.FHIT基因可能通过p21wafl蛋白参与了对肿瘤细胞周期的调控.     

胃液脱落细胞DNA甲基化在胃癌中的生物学意义

目的:探索在胃癌患者胃液脱落细胞中检测肿瘤相关基因启动子区DNA甲基化的可行性,及其与临床病理之间的关系。方法:采用MSP(甲基化特异性PCR)方法,对117例胃癌及165例非胃癌患者胃液脱落细胞P16、DAPK(死亡相关蛋白激酶)、E-cadherin(上皮细胞钙黏蛋白)、hMLH1(错配修复基因)四种基因启动子区甲基化状态进行检测;并与组织、血浆检测结果进行比较。结果:不同标本四种基因异常甲基化的频率,胃癌组明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。P16、E-cadherin、DAPK发生甲基化的频率,早期胃癌与进展期胃癌相比,差异无统计学意义(P>0.05)。胃癌组胃液脱落细胞各基因甲基化状态与患者年龄、性别、肿瘤大小、H.pylori感染无关。结论:通过胃液脱落细胞检测肿瘤相关基因DNA甲基化有望作为检测胃癌的生物学标志物。     

跨膜丝氨酸蛋白酶4在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的 探索跨膜丝氨酸蛋白酶4(TMPRSS 4)在胃癌组织中的表达情况及与胃癌病理学特征的关系,以及明确TMPRSS 4表达与胃癌临床预后的关系.方法 使用RT-qPCR技术和免疫组化检测TMPRSS 4在115例胃癌组织样本(胃癌及癌旁组织)中的表达情况;分析TMPRSS 4表达水平与胃癌病理学特征和预后的关系.结果 RT-qPCR结果提示胃癌组织中的TMPRSS 4 mRNA水平显著高于其在匹配癌旁组织中的表达水平,差异有统计学意义(P＜0.05).免疫组化结果显示TMPRSS 4在胃癌组织中的表达比在良性组织高(56.5％vs19.5％,P＜0.001).TMPRSS 4的过度表达与胃肿瘤的分化程度、淋巴道转移及TNM分期肿瘤显著相关(P＜0.01).TMPRSS 4是影响胃癌总体生存率及无病生存率的独立因素.结论 TMPRSS 4高表达与胃癌患者相关临床病理特征及患者的预后密切相关,TMPRSS 4有可能作为一个常规的胃癌的生物标志物,在一定程度上预测肿瘤的侵袭转移.     

RASSF10基因启动子区甲基化状态在宫颈癌中的临床应用

目的探讨RASSF10基因启动子区甲基化状态在宫颈癌中的临床意义。方法收集本院2005年6月～2013年12月经术后病理证实的70例宫颈癌患者,取其经手术切除癌组织70例和配对癌旁组织标本70例,采用甲基化特异性PCR(MSP)分析法检测RASSF10基因启动子区DNA甲基化状态,分析RASSF10基因启动子区甲基化状态与临床病理特征(年龄、肿瘤大小、颈深部间质侵犯、盆腔淋巴结转移、FIGO分期及肿瘤分级程度)的关系及宫颈癌预后的相关性因素分析。结果 MSP检测发现宫颈癌组织中RASSF10基因启动子区甲基化为38.6%,未甲基化为43例(61.4%),而正常宫颈组织未见甲基化;宫颈癌中RASSF10基因启动子甲基化状态与年龄、肿瘤大小、颈深部间质侵犯及盆腔淋巴结转移无关(P0.05),而与FIGO分期及肿瘤分化程度有关。70例宫颈癌患者的中位生存期与年龄、肿瘤大小及颈深部间质侵犯无关,但与FIGO分期、肿瘤分化程度、盆腔淋巴结转移及RASSF10基因启动子区甲基化有关,其中RASSF10基因启动子区甲基化者5年生存率为66.7%,未甲基化者的5年生存率为88.4%,差异具有统计学意义(P0.05)。多因素分析结果显示FIGO分期、肿瘤分化程度、盆腔淋巴结转移和RASSF10基因启动子区甲基化状态为本组宫颈癌患者预后独立因素。结论 RASSF10基因启动子区甲基化在宫颈癌中高表达,且与FIGO分期、肿瘤分化程度及预后有关,可作为宫颈癌预后的参考指标。     

Methylation of the PCDH8 （Protocadherin-8） gene in gastric cancer

ObjectiveTo investigate the methylation status of the PCDH8 (Protocadherin-8) gene in gastric cancer tissues and find out the relationship between methylation status of the PCDH8 and clinicopathological features in gastric cancer patients.MethodsWe first investigated the methylation status of the PCDH8 (Protocadherin-8) gene in 65 gastric cancer and detected aberrant promoter methylation in gastric cancers; and then analyzed he relationship between methylation status of the PCDH8 and clinicopathological status with SPSS 13.0 software.ResultsWe first investigated the methylation status of the PCDH8 (Protocadherin-8) gene in 65 gastric cancer and detected aberrant promoter methylation in 36 of 65 (55.4%) gastric cancers. There was no significant difference in the distribution of patients with methylation or unmethylation of PCDH8 in terms of age, sex, tumor size, distant metastasis, or TNM stage. Methylation of PCDH8 was significantly correlated to negative pathological lymph node metastasis (P=0.038) and tumor differentiation (P=0.01). These two factors were proved to be of prognostic importance.ConclusionMethylated PCDH8 seems to have a trend for worse prognosis in gastric cancer. However, a further large series of tumor samples and a longer follow-up period are required to elucidate its potential role.     

Her-2和Ki-67在胃癌组织中的表达及其相关性研究

目的:检测胃癌组织标本中Her-2及Ki-67的表达情况并探究其相关性及两者与肿瘤临床病理参数关系.方法:收集胃腺癌组织标本213例,免疫组织化学(IHC)检测Her-2和Ki-67的表达状态;荧光原位杂交(FISH)进一步检测Her-2基因扩增情况并分析它们与临床病理参数之间关系.结果:213例胃腺癌组织中,Her-2和Ki-67阳性表达率分别为39.44%(84/213)和81.22%(173/213),Her-2基因表达与肿瘤的浸润深度、分化程度、TNM分期和淋巴结转移相关(P<0.05),而与性别、年龄和有无脉管癌栓无关(P>0.05);Ki-67表达与分化程度、TNM分期、浸润深度、淋巴结转移和有无脉管癌栓有关(P<0.05),与性别和年龄无关(P>0.05).Her-2基因扩增与Ki-67高表达呈正相关(r=0.177,P<0.05).结论:联合检测胃腺癌患者Her-2基因状态和Ki-67表达情况对病情评估以及预后判断有重要意义,给个体化分子靶向治疗提供科学依据.     

脆性组氨酸三联体基因在大肠癌中的表达及同预后的关系

目的:探讨大肠癌中脆性组氨酸三联体(FHIT)基因的表达状况及其与临床病理指标的可能关系。方法:利用免疫组织化学SP法检测56例大肠癌和33例正常大肠粘膜组织中FHIT基因的蛋白表达。结果:在大肠癌组织中,FHIT蛋白表达的阳性率为48.2%(27/56);与正常大肠粘膜组织93.9%(31/33)相比,FHIT蛋白阳性表达的差异有显著意义(P<0.05)。FHIT蛋白表达的阳性率在癌组织学分期的分布为Ⅰ级癌72.0%(18/25),Ⅱ级癌38.9%(7/18),Ⅲ级癌15.4%(2/13),各级癌组间比较,差异有显著性(P<0.05)。FHIT蛋白表达的阳性率在Dukes分期中的分布为A期癌71.4%(15/21),B期癌47.8%(11/23),C期癌8.3%(1/12),各期癌组间比较,差异有显著性(P<0.05)。已伴淋巴结转移组的C期癌与未转移组的A、B期癌比较,差异有显著性(P<0.05)。FHIT蛋白表达阳性癌在42例5年随访病例组中的分布为5年死亡组13.3%(2/15),5年生存组48.2%(13/27),组间比较差异有显著性(P<0.05)。结论:大肠癌中FHIT基因的蛋白表达状况可能与组织学分期,Dukes分期以及5年生存率密切相关,提示FHIT基因在大肠癌的演化和进展过程中具有重要作用,并可能成为一个新的预后指标。     

联合RASSF1A与FHIT基因甲基化检测在非小细胞肺癌诊断中的应用

目的 探讨RASSF1A与FHIT基因甲基化联合检测对预测诊断非小细胞肺癌(NSCLC)的价值。方法 收集滨州医学院附属医院胸外科行手术治疗并经过WHO病理组织学标准确诊的NSCLC患者30例作为病例组,另获取同期健康体检者30例作为对照组。于术前或体检时获取入组者血液标本,提取DNA后通过实时荧光定量甲基化特异PCR(MSP)法检测RASSF1A与FHIT基因甲基化率,将年龄、性别、病理组织学类型及临床分期等指标对甲基化的影响进行分析,并对两类基因甲基化联合检测对诊断NSCLC的敏感性、特异性等进行分析。结果 NSCLC患者RASSF1A基因甲基化率为66.67%(20/30),FHIT基因甲基化率为60%(18/30)。各临床病理特征与患者RASSF1A和FHIT基因甲基化均不存在明显的相关性(P＞0.05 )。RASSF1A和FHIT基因甲基化均为NSCLC发病的独立危险因素。联合检测RASSF1A和FHIT基因甲基化能够明显提高诊断的敏感性及特异性,而阳性、阴性预测值不存在差异。结论 RASSF1A和FHIT基因甲基化联合检测可显著提升NSCLC的诊断水平,但对于早期诊断并无明显优势。